Lm-LLO-Based免疫疗法和HPV-Associated疾病

文摘

人乳头状瘤病毒感染是一个肿瘤和恶性肿瘤的直接原因。细胞与细胞的免疫学活性表达人乳头状瘤病毒E6、E7足以消除存在发育异常的或肿瘤组织由HPV感染。减毒活疫苗单核细胞增多性李斯特氏菌,(Lm-)基础免疫疗法(adxs11 - 001)开发HPV-associated疾病的治疗。adxs11 - 001分泌antigen-adjuvant融合(Lm-LLO)蛋白截短片段组成的Lm蛋白质listeriolysin O (LLO) hpv 16 E7的融合。在临床前模型,发现了这种构造来刺激免疫反应,影响治疗结果。adxs11 - 001是目前评估在宫颈上皮内瘤2期临床试验中,宫颈癌,患有乳腺癌的头部和颈部癌症。使用减毒活疫苗细菌是更复杂的和完整的癌症免疫治疗的方法,是数千年来Lm已经感染人类和人类已经进化到预防和数千年来拒绝这种感染。这种演进已经形成深刻的基因保存其免疫机制,高度有效,对宽容,和可以使用这部小说独特的调用平台技术。

1。介绍

据估计,HPV感染占全球约5%的癌症(1]。持续的人类乳头瘤病毒感染现在公认的原因基本上所有的宫颈癌。2010年,据估计,在美国大约12000名妇女被诊断为这种类型的癌症和超过4000人将死于它。诊断宫颈癌是全球每年近一百万妇女,称每年一百万条生命的四分之一。HPV感染也会引起一些癌症的肛门,外阴,阴道和阴茎1]。性传播人类乳头瘤病毒感染很常见,患病率18到30岁之间的峰值。大多数这些感染自发地解决,但在10 - 20%的女性,这些感染仍然持续,进展的风险等级2/3宫颈上皮内瘤(CIN)和最终侵入性宫颈癌的(ICC)。cin基因不稳定病变30 - 40%发展为ICC的风险。如果不及时治疗,形成一系列的细胞学异型性增加,从低级CIN 1高档CIN 3;后者是几乎完全由高风险的人类乳头瘤病毒引起的,也就是说,人类乳头瘤病毒16和18。

口腔人乳头状瘤病毒感染导致某些癌症的口咽(咽喉的中间部分,包括软腭,舌头的基地,和扁桃体)(1- - - - - -5]。人乳头状瘤病毒与20 - 50%的口腔鳞状细胞癌(6),发生率显著增加。人乳头状瘤病毒也被牵连在一个角色在特定的结肠直肠癌、肺癌协会虽然有点争议。

2。人乳头状瘤病毒作为免疫治疗的目标

人乳头状瘤病毒是一个双链,环状DNA病毒缺乏一个信封。根据应变,其基因组包含六个或七个早期蛋白质(E1, E2、E4 E5, E6、E7,和E8)和2结构蛋白(L1和L2)晚些时候出现。感染病毒发生在复制,区分基底上皮细胞。角质细胞分化和成熟,病毒基因的表达导致病毒蛋白生产直到终末分化细胞表面表达的蛋白质,病毒衣壳是组装,该病毒。HPV-induced癌症可能发生当病毒DNA整合到宿主基因组,通常与E2基因的删除,E4, E5, L1和L2。病毒E2基因的损失,这是一个转录抑制剂,导致两个癌基因蛋白的upregulation E6、E7基因。病毒癌蛋白与肿瘤抑制基因E6复合物p53和肿瘤抑制蛋白视网膜母细胞瘤的肿瘤蛋白E7复合物(复审委员会)10),干扰细胞周期调控,导致基因组不稳定性和随后的肿瘤(11]。

HPV-associated瘤是一种最明确的医学情况,感染一个外生代理(病毒)是肿瘤和恶性肿瘤的直接原因。细胞与细胞的免疫学活性表达人乳头状瘤病毒E6、E7足以消除存在发育异常的或肿瘤组织由HPV感染。变量但重要的自发缓解率是觉得是由于免疫识别的人乳头状瘤病毒蛋白表达在转化细胞和CD8的数字更高⁺细胞和CD8比率更高⁺/ FOXp3浸润细胞发育异常的组织[4,12- - - - - -14]。免疫刺激可能需要克服公差已经发展到HPV-transformed发育异常的细胞。

3所示。使用Lm-LLO HPV-Associated疾病的免疫治疗

治疗CD8比率的变化⁺直到亚已经观察到的结果的管理Lm-LLO免疫疗法在各种模型(15- - - - - -18]。Lm-LLO-E7 (adxs11 - 001)被发现在各种各样的临床前模型来刺激免疫反应,影响治疗效果,目前正在临床试验。

这样一种减毒活疫苗单核细胞增多性李斯特氏菌- (Lm -)基于免疫疗法(adxs11 - 001)已经开发了由Advaxis HPV-associated疾病的治疗,Inc . adxs11 - 001分泌antigen-adjuvant融合(Lm-LLO)蛋白截短片段组成的LmHPV16-E7蛋白质listeriolysin O (LLO)融合。第一阶段的研究已经完成adxs11 - 001 (19)和4 2期临床试验是活跃的或即将启动。

Lm-LLO免疫疗法有多个同步机制的行动,可以治疗反应求和(20.]。Lm刺激自然先天免疫和感染APC cross-presents刺激双臂CD4适应性免疫系统导致的激活⁺和CD8⁺。这些代理降低瘤内亚群和MDSC,但不是那些在脾脏和淋巴结。他们可以刺激不成熟的免疫细胞终末分化的成熟效应细胞和骨髓转移的动力学的髓细胞数量增加。影响一直在观察到的血管内皮细胞,促进趋化和激活免疫细胞的外渗。Lm完全是细胞免疫促进剂,可以灭活病毒和抗体形成的类型没有发生Lm。有趣的是,巩固免疫记忆反应Lm抗原发生迅速,没有观察到相关的免疫记忆Lm发生最早接触[5小时后21]。

使用减毒活疫苗细菌癌症免疫疗法是一种不同的方法比基于合成化学或免疫抗体代理。这是更复杂的,Lm已经感染人类和人类已经进化到预防和数千年来拒绝这种感染。这种演进已经形成深刻的基因保存其免疫机制,高度有效,可以使用这部小说独特的调用平台技术。

4所示。单核细胞增多性李斯特氏菌(Lm):一个强有力的向量为免疫治疗肿瘤和传染病

之前的研究表明,生物工程Lm是一个强有力的向量不仅对癌症免疫疗法也对传染性疾病(20.,22]。这使得人类乳头瘤病毒感染,因此HPV-associated癌症治疗的主要目标。与Lm -LLO-based免疫疗法,它是可能的(a)根除肿瘤HPV引起的,(b)防止复发的肿瘤。Advaxis合作伊冯·帕特森的实验室(宾夕法尼亚大学医学院)开发了各种向量表达的肿瘤特异性抗原(tsa)目标HPV-induced癌症如表所示1。临床前研究使用不同的质粒骨干提供E7显示类似的抗肿瘤治疗效果在所有表中描述的向量1。adxs11 - 001 (Lm-LLO-E7)被选为人类研究在临床广泛研究和测试设置。此外,adxs11 10 - 001致病性减弱了⁴到10⁵日志,与野生型相比Lm亲本菌株10403年代,从而增加其临床使用安全。

生物工程允许的各种方法Lm在质粒表达TSA或通过染色体基因组中插入(23,24]。在Advaxis,两个互补机制的设计在活的有机体内保留减毒细菌菌株的质粒。一个压力是prfA缺失突变体是无毒由于缺乏大师毒性调节蛋白PrfA吞噬溶酶体,使其无法逃脱,但细胞内生长能力恢复通过互补PrfA在一个质粒。这种互补使在活的有机体内保留的质粒,但是在体外操作使用抗氯霉素等抗生素抗性标记基因(7,8]。另一个支柱是D-alanine合成的突变株有缺陷,这对细菌细胞壁合成是至关重要的。的生存Lm压力不足木豆和dat基因取决于plasmid-based互补的木豆基因。消除复合的可能性木豆基因存在于质粒和Lm基因组,芽孢杆菌subtillis木豆基因的互补在活的有机体内和在体外增长。这种互补不仅创造了一个antibiotic-marker-free质粒输送系统也变弱日志(0.5比1的向量9]。adxs11 - 001的prfA删除被发现通过SCID小鼠单独使用先天免疫(20.),和间隙动力学木豆dat72小时内展示了间隙。一个高度减毒Lm木豆⁻dat⁻学报⁻(Lm在Advaxis (ddA)创建骨干24),迅速清除在活的有机体内并包含一个antibiotic-marker-free TSA的表达质粒,这对免疫疗法在临床上是强有力的候选人。类似的在活的有机体内间隙的LmddA应变在正常和移行细胞基因敲除小鼠表明这一毒株是高度减毒和临床使用安全。

5。LLO:佐剂免疫疗法

Listeriolysin O是溶血性、thiol-activated cholesterol-dependent成孔蛋白的胞内逃脱至关重要Lm从吞噬溶酶体(25]。最近的免疫学的发展导致许多潜在的辅助候选人能够调节免疫反应的更多的控制和特定的方式(26]。这些佐剂调节和目标特异性免疫的组件,如激活不同的细胞,受体或信号通路。(26]。Advaxis研究表明nonhemolytic LLO还怀有一种佐剂的独特性质:(a)增加的影响“non-self-foreign”古典佐剂抗原一样,(b)减免宽容的“自我/肿瘤相关抗原(c)具体参与抗肿瘤活性,激活或增强功能(d)调节复杂的介质及其受体优化抗肿瘤活性,不同部门和(e)调节信号激活免疫系统的抗肿瘤活性。耿氏等人设计了LLO分子的c端截短蛋白,这使得LLO nonhemolytic [20.]。尼森等。27)独立报道,LLO辅助属性使用时的形式重组蛋白疫苗。融合LLO肿瘤抗原由其他疫苗形式,如病毒载体(28)和DNA疫苗(29日),也增强了他们的治疗效果。这些属性的重组LLO位置不仅是一个有吸引力的佐剂违反当地及周边相关的肿瘤和免疫耐受抗原也为抗原特异性和antigen-coordinated抗癌免疫反应后所述hpv相关肿瘤小鼠模型。

6。细胞内事件和抗原表达的Lm -LLO-Ag (HPV)融合蛋白

如图1,减Lm携带HPV抗原融合LLO可以吞噬抗原递呈细胞,巨噬细胞和其他细胞(20.,30.]。减毒细菌细胞进入核内体,他们唤起守恒的致病性攻击(31日)和重定向肿瘤抗原(23]。PEST-like LLO序列是很重要的,因为它被证明能增加抗肿瘤的功效Lm基于向量表达的融合蛋白LLO-PEST-E7 hpv 16无限增殖的肿瘤(8]。这个过程会刺激产生CD4细胞介导的免疫反应⁺细胞和CD8⁺T细胞(20.]。的融合抗原LLO促进分泌的抗原(32和增加抗原表达8对CD8)与深远的影响⁺t细胞激活(20.,33]。

图1

单核细胞增多性李斯特氏菌 Lm 17 22 24 在活的有机体内 Lm 23 24 31日 李斯特菌 18 32 20. 34 ⁺ Lm 李斯特菌 20. ⁺ 34 Lm β γ 20. 33 35 37 示意图的LLO-Ag (HPV)融合蛋白加工和表达的抗原呈递细胞(APC)。Advaxis与帕特森等人合作开发了人类乳头状瘤病毒(HPV)和listeriolysin (LLO)融合蛋白免疫疗法(,- - - - - -]。在注射,这些隔离和吞没抗原递呈细胞(apc),如树突状细胞(,,]。细菌是吞没液泡的大部分地方被杀(,]。细菌在处理的肿瘤相关抗原(HPV)和listeriolysin O (LLO)刺激双臂的适应性免疫系统,]。抗原的一部分从液泡加工通过MHC II级分子生成CD4细胞T细胞。5到百分之十的逃入胞质与援助的LLO可以进行复制。内源性抗原的胞质HPV-LLO融合蛋白的行为。HPV-LLO融合蛋白发生了泛素化,通过蛋白酶体处理(]。并给出了生成的肽通过MHC分子类我生成CD8T细胞(]。这些细胞产生细胞介导免疫反应强。也唤起强烈的先天免疫反应导致代众多介质如一氧化氮参与杀死细菌的液泡和细胞因子(如TNF -il - 1的地震,白介素、干扰素),传授几种类型的旁观者效应(,,- - - - - -]。

7所示。在活的有机体内应对Lm-LLO-Ag (HPV)融合蛋白和细胞在肿瘤环境事件

一个在活的有机体内应对Lm -LLO-Ag (HPV)融合蛋白诱发一些免疫功能,很好地协调打破当地和周边宽容肿瘤特异性抗原和启动一连串的抗肿瘤活动利用各种可溶性介质和细胞,如图2。LLO是一个强有力的炎性细胞因子的诱导物,如白介素、引发,白介素,地震,TNF -α干扰素-γ和gm - csf;一氧化氮,趋化因子,以及costimulatory分子对先天和适应性免疫反应很重要20.,35- - - - - -37]。高th)的一个例子cytokine-inducing LLO是保护性免疫的活性Lm可以引起死亡或无毒吗Lm当LLO一起管理,但不缺乏LLO [38]。细胞因子诱导的巨噬细胞存在LLO [39]反过来激活NK细胞释放干扰素-γ(40]。

图2

在活的有机体内 Lm - Lm 在活的有机体内 李斯特菌 41 42 20. 39 43 44 ^{+ +} 34 43 4 14 20. 45 9 24 30. 34 46 47 李斯特菌 48 假想的代表的影响LLO-based免疫疗法。-LLO-based免疫疗法引起一连串的事件涉及多种细胞类型,(a)回归现有肿瘤和(b)阻止肿瘤复发。生理活动与这些有效的治疗和预防活动包括以下几点:(1)不同寻常的快速生成免疫记忆的巩固与5小时后基于免疫疗法(,];(2)促进了旁观者效应通过激活细胞因子,趋化因子,和/或其受体调节功能,如白细胞增多,内存和李氏杆菌病(];(3)刺激合成和成熟的免疫髓细胞通过刺激骨髓细胞的形成和成熟的树突细胞,,];(4)指导不等的Ag)产生抗原CD4 (HPV)处理和CD8细胞,分别通过MHC II级和我通路(,];(5)减少亚群和MDSC只在肿瘤和减少肿瘤抗原的抗免疫攻击细胞(,,,];(6)促进类1和2的适应性免疫反应而产生强烈的细胞抗肿瘤免疫(,,];(7)趋化和激活免疫细胞的外渗是先天免疫反应的一部分,涉及肿瘤特异性的白细胞的招聘(,,];(8)PAMP-mediated先天免疫刺激促进生活的处理这唤起inflammasomes和先天免疫的基本活动]。

8。代Tumor-Antigen-Specific HPV-Associated肿瘤细胞毒性T细胞和回归

临床前研究使用转基因的减毒株Lm表达hpv 16 E7证明治疗活动对E7-expressing肿瘤动物模型(7]。两个Lm-LLO-based免疫疗法向量,其中一个表达的抗原hpv 16 E7单独和一个截短形式的LLO E7融合表达,显示回归的E7-expressing肿瘤,TC-1成立于同源的C57BL / 6小鼠(7]。肺上皮细胞系(TC-1)无限增殖与hpv16 E6、E7和转换c-ras致癌基因是在这些研究中使用。帕特森等人最近利用新的重组菌株使用multicopy游离表达系统(Lm-ActA-E7)分泌的HPV E7蛋白融合Lm蛋白质ActA如图3。

图3

Lm Lm ph值 他 学报 prfA prfA Lm。 在活的有机体内 49 一个质粒pActA-E7的示意图表示。重组质粒用于变换应变XFL-7创建-ActA-E7。向量包括启动子()和(ss)信号序列基因,基因,人类乳头瘤病毒16 E7基因和转录因子。XFL-7是一个删除的因此,只有保留的细菌质粒复制。采用和修改(]。

的Lm-ActA-E7-based免疫疗法(但不是Lm-ActA-NP treated-used nonspecific-controls)或未经处理的控制造成75%患有乳腺癌肿瘤20天的回归相比,肿瘤在7天。然而,回归观察肿瘤的90%以上Lm-ActA-E7-induced肿瘤减少比控制在28天(图4)。

图4

Lm ⁵ Lm Lm Lm 49 -ActA-E7回归建立TC1肿瘤的原因。C57BL / 6小鼠收到2×10在左翼TC1细胞皮下注射。7天后肿瘤增长到5毫米。然后老鼠接受0.1的半数致死量-ActA-E7或-LLO-NP(数据未显示)是一种消极控制在7天,和一个升压剂得到了14天。第三也是最后一组不及时治疗。用游标卡尺测量肿瘤直径和平均为每个显示鼠标。肿瘤大小之间的差异-ActA-E7组和对照组在20天、28天的评分是统计学意义(和、职责)。描述的是1实验4的代表。从[图和传说都采用和修改]。

西维尔等人表明,抗肿瘤的活性Lm-LLO-based免疫疗法对E7也可以在实体肿瘤植入转基因小鼠(8,49]。该模型系统还显示增强的抗肿瘤的功效Lm-LLO基于向量表达的融合蛋白LLO-PEST-E7 hpv 16无限增殖的肿瘤在小鼠同源的。应该注意的是,这种免疫治疗有可能不仅导致肿瘤回归,也防止肿瘤的复发。一个细胞毒性t淋巴球试验表明管理Lm-LLO-based向量引起细胞毒性T细胞的生成特定E7(图5)。

图5

Lm Lm ⁵¹ Lm 49 -ActA-E7诱发E7-specific细胞毒性t淋巴球(CTL)活动。C57BL / 6小鼠免疫与0.1的半数致死量-ActA-E7或Lm-LLO-NP。另一组老鼠不及时治疗。加强免疫接种7天后。脾细胞收获7天后助推器和建立在主文化与辐照TC1细胞为7天。初代培养后,细胞毒性t淋巴细胞活性化验通过51铬(Cr)释放EL4-E7细胞。CTL活性明显高于接种在那些老鼠-ActA-E7比控制()。结果表示为一式三份的意思是文化。这些结果代表3实验。采用图和传说从[]。

9。的能力Lm-LLO-E7诱导CD8⁺建立肿瘤的t细胞记忆和回归后抗生素管理

应该注意的是,虽然Lm -LLO-based免疫疗法需要减毒活疫苗细菌融合抗原的载体,细菌可能被杀后不久,政府由抗生素治疗和免疫治疗将继续证明抗肿瘤活性(20.]。由Bajenoff等人表明,实验小鼠Lm特殊技能和Lm非特异性CD8记忆⁺感染T细胞可以在6小时内观察到的和Lm负担(41]。的Lm特殊技能和Lm非特异性CD8记忆⁺T细胞是本地化的脾脏红髓形成集群Lm来华的细胞。CD8记忆⁺T细胞产生炎性细胞因子如干扰素-γ和附近CCL3被感染的骨髓细胞是至关重要的Lm杀人。卡宾和哈蒂42)报道,Lm来华的小鼠在24小时使用抗生素治疗postinfection显示一个健壮的抗原CD4的增加⁺和CD8⁺T细胞类似于控件的响应没有收到的抗生素。此外,抗生素治疗并没有改变二次抗原t细胞扩张和保护有或没有抗生素(42]。这些实验表明,CD4早期的发展⁺和CD8⁺T细胞显示内存功能,独立的长期感染或抗原显示28天。图6表明政府3天抗生素治疗后与adxs11 - 001对效果没有影响肿瘤回归90%以上发生在老鼠。

图6

⁵ ₅₀ 17 氨苄青霉素治疗的治疗效果的TC1 adxs11 - 001。C57BL / 6小鼠注射1×10TC1肿瘤细胞。七天后,老鼠接受0.1×LDadxs11 - 001。开始3、5或7天后adxs11 - 001治疗,一些老鼠收到每天注射10毫克的氨苄西林,连续三天交货;老鼠然后保持饮用水与氨苄青霉素补充0.5毫克/毫升的浓度。采用数据从[]。

10。在肿瘤细胞内的环境

存在的一个复杂网络在肿瘤免疫抑制微环境包括,但不限于,(a)亚群,(b) myeloid-derived抑制细胞(MDSCs)以及它们的介质(即。il - 10, TGF -βgm - csf,铂族元素₂、B7-H1 PD-1,精氨酸酶I), (c)免疫细胞功能受损,和(d)肿瘤相关巨噬细胞(tam)和他们的介质,如一氧化氮这有效地停止抗肿瘤免疫(45]。细胞内环境等任何免疫疗法是一项具有挑战性的方面Lm-LLO-based免疫疗法。图2总结了一些在活的有机体内体现的事件Lm-LLO-based免疫疗法能够消除和/或改变细胞功能和中介发布参与肿瘤免疫。大部分的这些事件也诱导在E7-induced肿瘤的动物模型Lm-LLO-HPV-induced免疫疗法。例如,Advaxis和帕特森实验室的研究表明CD8之间的相关性⁺t细胞诱导、肿瘤归航,抗肿瘤的功效Lm-LLO基于免疫疗法(20.]。

的影响在不同的t细胞数量在治疗后肿瘤微环境Lme7和Lm老鼠-LLO-E7窝藏TC1肿瘤如表所示2。有一个尖和CD25下降⁺CD4⁺FoxP3⁺亚群在小鼠肿瘤免疫Lm-LLO-E7表明LLO-E7融合不仅增加t细胞浸润也减少抑制细胞瘤内。为了确定类似的效果在外围观察亚群,这些细胞的分布在脾脏监控。如表所示3治疗Lm-LLO-E7疫苗导致优惠减少treg瘤内和脾脏等外围没有影响。这些研究表明,Lm-LLO-based免疫疗法导致减少特定亚群内肿瘤刺激抗肿瘤免疫力。

的融合抗原LLO似乎也促进分泌的抗原(7,32),增加对CD8抗原表达与深远的影响⁺t细胞激活(50]。Lm-LLO-Ag减少的百分比immune-suppressive treg浸润肿瘤和其他有助于刺激dc的成熟和髓细胞(44]。辛格等人已经证明降低MDSC发挥重要作用在肿瘤回归Lm -LLO-based癌症免疫疗法在小鼠模型(未发表的数据。Advaxis Inc .)。先前的研究已经报道的积累Lm在肿瘤免疫治疗期间(20.]。Lm -基于疫苗已报告感染原发肿瘤和转移肿瘤在活的有机体内(51]。金等。51)建议Lm疫苗可以杀死肿瘤(a)通过直接感染肿瘤和增加活性氧的水平和(b)指挥针对细胞表达特定抗原的CTL反应。

临床前研究表明,Lm-LLO-based免疫疗法包括协调和全面的细胞反应对肿瘤破坏E7-induced肿瘤在小鼠模型。这些临床数据表明,Lm-LLO-based免疫疗法是pleotropic在性质和所需的许多特征克服中央和周边免疫耐受中发挥上述肿瘤微环境。此外,Lm-LLO-based免疫疗法是抗原,组织具体,与化疗不同,一旦肿瘤根除,它一直阻止其复发癌症的小鼠模型中由于免疫记忆的发展。这些实验也证明的有效性Lm -LLO-based免疫疗法对肿瘤诱导的病毒致癌基因。

11。临床adxs11 - 001年发展规划

最可能的疾病评估adxs11 - 001的安全性和有效性是宫颈上皮内瘤(CIN)和宫颈癌,患有乳腺癌头部和颈部癌症或其他HPV-associated (VIN)外阴上皮内瘤等疾病,甚至肺癌和大肠癌,可以确定一个人乳头状瘤病毒的链接。到目前为止,第一阶段的研究已经完成,两个第二阶段试验正在进行,和2额外的2期临床试验目前等待机构批准开始。

11.1。第一阶段研究

第一阶段试验adxs11 - 001是在15岁以前治疗的患者进行转移,难治性或复发性宫颈癌之前没有细胞毒性治疗(19),在人口没有治疗方案被证明延长生存。adxs11 - 001是由静脉输液在三(3)剂量水平(1×10⁹那么,3.3×10⁹那么,1×10¹⁰CFU)使用剂量升级设计在军团与每个病人队列接收只有两届政府相同的剂量。被注入每个参与者超过30分钟,发生一次21天共有两个治疗天1和22日分别。总的来说,15(100%)的患者cytokine-mediated不良事件(AEs)。最常报道的AEs是发热、发冷、贫血、头痛、呕吐、恶心、心跳过速,肌肉骨骼疼痛。毒品AEs轻度至中度,瞬态的性质,和由“感冒”症状如发热、呕吐、发冷、头痛、心动过速、恶心和对标准的非处方药物。注入1×10¹⁰或多个CFU没有术前用药法导致剂量限制毒性(DLT)的二年级舒张低血压发生后数小时内adxs11 - 001输液需要治疗。在所有患者中,低血压成功控制了静脉输液和支持治疗。已经观察到类似的DLT 1×10¹⁰对于其他生活Lm基于向量在试验进行的其他赞助商19];因此,剂量的1×10⁹CFU或更少被选为随后的临床评价。

从历史上看,这些患者的生存中值是大约6个月的存活率为5%(未发表的数据(高格127系列第二阶段研究))。adxs11 - 001,第一阶段研究的13 4可评价的患者减少肿瘤负荷;生存中值是347天,一年生存率为53%。11/15例(73%)有一个性能状态ECOG 2 - 4。增加生存和肿瘤的临床效益收缩中观察到这种先进的恶性肿瘤设置值得进一步调查。

11.2。第二阶段的研究

免疫疗法似乎大部分工作最好在疾病的早期肿瘤负荷较低和之前有更少的治疗。HPV-associated宫颈癌的案例中,有一个明确而慢慢发展成熟的发育不良对宫颈癌称为CIN。频繁的巴氏涂片和colposcopic检查可以确定主题与CIN。高档的标准治疗CIN (CIN 2/3)是一种外科切除宫颈发育异常的组织。虽然这通常是一种门诊手术,它可以妥协未来生育的女性会发生和复发。还有一个重要的女性自发缓解率与CIN的级别CIN成反比。代理能够诱导免疫缓解高档宫颈发育不良可以消除与手术相关的风险并提供免疫记忆,可能在理论上防止复发。

Lm-LLO-E7-07是一个随机、单盲、安慰剂对照、剂量升级第二阶段试验于120年在美国进行的女性CIN 2/3。最初的40主题队列已经完成31受试者接受80剂。每个主题收到3剂量的剂量5×10⁷CFU或安慰剂(3:1随机化)。入学的第二组正在进行。

Lmllo - e7 - 015是一个随机第二阶段试验进行在印度进步的女性宫颈癌细胞毒性治疗失败。患者随机分配到3个剂量的adxs 1×10 - 011⁹CFU或4剂1×10⁹菌落与顺铂化疗剂量1和2之间。8/1/11,54岁的病人已经收到117份。

在这两个研究,萘普生和口服异丙嗪作为术前用药法改善潜在的副作用,并给出的氨苄青霉素3天后灌注作为预防措施。从这个临床经验,治疗相关的不良事件的一个清晰的模式出现了包括发热、寒战、恶心和呕吐,一般是一致的免疫细胞因子的释放与免疫激活有关。15至23%的剂量与毒品相关的不良事件;通常是一个短暂的1级或2(轻中度)类似流感的症状,出现在几小时内注入后3天。症状self-resolve或快速响应症状治疗。到目前为止,没有严重不良事件与adxs11 - 001 171剂,没有李氏杆菌病的证据,没有持续的症状,没有延迟的症状,也没有在随后的剂量累积毒性的证据。

美国高格2期临床试验患者的复发/难治性宫颈癌和1/2的安全性和有效性adxs11阶段- 001患有乳腺癌口咽的头部和颈部癌症是由英国癌症研究中心(CRUK)。

12。结论

adxs - 11 - 001免疫疗法可以安全地管理健康的年轻学科以及晚期癌症患者提供了一个可预见的和可管理的安全性。这个代理有能力的诱导免疫反应的类型被观察到在自发缓解的情况下和回应HPV-transformed病变。adxs - 11 - 001可以生成一种th)免疫反应生成CD8⁺同时抑制T细胞这一目标HPV-E7-transformed细胞Treg——MDSC-driven病灶内的免疫耐受性,增加CD8 / Treg(福克斯P3 +)比,导致临床缓解。正在进行的临床试验来评估对该代理的活动,人乳头瘤病毒引起疾病的频谱变换对面宫颈上皮内瘤(CIN 2/3)通过局部晚期宫颈癌先进复发宫颈癌。其他HPV-associated恶性肿瘤也被调查或感兴趣的包括患有乳腺癌头部和颈部癌症和类型的肺癌和大肠癌,可以确定一个人乳头状瘤病毒的链接。

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