有机涂层的生物学效应Grias neuberthii和Persea美国银纳米粒子在海拉和MCF-7癌症细胞系

文摘

本研究的目的是评估有机涂层的生物学效应Grias neuberthii(钉)水果和Persea美国(鳄梨)叶子纳米颗粒(NPs)在宫颈癌(海拉)和乳腺癌细胞腺癌(MCF-7)重点是基因表达(p53转录因子和glutathione-S-transferase销售税)和细胞生存能力。紫外可见光谱分析表明,合成AgNPs仍部分细胞培养条件下稳定。海拉细胞仍然暴露在岩钉和鳄梨AgNPs时可行的。统计学意义,细胞毒性反应对AgNPs存在剂量依赖的相关性被发现在乳腺癌细胞系(MCF-7)浓度高于50µm .尽管转录因子p53的表达水平在治疗差别显示对这些MCF-7和海拉细胞销售税两细胞系表达并不影响治疗。细胞生存能力分析以及基因表达水平在治疗MCF-7细胞支持人口癌细胞发生细胞周期阻滞。的选择性毒性biosynthesized钉/鳄梨AgNPs MCF-7细胞疗法可能有价值的小说。

1。介绍

乳腺癌和宫颈癌是最常见的女性恶性肿瘤在低收入和中等收入国家(中低收入国家的要求)。两个恶性肿瘤与高死亡率和公共卫生系统代表了一个相当大的负担1]。目前癌症治疗,如化疗和放疗,表现出局限性,必须克服提高疗效和病人的寿命。自世界卫生问题,癌症是一种新兴的药物制剂,可以通过肿瘤壁垒,增强抗癌药物传输是潜在有用的(2]。在这种背景下,很多研究已经完成合成新类的材料,包括纳米级,和测试他们的抗癌特性和/或他们的应用程序在癌症早期检测方法(3,4]。银纳米粒子(AgNPs)是广泛应用于癌症研究由于其有效在体外抗肿瘤作用于癌症细胞系包括乳腺癌和宫颈癌模型(5,6]。纳米颗粒的细胞毒性反应可能引发细胞中不仅取决于其物理和化学特性3),但同时,由于不同的细胞系不相同的刺激与回应相同的纳米颗粒,在细胞类型(7]。

的合成AgNPs通过不同的物理、化学和生物方法和定义良好的参数的大小和形状(几个作者所报道的8]。最近的研究表明,生物合成的方法AgNPs制造可以改善一些限制与常用的物理和化学方法发现,即高能量消耗,负面的环境影响,重大生产成本(3,8]。植物提取物是常用的降低和稳定剂对AgNPs的生物合成。植物的细胞毒性和抗增殖效果对不同癌细胞AgNPs模型都进行了广泛的调查(9]。一项研究使用绿色合成与传统植物是由Barua et al .,金钟柏occidentalis叶提取抗癌显示属性被用来合成AgNPs MCF-7, mda - mb - 231 KB,海拉细胞线。NPs还显示抗菌性能枯草芽孢杆菌,金黄色葡萄球菌,单核细胞增多性李斯特氏菌,鼠伤寒沙门氏菌,和铜绿假单胞菌(29日]。

一个有趣的发现一直是upregulation proapoptotic基因AgNPs暴露后的10- - - - - -12]。最近的一项研究发现,AgNPs可以通过p53凋亡通路诱导细胞死亡时间和剂量依赖性的方式(13,14]。肿瘤抑制基因p53基因细胞凋亡细胞周期阻滞和触发器启动与广泛的细胞DNA损伤。然而在某些类型的癌症,p53失活函数作为耐药性机制(15]。因此,在体外p53表达的研究是重要的评估AgNPs细胞毒性。

氧化应激是另一个AgNPs的有害效应。为了应对高活性氧(ROS),氧化应激相关基因(过氧化氢酶,μ类glutathione-S-transferase)据报道过表达(16]。最后一个,glutathione-S-transferase (销售税),是一种抗氧化剂防御酶催化的耦合减少谷胱甘肽各种有害化合物激活细胞流出这些污染物(17]。

p .美国(鳄梨)的一员樟科家庭,已用于草药在中美洲和南美洲由于其药理特性(18,19]。众所周知,鳄梨可以发挥抗氧化,抗炎和其他有益的作用[19]。鳄梨浆,种子和叶子含有亲脂性的植物化学物质(20.和酚类化合物21]。Anitha和Sakthivel AgNPs使用水叶提取物的生物合成报道鳄梨作为还原剂,并演示了一种抗炎对红细胞的影响(22]。鳄梨的另一项研究表明,biosynthesized AgNPs显示强大的抗菌效应对革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌(23]。

g . neuberthii(Sachamango钉)是一种药用树,属于玉蕊科家庭,生长在秘鲁的亚马逊地区,巴西和厄瓜多尔(24- - - - - -26]。传统医学在当地土著社区使用岩钉属性一些病理条件包括鼻窦炎的治疗,子宫出血、腹泻、便秘等(27]。最近,Vasquez-Ocmin和同事证明g . neuberthii树皮提取物有抗寄生物的活动在体外(28]。然而,应用程序g . neuberthii提取合成的AgNPs尚未报道。

本研究旨在评估的影响,两种类型的biosynthesized AgNPs使用g . neuberthii水果和p .美国叶提取物(稳定和减少代理)在乳腺癌(MCF-7)和宫颈癌症细胞系(海拉)。NPs的细胞毒性评估使用MTT比色测定。这项研究还评估了AgNPs调制特性在两个代谢途径:细胞凋亡和氧化应激。为此,基因表达分析被用于相对量化的p53的表达销售税基因。

2。材料和方法

2.1。银纳米粒子(AgNPs)

g . neuberthii水果AgNPs和p .美国叶AgNPs biosynthesized,请提供Brajesh Kumar博士CENCINAT先进材料实验室、大学组织de las舰队ESPE,厄瓜多尔。AgNPs通过透射电子显微镜(TEM)(美国FEI-TECNAI G20精神双),紫外可见光谱(德国耶拿分析仪器公司SPECORD®年代600年,德国),和动态光散射(DLS) (HORIBA lb - 550、日本)。g . neuberthii和p .美国AgNPs球形,其水动力直径分别为38.9±19.0和41.1±19.1 nm,分别。

2.2。细胞培养

MCF-7(人类乳房腺癌)和海拉细胞(宫颈腺癌)行请博士提供的哈维尔·卡马乔CINVESTAV-IPN,墨西哥。细胞系培养在杜尔贝科修改鹰的中/营养混合物F-12 (DMEM / F-12) (Gibco),补充10%胎牛血清的边后卫(Gibco),和1% penicillin-streptomycin (Gibco)。此外,1%的丙酮酸钠(Gibco)添加到海拉细胞培养基。细胞培养是维持在37°C和5%的公司₂在湿润的气氛中。亚文化是当细胞获得的融合达到了85 - 90%。细胞被洗连续三次磷酸盐(PBS) (Gibco),然后分离trypsin-EDTA 0.25%解决方案(Gibco)。细胞悬浊液离心机在1000 rpm 22°C 10分钟。颗粒在介质resuspended,细胞被指望纽鲍尔室与倒置显微镜(微指令奥地利mcx - 1600、奥地利)。细胞被播种6-well盘子或60毫米×15毫米培养皿在特定的密度。

2.3。纳米粒子的细胞培养条件下稳定

之前在体外生物测试,稳定性的两种类型的biosynthesized AgNPs (g . neuberthii和p .美国)在细胞培养条件下进行紫外可见光谱(德国耶拿分析仪器公司SPECORD年代600年,德国)。股票AgNPs准备(1毫米)在完全培养基和蒸馏水稀释。AgNPs解决方案被安置在60毫米×15毫米培养皿和孵化37°C和5%的二氧化碳0,24和48小时。额外的控制包括评估细胞碎片的影响。控制,MCF-7——海拉细胞系生长24小时然后暴露于NPs。收集到的上层清液后来确定集聚的存在。无控、MCF-7和海拉细胞被播种(1.5×10⁵细胞)和维护24小时,其次是暴露于不同AgNPs浓度和培养时间。最后,紫外可见吸收光谱测量在350 - 800海里。

2.4。MTT测定纳米颗粒的细胞毒性评价

MCF-7和海拉细胞被播种在96 - 200年孔板µ完全培养基的L 4×10的密度³细胞每口井和2×10³每口井的细胞,分别。细胞保持文化条件下如上所述。不同浓度的g . neuberthii和p .美国AgNPs。稀释AgNPs得到完整的培养基添加到最终暴露浓度的1 - 80µ-50年MCF-7细胞和0.001米µ米海拉细胞。对于每个细胞株和AgNPs类型,六个技术进行复制。完整的实验进行了三次(生物复制)。空井只包含中、未经处理的细胞被包含在每一个实验中,适当的控制。后48小时的曝光时间,细胞生存能力是衡量一个3 - (4 5-dimethyl-2-thiazolyl) 2, 5-diphenyl-2H-tetrazolium溴化(MTT)比色测定(分子探针),遵循制造商的建议。

上层清液被移除,MTT试验和100年µL杜尔贝科的修改鹰的介质(DMEM)没有红色苯酚被放置在每一个。一个12毫米MTT股票的解决方案是通过添加1毫升无菌PBS的准备。接下来,10µL的股票添加到每个。细胞培养受光照4小时,其次是增加100µL SDS-HCl和均质化,另一个4小时的孵化,以溶解细胞内甲瓒产品。最后,吸光度测量在570 nm使用标(北京普朗)。细胞生存能力计算的平均吸光度的比值获得治疗井控制井的平均吸光度(未经处理的细胞)如下:

2.5。定量实时聚合酶链反应分析

MCF-7和海拉细胞被播种到6-well盘子1.5×10的细胞密度⁵每口井。24小时后文化时期,细胞暴露于不同浓度的AgNPs 48小时。测试了AgNPs浓度0,80,和160年µM MCF-7细胞系,和0、25、50、100µ米希拉细胞线。经过48小时的暴露在岩钉或鳄梨AgNPs,细胞在200年被收集和稀释µL PBS。总RNA提取使用PureLink®RNA迷你包(Ambion)和净化已经没有dna涡轮细胞™工具包(Ambion)为了消除污染物基因组DNA。纯化RNA是量化NanoDrop 2000分光光度计(热科学),也由在琼脂糖凝胶电泳(1%)与1 x Tris-borate-EDTA缓冲区(此种)100 V和300 mA的55分钟检查完整性。

纯化rna在上一步中存在化验LightCycler®纳米仪器(罗氏诊断),与TaqMan探针确定相对量化的p53和化学销售税基因MCF-7和海拉细胞线。本研究中使用的引物和探针在表列出1。TaqMan探针(英杰公司)与荧光团end-labeled 6-carboxyfluorescein (6-FAM)和冷却器tetramethylrhodamine (TAMRA) 5’和3’,分别。每个PCR结合包括1 x TaqMan®rt - PCR, 0.5µ0.5 M的底漆µ反向引物,0.15的MµM TaqMan探针,1 x TaqMan RT酶混合,DEPC-treated水(表达载体),和20总量的10 ng RNA模板μl。存在thermocyling计划如下:互补脱氧核糖核酸合成在48°C,持续15分钟,其次是聚合酶激活步骤在95°C 10分钟。然后,40的循环热放大进行了15秒的95°C(变性),50°C或56°C 15 s(引物的退火ACTB和销售税基因,分别地。)和最后一步45 s 60°C(扩展)。p53基因扩增、退火和延伸在单步执行60年代的61°C。聚合酶链反应效率和相关系数(R²RNA)计算,10倍稀释。半对数图与Ct值标注在构造X设在和日志RNA浓度的值,在Y设在。存在效率计算根据以下方程:

p53和销售税与肌动蛋白β基因表达水平正常化(管家基因)表达水平根据方法由Pfaffl (2001) (30.]。从未经处理的细胞RNA表达水平被用作校准器来计算相对表达比率。

2.6。统计分析

六个复制的治疗进行了细胞毒性实验。基因表达中存在的实验进行了一式三份。数据给出平均值±标准偏差(SD)。克鲁斯卡尔-沃利斯,邓恩,图基进行多重比较测试来确定控制和治疗之间的显著差异。一个值< 0.05是统计学意义。

3所示。结果

3.1。AgNPs稳定

biosynthesized稳定性g . neuberthiiAgNPs和p .美国AgNPs生物介质和蒸馏水的紫外可见光谱法来评价为3孵化* 37°C和5%的标准条件下有限公司₂在湿润的气氛中(见补充数据(可用在这里))。结果表明,吸光度值更高的AgNPs稀释时培养基相比,AgNPs蒸馏水稀释。紫外可见光谱的样品表现出广泛的峰值在最大吸收波长在400年和420年之间由于表面等离子体共振(SPR)纳米球形AgNPs的乐队。AgNPs DMEM / F12培养基稀释显示第二个峰值在550到560纳米之间。的吸收光谱AgNPs孵化与海拉和MCF-7细胞系没有出现任何其他修改。孵化在37°C和5%的公司₂24和48小时内没有产生任何重大的变化相比,紫外可见光谱0小时的潜伏期。

3.2。海拉细胞生存能力和MCF-7细胞系暴露岩钉和鳄梨AgNPs

MTT比色测定被用来评估在体外两种类型的细胞毒性效应AgNPs MCF-7和海拉癌症细胞系。吸光度数据转化为细胞生存能力率使用(1)。未经处理的细胞没有接触AgNPs(控制)占细胞生存能力的100%。结果表明,MCF-7细胞生存能力利率下降时岩钉和鳄梨AgNPs浓度增加。与对照组相比,这种细胞毒性存在剂量依赖的相关性显著,50的浓度µ米()和80µ米()钉AgNPs,显示细胞生存能力下降约16%和25%,分别为(图1(一))。鳄梨的影响AgNPs MCF-7细胞系是重要的50岁µ米()和80µ米()导致细胞生存能力下降19%和27%,分别为(图1 (b))。图基的多重比较测试被用来确定哪些治疗方法是不同的。的生存方式1µ米和80µ米治疗这两种类型的AgNPs显示0.0249的假定值钉AgNPs和鳄梨AgNPs 0.0371。数据2(一个)和2 (b)表明,该置信区间(95%置信水平)为1的方法之间的区别µ米和80µ米不包含零。因此,这些手段支持的统计上的显著差异。相反,海拉细胞接受岩钉和鳄梨AgNPs 50浓度µ并没有显示出显著的细胞毒性反应()。海拉细胞治疗的可行性仍类似于nonexposure控制数据1 (c)和1 (d)),并没有获得相关差异图基的多重比较测试和置信区间(数据没有显示)。

3.3。相对量化的销售税和p53基因

销售税安装和p53基因是重要的细胞对有害刺激导致的防御反应,例如,DNA损伤(34,35]。我们进行了销售税和p53相对mRNA表达分析中存在的RNA提取MCF-7和海拉细胞接触g . neuberthii和p .美国AgNPs。细胞治疗与不同浓度的NPs (0, 80, 160µM MCF-7细胞系,和0、25、50、100µ米海拉细胞线)48 h,然后rna分离,存在进行了分析中描述的方法。MCF-7细胞接触到40µ米的g . neuberthii和p .美国AgNPs导致p53的差别具有统计学意义对这些基因的相对表达水平的0.527 ()和0.560 (),分别(图3(一个))。在海拉细胞,g . neuberthiiAgNPs在100µM和p .美国AgNPs 25µM也减少了p53表达(相对表达式0.331, ,resp)(图3 (b))。对于这两个细胞系,销售税基因的表达没有明显影响AgNPs治疗在任何测试浓度(数字3(一个)和3 (b))。尽管我们发现一些AgNPs治疗略高销售税表达水平,这些结果在统计学上没有相关。

4所示。讨论

有相当多的文献裸银纳米粒子显示他们的抗菌23,抗炎22),抗癌,抗血管新生38],抗病毒[39- - - - - -41),和抗增殖42]属性。然而,在哺乳动物细胞毒性评价银NPs显示不良反应(43]。几个在体外化验报告,锌和铁纳米粒子诱发氧化应激,DNA损伤,和人类肝癌细胞凋亡细胞,肝细胞,淋巴细胞(44]。在活的有机体内Crl实验:CD (SD) 344年的IGS BR老鼠显示肺部炎症和细胞毒性接触着单壁球长大后碳纳米管(45]。

当研究有机涂层纳米颗粒(OC-NPs),重要的是要理解他们的化学、溶解率、表面性质,并确定他们的物理性能评估在活的有机体内和在体外效果。例如,OC-AgNPs与水互动解决方案和形式Ag) +导致膜和亚细胞组件损坏(46]。然而,至关重要的是评估所有不同的涂料,以探索新的应用程序。

我们所知,目前的研究是第一个评估p .美国和g . neuberthii涂布AgNPs生物在体外对MCF-7和海拉细胞的影响。后bio-synthesized AgNPs物理特性、文化条件下稳定性评估使用紫外可见吸收光谱法提供的信息结构构象的有机或无机元素在筛选了解决方案47]。局部表面等离子体共振的原理(LSPR)指出,当光与导电纳米粒子(即交互。,一个gNPs) which are smaller than the incident wavelength, the resultant electric field excites electrons and generates plasmon oscillations which are dependent on the composition, size, geometry, dielectric environment, and separation distance of NPs [48]。紫外可见光谱分析有机涂层纳米颗粒悬浮在去离子水为海拉在我们的研究中并没有显示一个吸收峰由于它高度稀释,而对于MCF-7,一个小高峰出现在400 - 420海里。稳定性分析在完全培养基显示前所述峰的存在,第二个在550到560纳米之间。由于AgNPs吸光度是在390 - 430纳米的范围49,50),我们的研究结果证实了纳米粒子的存在。然而,合成NPs缺乏一致性,表明获得的NPs有不同的形状、大小(49,并没有完全单分散的(集聚)[51]。第二个峰值明显与DMEM,吸收波长从440到560 nm取决于溶液的pH值(52]。虽然这个峰值对应于生长介质,需要考虑的一个相关点是存在不同的氨基酸,生长因子,和的边后卫,也可能导致导致AgNPs聚合(53]。

很重要的一点要注意的是,海拉细胞显示减少细胞吸收与MCF-7相比细胞。Biosynthesized AgNPs在我们的研究成为聚合,但内吞作用不仅取决于聚合状态,还在多个因素,如大小、电荷、表面涂层,与文化的互动媒体,和特异性吸收属性(54]。

Gliga和合作者研究了涂层AgNPs聚集在细胞吸收的重要性,认为主要的颗粒大小是最重要的因素,有助于Ag) +释放和随后的细胞毒性55]。例如,终修改乙二醇CS (HGCS)纳米粒子进行评估在海拉细胞大部分被无损内化机制微胞饮现象(用于凝聚NPs)而不是clathrin-mediated内吞作用的路线。这些内化途径表现出不同的细胞内行为和引发不同程度的细胞毒性,包括抑制溶酶体降解[56]。

细胞毒性MTT检测显示MCF-7细胞株的毒性存在剂量依赖的相关性显著减少50细胞浓度的可行性µ米和80µ对于纳米颗粒。本研究中发现的细胞毒性效应与其他研究结果一致。例如,绿色biosynthesized AgNPs (Tanacetum vulgare藻青蛋白)可以产生致命影响MCF-7细胞(57,58]。进一步分析从图1(一)(g . neuberthii)和图1 (b)(p .美国)MCF-7细胞表明减少生存能力高达25%和27%,分别。然而,高毒性水平(50%以上)之前报道了Gurunathan et al。59)使用生物合成AgNPs在同一细胞株的毒性是通过微胞饮现象和clathrin-dependent介导的内吞作用[60]。然而,形态、大小和表面纳米粒子的化学组影响上述机制(61年)和bio-AgNPs缺乏单分散性。根据El-Naggar et al。58),AgNPs行动机制涉及释放银离子,进一步交互与DNA和蛋白质等生物分子,影响细胞膜的完整性,乳酸脱氢酶(LDH)水平和线粒体渗透性和最终导致氧化应激和细胞凋亡。

相比之下,海拉细胞MTT可行性评估(数字1 (c)和1 (d))表明,non-monodispersed纳米颗粒干扰Ag)⁺离子释放。此外,聚集/聚合状态AgNPs影响细胞吸收主要依赖细胞类型和它们的属性,作为报道Lankoff et al。62年),其结果类似于我们的。总之,海拉细胞表现出减少吸收的凝聚AgNPs,相反MCF-7细胞显示,这种类型的NPs的摄取率较高。

要解决的一个有趣的方面是AgNPs涂层之间的交互与细胞膜负电荷在哺乳动物细胞在pH = 7。电的变化这一层影响基质的运输,据Dobrzyńska et al .,描述电膜变化MCF-7细胞根据其媒体小灵通(63年]。作者显示转变的等电点在低pH值和一个正电荷被证明在低pH值,与负电荷在海拉细胞的情况下,高博士沃伦和佩恩的一项研究发现,纳米颗粒不permeabilize膜但允许去极化通过增加钾离子通道,从而导致稳定的静止膜电位64年]。在目前的研究中,不同的反应研究的细胞系表明内在差异影响纳米粒子的吸收和内化。细胞培养组件(媒体和血清)影响纳米颗粒,导致聚合,这可能影响细胞内的行为NPs但不一定抑制他们的效果63年]。这是由于这样的事实,NPs细胞吸收总是由biocorona,影响NPs biodistribution,激活,并与细胞表面受体相互作用。据Asharani et al ., NPs大小影响绑定和膜受体的激活和癌症细胞系的基因表达42]。

尽管AgNPs细胞毒性被发现在几项研究[14,66年- - - - - -69年),所涉及的分子机制并不完全清楚(16]。AgNPs可能引发氧化应激的活性氧(ROS)的生产(70年,71年]引起多种细胞内反应和抗氧化系统的变化72年),最终可能导致细胞凋亡或坏死(73年]。

最近的研究报告的表达水平显著增加销售税在不同的在体外(16][31日),在活的有机体内(74年,75年)接受AgNPs模型,显示销售税是一个重要因素来平衡细胞内氧化状态(76年]。然而,我们发现,暴露在biosynthesized AgNPs没有引起显著的变化在治疗肿瘤细胞基因表达48小时孵化/曝光。这种缺乏反应有关销售税表达式可能解释为生物活性化合物的存在可能会抵消细胞内自由基的形成。它已经被Owolabi之前报道et al。77年),植物化学物质如槲皮素具有很强的抗氧化活性提取物p .美国叶子。阿尔瓦等。27)发现,g . neuberthii水果含有单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸,清除自由基的能力著称,例如,过氧化物(78年]。然而,需要进一步的实验来确认中抗氧化剂的存在内部的纳米颗粒和细胞。

分析基因编码解毒酶的表达水平Aueviriyavit et al。79年)发现,销售税表达水平Caco-2细胞暴露于AgNPs后保持不变,尽管其他逆境应答基因的表达水平有显著影响。库玛et al。31日)发现,销售税MCF-7细胞表达成为改变后24小时接触NPs而不是48小时。这种现象被解释为一个更高的NPs:细胞比率在24小时内与扩散速率48小时相比,在细胞内大量的NPs减少,导致更少的细胞毒性。

另一个有趣的研究表明,一个可能的机制引起的死亡的NPs细胞系p53-mediated凋亡,机制,取决于,除此之外,在研究纳米材料的大小80年- - - - - -82年]。布兰科等人表明p53表达可能下调当小NPs和更长的潜伏期时间化验(14]。在目前的研究中,p53基因表达在不同浓度显著降低48小时后的孵化g . neuberthii和p .美国AgNPs(直径约40 nm),这是在协议与布兰科等的研究,我们发现p .美国AgNPs诱导的48小时后差别显著p53对这些接触浓度的25µM和40µm .,g . neuberthiiAgNPs表现出相同的模式为40µ米和100µm .我们与其他研究结果一致,比如最近的一个Asharani等人,作者发现p53成为p21表达下调以及低水平的蛋白质在正常的人类肺细胞(imr - 90)和人类大脑肿瘤细胞(U251)后接触AgNPs [83年]。Zhang et al。65年发现AgNPs(400年μg / ml) p53的差别在一些癌症细胞系诱导对这些基因的表达和细胞周期阻滞在S / G2 / M期。

在我们的研究中,海拉细胞线显示p53在差别明显对这些25岁μ米和100μ在任何浓度,m .然而,相关的毒性会缺席。这一发现可能解释为p53的作用作为一个重要的监管机构细胞增殖和基因组的稳定性。p53诱导p21的表达转录因子存在的压力信号来触发细胞周期阻滞和衰老36]。然而,在原发性肿瘤,p53突变可能与抑制其正常功能的结果或可能成为退化ubiquitin-protein连接酶定位。Engeland发现p53激活导致细胞周期阻滞p53-DREAM通路。这几个基因包括的主要差别网络涉及到对这些检查点p53 [37]

信使rna p53水平之间的相关性和细胞生存能力在科瓦奇和合作者的研究被发现。作者发现减少骨肉瘤u - 2侦察机OS细胞生存能力AgNPs处理时,与p53显著调节(15]。然而,还有其他主要参与细胞凋亡机制触发,例如,线粒体的压力。我们的发现与Kovacs协议的研究中,我们观察到的差别一个对这些基因p53基因在细胞生存能力没有明显影响,从而支持的观点可能差别p53对这些基因的诱导增殖被捕。

总之,MCF-7细胞接受周期阻滞当暴露于biosynthesized AgNPs,而海拉细胞没有影响。这一发现可能会使用在设计小说在癌症治疗策略时,特别是在乳腺癌。

5。结论

在目前的研究中,我们检测了细胞毒性/抗增殖效果biosynthesized AgNPsp .美国和g . neuberthiiMCF-7和海拉细胞系。p53的表达和销售税基因也是评估NPs的分别引发细胞凋亡和氧化应激调制特性。Biosynthesized AgNPs MCF-7细胞的毒性浓度的方式但不是海拉细胞。销售税表达不受影响,在对待MCF-7细胞p53表达下调的时候。我们的发现证明净的细胞毒性效应AgNPs MCF-7细胞凋亡可能较小人口和人口大细胞进入增殖被捕。虽然有一个明确的需要机械的研究上面的细胞反应,合成了AgNPs可能是有用的在设计未来的治疗在乳腺癌中的应用。

数据可用性

数据支持本文的研究可从相应的作者。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

确认

作者感谢Brajesh Kumar博士提供biosynthesized NPs拉希德Seqqat博士和有价值的帮助与初步实验。这项工作是由大学组织de las舰队ESPE科研资助2014 -坑- 044 (Marcelo Grijalva)。

补充材料

分析钉/鳄梨AgNPs紫外可见光谱在生物条件下。(补充材料)

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