调查的影响蛋的银纳米粒子注射脂肪吸收和发展肉鸡和蛋鸡幼仔

文摘

银纳米粒子(AgNano)作为载体可用的氧气(O₂)和高表面活性可能增加O₂消费,提高脂肪吸收(FU),刺激经济增长和发展。在蛋的目的是探讨影响注入AgNano代谢率(O₂消费,有限公司₂生产、和热生产惠普),脂肪吸收,肉鸡和蛋鸡幼仔的发展。AgNano浓度(50、75和100毫克/公斤)在蛋在孵化第一天注射不同品种的肉鸡和蛋鸡鸡胚胎。耗氧量,随后傅没有增加线性AgNano后治疗。傅低AgNano幼仔接受50和100毫克/千克,但令人惊讶的是没有在幼仔AgNano接受75毫克/公斤。有趣的是,FU治疗之间的差异并没有反映在人工孵化的发展。结果表明,AgNano影响代谢率和富;然而,这并不影响幼仔的发展。这表明在蛋注入AgNano减少了需要使用蛋黄的脂肪作为能源在胚胎发育阶段,因此剩余的脂肪剩余卵黄囊可能提供的有力的营养储备来源小鸡孵化后几天。

1。介绍

在孵化的后期,脂肪在蛋黄为胚胎发育提供能量的主要来源。葡萄糖从碳水化合物和蛋白质提供了重要的能源在胚胎发育的前两周,从那时直到2或3天前内部管道,脂肪酸从蛋黄供应90%的能量需求的胚胎。对孵化,前几天管道、能量代谢开关通过糖质新生葡萄糖和糖原生成(1- - - - - -3]。

氧气(O₂)是脂肪和有效检索的一个重要因素β从蛋黄脂肪酸氧化1,2]。在发展中胚胎,从第14天开始,绒毛膜尿囊的膜介导O的转移₂孔之间的壳和胚胎2,4]。然而,孵化的末尾,O₂消费达到高原期,因为限制的O₂壳牌孔隙系统的扩散能力。因此,供应的O₂胚胎发展中变得有限,最终结果缺氧限制脂肪代谢和胚胎的生长(5]。

正在调查若干技术来减轻这种影响和促进增长孵化之前和之后。蛋的营养供应,例如,是一个技术,包括注入营养液前几天管道提供一个外部能源胚胎和幼仔(3,6]。这项技术是非常有前途;然而,这种做法还有待完善和商业化。因此,需要考虑其他方法的发展。

最近,我们报道的新陈代谢层胚胎可以修改的蛋中蛋注入银纳米粒子(AgNano) [7]。我们证明AgNano集中50毫克/公斤,当注入蛋在孵化的第一天,增加代谢率在层的胚胎。然而,在前面的实验中,这种改善代谢率没有改善胚胎的生长。因此,不同浓度的影响AgNano通过剂量反应进行了实验。这是确定最佳有效浓度的AgNano增加代谢率以及提高肉鸡和蛋鸡的生长和发育鸡幼仔。测定的研究扩展到脂肪吸收新出生的小鸡,考虑到,除了遗传背景;一个因素对肉鸡和蛋鸡胚胎生长区别是脂肪的速度利用率(8,9]。在实际条件下,小海龟主要依靠剩余卵黄囊组件作为一个直接的营养来源在孵化后的几天,直到他们得到一个外部营养来源(10]。我们提出的引入AgNano能够携带O₂在细胞水平上在提供O将提供另一种方法₂要求发展中胚胎。由于AgNano的高表面活性,这种治疗可以促进脂肪的氧化在幼仔的蛋黄和随后脂肪吸收。这项研究的目标是确定的影响在蛋注入AgNano代谢率(耗氧量,O₂;二氧化碳生产有限公司₂;热生产),脂肪吸收,肉鸡和蛋鸡幼仔的发展。

2。材料和方法

2.1。实验设计

2×3析因实验和两个增殖病毒(308年罗斯×罗斯和罗曼)和三个AgNano浓度(50,75和100毫克/公斤)使用。

584肥沃的鸡蛋从罗曼(层类型)和罗斯×308年罗斯(broiler-type)增殖同龄的菌株(37周大)是获得商业孵化器。在每一个增殖病毒,292个鸡蛋被随机分成两批并存储在冰箱(10°C)被放置在孵化前1 - 3天。在每一批,140个鸡蛋被分成5组,有28个鸡蛋每次治疗的12个鸡蛋从每个治疗被用于测量O₂消费和有限公司₂生产,5个鸡蛋人工孵化的开发、评估和其他被用作储备。此外,12个鸡蛋/增殖应变在第一天开了,蛋黄样本收集。的鸡蛋在孵化的第一天,第一批被数和注射治疗根据以下描述:(1)控制(没有注射),(2)虚假的控制(安慰剂),(3)AgNano 50毫克/公斤,AgNano(4) 75毫克/公斤,(5)100毫克AgNano /公斤。鸡蛋被注射0.3毫升hydrocolloidal AgNano和磷酸缓冲盐溶液(安慰剂)使用无菌气囊27日计,20毫米针。后立即注射,这个洞是用低变应原的胶带封起来和鸡蛋都放在孵化器。鸡蛋孵化21天,在标准条件下(温度37.8°C,湿度55%,鸡蛋第一18天每小时一次,和温度37°C,湿度和60%从19天直到孵化)。相同的过程重复第2批鸡蛋的第二天。

2.2。气体交换测定

O₂消费和有限公司₂生产测量在第十天,13日,16日和19日孵化,据Chwalibog等描述的过程。11]。气体交换测量是基于顺原则在一个开放的空气循环呼吸单元(Micro-Oxymax量热器从哥伦布仪器,哥伦布,哦,美国),配备四个呼吸室体积为2000厘米³。O的浓度₂和有限公司₂在传入的大气室分别为20.946%和0.038%,分别。温度和相对湿度保持类似的孵化器。

鸡蛋要称重和蜡烛前测量检查胚胎的存在。鸡蛋没有胚胎被抛弃,取而代之的是鸡蛋相同的年龄从相同的治疗在孵化器作为储备。从每个治疗六个鸡蛋放在呼吸室和测量3 h从9点到12点,紧随其后的是六个鸡蛋从同一治疗测量从下午一点到16:00时。每次测量后,鸡蛋被推迟到孵化器。这个过程被重复第二天与另一批鸡蛋;因此,共有24个鸡蛋每增殖应变测量从每个治疗。所有气体交换和热生产(HP)测量标准化50克鸡蛋质量以占体重的差异在每个测量。

惠普是计算从O₂消费和有限公司₂生产按照这[12]:惠普,kJ = 16.18×O₂毫升+ 5.02×有限公司₂毫升。

2.3。Nanosolution

水状胶质AgNano解决方案获得Nano-Tech(华沙,波兰),由专利防爆的高压法(波兰专利3883399)从高纯度金属(99.9999%)和高纯度去除矿物质水。纳米粒子的浓度的凝胶是50,75和100毫克/公斤AgNano粒子大小从2 35 nm基于TEM评估被Chwalibog et al。13]。

2.4。蛋黄和卵黄囊抽样

所有的鸡蛋在孵化的第一天,决定重鸡蛋重量设置。十二个鸡蛋从每个增殖病毒,代表了鸡蛋的平均体重,选择新鲜蛋黄收集的第一天。在孵化后24小时,10只小鸡从每个治疗被斩首的安乐死和卵黄囊(y)从腹腔中删除,然后重,储存在−20°C和冻干前的分析。

2.5。人工孵化的测量

孵化,那天刚孵出小鸡没有饲料和水,保持在一个温度控制(32°C)孵卵器箱配有24小时热灯。小鸡重量(连续波;)测量;此后,他们安乐死,肝脏,心脏和小肠解剖和体重。

实验过程遵循丹麦国家立法。

2.6。分析

蛋黄样品收集在第一天(在24小时)和残余y (孵化后)一式三份,DM的内容分析和脂肪。湿的DM内容并分析了冻干蛋黄干一夜之间在烤箱105°C,而脂肪含量是决定使用冻干样品的石油醚萃取盐酸水解后Soxtec系统。氮(N)的内容进行分析,因为没有考虑N在蛋黄不能准确确定由于蛋白质和水的渗透nonyolk蛋隔间,据Yadgary et al。10]。

2.7。计算

Yolk-free体重(YFBW)被确定为连续波和残余y之间的区别。肝脏、心脏和小肠重量相对于YFBW YFBW(%)被用来计算相对器官重量YFBW器官重量的(g / g)×100。的绝对权重y,蛋黄的脂肪含量(YF)和脂肪吸收(FU)及其权重相对于YFBW YFBW(%)都是计算,如果这一趋势是相同的,只显示了绝对值。

YF在第一天()是由增加脂肪的浓度蛋黄,蛋黄的重量在第一天。在孵化后24 h YF ()是由乘法计算脂肪的浓度与剩余的重量y y孵化后24小时。傅决心通过计算脂肪含量的差异之间的两个时间点(FU =−)。

2.8。统计分析

数据分析使用的漠视,SAS程序(SAS研究所有限公司,2009)考虑的主要影响治疗(50,75,和100毫克/公斤AgNano),增殖应变(罗斯或罗曼),这些变量之间的相互作用。说实话Tukey-Kramer显著差异测试用于测试的分离手段的显著性水平。安慰剂组的数据是从分析由于技术问题,省略了这组胚胎的死亡引起的。

3所示。结果

3.1。卵黄囊的体重、脂肪含量和脂肪的吸收

剩余y体重较大的幼仔AgNano处理(;图1(一))。在孵化后24小时,没有观察到的差异在AgNano浓度;然而,与控制相比,小海龟AgNano接受50和100毫克/公斤有较大的残余y。幼仔的y重量AgNano接受75毫克/公斤是中间。

幼仔的残余y AgNano接受100毫克/公斤含有更多的脂肪(;图1 (b))与幼仔AgNano接受75毫克/公斤和控制(没有注射)集团,但并不是不同的幼仔对待AgNano 50毫克/公斤,这可比YF所有治疗。幼仔的傅AgNano接受50和100毫克/公斤是相同的,但它是低比幼仔在控制(没有注射)组(;图1 (c))。幼仔的傅AgNano接受75毫克/公斤相当的傅幼仔AgNano 50毫克/公斤处理和控制,但高于幼仔AgNano接受100毫克/公斤(;图1 (c))。

新鲜蛋黄体重(18.6和15.8 g)在第一天在烤焙用具大鸡蛋孵化与层的鸡蛋。最少、YF内容(5.97和4.82 g)也在烤焙用具高于层鸡蛋。剩余的重量y高出0.37克(;图2(一个))和YF高出0.59克(;图2 (b))在烤焙用具层幼仔。傅高出0.4 g的烤焙用具与层幼仔(;图2 (c))。

之间没有显著的交互影响治疗和增殖菌株y, YF, FU(数据未显示)。

3.2。小鸡重量和器官重量

在设置AgNano浓度并不影响鸡蛋重量(),YFBW或肠道的相对权重,心脏,肝脏YFBW(%)与控制(所有;数据未显示)。

鸡蛋的重量比层设置在肉鸡重5%(63.0和60.0;)。肉用鸡幼仔的YFBW比层幼仔(重13%;图2 (d))。除了肠道的相对重量,没有在其他器官重量的影响。在肉鸡肠道的相对重量比层幼仔重8%(5.0和4.6%;)。心脏和肝脏相对重量增殖菌株之间没有差别(;数据未显示)。

之间没有相互影响指出治疗和增殖压力YFBW和肠的相对权重,肝脏和心脏(;数据未显示)。

3.3。代谢率

治疗和观察增殖应变的影响气体交换和惠普。幼仔AgNano接受50和100毫克/公斤最低代谢率(O₂消费,有限公司₂孵化期间生产,HP) (;表1)。

肉用鸡胚胎多消耗13%的O₂多生产17%的有限公司₂,更多的热量比消耗14%层胚胎(;表1)。

之间没有相互影响记录治疗和增殖菌株代谢率(;数据未显示)。

4所示。讨论

4.1。脂肪的吸收

这项研究显示,傅AgNano减少,表明减少脂肪氧化,高权重的y和YF孵化后24小时。结果意想不到的AgNano与我们的假设相反,可用O的载体₂高表面活性,将增加O₂消费和促进脂肪氧化。在当前的研究中,我们证明了傅低AgNano幼仔接受50和100毫克/千克,但令人惊讶的是没有在幼仔AgNano接受75毫克/公斤,这表明,氧化的模式没有回应线性AgNano浓度的增加。这种反应的原因是未知的,但也许O的利率₂消费可以解释这种模式的脂肪氧化。O₂供应是至关重要的β氧化脂肪酸的蛋黄和有效检索脂质在孵化期间,在几位评论指出1- - - - - -4),在以前的研究证明啊₂消费影响蛋黄的脂肪的用量(14]。此外,阿₂消费和傅呈正相关记录在几项研究[9,11),这表明,较低的O₂消费率和更高的蛋黄重量与更少的脂肪氧化。在我们的研究中,这种积极O之间的关系₂消费和傅记录;小海龟AgNano接受50和100毫克/公斤表现出较低的啊₂消费这解释了傅越低。

几项研究已经表明,在孵化,剩余的重量y, YF,和傅相比更高肉用鸡层小海龟,因为更高的代谢率在前,这有利于脂肪的氧化和解释了较高的脂肪消耗8,9,15]。在目前的研究中,类似的结果都记录在肉用鸡幼仔为同一参数。除了代谢率的差异,我们也将这些参数的增加归因于在肉鸡规模更大的鸡蛋和蛋黄含有更多的脂肪和其他营养物质,负责更大的重量y和肉用鸡幼仔YF含量较高14,16]。

治疗和增殖应变之间无显著交互效应是指出y, YF,和傅小海龟。这可以解释为缺乏交互的影响,都表现出代谢率增殖菌株AgNano治疗的反应。

4.2。代谢率

与控制(没有注射)组相比,负面影响代谢率在幼仔注射AgNano 50 - 100毫克/公斤。这一发现是与我们之前的工作7),这样做的原因是未知的。很可能50毫克/公斤的AgNano浓度太低了,100毫克AgNano /公斤太高,增加代谢率。从目前的结果很明显,代谢率的幼仔AgNano接受75毫克/公斤AgNano高于50和100毫克/千克,但类似的控制(没有注射)组,表明最优浓度,增加代谢率在50 - 100毫克/公斤的范围,但这还有待阐明。

在协议与其他研究7,9,17- - - - - -19),我们的工作证明,肉用鸡胚胎的代谢率较高而层胚胎。

缺乏一个重要的治疗和增殖压力之间的相互作用的代谢率并没有完全同意与我们之前的研究。符合之前的实验(7,20.),烤焙用具胚胎的代谢率没有影响AgNano治疗,可能是因为基因编程的最大值。然而,缺乏影响层是一个对比的结果,正如我们以前记录显著增加O₂层的消费胚胎注射AgNano 50毫克/公斤。研究之间的差异可能是由于不同的蛋壳电导和孔隙度之间的育种群使用,可能是年龄的影响。层胚胎的代谢率从老饲养员羊群在先前的研究中使用了30%低于峰值育种群产生的胚胎用于当前工作(9毫升h⁻¹与13毫升h⁻¹)[7]。之前就有报道称,蛋壳电导和孔隙度降低育种群年龄(21]。如果是这样的话,它可以推测壳孔隙度的减少可能减少了啊₂壳牌孔隙系统的扩散能力和合成代谢缺氧有限的增殖群(5]。的发现我们的研究可能表明AgNano在代谢率的影响不仅受应变的影响,还受到O₂消费的胚胎。似乎AgNano施加的影响层胚胎的代谢率和更少的多孔壳和O的供应有限₂。然而,这些假设,需要在进一步的研究确认,因为我们没有评估壳牌电导和孔隙度的研究。

4.3。人工孵化的发展

在当前的研究中,YFBW和相对器官重量的小鸡被用作人工孵化发展的风向标。对肉用鸡YFBW是高于层幼仔,与记录在协议高等BW和更快的发展在肉鸡和蛋鸡鸡胚报道之前7,9,17,22]。人工孵化发展的差异本研究可能主要与增殖菌株之间遗传背景的差异(19),脂肪的模式利用率(8,9),和鸡蛋大小(16]。

目前的结果还证明增殖病毒株之间的差异相对小肠重量。我们记录的相对权重更高的肠肉用鸡层小海龟相比,这可能表明更先进的成熟的肠道肉用鸡幼仔(22]。可能的原因可能是,肉仔鸡生产周期短,重要的是,小肠尽早达到功能性能力增强消化的营养和增长3,15]。

人工孵化的发展没有受到AgNano浓度的影响。缺乏治疗效果是一致的结果在鹌鹑,猪和鸡和支持结论AgNano不影响增长(7,20.,23- - - - - -25]。有趣的是,脂肪吸收治疗之间的差异反映在人工孵化的发展。发展的幼仔AgNano接受50和100毫克/公斤YF保持以最小的消耗,这可能表明,其他营养物质被利用(10),也可以是傅太小引起的差异对经济增长产生影响。也可能观测的周期太短(24小时)的差异有待确定。以往的经验显示,膳食脂肪的影响新生儿的肉鸡的生长是在10天的年龄最大26]。

5。结论

结果表明AgNano在50和100毫克/公斤影响新陈代谢和脂肪的吸收;然而,这并不影响幼仔的发展。在蛋注入AgNano 50 - 100毫克/公斤减少了需要使用蛋黄的脂肪作为能量来源,它可以推测剩余的脂肪的残余y是一个有效的来源posthatching幼仔的营养储备。然而,进一步的研究是必要建立它的潜力。

承认

这项工作得到了丹麦科学技术和创新机构(批准号2106-08-0025)。

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