Ipomea甘薯叶粉来自喀麦隆:抗氧化活性和Antihyperlipidemic效应与高脂肪饮食喂养的老鼠

文摘

目前的研究包括植物化学的成分的分析番薯甘薯叶粉和评估他们的antihyperlipidemic影响接受高脂肪食物的老鼠。番薯甘薯喀麦隆的树叶收集从四个农业生态的地区,和粉末得到洗涤后,干燥、粉碎和筛分。标准分析方法被用来确定两个品种的植物化学的成分(IRAD-tib1yellow-V1和irad - 1112 -白- v2)从北Z1, Adamawa Z2,西Z3中心Z4。的影响一、甘薯叶粉对脂质代谢评估在活的有机体内通过与高脂肪饮食喂养不同组的大鼠补充5和10%的一、甘薯叶粉在30天。最后实验、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白-胆固醇(低密度脂蛋白),HDL(高密度脂蛋白)胆固醇,ASAT(天冬氨酸转氨酶)、ALAT(丙氨酸转氨酶)和肌酐测定使用商业酶试剂盒(Spinreact、西班牙)。植物化学的分析的结果一、甘薯叶粉显示总酚含量范围从660.173毫克GAE / 100 gDW (Z1V2)到GAE 657.76毫克/ 100 gDW (Z3V2),类黄酮含量范围从282.25 mgEC / 100 gDW (Z3V1) 325.05 mgEC / 100 gDW (Z4V2),和蒽醌含量范围从324.05毫克/ 100 gDW (Z3V2) 326.72毫克/ 100 gDW (Z4V2)。总抗氧化能力范围从19.00 (Z1V1) 23.48毫克AAE / gDW (Z3V2),而集成电路₅₀范围从1.58毫克/毫升(Z1V1) 3.08毫克/毫升(Z3V2)。老鼠喂食高脂肪的饮食和补充的5 - 10%一、甘薯叶粉显示出显著( )相比减少体重控制与减少利率从6到10%。的消费一、甘薯叶粉30天显著( )降低血清总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇,甘油三酯,ALAT,肌酐水平。这些结果显示使用一、甘薯叶子作为植物学期刊在心血管疾病的治疗。

1。介绍

如今,饮食习惯已经改变,趋势更加面向基于蔬菜非常丰富的传统食品抗氧化剂防止心血管疾病(1]。在蔬菜的叶子Ipomea甘薯(红薯)是人类饮食的一个重要组成部分,为人体提供维生素、矿物质、蛋白质、激素前体,高含量的植物化学物质具有有益的影响(2]。在日本,的叶子一、甘薯已报告是花青素和许多其他生物活性化合物的极好来源(3]。在巴西和马来西亚,叶子上的一些研究一、甘薯专注于其抗氧化能力由于黄酮类化合物的含量高,β胡萝卜素、花青素和酚类(4,5]。因此,这些化合物的存在提到可能的原因一、甘薯叶被用于传统医学(贫血、抗病毒和蠕虫)。除了治疗糖尿病药和抗病毒特性,番薯甘薯叶子已经用于治疗传染病在巴西6]。植物化学的化合物保护身体对抗退化性疾病,如癌症和动脉粥样硬化引起的自由基。因为他们的潜在生物活性的化合物,使用一、甘薯叶子也被认为是高脂血症的管理。高脂血症是一种生理干扰以提高胆固醇水平异常或血液脂蛋白(7]。这是心血管疾病的主要原因,如缺血性脑血管疾病、冠心病、和周围性血管疾病8,9]。另一方面,高脂血症是死亡率的主要原因(约1200万人)和发病率在世界上10]。许多降脂药物(纤维、隔离胆汁酸等)由各种机制用于调节脂质代谢,但由于其合成的特性,他们也被认为是对健康造成不良影响,包括高尿酸血,腹泻,恶心,严重肌肉损伤(肌病),胃刺激、潮热、皮肤干燥,放松管制的肝功能(11]。大量的植物被传统上用来对付各种心血管疾病和控制高脂血症,其中的叶子一、甘薯(6,12]。一些地方在喀麦隆的一些调查报告了他们的使用在传统医学减肥植物。因此本研究旨在量化的植物化学的化合物番薯甘薯叶在不同农业生态区域的喀麦隆和收集研究他们antihyperlipidemic吃高脂肪食物的老鼠的活动。

2。材料和方法

2.1。的植物材料和制备Ipomea甘薯叶粉

新鲜的叶子两(2)品种,黄色一、甘薯IRAD-Tib1 (V1)和白色一、甘薯irad - 1112 (V2),收集到约20厘米从顶端极四个方面的研究:Sudano-Sahellian (Z1,北:Garoua),几内亚萨凡纳高区(Z2, Adamawa: Ngaoundere),西部高原地带(Z3、西:Foumban)和雨林两种模式(Z4,中心:Bafia),博士被Neree Onguene,植物分类学者雅温得农业发展研究所(IRAD-Yaounde、喀麦隆)和MBONOMO吉恩·莫伊兹先生,技术员发展农业研究所(IRAD-Wakwa Ngaoundere-Cameroon)。

叶子洗净晾干在烤箱45°C 48小时和碎500年冰川锅穴通过筛网μ生产细叶粉。粉末被储存在塑料包装和密封进行进一步分析。

2.2。纤维和植物化学的化合物的定量估计

2.2.1。纤维含量

沃尔夫(13)方法被用来确定叶粉的粗纤维含量。2 g的样本煮30分钟下回流冷凝器在0.25 N硫酸溶液。混合物过滤,然后,残渣冲洗,再煮30分钟在0.3 N氢氧化钠溶液。然后,过滤和冲洗样品干了8个小时在105°C。冷却后,残渣重量,然后在马弗炉焚烧3小时的550°C。粗纤维含量是表示为干重的百分比(DW)的样本。

2.2.2。总酚和类黄酮含量

徐(描述的方法14)是用于酚类化合物的提取。八十毫升的甲醇(80%)被引入包含5 g的叶粉、烧杯和混合均质和浸渍12小时。混合物是离心机(5000 rpm, 10分钟,4°C),通过绘画纸N°1滤纸过滤。滤液与甲醇(80%)是由100毫升作为股票的解决方案(50毫克/毫升)。然后,总酚和类黄酮含量测定使用的协议描述Sokamte et al。15]。

2.2.3。原花青素含量

香兰素的方法描述了布罗德赫斯特和琼斯16)是用于proanthocyanidin内容的决心。25μl的样本(原液)是125年混合μl(香兰素试剂甲醇(4%)和60μl(浓盐酸(35%)。15分钟后吸光度测量在500 nm潜伏在黑暗中在室温下。校准曲线的绘制与儿茶素(0 - 1毫克/毫升)。mg儿茶素表达的proanthocyanidin内容相当于/ g干重(mg CE / g DW)。

2.2.4。蒽醌含量

蒽醌含量的测定,股票的解决方案是使用一个旋转蒸发器蒸发真空获得干燥的提取。然后,1 g的提取与30毫升蒸馏水混合,煮15分钟回流冷凝器。分析过程后Sakulpanich协议中描述的步骤和Gritsanapan [17),结果被表示为毫克hydroxyanthracene衍生品/ DW 100克。

2.3。测定抗氧化活性

样品的抗氧化活性是评价使用三个测试:DPPH测试(1,1-Diphenyl-2-Picrylhydrazyl测试),收紧的(铁减少抗氧化能力)测试,和TAC(总抗氧化能力)测试。分析程序在我们之前的出版物中描述的步骤(18]。对DPPH测试,结果表达的IC₅₀(浓度提取,允许50%的DPPH自由基被困)和指数回归方程计算了15]。

2.4。实验动物

36岁男性纯种白化病老鼠约3个月,重约250克实验室的营养,科学教师,喀麦隆雅温得我大学使用的在体外研究。在这项研究之前,老鼠的体重,分成6组6老鼠,住在一个笼子里,和适应一周免费自来水和食物。动物被关在一个环境 的相对湿度 下一个周期12 h光明和12 h黑暗。过程研究中使用的动物伦理委员会批准的实验室营养雅温得。大学的审判是在参考注册号码:没有。FW-IRB00001954。

2.5。饮食管理和采血

标准和高脂肪饮食提出的用来喂养动物被制定为Murase et al。19(表)和轻微的修改1)。老鼠被分为6组6老鼠。消极的控制标准饮食(TN-STD)组随意标准或正常饮食。积极的控制高脂肪饮食(TP-HFD)组随意高脂肪的饮食。TP-HFD-Z2V2 5%组、TP-HFD-Z2V2 10%组,组TP-HFD-Z3V2 5%, TP-HFD-Z3V2 10%组,美联储随意与高脂饮食补充剂量的5 - 10% ( )的一、甘薯叶粉区2 /品种2区3 /品种2,分别。膳食补充草药粉的剂量是固定的基础上,以往的研究发现在文献[20.,21]。实验进行了30天,该动物禁食12小时后,用乙醚麻醉。颈静脉的血液被撤回、引入干燥管(没有抗凝)然后离心机(1500转;10分钟)收集的血清进行后续分析评估血脂,肝功能、心肌损伤。

2.6。生化试验

2.6.1。血脂

总胆固醇的水平,血清中脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇测定使用商业酶试剂盒(22]。甘油三酯是由GPO-PAP化验(甘油三磷酸oxidase-4 Amino-antipyrine)比色法使用人类SU-TRIMR 10720 p工具包(德国人)。示例中的甘油三酯水解使用一组微生物脂酶形成甘油和脂肪酸23]。粥样硬化指数计算公式后被薄熙来et al。24]。

2.6.2。评价肝和心脏功能

肝脏功能评估的决心丙氨酸转氨酶(ALAT)和天冬氨酸转氨酶(ASAT)活动使用分光光度计基于协议的商业工具(25]。结果表示为IU / L。

肌酐含量测定用分光光度计在520海里与人类Su-Crea 10052装备26),了解心脏损伤的程度。

2.7。统计分析

分析进行了一式三份和数据受到方差分析测试治疗之间的意义。此外,差异意味着测试使用邓肯多个范围测试使用Statgraphics百夫长十六软件版本16.1.18 (StatPoint Technologies, Inc .)和统计上的值被认为是不同的风险 。回归分析了使用SigmaPlot 12版本12.5.0.38 (Systat软件,Inc .)。

3所示。结果与讨论

3.1。纤维含量

纤维是植物的nondigestible多糖残留物和总纤维不等的手段 gDW(样本Z4V1) gDW(样本Z1V2)(表2)。一个重要的( )观察不同样品之间,无论收获或品种研究的起源。这一研究获得的结果类似于太阳et al。27]。他们发现纤维含量为11.33克/ 100 gDW甘薯叶粉来自中国。据Kurata et al。20.),红薯叶富含膳食纤维。

3.2。总酚类黄酮、原花青素和蒽醌类内容

表2显示了两个品种的生物活性化合物的内容Ipomea甘薯叶粉收集到的四个地方。在这个表中,可以看出总酚的含量,原花青素,和蒽醌类是非常相似的,无论品种或植物的起源。然而,显著差异( )被观察到的总酚和proanthocyanidin内容。总酚含量的变化 gDW来 gGAE / 100 gDW,原花青素含量不同 gGAE / 100 gDW mgCE DW / 100 g。最高的记录总酚含量Z4V2样本,而最小值被记录在Z3V1样本。另一方面,proanthocyanidin内容记录在样品Z1V2最高,而最小值被记录在Z2V1示例。没有显著差异( )观察蒽醌含量的不同甘薯叶样品。从平均水平 来 毫克/ 100 gDW。总类黄酮含量,各种各样的植物有重大影响的值记录在甘薯叶以来最低的内容( 来 mgCE / 100 gDW)品种1中被观察到,而最高的内容( 来 mgCE / 100 gDW)品种2中被观察到。植物化学的化合物如总酚类和黄酮类化合物中也发现了收获红薯的叶子在埃塞俄比亚(28)和中国(29日]。在这项研究中观察到的总酚含量值很高相比发现太阳et al。27]我国甘薯叶收获(120毫克/ 100 gDW)。相比之下,高水平的总酚类(3680 - 4670 mg / 100 gDW)被发现在三个甘薯品种的叶子在美国收获(30.]。这些作者认为花青素主要是出现在提取进行了研究。因素可能是负责观察差异红薯叶子的植物化学的成分不同,收获季节,植物的生长条件和年龄据Sokamte et al。15]。总酚类化合物被称赞的有利影响对抗慢性疾病如动脉粥样硬化、心血管和糖尿病(31日]。此外,所显示Groppo et al。6),红薯叶被赋予一个潜在的药用由于其高含量的酚类物质(如生育酚、单宁酸、酚酸和类黄酮)。

3.3。总抗氧化能力(TAC),铁降低抗氧化能力(收紧),和1,1-Diphenyl-2-Picrylhydrazyl (DPPH)测定

不同样品的抗氧化活性比较后估计的总抗氧化能力(TAC)和铁降低抗氧化能力在AAE / g DW(收紧)值,它在桌子上2。从这个表可以看出,这些TAC值差别很大从一个到另一个样本,Z3V2活动最高的样品( AAE DW / g),其次是Z2V2样本( AAE DW / g)。收紧的测试中,所有种类的样本1显示平均值从最低的活动 AAE DW / g AAE DW / g。为这些收紧值观察无显著差异,而不同的样本2明显不同。样本Z3V2记录最高的活动( AAE DW / g)。这些样本捕获自由基的能力也被评估使用1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH)测试,和IC表达的结果₅₀。像收紧的测试,这些样本的反激进主义的能力遵循相同的模式,作为各种1(没有观察到显著差异 来 ,Z1V1和Z4V1样本,分别)。此外,最高的反激进主义的活动记录Z3V2样本最低的IC₅₀值( )。酚类化合物是主要的贡献者的总抗氧化能力(32]。高反激进主义的活动一、甘薯叶粉可以解释其使用在传统治疗一些疾病。此外,考虑他们的抗氧化能力,Z2V2和Z3V2样本可以用来管理血脂等降低对hdl胆固醇(低密度脂蛋白胆固醇,增加胆固醇)水平的影响。

3.4。主成分分析

进行了主成分分析(PCA)组Ipomea甘薯叶粉根据相似性或生物活性化合物和抗氧化活性的差异。此外,所有测量参数之间的相关性被发现后进行主成分分析。从图1(一),它可以观察到,总变异的93.10%数据由主成分F1xF2解释说。第一个主成分(F1)表示变量之间的变异的55.61%,而第二个主成分(F2)占37.49%。树组从这个图可以观察到,不同群体的特点获得如图1 (b)。在这个图中,可以看出,组1,由样本Z3V1, Z2V1, Z1V1 Z4V1,特点是低含量的生物化合物和抗氧化活性较低。组2,由样本Z1V2 Z4V2,特点是一个较高含量的酚类化合物,黄酮类化合物,含有花青素,蒽醌类。最后,组3,由样本Z2V2 Z3V2,非常有趣,因为他们更高的反激进主义的和还原能力。然而,尽管他们的良好的生物性能,后者也具有高含量的生物化合物,但低于2。这可以用这一事实来解释植物的生物特性不仅取决于其生物活性化合物的内容但也密切相关的性质和发现生物活性化合物的比例。根据他们的更高的抗氧化活性,样本Z2V2和Z3V2用于实验大鼠血脂管理评估其影响。

3.5。的影响Ipomea甘薯叶粉体重进化

高脂肪食物的摄入导致体重随时间逐渐增加,而体重增加是抑制剂量依赖性的方式在所有组喂一、甘薯叶粉补充HFD(图2)。在观察体重明显降低一、甘薯叶粉组(TP-HFD-Z2V2 5%, TP-HFD-Z3V2 5%)相比TP-HFD组喂高脂肪饮食(图2)。在实验结束时,体重增加的一、甘薯叶粉组(TP-HFD-Z2V2 5%, TP-HFD-Z3V2 5%)相似,和观察无显著差异(分别为2和1.9%)。tp - hfd - 10%组,显著减少体重(体重)观察到整个实验周期,最后体重记录是2.9和3.2%的初始重量,和TP-HFD-Z3V2 TP-HFD-Z2V2 10%和10%,分别。已经建议减肥计划应该着重于实现适度减肥的7 - 10%的初始重量。因此,一、甘薯叶粉可用于减肥计划。减肥可以归因于膳食纤维包含大量的被发现一、甘薯叶粉(33]。在先前的研究34,35),证据之间的负相关纤维含量高,体重已经被报道。膳食纤维能促进脂肪的排泄,另外据Isken et al。33),有可能是脂质吸收在小肠被膳食纤维。这些结果是在协议与Kurata et al。20.)进行了一个类似研究高脂肪饮食的补充与5%的老鼠一、甘薯在日本叶粉收集。他们发现5%的一、甘薯叶粉组显示,最后重量显著抑制( )体重和脂肪组织( )与阳性对照组相比只喂养高脂肪饮食,为此,最后体重和脂肪组织的重量 和 ,分别。

3.6。的影响Ipomea甘薯叶粉对血清脂质和硬化指数

总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、脂蛋白胆固醇和总甘油三酯浓度(mg / dL)的不同组的实验老鼠如表所示3。从这个表中,可以观察到的最终值脂蛋白胆固醇浓度与hyperlipidemic饮食喂养的大鼠TP-HFD ( )明显( )低于正常的饮食喂养的大鼠TN-STD ( ),相反时观察到的最终值,血清总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇浓度这两组大鼠之间。TP-HFD组对老鼠而言,最终的值了 , ,和 ,对血清总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇,分别,而对于老鼠TN-STD组,最终获得值 , ,和 ,分别。众多研究表明,血清总胆固醇水平增加,甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇增加患动脉粥样硬化和冠心病的风险36,37]。然而,当一、甘薯叶粉被纳入高脂肪饮食,显著降低血清总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇值观察相比TP-HFD组。老鼠的tp - hfd z2v2 - 5%,最终获得值 , ,和 ,分别。hfd - z2v2 - 10%的大鼠组,最终获得值 , ,和 ,分别。这些值明显低于TP-HFD-Z2V2 5%组。此外,补充一、甘薯叶粉导致显著增加脂蛋白胆固醇在老鼠tp - hfd z2v2 - 5%, tp - hfd z2v2 - 10%组( 分别为69.84±0.13 mg / dL)相比TP-HFD组。降低低密度脂蛋白胆固醇和增加血清高密度脂蛋白胆固醇水平有助于一个antiatherogenic条件(37]。也观察到类似的结果的老鼠hfd z3v2 - 5%和hfd z3v2 - 10%组,接收hyperlipidemic饮食包含5和粉的10%的叶子一、甘薯区3中,收获和属于不同2。血清总胆固醇的降低可能与高膳食纤维的含量一、甘薯叶子。多项研究表明,丙酸生成从膳食纤维hypocholesterolemic效果和补偿的hypercholesterolemic影响醋酸生产,这往往会增加血清总胆固醇通过一种机制可能涉及肝脂肪生成(38,39]。几种其他机制在降低血清总胆固醇;最著名的之一是减少胆汁酸的吸收,导致消除体内的类固醇通过粪便排泄,增加胆固醇分解代谢,增加胆汁酸的分泌,减少胆固醇的分泌脂蛋白(40]。此外,一些科学研究也表明,某些生物活性化合物存在于植物可以降低血清胆固醇水平(41- - - - - -46]。例如,皂甙有降低胆固醇作用在动物和人类47- - - - - -50]。他们有一个两亲性结构和可以绑定到膳食胆固醇和/或胆汁酸。皂甙可以防止胆固醇的吸收,干扰其肝肠循环,增加其粪便排泄。皂甙的明显存在报道了甘薯叶Groppo et al。6]和Mbaeyi-Nwa和Emejulu [51]。在这项研究中,相比Kurata et al。20.)没有发现显著差异在脂蛋白胆固醇和总胆固醇水平之间的群只有高脂肪饮食喂养的老鼠和老鼠喂食高脂肪饮食的补充与5%一、甘薯叶粉。然而,他们发现,血浆甘油三酯水平的5%一、甘薯组显著降低( )和大约38%的阳性对照组( )。另一方面,其他研究已经报告了类似的结果,本研究发现的水提物一、甘薯收集的树叶在喀麦隆血脂恢复正常组老鼠喂食高脂肪饮食中的值(52]。这些作者也建议一、甘薯叶子有降血脂药和antiatherosclerotic属性,证明他们在传统医学使用。

TG /脂蛋白胆固醇比率与冠心病的一个危险因素,风险增加这个比例也增加。心血管疾病的风险是低hdl胆固醇(TG /胆固醇)−0.3和0.1之间的比率,媒介在TG /脂蛋白胆固醇比率在0.1和0.24之间,和高TG /脂蛋白胆固醇比率超过0.24时,据博et al。24]。从观察表3很明显,高脂肪饮食( )相比显著增加hdl胆固醇(TG /胆固醇)比正常饮食( )。不同组的老鼠喂食高脂肪的饮食和补充10%的一、甘薯叶粉(tp - hfd集团和tp - hfd z3v2 z2v2 - 10% - 10%组),没有发现显著差异粥样硬化指数从 来 ,分别。然而,这些值明显低于阴性对照组和也显著低吃高脂肪食物的老鼠相比,(TP-HFD)和高脂肪饮食喂养的大鼠,用5%的补充一、甘薯叶粉(tp - hfd集团和tp - hfd z3v2 z2v2 - 5% - 5%,患索引值的 和 ,分别)。这些结果表明,一、甘薯叶粉含有某些生物化合物,防止胆固醇沉积或脂质在某些器官(肾脏、心脏和肝脏)和动脉。然而,一般来说,在实验的最后(喂养4周),所有的不同组的老鼠可分为根据获得的硬化的索引值,作为心血管疾病的高危人群患指数大于0.24。

3.7。的影响Ipomea甘薯叶粉在血清天冬氨酸转氨酶(ASAT)、丙氨酸转氨酶(ALAT)和肌酸酐

天冬氨酸转氨酶(ASAT)和丙氨酸转氨酶(ALAT)值在肝脏被量化确定实验性大鼠肝损伤的程度和结果如表所示3。从这个表中,可以观察到,高脂肪饮食会导致显著增加肝脏参数的值分析,除了肌酐水平。因此,TP-HFD集团ALAT, ASAT值和肌酐的浓度 UI / L, UI / L μ分别mol / L。虽然TN-STD集团ALAT, ASAT值和肌酐的浓度 UI / L, UI / L μ分别mol / L。TP-HFD组相比,补充一、甘薯叶粉能显著降低小鼠ALAT值在TP-HFD-Z2V2 TP-HFD-Z3V2组。ALAT值范围从 UI / L UI / L。组tp - hfd z2v2 - 10%, tp - hfd z3v2 - 10%值(最低 UI / L和 分别为UI / L),没有显著不同于TN-STD集团( UI / L)。然而,相比TN-STD组( UI / L), ASAT值( UI / L UI / L)仍明显高于所有组接收hyperlipidemic饮食补充一、甘薯叶粉。观察无显著差异,tp - hfd z3v2 - 10% ( UI / L), tp - hfd z2v2 - 10% ( UI / L)组相比TP-HFD组( UI / L)。关于肌酐水平,组老鼠喂食高脂肪的饮食和补充的5 - 10%一、甘薯叶粉有显著降低肌酐水平( 来 )比TN-STD ( )和TP-HFD ( )组。这些结果表明,补充饮食的10%一、甘薯叶粉降低肝损伤的程度和规范高脂肪饮食喂养的大鼠的血清肌酐水平,表明其保护作用肾肾小球滤过能力,据Suanarunsawat和Songsak53]。

4所示。结论

本研究揭示了高纤维含量Ipomea甘薯叶粉,也含有植物化学的化合物如类黄酮、原花青素和蒽醌类。一、甘薯叶粉也显示良好的反激进主义的和减少活动,特别是Z3V2和Z2V2品种2收集样品,分别在西和Adamaoua。在老鼠喂食高脂肪的饮食,补充10%一、甘薯叶粉有效地降低甘油三酯的水平,总胆固醇,低密度脂蛋白胆固醇以及ALAT活动和肌酐浓度。这项研究的结果显示使用一、甘薯叶子作为植物学期刊在心血管疾病的治疗。在本研究的进一步发展,它将会是很有趣的识别、使用分析技术,植物化学的化合物具有这些性质。

缩写

Z1:	北(Garoua)
Z2:	Adamawa (Ngaoundere)
Z3:	西部(Foumban)
Z4:	中心(Bafia)
“V1:	黄色(IRAD-Tib1)
V2:	白色(irad - 1112)。

数据可用性

使用的数据来支持本研究的发现可以从相应的作者。

的利益冲突

作者没有利益冲突。

确认

作者感谢Ngaoundere大学(喀麦隆)支持的形式进行本研究的基础设施可用。

引用

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