协会糖尿病孕产妇和儿童NKX2.5基因的多态性与先天性心脏病:单个Centre-Based病例对照研究

文摘

背景。先天性心脏病(CHD)是新生儿最常见的出生缺陷之一,占全球婴儿死亡率的一大部分。然而,在很大程度上仍不确定的机制。本研究旨在探讨冠心病协会在后代的母亲与糖尿病(DM)和单核苷酸多态性(snp)NKX2.5。方法和结果。620的母亲的病例对照研究冠心病患者和620名健康儿童的母亲承认湖南儿童医院从2017年11月到2019年12月。我们通过问卷调查收集了母亲的信息,发现孩子的NKX2.5变体MassARRAY系统。相互作用系数(γ)是用来量化估计基因-环境相互作用。单变量和多变量分析都表明,冠心病的婴儿有较高的风险,如果他们的母亲有糖尿病史,包括妊娠期糖尿病(GDM)怀孕期间(调整后的优势比( ]),GDM在以前怀孕( ),和孕前的DM (PGDM)在这次怀孕前的3个月( )。多态性的NKX2.5基因在rs11802669 (C / C与T / T: ;C / T与T / T: )和rs2277923 (T / T)与C / C, ;T / C和C / C, )与冠心病的风险显著相关的后代。此外,重要的孕产妇DM和之间的相互作用NKX2.5基因变异在rs11802669 ( )和rs2277923 ( )影响冠心病的发展被发现。结论。这些结果表明,产妇DM、NKX2.5基因变异,他们的交互与冠心病的风险显著相关的后代。

1。介绍

先天性心脏病(CHD)是新生儿最常见的出生缺陷之一,占全球婴儿死亡率的一大部分。作为一个粗略的估计,大约8与冠心病(每1000个出生的婴儿1]。然而,冠心病的发病机制非常复杂,不同于其他先天性疾病,和它的确切原因在很大程度上是不确定的(2]。

大约2%的冠心病可以归因于环境因素,其中母亲的糖尿病(DM)是一种广泛接受的风险因素(3]。妊娠糖尿病(GDM)构成重大风险的直接和长期的母亲和胎儿的健康,影响了全球-25%的妊娠3% (4]。研究已经证明,孕期血糖控制胎儿畸形有明显的联系,和孕产妇DM似乎诱发后代畸形之前怀孕的第七周(5]。血糖水平异常的一个假设是,产妇DM破坏胚胎基因的表达,导致embryotoxic凋亡细胞的变化(6]。

超过40个基因已经被卷入冠心病的发展(7]。CHD-causing突变在的例子NKX2.5,一个转录监管机构在胚胎心脏早期发育(8,9]。实验表明,NKX2.5对心脏的形成和成熟至关重要的传导系统。老鼠的缺席导致胚胎杀伤力和逮捕的心发展(10]。此外,超过40的突变NKX2.5在冠心病病例被发现,这可能减少的转录活动NKX2.5和心脏发育的影响11]。几个动物实验表明NKX2.5可能参与胚胎先天性心脏病的发病机理引起的妊娠期糖尿病大鼠模型,表达式的NKX2.5胎儿的心脏发育期间减少母亲妊娠期糖尿病(12- - - - - -14]。

因此,我们进行了一项病例对照研究包括620名冠心病患者和620位母亲的母亲健康的孩子,收集通过问卷调查和检测儿童母亲的信息NKX2.5变异MassARRAY系统,研究协会的孕产妇DM,NKX2.5在后代变异及其与冠心病为冠心病的预防提供一个新的方向。

2。方法

2.1。招聘的研究参与者

我们进行了一项病例对照研究探讨孕产妇DM和的作用NKX2.5单核苷酸多态性在冠心病的病因学的后代。招聘是由湖南儿童医院从2017年11月到2019年12月。冠心病的孩子和他们的父母在医院被认为是这样。所有冠心病患者使用超声诊断,其诊断证实了手术。体检之后没有任何先天性畸形的儿童和他们的父母被确定为对照组。研究参与者招募2从这个医院诊所。病例组招募的心胸外科手术,提供诊断、治疗、手术、冠心病和管理,对照组是招募儿童后医疗卫生部门的咨询或体检。的控制选择同一家医院在同一研究期间为例。本研究经伦理委员会批准的湘雅中南大学公共卫生学院的和书面的知情同意是获得所有的母亲。本研究在中国临床试验注册中心注册(注册号:ChiCTR1800016635)。

2.2。入选标准

在这项研究中,感兴趣的曝光是孕产妇DM和儿童的遗传变异NKX2.5基因。DM被确定基于以下国际疾病分类和相关的健康问题,十修订(icd - 10)代码:O24.4。三种类型的孕产妇DM包括:妊娠期糖尿病(GDM)怀孕期间,GDM前怀孕,孕前的DM (PGDM)在这次怀孕前的3个月。感兴趣的结果是冠心病的后代,包括七个亚型:心房间隔缺损(ASD)、心室间隔缺损(VSD)房室中隔缺损(AVSD)、动脉导管未闭(PDA), aortopulmonary间隔缺损(APSD),法洛四联症(TOF),并完成大动脉转位(CTOGA)。所有冠心病患者使用超声诊断,其诊断证实了手术。

减少回忆偏倚,1岁以下儿童母亲被召集来,以同样的方式来完成相同的问卷由专业训练的调查人员并没有提前通知的情况下的分类和控制。此外,本研究旨在与单例汉族血统的母亲怀孕。合格的母亲需要能够完成问卷调查和提供知情同意和血液样本。Nonsyndromic冠心病是感兴趣的,其他器官畸形或已知的异常患者被排除在外。体检之后没有任何先天性畸形的儿童作为对照组。

2.3。信息的收集

一个标准化的问卷是用来评估孕产妇DM的历史,包括GDM怀孕期间,GDM前怀孕,PGDM这次怀孕前的3个月。此外,我们咨询了孕产妇和儿童健康手册和孕产妇医疗记录,进一步确认相应的信息对孕产妇DM历史。在中国,每个孕妇提供孕产妇和儿童健康手册,记录他们的基本人口学特征、行为习惯、疾病,怀孕期间和各种医疗检查的结果。本研究的另一个主要接触的兴趣的snpNKX2.5基因在rs6882776 rs118026695、rs2277923 rs703752,如下所述。

当评估孕产妇DM和协会NKX2.5单核苷酸多态性与冠心病风险的后代,其他混杂因素需要考虑。因此,我们收集以下信息母亲:(1)人口学特征,(2)异常妊娠史,(3)家庭历史,(4)个人病史,(5)生活方式和习惯,(6)暴露于环境有害物质的历史,和怀孕期间(7)病史。

2.4。NKX2.5SNP序列

基因位点rs6882776、rs118026695 rs2277923, rs703752的NKX2.5基因,已被广泛研究之前,被选为本研究的候选位点(15- - - - - -17]。三到五毫升静脉血外围的儿童用于基因分型。血液样本被收集在EDTA-treated(乙二胺四乙酸)抗凝管,然后立即离心成等离子体和白细胞。白细胞分离和储存在-80°C到进行基因分型。DNA被QIAamp从血液中提取细胞DNA迷你包(美国试剂盒,瓦伦西亚,CA)根据制造商的标准协议和溶解在无菌此种(Tris-borate-EDTA)缓冲区。DNA溶液的浓度和纯度检测到紫外分光光度法,以确保资格作为模板DNA聚合酶链反应(PCR)。

设计引物,扩增条件,预期的产品尺寸NKX2.5已经被先前的研究[15- - - - - -17]。的多态性NKX2.5基因在rs6882776 rs118026695、rs2277923 rs703752测试使用matrix-assisted激光解吸电离飞行时间质谱MassARRAY系统(美国圣地亚哥阿金纳iPLEXassay CA)。基因分型的错误率低于5%。实验者的基因分型结果没有提前通知执行谁控制的状态或情况下组。每个样本重新输入和双重检查,以确保实验的可靠性。

rs6882776,三个基因型,包括纯合子的野生型G / G, T /一个杂合的变体,和变异纯合子/一个确认。rs118026695,三个基因型确定:纯合子的野生型T / T,杂合的变体C / T、C / C纯合子的变体。rs2277923,三个基因型确定:纯合子的野生型T / T, T / C,杂合的变体和纯合子变体C / C。rs703752,三个基因型确定:纯合子的野生型C / C, C /一个杂合的变体,/一个纯合子的变体。

2.5。统计分析

手段和连续变量正态分布的标准偏差报告。看起来还不是正态分布的连续变量和分类变量,四分位数(%)报道。在单变量分析、皮尔逊卡方测试或确切概率法是用于比较分类变量数据;Wilcoxon等级和测试是用于非正态的分布的连续变量。

NKX2.5单核苷酸多态性分析偏离哈迪温伯格平衡(HWE)。冠心病和孕产妇DM的相关分析NKX2.5单核苷酸多态性是由单变量和多变量逻辑回归分析,和优势比(ORs)及其95%置信区间(CIs)被用来评估协会的水平。口服补液盐是调整(aor)使用的因素值小于0.05表1。我们使用逻辑回归和控制了潜在的混杂因素研究的主效应和交互效应的基因-环境相互作用NKX2.5基因和孕产妇DM在后代患冠心病的风险。


变量	对照组( )	病例组( )	单变量分析

人口特征
在这个怀孕母亲的年龄(年)
≤24	124例(20.0%)	176例(28.4%)	;
25 - 29	261例(42.1%)	235例(37.9%)	;
- 34	152例(24.5%)	122例(19.7%)
≥35	83例(13.4%)	87例(14.0%)
教育水平
小于主键或主	7 (1.1%)	87例(14.0%)	;
初中	117例(18.9%)	263例(42.4%)
高级中学	217例(35.0%)	167例(26.9%)
大学或以上	279例(45.0%)	103例(16.6%)
身体质量指数在此之前怀孕
< 18.5	156例(25.8%)	112例(18.3%)	;
18.5 - -23.99	340例(56.3%)	404例(65.9%)	;
≥24	108例(17.9%)	97例(15.8%)
家庭的年收入在过去1年(元)
≤50000	179例(28.9%)	494例(79.7%)	;
60000 - 100000	267例(43.1%)	92例(14.8%)
110000 - 150000	57 (9.2%)	12 (1.9%)
≥160000	117例(18.9%)	22 (3.5%)
居住位置
农村地区	342例(55.2%)	444例(71.6%)	;
城市地区	278例(44.8%)	176例(28.4%)
异常妊娠史
自然流产
没有	560例(90.3%)	545例(87.9%)	;
是的	60 (9.7%)	75例(12.1%)
人工流产或劳动
没有	428例(69.0%)	363例(58.5%)	;
是的	192例(31.0%)	257例(41.5%)
胎儿死亡或死胎
没有	618例(99.7%)	584例(94.2%)	;
是的	2 (0.3%)	36 (5.8%)
早产
没有	614例(99.0%)	603例(97.3%)	;
是的	6 (1.0%)	17 (2.7%)
低出生体重
没有	617例(99.5%)	603例(97.3%)	;
是的	3 (0.5%)	17 (2.7%)
新生儿死亡
没有	620例(100.0%)	603例(97.3%)	;
是的	0 (0.0%)	17 (2.7%)
胚胎的破坏
没有	610例(98.4%)	604例(97.4%)	;
是的	10 (1.6%)	16 (2.6%)
妊娠高血压
没有	611例(98.5%)	577例(93.1%)	;
是的	9 (1.5%)	43 (6.9%)
前置胎盘
没有	615例(99.2%)	613例(98.9%)	;
是的	5 (0.8%)	7 (1.1%)
胎盘早剥
没有	620例(100.0%)	620例(100.0%)
是的	0 (0.0%)	0 (0.0%)
胎膜早破
没有	620例(100.0%)	615例(99.2%)	(确切概率法)
是的	0 (0.0%)	0.8%	(确切概率法)
孕期贫血
没有	598例(96.5%)	554例(89.4%)	;
是的	22 (3.5%)	66例(10.6%)
家族病史
近亲结婚
没有	617例(99.5%)	599例(96.6%)	;
是的	3 (0.5%)	21 (3.4%)
先天畸形
没有	615例(99.2%)	584例(94.2%)	;
是的	5 (0.8%)	36 (5.8%)	;
个人病史
先天畸形的个人历史
没有	617例(99.5%)	611例(98.5%)	;
是的	3 (0.5%)	9 (1.5%)	;
寒冷的历史在这次怀孕前的3个月
没有	548例(88.4%)	499例(80.5%)	;
是的	72例(11.6%)	121例(19.5%)
热历史在这次怀孕前的3个月
没有	608例(98.1%)	569例(91.8%)	;
是的	12 (1.9%)	51 (8.2%)
怀孕期间冷历史
没有	488例(78.7%)	413例(66.6%)	;
是的	132例(21.3%)	207例(33.4%)
怀孕期间热历史
没有	601例(96.9%)	561例(90.5%)	;
是的	19 (3.1%)	59 (9.5%)
生活方式和习惯
历史上活跃的吸烟在这次怀孕前的3个月
没有	607例(97.9%)	584例(94.2%)	;
是的	13 (2.1%)	36 (5.8%)
被动吸烟史在这次怀孕前的3个月
没有	393例(63.4%)	293例(47.3%)	;
是的	227例(36.6%)	327例(52.7%)
饮酒历史在这次怀孕前的3个月
没有	577例(93.1%)	539例(86.9%)	;
是的	43 (6.9%)	81例(13.1%)
喝茶的历史在这次怀孕前的3个月
没有	503例(81.1%)	542例(87.4%)	;
是的	117例(18.9%)	78例(12.6%)
喝咖啡的历史在这次怀孕前的3个月
没有	592例(95.5%)	565例(91.1%)	;
是的	28 (4.5%)	55 (8.9%)
咀嚼槟榔的历史在这次怀孕前的3个月
没有	608例(98.4%)	593例(95.6%)	;
是的	10 (1.6%)	27 (4.4%)
化妆品的使用频率在这次怀孕前的3个月
从来没有	360例(58.1%)	293例(47.3%)	;
的某个时候	174例(28.1%)	150例(24.2%)
经常	40 (6.5%)	105例(16.9%)
每一天	46 (7.4%)	72例(11.6%)
你养宠物在这次怀孕前的3个月吗?
没有	573例(92.4%)	537例(86.6%)	;
是的	47 (7.6%)	83例(13.4%)
你经常染料或烫你的头发在这次怀孕前的3个月吗?
没有	584例(94.2%)	547例(88.2%)	;
是的	36 (5.8%)	73例(11.8%)
环境有害物质接触史
居住地附近有工厂,排放对环境有害物质?
没有	574例(92.6%)	503例(81.1%)	;
是的	46 (7.4%)	117例(18.9%)
有在你住的附近交通道路或嘈杂的工厂(噪声暴露)?
没有	506例(81.6%)	446例(71.9%)	;
是的	114例(18.4%)	174例(28.1%)
你的房子新装修的在这个怀孕前3个月?
没有	567例(91.5%)	572例(92.3%)	;
是的	53 (8.5%)	48 (7.7%)	;
在这次怀孕医学历史
叶酸
是的	577例(93.1%)	526例(84.8%)	;
没有	43 (6.9%)	94例(15.2%)
大环内酯物抗生素
没有	603例(97.3%)	569例(91.8%)	;
是的	17 (2.7%)	51 (8.2%)
抗抑郁药
没有	586例(94.5%)	551例(88.9%)	;
是的	34 (5.5%)	69例(11.1%)
Fetal-prevention药物
没有	539例(86.9%)	487例(78.5%)	;
是的	81例(13.1%)	133例(21.5%)

在逻辑回归模型中,混杂因素,孕产妇DM、NKX2.5snp是设置为独立变量(共)、口服补液盐和表达的影响是独联体为95%。后代的诊断结果设置为因变量(二进制的结果)。模型的基因-环境的相互作用及其影响称为华莱士(描述的方法17]。相互作用系数(γ)计算回归系数的一个函数(β)逻辑回归分析(例如, 和基因-环境相互作用)和用于评估交互(18]。当所有γ值大于1,积极互动;当所有γ值小于1,负作用;当γ值等于1,没有互动。

在这项研究中,我们检查了总冠心病的风险,而不是特定亚型的风险由于样本量有限。所有数据分析使用SPSS (IBM SPSS统计Macintosh, 26.0版本,阿蒙克,纽约:IBM公司)。被认为是具有统计学意义。

3所示。结果

3.1。基线特征比较

我们分析了七个方面的1240份问卷(620对照组和620例组)(表1)。妊娠年龄( ),教育水平( ),和家庭年收入( )的女性病例组明显低于对照组。然而,体重指数没有显著差异( )。此外,异常妊娠的发生率的历史(除了自然流产、胚胎损伤和前置胎盘),家族性先天性畸形、个人病史(除了先天性畸形)的历史,环境有害物质接触史(房子装修除外),和药物的历史在这个怀孕(叶酸除外)在组明显高于对照组。也有显著差异在两组之间的生活方式。的因素值小于0.05是包含在后续多变量分析。

3.2。产妇DM增加后代冠心病的风险

怀孕期间,10.2%的女性有PGDM,和11.0% GDM组,这两个国家都明显高于对照组(女性各自的百分比 )(表2)。也有更多的女性与GDM之前怀孕期间在集团( )。未经调整的口服补液盐这三种类型的孕产妇DM分别为2.61,3.03,和4.01,分别证明,如果母亲有糖尿病史,为子女有更高的风险患冠心病。接下来,孕产妇DM和后代之间的关系分析了冠心病的多变量分析(表3)。孕产妇DM分为3种类型,包括GDM怀孕期间,GDM前怀孕,和PGDM这次怀孕前3个月,和风险因素表1,如年龄、受教育水平和医疗历史,在这三种类型的分析调整。有一个母亲的糖尿病和冠心病的后代之间的显著相关性( ),和孕产妇DM后代冠心病的风险增加( ,分别为4.30、6.78)。


孕产妇DM	对照组( )	病例组( )	单变量分析	未经调整的或(95%置信区间)

GDM怀孕期间
没有	592例(95.5%)	552例(89.0%)	;	1
是的	28 (4.5%)	68例(11.0%)	;	2.61 (1.65 - -4.11)
GDM在怀孕之前的经验
没有	595例(96.0%)	550例(88.7%)	;	1
是的	25 (4.0%)	70例(11.3%)	;	3.03 (1.89 - -4.85)
PGDM在这次怀孕前的3个月
没有	603例(97.3%)	557例(89.8%)	;	1
是的	17 (2.7%)	63例(10.2%)	;	4.01 (2.32 - -6.94)

糖尿病:糖尿病;冠心病:先天性心脏病;GDM:妊娠期糖尿病;PGDM:孕前的糖尿病;或:优势比;置信区间:置信区间。统计学意义( )。


孕产妇DM	B	东南部	细胞膜	价值	调整或(95%置信区间)

怀孕期间GDM (yes和no)	1.609	0.340	22.326	0.001	4.98 (2.56 - -9.74)
GDM怀孕前经历(yes和no)	1.458	0.334	19.117	0.001	4.30 (2.24 - -8.27)
PGDM这次怀孕前3个月(yes和no)	1.914	0.385	24.676	0.001	6.78 (3.19 - -14.43)

糖尿病:糖尿病;冠心病:先天性心脏病;GDM:妊娠期糖尿病;PGDM:孕前的糖尿病;或:优势比;置信区间:置信区间。调整的因素与统计的差异表1。

3.3。NKX2.5在后代变异会增加冠心病的风险

单变量分析表明,有冠心病之间的关联和多态性的基因型和等位基因频率rs118026695, rs2277923, rs703752NKX2.5(表4)。接下来,我们进行多变量分析(表5)。大量的纯合基因型对照组被用作控制基因型。在表的混杂因素1在分析调整。突变的rs118026695和rs2277923被证明与冠心病有关。


SNP的NKX2.5基因	对照组( )	病例组( )	单变量分析	未经调整的或(95%置信区间)

基因型在rs6882776				0.98 (0.83 - -1.16)
/一个	216例(34.8%)	209例(33.7%)	;	1
G /	308例(49.7%)	328例(52.9%)		1.10 (0.86 - -1.41)
G / G	96例(15.5%)	83例(13.4%)		0.89 (0.63 - -1.27)
隐性模型rs6882776
/一个	216例(34.8%)	209例(33.7%)	;	1
G / A + G / G	404例(65.2%)	411例(66.3%)		1.05 (0.83 - -1.33)
在rs6882776主导模式
/ + G / A	524例(84.5%)	537例(86.6%)	;	1
G / G	96例(15.5%)	83例(13.4%)		0.84 (0.61 - -1.16)
等位基因在rs6882776
一个	740例(59.7%)	746例(60.2%)	;	1
G	500例(40.3%)	494例(39.8%)	;	0.98 (0.84 - -1.15)
基因型在rs118026695				1.83 (1.42 - -2.36)
T / T	510例(82.3%)	443例(71.5%)	;	1
C / T	107例(17.3%)	164例(26.5%)		1.77 (1.34 - -2.32)
C / C	3 (0.5%)	13 (2.1%)		4.99 (1.41 - -17.62)
隐性模型rs118026695
T / T	510例(82.3%)	443例(71.5%)	;	1
C / T + C / C	110例(17.7%)	177例(28.5%)		1.85 (1.41 - -2.43)
在rs118026695主导模式
T / T + C / T	617例(99.5%)	607例(97.9%)	;	1
C / C	3 (0.5%)	13 (2.1%)		4.41 (1.25 - -15.53)
等位基因在rs118026695
T	1127例(90.9%)	1050例(84.7%)	;	1
C	113例(9.1%)	190例(15.3%)	;	1.81 (1.41 - -2.31)
基因型在rs2277923				1.38 (1.17 - -1.62)
C / C	291例(46.9%)	217例(35.0%)	;	1
T / C	254例(41.0%)	310例(50.0%)		1.64 (1.29 - -2.08)
T / T	75例(12.1%)	93例(15.0%)		1.66 (1.17 - -2.36)
隐性模型rs2277923
C / C	291例(46.9%)	217例(35.0%)	;	1
T / C + T / T	329例(53.1%)	403例(65.0%)		1.64 (1.31 - -2.06)
在rs2277923主导模式
C / C + T / C	545例(87.9%)	527例(85.0%)	;	1
T / T	75例(12.1%)	93例(15.0%)		1.28 (0.93 - -1.78)
等位基因在rs2277923
C	836例(67.4%)	744例(60.0%)	;	1
T	404例(32.6%)	496例(40.0%)	;	1.38 (1.17 - -1.63)
基因型在rs703752				1.66 (1.20 - -2.29)
/一个	7 (1.1%)	2 (0.3%)	(确切概率法)	1
C /一个	86例(13.9%)	57 (9.2%)	(确切概率法)	2.32 (0.47 - -11.57)
C / C	527例(85.0%)	561例(90.5%)		3.73 (0.77 - -18.02)
隐性模型rs703752
A / A + C / A	93例(15.0%)	59 (9.5%)	;	1
C / C	527例(85.0%)	561例(90.5%)		1.68 (1.19 - -2.38)
在rs703752主导模式
/一个	7 (1.1%)	2 (0.3%)	(确切概率法)	1
C / A + C / C	613例(98.9%)	618例(99.7%)	(确切概率法)	3.53 (0.73 - -17.05)
等位基因在rs703752
一个	100例(8.1%)	61例(4.9%)	;P= 0.001	1
C	1140例(91.9%)	1179例(95.1%)		1.70 (1.22 - -2.36)

或:优势比;置信区间:置信区间。统计学意义( )。


NKX2.5基因	B	东南部	细胞膜	价值	调整或(95%置信区间)

基因型在rs6882776 ( )
G /	0.082	0.169	0.238	0.626	1.09 (0.78 - -1.51)
G / G	0.018	0.239	0.006	0.940	1.02 (0.64 - -1.63)
加性模型	0.026	0.114	0.050	0.822	1.03 (0.82 - -1.28)
隐性的模型	0.068	0.161	0.179	0.673	1.07 (0.78 - -1.47)
占主导地位的模式	-0.031	0.217	0.020	0.886	0.97 (0.63 - -1.48)
基因型在rs118026695 ( )
C / T	0.766	0.196	15.297	0.001	2.15 (1.47 - -3.16)
C / C	1.603	0.707	5.147	0.023	4.97 (1.24 - -19.86)
加性模型	0.774	0.175	19.521	0.001	2.17 (1.54 - -3.06)
隐性的模型	0.821	0.191	18.546	0.001	2.27 (1.56 - -3.30)
占主导地位的模式	1.450	0.704	4.241	0.039	4.26 (1.07 - -16.95)
基因型在rs2277923 ( )
T / C	0.477	0.167	8.127	0.004	1.61 (1.16 - -2.24)
T / T	0.555	0.240	5.352	0.021	1.74 (1.09 - -2.79)
加性模型	0.328	0.113	8.478	0.004	1.39 (1.11 - -1.73)
隐性的模型	0.496	0.158	9.840	0.002	1.64 (1.20 - -2.24)
占主导地位的模式	0.302	0.222	1.842	0.175	1.35 (0.88 - -2.09)
基因型在rs703752 ( )
C /一个	0.467	0.970	0.232	0.630	1.60 (0.24 - -10.68)
C / C	0.893	0.947	0.889	0.346	2.44 (0.38 - -15.63)
加性模型	0.430	0.212	4.098	0.043	1.54 (1.01 - -2.33)
隐性的模型	0.452	0.229	3.908	0.048	1.57 (1.00 - -2.46)
占主导地位的模式	0.847	0.946	0.802	0.371	2.33 (0.37 - -14.90)

或:优势比;置信区间:置信区间;SNP:单核苷酸多态性;冠心病:先天性心脏病。调整的因素与统计的差异表1。

T / T、C / T、C / C基因型检测在rs118026695及其频率分布显著不同对照组和病例组( )。logistic回归分析显示,C / T ( , ,95%可信区间)和C / C ( , ,95%可信区间)与冠心病呈正相关。2等位基因的频率分布(C、T)也显示对照组和病例组(之间的显著差异 ),和逻辑回归分析表明,C等位基因与冠心病呈正相关( , ,95%可信区间)。

C / C、T / C、T / T基因型检测在rs2277923及其频率分布显著不同对照组和病例组( )。logistic回归分析显示,T / C ( , ,95%可信区间)和T / T ( , ,95%可信区间)与冠心病呈正相关。2等位基因的频率分布(C、T)也显示对照组和病例组(之间的显著差异 ),和逻辑回归分析表明,T等位基因与冠心病呈正相关( , ,95%可信区间)。

3.4。分析孕产妇DM和之间的交互NKX2.5在冠心病的发展的后代

基于上述结果,孕产妇DM与三种类型NKX2.5单核苷酸多态性在rs11802669和rs2277923选择进行进一步分析(表6)。我们分析他们的交互之间的相互作用,发现怀孕期间母体GDM和C / T rs11802669 ( , ,95%可信区间)或T / C rs2277923 ( , ,95%可信区间)后代增加冠心病的风险。


孕产妇DM	基因型	β	价值	调整或(95%置信区间)

GDM怀孕期间	rs118026695
没有	T / T			1
没有	C / T	0.804 (β_g1)	0.001	2.23 (1.50 - -3.33)
没有	C / C	21.324 (β_g2)	0.998	1.823 e9
是的	T / T	1.987 (β_e1)	0.001	7.29 (3.29 - -16.17)
是的	C / T	2.094 (β_e1 _g1)	0.008	8.12 (1.71 - -38.51)
是的	C / C	0.430 (β_e1 _g2)	0.620	1.54 (0.28 - -8.40)
GDM在怀孕之前的经历	rs118026695
没有	T / T			1
没有	C / T	0.861 (β_g1)	0.001	2.37 (1.59 - -3.52)
没有	C / C	1.496 (β_g2)	0.046	4.46 (1.03 - -19.44)
是的	T / T	1.603 (β_e1)	0.001	4.97 (2.44 - -10.11)
是的	C / T	1.681 (β_e1 _g1)	0.074	5.37 (0.85 - -33.87)
是的	C / C	21.345 (β_e1 _g2)	0.999	1.862 e9
PGDM在这次怀孕前的3个月	rs118026695
没有	T / T			1
没有	C / T	0.826 (β_g1)	0.001	2.29 (1.54 - -3.40)
没有	C / C	1.753 (β_g2)	0.013	5.77 (1.45 - -23.05)
是的	T / T	1.971 (β_e1)	0.001	7.18 (3.27 - -15.74)
是的	C / T	20.740 (β_e1 _g1)	0.998	1.017 e9
是的	C / C
GDM怀孕期间	rs2277923
没有	C / C			1
没有	T / C	0.472 (β_g1)	0.007	1.60 (1.14 - -2.26)
没有	T / T	0.703 (β_g2)	0.006	2.02 (1.22 - -3.34)
是的	C / C	1.984 (β_e1)	0.001	7.27 (2.37 - -22.33)
是的	T / C	2.875 (βe1g1)	0.001	17.72 (5.79 - -54.24)
是的	T / T	0.338 (β_e1 _g2)	0.628	1.40 (0.36 - -5.50)
GDM在怀孕之前的经历	rs2277923
没有	C / C			1
没有	T / C	0.628 (β_g1)	0.001	1.88 (1.33 - -2.65)
没有	T / T	0.715 (β_g2)	0.004	2.05 (1.25 - -3.34)
是的	C / C	3.255 (β_e1)	0.001	25.92 (7.20 - -93.26)
是的	T / C	1.225 (β_e1 _g1)	0.005	3.41 (1.44 - -80.07)
是的	T / T	0.867 (β_e1 _g2)	0.317	2.38 (0.44 - -12.99)
PGDM在这次怀孕前的3个月	rs2277923
没有	C / C			1
没有	T / C	0.579 (β_g1)	0.001	1.79 (1.27 - -2.52)
没有	T / T	0.644 (β_g2)	0.009	1.90 (1.17 - -3.09)
是的	C / C	3.592 (β_e1)	0.001	36.30 (7.62 - -172.98)
是的	T / C	1.421 (β_e1 _g1)	0.002	4.14 (1.67 - -10.27)
是的	T / T	21.312 (β_e1 _g2)	0.999	1.802 e9

糖尿病:糖尿病;冠心病:先天性心脏病;GDM:妊娠期糖尿病;PGDM:孕前的糖尿病;或:优势比;置信区间:置信区间。调整的因素与统计的差异表1。

4所示。讨论

心脏发育是一个复杂的过程,涉及基因和环境的双重角色。摄动母体环境的一个典型的例子与冠心病密切相关是孕产妇GDM [19]。GDM, hyperglycaemic环境在妊娠前三个月期间,有关糖尿病胚胎病,影响心脏、大血管、神经管(20.]。GDM下半年怀孕期间胎儿巨大胎儿、心肌病和围产期并发症的发病率和死亡率增加21]。孕产妇DM被发现后代冠心病的一个危险因素在这项研究中,这表明因果通路中的葡萄糖的作用。研究表明,女性的后代DM对大多数类型的冠心病也有类似的风险,并为他们增加冠心病的风险超过了非心血管疾病的风险增加相关的孕产妇DM,这可能是由于母亲的影响DM在胚胎心脏发育早期(22,23]。这是与我们的结果一致,意味着某种程度的怀孕前和怀孕期间血糖控制是必要的。此外,肥胖与增加小有关冠心病的风险(24]。然而,我们的研究并不支持这个结论。没有显著差异指数之间的控制和组织,这表明有其他重要因素影响后代冠心病,特别是对于女性怀孕期间发达DM。

许多研究表明,冠心病的发生、发展可能与变化相关的转录因子在后代。多年来,家庭研究确定突变转录因子基因控制心脏的发展,包括NKX2.5 GATA4, TBX5 [25]。这些突变通常是观察冠心病患者冠心病的患者,但很少发现(26]。在我们的研究中,NKX2.5被证明与冠心病的发病率有关,和突变rs118026695和rs2277923证明增加冠心病的风险在单变量和多变量分析。

NKX2.5是一个NK-2 homeodomain-containing转录因子家族的成员,这是高度保守的,在许多生物(27]。这是一个转录监管机构在胚胎心脏早期发育和必不可少的心脏的形成和成熟以及传导系统。实验表明,缺乏NKX2.5在老鼠身上导致胚胎杀伤力和逮捕的心发展(10]。此外,超过40的突变NKX2.5在冠心病病例被发现,63年> G (rs2277923)多态性是最密集的调查网站(28]。几项研究已经发现,这种多态性与冠心病风险显著相关(11),这种突变可以改变信使rna结构和稳定,而不是编码蛋白质的氨基酸序列(29日]。此外,的转录活动NKX2.5也与冠心病有关。欧阳等人透露,63年> G变异显著降低的转录活动NKX2.520%,这可能与冠心病协会(占11]。一些相反的结果,然而,也发现在冠心病研究的snpNKX2.5在rs2277923并不与冠心病的发病率在中国(30.]。不同的结果可能是由于所选择的地区,种族,和冠心病亚型。因此,进一步的研究样本量大,需要澄清这种关联。

冠心病的发病率是遗传和环境因素的共同结果。他们的交互是深刻的异构操作常见的途径。尼娜等人认为葡萄糖本身可能产生致畸效应通过信号通路调节胰岛素敏感性,这也是胚胎发生和早期发展的一个重要中介22]。实验研究发现,怀孕早期高血糖症影响调节基因表达在胚胎基因,如Bmp4, Msx1, Pax3,导致心脏神经嵴细胞死亡和冠心病的风险增加31日]。是否的表达NKX2.5心脏早期发育的一个重要转录监管机构,高血糖症的影响值得进一步试验研究。此外,NKX2.5表示在第一个字段(FHF)和第二心脏领域(超高频),心脏祖细胞的两个不同的来源导致心脏的不同部分(32]。在小鼠中,NKX2.5镇压Bmp2 / Smad1信号调节超高频核扩散和流出道形态(33]。在心脏领域NKX2.5突变体,失败的超高频扩散和OFT截断也发现(34]。同样,高血糖症被发现参与超高频的发展,并与母体糖尿病协会前第二心脏磁场缺陷远远强于后第二个心脏缺陷当分组流出道畸形和流入呼吸道畸形(19]。基于上述,孕产妇DM和之间的交互NKX2.5基因变异值得进一步探索。我们所知,这是第一个研究探索协会孕产妇DM和之间的交互NKX2.5后代的遗传变异与冠心病的风险。

最后,我们在研究中承认重要的局限性。这是一个回顾性研究,和回忆偏见是不可避免的,尽管我们采取了措施来减少样本选择和信息收集。此外,本研究是针对汉族个体和地理位置的限制,所以不同的民族人口和大样本大小需要确认我们的结果。最后,本研究结果的兴趣是总冠心病而不是特定的冠心病亚型,这可能会导致结果的不准确。

5。结论

在这项研究中,我们调查了风险因素与冠心病有关。我们表明,产妇DM,NKX2.5变异,他们的交互与冠心病密切相关的后代。目的是防止冠心病,需要女人来控制他们的血糖指数在怀孕期间和屏幕NKX2.5突变在他们的孩子,如果必要的。

数据可用性

使用的数据来支持本研究的结果包括在本文中。

的利益冲突

作者声明没有利益冲突,财务或其他。

确认

作者要感谢编辑和审稿人的建议和所有的同事们工作在孕产妇和儿童健康促进和预防出生缺陷。这项研究是由中国国家自然科学基金项目(批准号81803313,81974019,81970248),湖南省自然科学基金项目(批准号2018 jj2551),湖南省级重点研究和发展计划(批准号2018 sk2062和2018 sk2063),中国国家重点研发项目(2018 yfa0108700 2017 yfa0105602),广州的关键项目科学研究计划(805212639211),和登封的特殊工程项目,广东省人民医院(DFJH201812;KJ012019119)。

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