文摘

在目前的研究中,我们已经决定评估如果血清转换增长因子1 (TGF -β1)浓度可能有诊断价值预测发生糖尿病性视网膜病变(DR)患者在青少年1型糖尿病(T1DM)。这项研究包括81名儿童和青少年T1DM和19个对照组。所有的研究参与者生化参数检查,接受眼科检查,24小时血压监测。此外,血清浓度的TGF -β1测量。T1DM患者和nonproliferative糖尿病性视网膜病变(NPDR)有统计上显著的更高的血清水平的TGF -β1 ()相比T1DM病人没有视网膜病变以及健康的控制问题。阈值血清TGF -β1浓度也有区别的预测能力的博士计算使用接受者操作特征(ROC)曲线分析和达443 pg / ml。ROC曲线下的面积()是0.80,人口值在0.66至0.94的范围。计算的敏感性和特异性为72%和88%,分别。我们的研究结果表明,TGF -β1血清浓度可能是一个额外的参数在预测在青少年患者T1DM博士的发生。

1。介绍

糖尿病视网膜病变(DR)是最常见的导致视力丧失,和大量的糖尿病患者体验显著的视觉障碍(1- - - - - -3]。通常,1型糖尿病(T1DM)患者临床明显的眼眼底不再发生的变化早于5年疾病的持续时间。然而,经过十年的疾病,糖尿病性视网膜病变的症状影响50%的病人,在20 - 30年多达90%的T1DM患者(2,3]。目前用于医疗实践的方法来识别博士开发的风险在儿童和青少年T1DM包括眼睛的检查眼底,颜色和视觉敏锐度,弱视(4,5]。许多作者强调的变化造成的眼眼底T1DM也伴有蛋白尿的发展反过来是糖尿病肾病的标志(1- - - - - -3,6]。然而,这些血管损伤的临床标记指向特定的组织损伤的存在,已经让蛋白尿或视力障碍等临床症状。同时,众所周知在眼科医生个人的糖尿病微血管病改变顺利进入更高级的阶段。此外,当没有变化的视网膜检眼镜检查期间,不排除存在早期血管壁组织病理学变化或血管血流动力学异常的存在。除了视网膜血管的扩张,毛细血管基底膜厚度的减少,blood-retina屏障破坏,和选择性的对损失T1DM患者还可能出现(1,6,7]。因此,有一种强烈的需要发展的新的诊断工具将使早期诊断糖尿病并发症的少年T1DM患者。

尽管有广泛的研究,糖尿病性视网膜病变的确切发病机理仍然未知。它的机制是一个直接后果之一高血糖引起的组织缺氧和局部血管生成因子的不平衡表达式(8- - - - - -10]。例如,数据从我们以往的研究强调TNF -的作用α博士和白介素超表达的发病机理与T1DM(儿童和青少年10]。最近,一些生长因子的作用,包括转化生长因子(TGF -β),一直在强调[博士的发病机制11- - - - - -13]。TGF -β是其中一个因素参与细胞生长、分化和迁移,细胞外基质的形成和退化的组件,趋化现象的过程,细胞凋亡。此外,它显示的强大的免疫调节活动(8,12]。它有5个亚型,三,即TGF -β1、TGF -β2,TGF -β3是由不同的基因编码。其中最著名的是TGF -β1,这是由树突细胞,白细胞和自然杀伤(NK)细胞(14]。许多研究表明TGF -β1在乳腺癌的发病机制中扮演一个重要的角色,心肌梗塞,自身免疫性疾病,骨质疏松症,博士,成人肾病(15- - - - - -17]。然而,近年来,一些研究(包括我们)指向TGF -的作用β1在儿童和青少年的微血管并发症的发病机理与T1DM [18,19]。因此,在本研究中,我们已经决定评估如果血清TGF -β1浓度预测可能有额外的诊断作用的发生博士在少年T1DM患者。

2。对象和方法

2.1。研究对象

八十一名青少年患者(44男孩和37个女孩,年龄范围7-20岁)与T1DM的部门和儿科诊所,糖尿病学、内分泌学医科大学的Gdańsk登记进入本研究。所有的患者都在强化胰岛素治疗(国际单位每天的胰岛素/公斤体重)。根据波兰被诊断为糖尿病糖尿病协会的指导方针的指导方针与欧洲糖尿病协会(20.,21]。血压测量使用24小时血压监测(ABPM)方法。使用不同大小的袖口根据年龄、体重、上臂周长的研究主题。所有ABPM报道不到80%的技术上正确的测量被排除在研究之外。动脉高血压诊断意味着ABPM值超过第95百分位数时相应的年龄,性别,和身高至少三个独立的测量(22]。眼科检查也执行。这包括视力测试、眼压和前部分估计使用裂隙灯(Topcon sl - 82、日本)。经过当地政府的tropicamide(1%溶液),眼睛眼底检查使用+ 90 D透镜(眼仪器,美国)。数码相机(Topcon Imaginet 2000年,日本)是用于荧光素血管造影。视网膜病变诊断阶段根据国际糖尿病性视网膜病变的指南(4,5]。24小时尿液收集了三次6个月的评估期间每日白蛋白排泄。的尿白蛋白测定immunoturbidometric化验使用Tina-quant工具包(德国勃林格曼海姆GmbH)。蛋白尿时被诊断出至少三分之二的尿液样本显示每日白蛋白排泄之间30 - 299毫克/ 24 h,收集6个月内控制糖尿病患者没有临床或实验室酮症酸中毒的迹象5,23]。血清肌酐测定使用克雷亚分析系统(德国勃林格曼海姆GmbH)。糖化血红蛋白(HbA1c)测量immunoturbidometric方法使用一组通用机械手3(瑞士罗氏公司AG)、巴塞尔协议)。总胆固醇的水平,高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇,甘油三酯测定使用Cormay酶试剂盒(Cormay,卢布林,波兰)。血清c反应蛋白(CRP)浓度测定使用一个高度敏感的检测方法(美国戴德Behring Hs-CRP)。对照组的年龄和体重指数与19岁健康儿童和青少年(11个男孩和8个女孩,年龄范围6 - 18岁)。书面知情同意了所有的参与者在研究或从他们的父母或监护人。本研究经伦理委员会批准的医科大学Gdańsk (NKEBN / 204/2009),和调查进行了符合赫尔辛基宣言的原则就像1996年的修订。

2.2。血清TGF -β1测量

血清浓度的TGF -β1测量使用仪珠阵列(CBA)根据制造商的指示手册(丛Flex一组,正欲,美国)。样本读入一个光敏电阻二流式细胞分析仪使用流式细胞仪天后软件(美国,正欲)。在阅读之前,血细胞计数器是校准使用校准珠子包括在测试包(血细胞计数器设置珠)。基于fs / SS图片,珠子是封闭的,荧光是阅读。分析了使用FCAP数组软件(美国,正欲)。

2.3。统计分析

所有统计计算都使用一个统计执行计算机程序STATISTICA版本9.0 (http://www.statsoft.com)。提出了定量数据作为一个算术平均值和标准偏差(SD)。验证一个定量变量是否来自正态分布的人口,Shapiro-Wilk测试执行。对照组之间的差异的重要性和糖尿病患者与学生进行了测试以及或Mann-Whitney测试时不是正态分布的变量。由于多个之间的对比组,Bonferroni调整计算的应用价值。估计的准确性测试,即测试的能力来衡量特征按照其实际状态,使用了两个指标的量化测试精度:敏感性和特异性。确定判别阈值,当测试结果测量规模连续,接收机操作曲线(ROC)计算,轴的坐标代表敏感性和横坐标代表特异性的轴24]。最大的ROC曲线下面积(AUC)_中华民国)(值在0和1之间)是衡量测试的辨别力,结果被报道为手段和95%置信区间(95%置信区间)25]。的小于0.05被认为是具有统计学意义的价值。

3所示。结果

3.1。所有研究对象的临床特征

研究了儿童和青少年的临床特点与T1DM以及控制对象展示在表1。这项研究包括31 T1DM NPDR患者,年龄年,意味着疾病的持续时间年,57 T1DM的病人没有视网膜病变,年龄年,意味着疾病的持续时间年。NPDR组29例蛋白尿,和11个患者动脉高血压。对照组由19年龄(年)健康的孩子。T1DM患者和确认NPDR长期患糖尿病,高血清糖化血红蛋白水平,高c反应蛋白,高尿白蛋白排泄,收缩压值T1DM患者相比无视网膜病变()。T1DM之间没有明显的统计学差异或无视网膜病变患者在年龄、血清肌酐水平和舒张压值()。然而,T1DM和无视网膜病变患者血清糖化血红蛋白水平明显高于c反应蛋白,高尿白蛋白排泄、高收缩压值与对照组相比()。没有统计上的显著差异在年龄、血清肌酐水平,和舒张压值之间T1DM无视网膜病变患者比对照组()(表1)。

3.2。血清水平的TGF -β1

T1DM患者和NPDR显示显著更高的血清水平的TGF -β1 (pg / mL和pg / mL,)患者相比T1DM但没有然而,博士的患者T1DM但没有博士的水平明显高于血清TGF -β1健康对照组受试者相比(pg / mL和pg / mL,)(表2)。

3.3。研究参数的阈值有区别的预测能力在青少年患者T1DM博士的发生

为了确定的阈值有区别的预测能力的发生在我们的博士T1DM的病人,我们进行了一次ROC分析。然后,曲线下的面积(AUC)_中华民国)计算参数,比如年龄、糖尿病、持续时间的收缩压和舒张压,蛋白尿,血清糖化血红蛋白、c反应蛋白、肌酐和血清TGF -β1的水平。(表中给出的结果3)。

在所有这些变量,TGF -β1原来得最有辨别力博士在预测的发生的青少年患者T1DM。截止阈值的计算与AUC 443 pg / mL_中华民国0.80 (95% CI 0.66 - -0.94)。

敏感性和特异性分别为72%和88%,(图1)。

4所示。讨论

数据从最近的研究表明,TGF -β1是一个TGF同种型,展品最强大与组织纤维化的关系(12,13,17]。它也表明,在长期糖尿病、TGF -β1超表达器官纤维化的罪魁祸首,也就是说,在糖尿病肾病的肾间质组织17]。在视网膜上,TGF -β1是由视网膜色素上皮细胞和周,这是一个关键profibrotic因素(12]。增生性糖尿病视网膜病变(PDR)和增生性玻璃体(PVR), TGF -β已被证明是在适应症接口(13]。

然而,数据的作用细胞因子在糖尿病血管并发症的发病机理T1DM的孩子仍然稀缺(18,19]。Korpinen et al。(2000)发现高尿TGF -β1浓度与对照组相比,T1DM的孩子(18]。此外,数据从我们的最近的研究表明增加血清水平的TGF -β1在儿童肾病。更重要的是,有一个关联的血清细胞因子和先进的糖化终端产品(年龄)浓度与T1DM的儿童和青少年19]。然而,我们没有遇到任何报告关于血清TGF -β1水平青少年糖尿病视网膜病变患者。我们的假设是血清TGF -β1浓度T1DM患者可能指向视网膜病变的发生。因此,我们的研究的目的是评估血清浓度的细胞因子以及确定其阈值有区别的预测能力在青少年患者T1DM博士的发生。我们的研究结果支持我们的假设,根据我们的计算血清TGF -β1浓度超过443 pg / mL可能指向博士在青少年患者T1DM的存在。我们还发现,青少年糖尿病患者NPDR具有更高的血清水平的TGF -β1相比,患者没有并发症。此外,血清TGF -β1浓度T1DM和NPDR患者与健康对照组相比高出10倍以上,约4倍博士在糖尿病青少年患者与健康对照组相比。根据我们的数据,我们得出这样的结论:TGF -可能有关系β1过度和博士在青少年患者T1DM的存在。的主要来源血清TGF -β1血盘子。然而,Loukovaara et al。(2012)也表明更高intravitreal TGF -β1在成人T1DM PDR患者或PDVR浓度,进而可能与视网膜血管生成和有关组织纤维化适应症接口(13]。数据从其他研究还指出TGF -的作用β1基因多态性的病机贝拉尼克博士et al .(2002)已经证实越来越频繁地发生的915 g / C多态性(R25P)患者与对照组相比博士(26]。反过来,其他研究人员已经表明,尿液TGF -的活性β1在糖尿病患者增加肾小球损伤细胞和肾小管造成的局部激活生产TGF -β1 (27- - - - - -29日]。这导致肾层粘连蛋白的合成,增加纤连蛋白和胶原蛋白。胶原蛋白很容易糖化,进而增加数量的交联结构。这导致纤维的刚度,增加他们的溶解度降低,敏感性降低酶消化(29日]。

在临床实践中,有一种强烈的需要新的标记点的风险开发或特定的病理的存在。因此,在我们的研究的第二部分中,我们计算阈值TGF -β1的浓度,从而使我们能够预测早期糖尿病视网膜病变的存在与T1DM青少年患者。的一个统计方法确定极限的参数值进行调查分析ROC曲线。ROC曲线分析有助于可视化并选择最优阈值,保证最高决策正确性(24,25]。的九个测试参数(年龄、糖尿病持续时间、收缩压和舒张压,白蛋白排泄率、血清糖化血红蛋白、CRP, TGF -β1,肌酐),原来TGF -β1血清中最辨别力博士在预测的发生在青少年T1DM的患者。截止阈值的计算与AUC 443 pg / mL_中华民国0.80 (95% CI 0.66 - -0.94)。敏感性和特异性分别为72%和88%,分别。

阈值的TGF -血清值β1被其他研究者也计算在其他疾病(30.,31日]。Gonzalez-Santiago et al。(2011)计算阈值TGF -β在肺癌患者1价值。切割点值诊断能力计算是30.5 pg / mL,敏感性80.5%,特异性64.5% (31日]。然而,我们的研究是第一个尝试定义阈值血清TGF -β1浓度有辨别力预测T1DM患者博士的发生。

总之,我们的研究结果表明,血清TGF -β1浓度可能是一个额外的参数在预测NPDR的发生在青少年T1DM的患者。

利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

承认

这项研究是由医科大学的Gdańsk格兰特(ST-56)。