文摘

背景。组织Apelin已受体的内源性配体,通过氮的影响有效的降血压药体内oxide-dependent机制。这项研究的目的是调查组织apelin基因的常见变异之间的关系(APLN)和高血压,这是最近在中国汉族人口,没有糖尿病。方法。三个单核苷酸多态性(snp)APLN3156年基因分型糖尿病患者和3736名非糖尿病的个体。非糖尿病的受试者中,1779人参加第一阶段,1757年招募进行验证。进行了荟萃分析结合两个阶段获得整体效果。结果。在糖尿病患者中,无显著关联的三个单核苷酸多态性与高血压。相比之下,我们发现rs2235306男性在非糖尿病与高血压相关的协变量调整后(,),而rs2235307 rs3115759显示没有证据表明协会在两性。一个单体型,C-C-A,还显示一个与高血压(,只在男性)。然而,在第二阶段分析和荟萃分析并不支持这些发现。结论。我们得出这样的结论:常见变异APLN不与高血压的流行在中国。

1。介绍

原发性高血压是一个主要的风险因素很多发病率和死亡率的常见原因包括中风、心肌梗死、心力衰竭、和终末期肾病(1- - - - - -3]。大约30 - 50%的普通人群血压变异是由遗传因素决定的4,5)和各种基因变异已被证明与原发性高血压有关(6,7]。

组织Apelin,已受体的内源性配体(孤儿G-protein-coupled受体),是一种生物活性肽,在多种组织中表达的是8- - - - - -11]。组织apelin基因(APLN)在人类位于染色体xq25 - 26.1,编码一个77 -氨基酸prepropeptide裂解成不同长度的亚型(8- - - - - -13]。近年来,有越来越多的证据表明组织apelin对脂质和葡萄糖的新陈代谢(多效性的影响14- - - - - -16),因此与代谢紊乱包括糖尿病。另一方面,自组织apelin /已系统具有较高的序列同源性血管紧张素ⅱ/血管紧张素受体(/暗生)系统(17),获得了许多研究感兴趣关于它在血压控制中的作用。已绑定,组织apelin施加有效的降血压药的影响通过氮oxide-dependent体内机制(12,18,19]。符合这一点,流通组织apelin报道是降低原发性高血压患者(20.,21),这意味着一个重要的角色在人类血液组织apelin /已系统压力调节。

到目前为止,两项研究报道的常见基因变异的关联APLN与高血压22,23]。然而,基因的发现需要复制。因此,我们试图调查之间的关系APLN标记snp和高血压的社区人口免费糖尿病,排除糖尿病对高血压的混杂效应。另一方面,高血压和2型糖尿病常共存。一个令人信服的证据表明,高血压可能大大增加心血管疾病的风险在糖尿病患者24),表明迫切需要识别高血压易感基因在这个子集的个体(25]。此外,失调endothelium-dependent血管舒张和一氧化氮的生物利用度在糖尿病(已报告26- - - - - -28),提高组织apelin可能与糖尿病的可能性在调节血压。在这种背景下,当前的研究的另一个目的是检查的影响APLN在高血压患者中糖尿病的遗传变异。

2。材料和方法

2.1。主题

糖尿病患者住院数据库的选择上海市糖尿病研究所。糖尿病是根据1999年的定义标准(空腹血浆葡萄糖更易与h / L和/或2血浆葡萄糖更易/ L)。非糖尿病的受试者参加上海糖尿病研究[29日),一个以社区为基础的糖尿病流行病学调查。短暂,华阳曹杨社区,两个中等收入社区在上海,被选作调查。目标人群包括无关的40岁以上居民已经在上海生活了十多年。证实了正常葡萄糖调节空腹血浆葡萄糖(< 6.1更易/ L)和2 h后血浆葡萄糖口服葡萄糖耐量试验(< 7.8更易/ L)。所有受试者的汉族血统,居住在上海或附近地区。人患有继发性高血压、癌症、严重残疾或严重精神障碍被排除在外。在分析局限于非糖尿病的个体,我们使用一个两阶段的策略。在阶段1中,总共有1779(728名男性和1051名女性)受试者招募。在第二阶段,我们另外招收了1757名(668名男性和1089名女性)验证阶段1的结果,在阶段1中包含和排除标准一样。对于糖尿病患者,3156年终于招募。

一般人体测量参数,包括身高、体重、血压,测量在所有参与者。体重指数的计算方法是体重(公斤)/身高²(m)²。两次血压测量与标准水银血压计每个参与者虽然坐着,5分钟后的休息和两个读数的平均值。原发性高血压被定义为血压/ 90毫米汞柱和/或当前的抗高血压药物的使用。而吸烟的信息没有在阶段1中,我们获得的这些信息在第二阶段使用的调查问卷。研究机构审查委员会批准的协议是上海交通大学附属第六人民医院,上海,中国。所有的参与者给予知情同意前研究。

2.2。临床实验室检测

快速收集血液样本后一夜。血清血脂水平,包括总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇(hdl - c)和低密度脂蛋白胆固醇(低密度脂蛋白),与7600 - 020型自动分析仪测定(日立,东京,日本)。

2.3。SNP基因分型结果选择和

基因组DNA提取外周血白细胞使用标准phenol-chloroform方法。基于数据库的人类基因组单体型图中国汉斯(慢性乙肝)组,三个单核苷酸多态性(rs2235307、rs2235306 rs3115759)捕获的所有变体与次要的等位基因频率在0.05APLN区域阈值以下被尾随者选择在本研究纳入Haploview(4.1版)(30.]。rs2235307、rs2235306 rs3115759映射到基因内区1内含子和外显子3的APLN,分别。基因分型是由matrix-assisted激光解吸电离飞行时间质谱法(Sequenom MassARRAY紧凑的分析仪,圣地亚哥,美国)。rs2235307成功率pcr, rs2235306, rs3115759是98.7%,98.7%,和99.5%,分别。基于100个重复对和合率平均为99.3%,每个SNP。

2.4。统计分析

作为APLN位于X染色体,genotype-hypertension分析是在男性和女性分别进行的。等位基因、基因型和单体型频率情况下通过使用和控制进行了比较以及。逻辑回归分析后调整年龄、BMI和台塑(对于非糖尿病受试者)或糖尿病(糖尿病患者)持续时间进行了评估基因型和等位基因的影响高血压的患病率。优势比(ORs)和95%置信区间(95% CI)。成对连锁不平衡(LD)估计,计算||,使用Haploview(版本4.1)。单体型的块结构是决定使用置信区间算法(31日),采用单体型频率估计的算法(32)使用Haploview(版本4.1)。单体型频率< 0.05被排除在外。所有由SAS统计分析(版本8.0;SAS研究所Inc .卡里,数控,除非另有说明,美国)小动物——一张长有 被认为是具有统计学意义。结合口服补液盐和95% CIs计算与审查经理(版本5.0)。Interstudy异质性估计使用的Q统计量。异质性被认为是显著时。还测试了,描述了总额的百分比变化点估计由于真正的变化,而非抽样误差。如果异质性存在,数据分析采用随机效应模型虽然没有异质性,使用固定效应模型。

3所示。结果

表1介绍了糖尿病患者的特征。非糖尿病受试者的特点补充表1所示(见Supplementry材料可用http://dx.doi.org/10.1155/2012/917496)。所有这三个单核苷酸多态性符合哈迪温伯格平衡控制和参与者。

对于糖尿病患者,等位基因和基因型分布的snp基因分型高血压和血压正常的人之间没有显著差异(表的雄性2)和女性(表3),分别。调整为协变量包括年龄、BMI和糖尿病持续时间、逻辑回归分析(表没有透露任何重大关联2和3)。

基于||,值,这三个单核苷酸多态性是位于一个块(图1)。四个单,由rs2235307、rs2235306 rs3115759,频率> 0.05(表被观察到在我们的研究样本4)。他们都没有表现出显著不同分布在高血压和糖尿病组的血压正常的参与者之间。

关于糖尿病的参与者(阶段1),我们发现rs2235306,但不是rs2235307 rs3115759,与高血压的患病率仅在男性(补充表2和图3)协变量调整后(,95%置信区间CI: 1.01 - -1.40,),轻微的等位基因(C)在高血压的主题更频繁。此外,C-C-A单体型(rs2235307-rs2235306-rs3115759)与高血压的风险更高(95%可信区间1.09 - -2.00,表4)男性(补充)。没有其他三个单体型与高血压协会。

自从rs2235306 C等位基因和相关的单体型C-C-A与非糖尿病男性高血压风险更高,我们进行一个额外的三个单核苷酸多态性的基因(第二阶段,非糖尿病的主题。在这些样本中,没有证据表明rs2235306协会和C-C-A单体型与观察高血压(补充表2、3和4)。接下来,我们结合两个阶段分析(补充表5)。所有的三个单核苷酸多态性和明显的四个单体型与高血压有关。

4所示。讨论

当前的研究三的标记snp基因分型APLN地区在中国人口和无糖尿病。飞行员数据显示,小rs2335306等位基因C和C-C-A单体型(rs223537-rs2235306-rs3115759)与葡萄糖调节正常的男性患高血压的风险更高。然而,我们的第二阶段样品未能复制这一发现,荟萃分析也表现出负面的结果。

1998年,Tatemoto et al。13]从牛胃中提取分离出36-amino酸肽,并命名为组织apelin,孤儿已G-protein-coupled受体的内源性配体。在人类,preproapelin mRNA在中枢神经系统丰富,胎盘在更为温和的浓度和肾脏,心脏,肺,乳腺和脂肪细胞。自发现以来,许多组织apelin /已系统的初步调查,因为它关系到心血管系统集中在它的角色在血压控制12,18,19]。在雄性Wistar鼠,aplein管理可以降低收缩压和舒张压,并持续几分钟(19,33]。此外,氮oxide-dependent动脉血管舒张效应组织apelin也观察到男性体内的18]。

值得注意的是,没有研究调查是否存在区别男性和女性对于组织apelin对血压的影响。然而,纽森et al。34)报道,组织apelin受体(已)有一个性别肾上腺轴的外周免疫激活函数,表明可能的性别组织apelin /已对血压的影响可能在未来需要解决的问题。

最近,李和他的同事们(22)评估了协会的多态性APLN与原发性高血压家庭研究和报道一个积极的结果。这个协会是下一个验证在一般人群妞妞et al。23]。然而,值得注意的是,相关的单核苷酸多态性在这两个研究都是不一致的。例如,t - 1860 c时,发现影响高血压的风险在以前的研究中,在后者没有成功复制,rs3761581赋予被观察到的风险。此外,值关联不够稳定(和、职责)。加上我们的数据,很可能常见变异APLN仅可能不会产生明显的基因对血压的影响。然而,协会的可能性不能被完全排除在外,作为我们的研究可能有力量不足时检测轻微的遗传效应低小的snp等位基因频率。例如,糖尿病组不到50%功率检测一个或1.2 rs2335307(补充表6)。另一方面,可能之间的交互APLN和AGTRL1编码的受体组织apelin,可能有一个更大的基因对调节血压的影响。事实上,在妞妞的研究等。23),与高血压的关系更健壮的单体型分析,这两者的变体APLN和AGTRL1考虑,比single-locus研究限制APLN。

当前的研究的力量存在,共有6693名受试者(3156糖尿病患者和3536例非糖尿病)招募,我们相信是最大的样本量的研究来评估之间的关系APLN和高血压。但也有一些局限性,应该提到。首先,我们没有获得药物治疗的信息,这可能对血压有一定的作用。第二,常见的变体AGTRL1没有基因分型。因此,互动的效果AGTRL1和APLN在高血压仍然未知。第三,我们没有测量循环组织apelin集中在我们的样例,从而排除之间的关系的分析APLN基因变异和循环组织apelin水平。

总之,我们并没有发现任何证据协会的常见变异APLN有高血压糖尿病或糖尿病的主题。虽然小效应不能被排除在外,我们的数据表明,常见的变体APLN可能不会发挥重要作用在调节血压。在不同人群需要进一步的研究来证实这一发现。

利益冲突

没有利益冲突。

作者的贡献

r .张和j . Lu贡献本文同样。

确认

作者感谢所有护理和医护人员在上海临床糖尿病中心为他们奉献在这个研究。这项工作是支持由中国国家973项目(2011 cb504001),中国国家自然科学基金(81170735和81170735),中国国家863项目(2012 aa02a509),上海新星计划(12 qh1401700),上海的优秀年轻的医学专家(XYQ2011041)和上海市的项目基础研究(jc1409600 11日),中国。

补充材料