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Yaqian盾、Guoxiang贾(Hu回族Liu婷婷Wu Shenshen杨,李Yubo蔡, ”测定生物碱和黄酮类化合物近年来UHPLC-Q-TOF /女士”,分析方法在化学杂志》上, 卷。2021年, 文章的ID9915027, 13 页面, 2021年。 https://doi.org/10.1155/2021/9915027
测定生物碱和黄酮类化合物近年来UHPLC-Q-TOF /女士
文摘
这项研究是基于UHPLC-Q-TOF /女士和碎片离子来实现分类和识别的生物碱和黄酮类化合物近年来。通过回顾可用的和相关文献,综述了生物碱和黄酮类的大规模分裂规则。0.1%甲酸水(A)和乙腈(B)被用作移动阶段。37个化学成分,包括13个生物碱和24类黄酮。这个研究方法提供了一个完整的战略基础上的碎片化信息特征碎片离子和中性丢失了MS / MS的化学成分的特点近年来。
1。介绍
传统中药(TCM)的分析方法并不能满足很多复杂的化学成分的分离和鉴定,将挑战的中药的质量控制和临床应用1]。Ultrahigh-performance液体chromatography-quadrupole飞行时间质谱(UHPLC-Q-TOF / MS)的主要成分分析方法已成为现代中药因其高速、高效和高分辨率。它可以克服紫外探测器的限制,所以它适用于成分分析在中药复杂体系(2- - - - - -4]。中药的化学成分可以快速分类和识别的基础上次生片段(5,6]。中药在治疗疾病的过程中,通常有多个组件和多个目标,这常常导致的问题不清楚组件。因此,化学成分的分类和识别中药很有意义。根据化学结构的不同,可以分为不同的母核结构的化合物类型。化合物具有相同父核类型会产生一些离子碎片是相同的质谱分析过程中碰撞。
传统的中草药近年来来自干的根源近年来河中的小岛。,a leguminous plant which is listed as middle grade in Shennong Materia Medica, and is bitter and cold in taste. Alkaloids and flavonoids are considered to be the main active components of近年来(7]。研究表明,生物碱近年来可以减少炎症因子的分泌TNF -α通过调节BMP2的表达,Runx2,和其他蛋白质,提高碱性磷酸酶的活性治疗慢性骨髓炎所致金黄色葡萄球菌感染(8]。吲哚胺2-dioxygenase-1 (IDO1),肿瘤细胞生存的因素,会导致多种肿瘤细胞逃脱。作为IDO1的抑制剂,许多黄酮类化合物近年来有潜在的用于癌症免疫疗法(9]。鉴于良好的临床疗效和研究的前景近年来具有重要意义,建立一个技术,可以快速分类和识别的化学成分近年来。
UHPLC-Q-TOF / MS技术的基础上,本研究总结了特点和中性碎片在卵裂过程中损失的化合物,化学成分的分类和识别近年来,确定了37个生物碱和黄酮类化合物近年来。
2。方法
2.1。材料和工具
近年来(北京同仁药店)、苦参碱、氧化苦参碱,sophocarpine标准(成都Ruifensi生物技术有限公司,中国),乙醇(天津Huihang,分析纯),乙腈(σ、美国、高效液相色谱级)、甲酸(σ、美国、高效液相色谱级),蒸馏水(中国广州屈臣氏),UPLC-Q-TOF-MS(美国水域,米尔福德,MA),一个水域ACQUITY UPLC本·C18柱(100毫米×2.1毫米,1.7μ米),MassLynx V4.1。
2.2。准备样品
5.0克近年来正是重、回流提取两次8倍和6倍70%乙醇,每次2小时。合并后的提取是蒸发和浓缩0.1 g / mL,然后由0.22过滤μ米微孔膜,被注入的样品溶液10,11]。
1毫克的苦参碱、氧化苦参碱和sophocarpine正是衡量。然后,1毫升的70%乙醇溶解,经过0.22μ微孔过滤膜。
2.3。UHPLC和女士条件
UHPLC:水域ACQUITY UHPLC本·C18柱,2.1×100毫米,1.7μm;列温度设置为35°C;流动相:水相是0.1%甲酸水溶液(A)和有机相乙腈溶液(B);流量:0.4毫升/分钟。用于色谱分离,梯度洗脱方法和渐变过程如下:清廉,3 - 20% B;10 - 15分钟,20 - 30% B;15 - 20分钟,30 - 50% B;20 - 25分钟,50 - 70% B;25日- 27日最小值,B 70 - 100%;研究最小值:100% B; 30–32 min,100–3% B; 32–35 min, 3% BTOF-MS:电喷雾电离源(ESI),扫描模式:积极的和消极的离子。女士参数如下:干燥气体温度:325°C;干气流量:11毫升/分钟;desolvent气体流量:800 L / h;毛细管电压:3.0 kV;collision-induced分离电压:6 kV;碰撞能量:20 - 50电动车;雾化压力:350 psi;辅助气体:N2;积极的和消极的参考离子校准([M + H]+= 556.2771,(mh)−在光谱采集= 554.2615),以确保准确性。数据采集是50到1500的范围。3所示。结果与讨论
3.1。方法的建立
质谱实验数据报告在文献中被用来总结已知片段丢失的碎片离子峰的化学成分近年来和总结的分裂规则不同的碎片离子。随后,MassLynx软件用于峰值匹配,的化学成分近年来推导了基于组件的保留时间和分裂规则。最后,13生物碱和24个黄酮类化合物的确定,如表所示1。化学成分的分裂规则近年来如图1,基础离子(BPI)的色谱峰近年来提取在正负离子如图2。
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(一)
(b)
3.2。生物碱化合物的分裂规则
根据母核的结构类型,生物碱近年来主要分为苦参碱型、金雀花碱型,anagyrine类型和凶残的类型(25]。其中,matrine-type化合物容易失去H2O (18), C5H7没有(97),C5H9没有(99)在碰撞过程中,导致特征的碎片m / z150年和m / z148年。氮氧化物的苦参碱生物碱容易失去H2O(18)和哦(17),导致丰富的片段[M +高度差2O)+和[M + H-OH]+(13,14]。的乳沟C7-C13 / C9-C11和C6-C7 / C1-C10扫帚生物碱债券将产生146 [M +·hc·等特征碎片3H9N]+和148年[M +·hc·2H5N]+甲基取代基位置相关12 (12]。大豆苷生物碱的特征碎片包括243 [M +高度差2O)+205 [M +高度差2o c3H4]+123 [M +·hc·8H14N2]+114年,[M +·hc·9H8没有)+(17]。
化合物2的分子式是C15H24N2O,保留时间为1.59分钟。主要次生片段是247.1815,231.1959,176.1083,150.1298,148.1152和136.1144。在正离子模式下,分子离子峰m / z249.1980 [M + H]+,及其母公司离子去除一个分子的H2和H2O,分别导致离子的峰值m / z247.1815 [M +高度差2]+和一个脱水的峰值m / z231.1959 [M +高度差2O)+。然后,复合经历RDA乳沟。在此基础上,特征matrine-type离子碎片m / z150.1298 [M +高度差2- c5H7没有)+,m / z148.1152 [M +高度差2- c5H9没有)+,m / z136.1144 [M +高度差2- c6H9没有)+。的基础上失去一分子H2,这种化合物可以继续失去一个分子的C3H5没有,形成离子的峰值m / z176.1083 [M +高度差2- c3H5没有)+。根据片段信息、标准对照品保留时间,相对分子质量,女士和女士的信息,确认为苦参碱化合物。在图所示的分裂规则3。
化合物4的分子式是C15H22N2O,保留时间为1.93分钟。在正离子模式下,分子离子峰是247.1821 [M + H]+主要二级碎片是245.1661,179.1542,150.1293,148.1149,136.1137和108.0833。推测,化合物4的分裂过程如下。首先,父离子失去一个分子的C5H7没有(97)和C5H9没有(99)生产苦参碱的特征离子碎片类型:m / z150.1293 [M +高度差2- c5H7没有)+和m / z148.1149 [M +高度差2- c5H9没有)+。其次,父离子可以失去一个分子的C4H4O导致片段179.1542 [M +·hc·4H4O)+然后直接失去一个分子的C2H4没有或失去C2H4收益率136.1137 [M +·hc·4H4o c2H4没有)+和m / z108.0833 [M +·hc·4H4o c2H4没有c2H4]+离子碎片。245.1661碎片离子通过分子H的直接损失2由父离子。基于分裂规则和标准信息,可以推断,sophocarpine化合物。分裂过程如图4。
3.3。黄酮类化合物的分裂规则
类黄酮在近年来类化合物,主要包括dihydroflavonoids dihydroflavonols、黄酮醇、异黄酮、dihydroflavonoids和化合物很容易改变。因此,质谱可以区分两个(26]。很容易移除中性分子等黄酮类化合物H2O, CH3有限公司有限公司2C2H2O和C2O3在负离子模式下。大多数的dihydroflavonoids近年来片段等信息(mh)−,(M-H-H2O)−,(M-H-CO)−,(M-H-CH3]−,这些化合物容易RDA乳沟位置1,2,3,4,导致1、3一个−碎片离子。查耳酮化合物形成261 (C16H21O3]−和161 (C9H5O3]−离子碎片在负离子模式下B环,1、4 dihydroflavonoids解理发生在不同位置,导致1、4一个−和B1、4−特征碎片离子(12,22]。dihydroflavonols是C的主要碎片环是由RDA重新安排生产特征碎片如177 (C9H5O4]−275 (C17H23O3]−,1、3一个−,1、3B−和羟基位置3是不稳定的,所以很容易消除反应,失去H2O形成双键。黄酮醇化合物进行RDA解理特征碎片1、3一个−和1、3B−并继续失去中性分子等公司(28)和有限公司2(44)。异黄酮容易失去中性分子等有限公司2有限公司有限公司2C2O3(23]。基于上面的质谱信息保留时间相结合,黄酮类化合物的化学成分近年来很快被确定。
复合34的分子式是C26H28O6,保留时间为20.62分钟。二级碎片离子主要有405.1707,262.15351,193.1601,161.0249和138.0323。在负离子模式下,母公司离子峰m / z423.1805 (mh)−。父离子2′-哦是化学活性,这意味着它很容易失去一个分子的H2O和脱水产生碎片m / z405.1707 [M-H-H2O)−。在此基础上,中性丢失片段C15H17O丢失,和离子片段m / z193.1601 [M-H-H2o c15H17O)−是获得。由于存在2′-哦,复合不容易产生RDA乳沟,但优惠1′4 C环的位置,导致离子碎片1、4一个m / z261.1501和1、4Bm / z162.0281,然后离子碎片m / z138.0323 [1、4得了9H15]−时获得C9H15是迷失在1、4答:基于上述法律,这是化合物norkurarinone推断。分裂过程如图5。
复合35的分子式是C25H28O7、保留时间为21.15和二级碎片离子主要有421.1631,287.12901,261.1497,177.0191,152.08121,149.0251和109.0298。在负离子模式下,前体离子峰m / z439.1761 (mh)−的前体离子去除一个分子H2O获得m / z421.1631 [M-H-H2O)−离子片段。之后,1 4 C的位置环折断一个分子的C9H6O3获得离子片段261.1497 [M-H-H2o c9H6O3]−。此外,父离子化合物还可以直接失去一个分子的C16H20.O2,产生离子的碎片m / z177.0197 [M-H-H2O-ringB-C10H15]−的基础上,另一个分子的C4H7是失去了,m / z109.0298 [M-H-H2O-ringB-C10H15- c4H7]- - - - - -。在RDA中重排的化合物,m / z287.12901、3一个−和m / z152.08121、3B−可以生成离子碎片,然后分段特征1、3一个−失去C9H14O生产m / z149.0251 [1、3一个−- c9H14O)−。基于上述分裂规则,可以推断,这种化合物是kushenol x分裂过程如图6。
4所示。结论
UHPLC-Q-TOF / MS技术结合特征碎片和中性的损失是用于跟踪和识别的生物碱和黄酮类化合物近年来,不同父离子的分裂规则推断。总共13生物碱和24类黄酮被确定。分析策略描述化合物的结构通过获得诊断碎片离子基于准分子离子峰和MS / MS进行了综述。
数据可用性
没有数据被用来支持本研究。
的利益冲突
作者宣称没有利益冲突。
确认
这项工作是由中国国家自然科学基金(没有。81903933),天津科技发展基金项目(2018 kj002),和天津人才发展特别支持项目高层次的创新和创业精神。
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