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Wedad Al-Onazi Amal m . Al-Mohaimeed Musarat阿米娜,摩诃El-Tohamy, ”金属化学成分和测定的识别Retama raetam使用icp (Forssk)阻止选民,GC-MS-MS, DART-MS”,分析方法在化学杂志》上, 卷。2021年, 文章的ID6667238, 9 页面, 2021年。 https://doi.org/10.1155/2021/6667238
金属化学成分和测定的识别Retama raetam使用icp (Forssk)阻止选民,GC-MS-MS, DART-MS
文摘
本研究旨在调查茎的化学成分Retama raetam在沙特阿拉伯。乙醇提取的有机和无机成分r . raetam茎一直在探索使用直接分析真正的次大规模光谱法(DART-MS),气相色谱分析-质谱法(gc - ms)和电感耦合等离子体质谱(icp)。由DART-MS和gc - ms分析揭示了存在的几个有趣的有机成分标识为2,4-di-tert-butylphenol,金雀花碱,benzenepropanoic酸,3,5-bis 4-hydroxy -(1,1 -二甲基乙基),甲基酯,邻苯二甲酸,1-octadecanol,角鲨烯,argentamin, 2, 4-di-tert-butylphenol,金雀花碱,苯丙酸,3,5-bis 4-hydroxy -(1,1 -二甲基乙基),甲基酯,邻苯二甲酸,1-octadecanol,角鲨烯,argentamin,三十一烷乙醇提取的r . raetam阀杆。茎中提取的icp分析显示存在的大量重要的无机元素,包括铝、氯、钙、镁、磷、溴钪和铬。当前的研究补充r . raetam提取调查在过去和未来研究提供了额外的数据。
1。介绍
芳香和药用植物被认为是主要的自然来源各种各样的动荡的萜烯,碳氢化合物,精油和次生代谢物。精油也称为挥发油被广泛用于传统医学。治疗风湿病的等,抗菌,抗真菌,抗炎活动已经在文献中报道这些精油1- - - - - -3]。属Retama由单元分类单元属于家庭蝶形花科吗。它由四个结构相关的特有物种分布从地中海面积:r . sphaerocarpa(l)木香。r . dasycarpa输出电容。r . monosperma(l)木香。和r . raetam(Forssk)。韦伯(4,5]。r . raetam通常被发现在西奈半岛和北东地中海区域。天线部分的提取各种属的物种Retama作为传统疗法治疗高血压、糖尿病、风湿、抗炎疾病(6- - - - - -8]。此外,一些研究文献中报告不同的药理性质Retama物种包括抗氧化,抗菌,抗真菌,王亚南,抗增殖,antiulcerogenic、降糖、降压、利尿效果9- - - - - -16]。植物化学的调查表明Retama物种富含类黄酮,quinolizidine bipiperidyl生物碱和cyclitol松醇化合物(17- - - - - -21]。Retama raetam(Forssk)韦伯,俗称“R 'tm,是最有价值的芳香和药用野生植物。它是自然生长在地中海东北部地区,西奈半岛,突尼斯,利比亚和沙特阿拉伯22,23]。这种植物的花朵发出甜美的蜂蜜香气,和根是深深扎根于土壤。它有细长的树枝,减少暴露的表面积,使植物抗干旱的沙漠。叶子非常小和迅速下降到节约水。传统上,不同地区的植物用于治疗肾和皮肤疾病。据报道,其提取物具有潜在利尿剂活动,在高血压的治疗可能是有用的。r . raetam也表明抗糖尿病的效果。在突尼斯,在丰富和被用于各种工业用途。在阿尔及利亚和摩洛哥,它是用来降低血糖和皮肤炎症24,25]。然而,在沙特阿拉伯,植物用于伤口愈合和炎症。同时,美联储与牛r . raetam牛奶甜。
大量的科学数据已经生成的传统药物的使用在过去的二十年中主要包括基于产品的天然药物。数以百计的植物成分,可在文献中报道他们的隔离、标识、和研究相关的药理学和毒理学特性。大多数自然科学研究的产品有关的识别和表征有机成分,主要次生代谢产物。实际上,生物活性的有机化合物是负责任的组件。然而,无机元素也存在于植物提取物,他们可以发挥潜在的影响力作用疗效的天然产品。无机组件可以参加补充材料除了护栏的药用作用植物源药物(26,27]。
许多研究的有机成分r . raetam;然而,无机元素还没有报道。当前的工作强调的有机以及无机成分r . raetam使用DART-MS干细胞提取,真空和icp技术。
2。材料和方法
2.1。植物材料
植物的茎Retama raetam(2.5公斤)收集salehh马达思班除上帝之外,沙特阿拉伯的西北,2019年10月。植物材料进行验证,确定了在植物分类学者沙特国王大学的部门。干茎粗粉在混合器磨床的统一大小。粉末材料的r . raetam被转移到聚乙烯塑料胶袋和保存在一个冷的地方在4°C,直到进一步的使用。
2.2。DART-MS分析
实时直接分析研究AccuTOF-DART-MS进行,JEOL(公司皮博迪,妈,美国),配备了一个离子源DART-SVPTM(美国马Ionsense,索格斯)。植物茎的植物样本直接采样通过控股钳飞镖离子源和质谱仪。化学成分的检测这一技术不需要提取或样品制备。茎的挥发组分蒸发在氦流加热在350°C,兴奋的亚稳态氦原子被电离之前进入质谱仪的离子源。分子主要是质子化了的没有任何碎片以积极的电离模式。
2.2.1。DART-MS仪器参数
所有质量测量中使用DART-AccuTOF质谱仪进行正离子模式。质子化了的利血平被用来测量谱仪的分辨率为6000(应用)。质谱的聚乙二醇(1500平均分子量)被选为参考标准的质量测量植物样品中的每个生成的化合物。下列条件的大气压力接口应用:环镜(4 V);孔1 (10 V)和孔2 (5 V)。射频(RF)离子指南的电压在800 V,允许调整检测离子的比m / z80年。氦气被用作飞镖离子源在350°C流量2 L / min和栅极电压530 V,和输入气体压力调整到1.8×10−2Pa (Airgas、剑桥、马)。元素成分的化学成分检测比较准确质量光谱数据与发达的植物组件库与NIST标准参考数据库(2008数据库)。
2.3。的制备r . raetam气相分析提取
分析了有机成分r . raetam植物,茎粉(100克)受到了乙醇提取。植物粉浸泡在300毫升乙醇48 h,在环境温度。ethanolic提取是排水、过滤、离心机,并过滤掉溶剂在rotavapour±50°C,在减压的深棕色残渣(16.5 g)。获得提取存储在冰箱里在4°C在黑暗的进一步分析与gc - ms前密封的瓶子。
2.3.1。气相色谱仪器条件
乙醇的化学成分提取得到的干的r . raetam分析了在热跟踪GC ultra-gas色谱加上TSQ量子质谱仪(三重四极),可以在大学的科学,沙特国王大学。2μl干细胞提取的解决方案r . raetam是加载到玻璃毛细管柱融合Elite-5MS列(30×0.25毫米内直径0.25毫米×0.25吗μ米膜厚度)。固定相是5%苯基polysilphenylene-siloxane。烤箱的温度设定在40°C, 5分钟,达到300°C的速度加速10°C /分钟。注入器和检测器温度维持在250°C。氦是用作载气流速为0.5毫升和分流25毫升/分钟,相应的分流比50的。分析总收购时间是75分钟。质量检测器进行了扫描在40到500 (m / z),在一个电离模式。质量检测器是在70 eV电离能和0.132 s /扫描完整的扫描模式。相对丰度(%区域)之间的比率的计算是基于每个化合物的峰面积和峰面积之和的化合物(28]。国家标准和技术研究院(NIST v2.1, 2005年,威利)是用于识别未知的组件库,与文献报道。
2.4。样本的准备的icp分析微波消化
干、植物粉(515毫克)放置在干燥、清洁的聚四氟乙烯微波消化容器,2.0毫升的集中HNO36.0毫升盐酸和2.0毫升的高频被添加。样本然后接受消化使用科学微波(模型里程碑风气1600)在165°C 10分钟1000 W功率的微波辐射,其次是居住时间20分钟在165°C。温度和压力上限是175°C和15.2条(220 psi),分别。冷却后,生成的摘要被转移到一个50毫升塑料容量瓶使用去离子水和由马克。一个空白的消化以同样的方式进行。
2.4.1。icp仪器条件
的微量元素分析r . raetam仪器NexION 300 d(美国PerkinElmer电感耦合等离子体质谱仪)被用来进行icp分析。表1强调了在这项研究中使用的仪器操作条件。
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2.4.2。icp和内部标准的校准
仪器校准使用十亿分之1.0多元素内部执行标准溶液在1%硝酸锂等各种元素(6李),铍(9)、锌(67年锌,硒78年Se),溴(81年Br)、钴(59有限公司),钠(23Na),镁(24毫克),硅(28Si)、铁(57铁)、铬(53Cr)、铅(208年Pb)、铜(63年铜)、铜(65年铜)和钡(136年Ba)。相同的标准解决方案应用于优化气流,质量校准,决议和AutoLens校准。所有分析,20磅的多元素内部标准的解决方案是使用。
2.5。菌株
五个不同的致病菌株被用于这项研究包括伤寒沙门氏菌写明ATCC,大肠杆菌写明ATCC,铜绿假单胞菌写明ATCC,肺炎克雷伯菌写明ATCC革兰氏阴性和金黄色葡萄球菌写明ATCC革兰氏阳性菌株。提供的菌株是哈立德国王医院,沙特阿拉伯和被用来研究乙醇提取物的抗菌潜力r . raetam。各种生理、形态和生化试验进行确定所选菌株(29日]。所有细菌隔离检测抗菌敏感性通过修改Kirby-Bauer盘扩散法在临床和实验室标准协会(CLSI)指南30.]。
2.6。抗菌试验的r . raetam提取
琼脂扩散法是用于乙醇提取物的抗菌潜力进行调查r . raetam干细胞在Mueller-Hinton琼脂(尼古拉斯)板31日]。测试菌株被安置在营养肉汤和孵化12 h在37°C,使浊度0.5麦克法兰标准产生的最后一剂1.5×108 CFU /毫升。标准化细菌培养是尼古拉斯板上传播。50 mg·毫升−1解决植物提取制备二甲亚砜(DMSO)。无菌软木钻孔机是用于孔接种媒体入井,和50μL的植物提取物添加到每个。链霉素是作为积极的控制,而DMSO作为消极的控制。大约30分钟的混合物被允许分散在环境温度和孵化37°C的一个完整的一天。孵化期后,周围明确区形成的板块进行评估,这表达了植物提取物的抗菌潜力测试。抑制的区是用毫米来衡量。
2.7。测定植物提取物的麦克风
麦克风是由使用汤采用过程按照CLSI的指令。微生物在营养肉汤培养6 h。20毫升的培养菌株接种在含有营养肉汤管补充了七个不同浓度(20、40、80、160、320、640和1280毫升)的植物提取物(25毫克毫升−1)和孵化了一天在37°C。麦克风的样本是由使用分光光度计测量光密度在620海里。氯霉素作为标准物质(32]。
2.8。DPPH自由基清除活性
的抗氧化效果r . raetam茎中提取决心spectrophotometrically使用DPPH方法通过修改前所述Brand-Williams et al。33]。该方法是由混合1.5毫升20μ克毫升−1与0.75毫升100 DPPH的解决方案μ克毫升−1植物提取物。被调查样本是混合好,保存在一个黑暗的环境温度30分钟。混合物的吸光度测定spectrophotometrically与空白溶液517海里(0.75毫升的水与1.5毫升DPPH)混合使用紫外可见分光光度计(日本岛津公司,京都,日本)。此外,消除粗提取液的吸光度,一个空白样品制备混合0.75毫升的植物提取物1.5毫升的甲醇。因此,抗氧化能力的百分比计算使用以下方程: 在哪里和的吸光度DPPH的解决方案没有提取和吸光度测试与DPPH植物提取物,分别。
3所示。结果与讨论
3.1。化学分析的r . raetamDART-MS茎提取物,gc - ms和icp
在最近的研究中,有机和无机成分的植物化学的评价r . raetam茎中提取被DART-MS识别和定量估计,真空和icp分析。相当数量的22个有机化学成分决定使用DART-MS技术(表2)。图1显示有机化合物的质谱DART-MS,用气相色谱-质谱技术而估计12有机成分(表3)。图2说明了有机化合物的色谱图r . raetam干细胞提取相。然而,共有33个无机成分被发现使用icp技术(表4)。结果显示,大量的重要的有机化合物中标识r . raetam茎提取物包括己二腈,2-isopropylimidazole, cinachyrazole C,卡达烯,8-hexylisoquinoline,金雀花碱,2-dodecyl-1H-imidazole, 4-methyl-2-undecylimidazole DART-MS分析。此外,gc - ms结果显示的存在价值的有机成分,包括2、4-di-tert-butylphenol,金雀花碱,苯丙酸,3,5-bis 4-hydroxy -(1,1 -二甲基乙基),甲基酯,邻苯二甲酸,1-octadecanol,角鲨烯,argentamin,三十一烷
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金雀花碱是一种heterobicyclononane生物碱具有抗心律失常的作用,减少室性心动过速和颤动的发生率,并有助于降低血压和心率(34,35]。它还显示降糖效果和诱发胰高血糖素和胰岛素分泌胰腺(36,37]。其他生物属性报告这生物碱包括抗炎、抗菌和利尿的作用,诱发子宫收缩38,39]。
gc - ms分析估计和确定干细胞提取的卅一烷的存在r . raetam(表3)。据报道,三十一烷具有抗炎作用的脂多糖(LPS)诱导小鼠腹腔巨噬细胞炎症反应。它有抑制白介素(il - 6)的生产,肿瘤坏死因子(TNF -α),prostaglandin-E2(铂族元素2),显示一个潜在的候选人的发展新的炎症药物治疗炎症性疾病(40]。
抗菌、抗真菌和细胞毒性的活动r . raetam提取已经在文献中报道(10),这表明成分存在于植物在生物学性质产生重大的作用。一朵花中提取的研究r . raetam显示强大的抗菌活性绿脓杆菌,大肠杆菌,假丝酵母物种(7.81 - -15.62μ克毫升−1)。测试植物提取物以及黄酮类化合物分离对Hep-2显示强烈的细胞毒性细胞(10]。
卅一烷也称为untriacontane是一种长链碳氢化合物属于有机类烷烃。通常见于多种食品,如藏红花、甜樱桃椰子,空心菜。这使得一个潜在生物标志物对这些食品的消费。据报道给不同的药理性质,包括抗肿瘤、抗炎和抗菌活动(41]。
活性氧(ROS)已知负责氧化细胞大分子损害如核酸、脂质和蛋白质。这些类型的生物破坏可能导致疾病进展和细胞死亡。茎中提取的r . raetam显示强大的DPPH自由基清除活性。结果认为这活动由于植物中的萜类和黄酮类化合物提取(42]。所有这些解决的特点r . raetam可以考虑支持其药用应用在传统的民间医学系统(43]。在当前的工作,可观数量的倍半萜类化合物被检测到r . raetam茎中提取。
无机成分发挥重要作用的生存生物活性的化学实体。除了四个基础建筑元素氢、碳、氧、氮(主要形成有机分子),各种无机组件所需的生物的健康生存。几个元素在人类本质上是人体正常生理功能所必需的(44]。在目前的分析,共33个无机元素被检测到r . raetam茎提取物(表4),这表明他们有一个重要的角色在人类的生物功能。
被发现的钙离子浓度最高的样本之后,铁,钾和钠。钙是一个至关重要的元素众多的生理功能和骨结合磷的结构材料。摄入的钙补充剂有助于防止骨折和钙缺乏症(45]。钙测定的最高金额(71951±3.1毫克公斤−1)在所有的无机元素在目前的研究中确定测试工厂。其他潜在的营养元素中提取铁、钾、钠(表4)。铁是一种重要的元素,帮助血红蛋白的携氧能力。还发现在各种重要细胞色素p450酶等酶。铁中记录的数量r . raetam茎提取物为1054.487±1.0毫克公斤−1(表4)。
钾,还发现在更高的数量r . raetam提取(15267.514±0.9毫克公斤−1),据报道,参与调节体液平衡,神经信号,肌肉收缩。研究表明,高钾饮食有助于降低血压和保水性,防止骨质疏松和肾结石,防止中风。
钠是一种有用的元素需要少量通过食物来执行正常的生物过程。它有助于进行神经冲动,保持适当的平衡水和矿物质,肌肉的收缩和放松。的日常要求人体500毫克的钠。在目前的调查,531.674±2.4毫克公斤−1钠的检测r . raetam提取。较高的钠摄入量负相关,高血压的风险,心脏病和中风。其他重要的微量营养元素检测r . raetam提取磷、锶、锰和铬(表4)。磷是骨骼的重要组成部分,牙齿,DNA和RNA。它起着至关重要的作用在细胞膜的结构和身体的能量的主要来源。一些糖和蛋白质在体内磷酸化。在这项研究中,磷被发现在一个可观的(701.293±2.1毫克公斤−1)。
目前的调查结果显示四个元素除了基本的吸引了大数量的r . raetam茎中提取。这些包括溴(35.389±0.9),钡(15.622±1.0毫克公斤−1)、铜(6.648±0.7毫克公斤−1)和砷(1.400±2.4毫克公斤−1)。这些无机元素在本质上是有毒的。表3还演示了微量的其他元素识别。
3.2。评价抗菌的潜力r . raetam茎中提取
抗菌活性的r . raetam茎中提取决心使用琼脂扩散法对五种不同的菌株。在这项研究中使用的植物提取物表现出不同程度的抗菌潜在的对所有使用的菌株。植物提取物的能力是衡量定性以及定量访问带抑制的存在与否,区直径,和麦克风的值。链霉素和DMSO作为积极的和消极的控制,分别。中提供的数据表5表明,乙醇提取的r . raetam干细胞具有良好的抗菌活性菌株对所有测试。结果显示,最高的抑制区被记录铜绿假单胞菌(6.2毫米)金黄色葡萄球菌(5.8毫米),而链霉素抑制区1.65和3.74毫米之间。的乙醇提取物r . raetam显示2和5毫克毫升的麦克风−1对铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌,分别。然而,氯霉素有不同的麦克风从6.5到10.5毫克毫升−1。本研究的结果与先前的研究支持Awen et al。(2011)46]。
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3.3。评价抗氧化剂的潜力r . raetam茎中提取
的抗氧化潜力r . raetam茎中提取是利用DPPH自由基清除实验评估。它被认为是一个最简单的,有效的,可靠的,被动的,可再生的在体外程序用于评价纯化合物的活动以及植物提取物。的DPPH自由基清除潜在的结果r . raetam阀杆与参考(抗坏血酸)和呈现在图3。测量的抗氧化潜力估计IC50值的DPPH自由基清除活性表现出强烈的乙醇提取物的抗氧化活性r . raetam阀杆。的集成电路50值分别为32.6和12.8μ克毫升−1分别提取和抗坏血酸。乙醇植物提取物的自由基清除能力降低,而抗坏血酸。结果表明,r . raetam茎中提取hydrogen-donating能力强,可以作为自由基清除剂,可以作为可能的替代品主要抗氧化剂。强抗氧化的潜力r . raetam茎提取物可以归因于存在的次生代谢物。
4所示。结论
这项研究提供了一个了解生物活性有机代谢产物以及有益的乙醇提取物的无机元素r . raetam阀杆。它可能是第一个报告有关的无机元素r . raetam提取和明确支持传统的使用r . raetam在民间,传统医学体系。作为一个整体,r . raetam提取包含必要的无机组件所需的生物功能和微量的汞,砷,铅有毒元素。目前调查的结果提供了优秀的角色无机成分的药用价值及其有机组成部分。它还表示的可能性使用这种植物作为各种无机元素的补充来源不足。
数据可用性
所有的数据包括文本中存在。
的利益冲突
作者宣称没有利益冲突。
确认
这个研究项目是由研究中心的资助支持女性的科学和医学学院,院长职科研、沙特国王大学,利雅得,沙特阿拉伯。
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