开发和验证的高效液相色谱法同时硫酸氢氯吡格雷的量化,其羧酸代谢物,在人血浆和阿托伐他汀:应用药代动力学研究gydF4y2Ba

文摘gydF4y2Ba

一个简单的、敏感的和特定的反相液相色谱测定方法的开发和验证同时量化的氯吡格雷,羧酸代谢物,阿托伐他汀在人类血清。血浆样本脱去蛋白质的乙腈和布洛芬被选为内部标准。色谱分离进行了BDS海泼斯尔合金gydF4y2Ba列(250×4.6毫米;5gydF4y2BaμgydF4y2Ba米)通过与流动相梯度洗脱组成的10毫米磷酸(钠)缓冲溶液(pH = 2.6调整为85%磷酸):乙腈:甲醇流量的1毫升·分钟gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}。检测是实现PDA探测器在220海里。该方法验证线性、灵敏度、精度、准确性、量化、极限和稳定性测试。校准曲线的分析物被发现是0.008 - 2的线性范围内gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}氯吡格雷,0.01 - 4gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}羧酸的代谢物,-2.5和0.005gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}阿托伐他汀。结果的准确性(复苏)与布洛芬作为内部标准为氯吡格雷在96 - 98%的范围,94 - 98%的羧酸代谢物,分别和阿托伐他汀90 - 99%。gydF4y2Ba

1。介绍gydF4y2Ba

众多的国际指导方针提供的证据为基础的建议coprescribing抗血小板药物和他汀类药物在壁血栓患者二级预防心血管事件(急性冠脉综合征(ACS),脑血管疾病,和外周动脉疾病(PAD)) (gydF4y2Ba1gydF4y2Ba,gydF4y2Ba2gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

硫酸氢氯吡格雷,gydF4y2Ba甲基(2 s) - (2-chlorophenyl) [6 7-dihydrothieno [3、2 c] pyridin-5 (4 h) - yl)硫酸酯gydF4y2Ba(图gydF4y2Ba1gydF4y2Ba),仍然是口服thienopyridine代理世界上最规定负荷剂量的300或600毫克和维持剂量75毫克(gydF4y2Ba2gydF4y2Ba]。氯吡格雷是一个前药转换约15%在肝脏细胞色素P450酶的一个两步过程硫羟活性代谢物(gydF4y2Ba3gydF4y2Ba)不可逆转地阻碍了P2Y12受体通过二硫键。第一步包括细胞色素P450-dependent monooxygenation [gydF4y2Ba4gydF4y2Ba]2-oxo-clopidogrel第二细胞色素P450-dependent氧化开放(gydF4y2Ba4gydF4y2Ba]thiolactone环的一个中间次磺酸随后代谢物活性硫羟代谢物。最近的一篇论文描述了PON-1-dependent水解2-oxo-clopidogrel导致endometabolites [gydF4y2Ba5gydF4y2Ba]。绝大多数(85%)的前体药物是由酯酶水解的活性羧基酸代谢物。gydF4y2Ba

他汀类药物的抑制剂3-hydroxyl-methylglutaryl辅酶A还原酶(β),建议尽早nste - acs患者降低低密度脂蛋白胆固醇(低密度脂蛋白)水平的2.6更易·LgydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}(< 100 mg·dLgydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}),最大的好处是实现高剂量阿托伐他汀(80毫克)gydF4y2Ba1gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

阿托伐他汀钙(3 r, 5 r) -gydF4y2Ba7 - [2 - (4-fluorophenyl) 5 -(1 -甲基乙基)3-phenyl-4 - (phenylcarbamoyl) 1 h-pyrrol-1-yl] 3 5-dihydroxyheptanoate三水gydF4y2Ba(图gydF4y2Ba1gydF4y2Ba),被广泛用于减少发病率和死亡率在动脉粥样硬化和心血管疾病患者通过抗炎、抗氧化、抗血栓形成的作用。内酯化形式和酸水解的内酯形式打开酸形式由酯酶催化,尿苷二磷酸(UDP) glucuronosyltransferase [gydF4y2Ba6gydF4y2Ba,gydF4y2Ba7gydF4y2Ba]。阿托伐他汀的内酯形式没有降脂效果,orthohydroxyl阿托伐他汀是主要的活性代谢物在等离子体中发现,和parahydroxyl阿托伐他汀较低血浆浓度(gydF4y2Ba7gydF4y2Ba]。阿托伐他汀较低生物利用度约为12%时由于presystemic间隙的口服药物在小肠和肝脏中代谢涉及细胞色素P450氧化(gydF4y2Ba8gydF4y2Ba]。阿托伐他汀研究了氯吡格雷试验由于其高亲和力CYP3A4同工酶,导致氯吡格雷抗血小板效应的可能损失。尽管有一些临床试验表明药物之间相互作用氯吡格雷和阿托伐他汀,没有重要的临床证据停止他们共同atherothrombotic事件的高危患者。gydF4y2Ba

大多数发表的报告描述氯吡格雷的量化羧酸代谢物在人类生物矩阵使用LC-UV等离子体(gydF4y2Ba9gydF4y2Ba,gydF4y2Ba10gydF4y2Ba和大鼠血浆gydF4y2Ba11gydF4y2Ba),但是gydF4y2Ba12gydF4y2Ba,gydF4y2Ba13gydF4y2Ba(女士),或质/gydF4y2Ba14gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba]。因为它的血浆浓度低,它不够稳定,硫羟代谢物中发现了几个报告质/女士(gydF4y2Ba21gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba24gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

各种方法已经应用量化的阿托伐他汀在人血浆LC-UV [gydF4y2Ba25gydF4y2Ba,gydF4y2Ba26gydF4y2Ba),同时估计的阿托伐他汀及其活性代谢物在人血浆质(gydF4y2Ba27gydF4y2Ba,gydF4y2Ba28gydF4y2Ba和孤独gydF4y2Ba29日gydF4y2Ba]。两份报告描述阿托伐他汀的同时测定,其orthohydroxyl parahydroxyl代谢物,在人血浆氨氯地平质/女士[gydF4y2Ba30.gydF4y2Ba,gydF4y2Ba31日gydF4y2Ba),一个用于阿托伐他汀、二甲双胍和glimepiride [gydF4y2Ba32gydF4y2Ba]。两份报告描述同时测定阿托伐他汀和普伐gydF4y2Ba33gydF4y2Ba)、阿托伐他汀和辛伐他汀,分别gydF4y2Ba34gydF4y2Ba),在人类血清。gydF4y2Ba

本文描述了一种选择性梯度色谱法同时测定氯吡格雷,羧酸代谢物,在人类血浆和阿托伐他汀gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba应用程序在三个病人口服氯吡格雷和阿托伐他汀在维持治疗。该方法应用于研究氯吡格雷之间是否发生有害的药代动力学相互作用和阿托伐他汀患者抗血小板和他汀类药物治疗。gydF4y2Ba

2。实验gydF4y2Ba

2.1。材料和试剂gydF4y2Ba

硫酸氢氯吡格雷、羧酸代谢物阿托伐他汀钙和布洛芬从西格玛奥德里奇获得的标准。高效液相色谱级乙腈、甲醇、正磷酸和水从默克公司(德国)获得。gydF4y2Ba

2.2。仪表gydF4y2Ba

色谱分析进行了使用热Finnigan色谱仪组成的三元溶剂的经理,一个手动喷射器的20倍gydF4y2BaμgydF4y2BaL循环,PDA检测器,热Finnigan Xcalibur为数据采集软件。的分离实现了BDS海泼斯尔合金CgydF4y2Ba_18gydF4y2Ba分析柱(250×4.6毫米,5gydF4y2BaμgydF4y2Ba米颗粒大小)。gydF4y2Ba

2.3。股票的准备和工作标准的解决方案gydF4y2Ba

硫酸氢氯吡格雷的股票的解决方案,其羧酸代谢物,阿托伐他汀和布洛芬(是)准备在100集中gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}在甲醇和储存在4°C。工作标准校准曲线的解决方案已经准备通过与甲醇浓度的连续稀释50,10,1gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}。工作标准溶液(50gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba})在甲醇制备。2 M盐酸溶液制备蒸馏水。gydF4y2Ba

2.4。制备校准标准和质量控制样品gydF4y2Ba

校正曲线、人血浆(0.5毫升)与硫酸氢氯吡格雷成功攀升,其羧酸代谢物,和阿托伐他汀的工作解决最后的原生质的浓度为0.008,0.016,0.032,0.064,0.128,0.25,0.5,1和2gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}硫酸氢氯吡格雷,0.015,0.03,0.06,0.125,0.5,4gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}羧酸的代谢物,0.005,0.01,0.02,0.04,0.08,0.16,0.32,0.64,1.28和2.56gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}阿托伐他汀。每个校准标准,是(布洛芬)添加在最后的原生质的浓度为2gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}(20gydF4y2BaμgydF4y2Ba50 L工作的解决方案gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba})。样品的质量控制(qc)中使用的方法验证飙升的级别:0.25,0.5,1和2gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}μgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}硫酸氢氯吡格雷、0.5、1、2和4gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}羧酸的代谢物,0.2,0.3,和2.5gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}阿托伐他汀。gydF4y2Ba

2.5。样品制备过程gydF4y2Ba

所有样本相同待遇如下:0.5毫升血浆样本,20gydF4y2BaμgydF4y2Ba(50 L布洛芬的标准解决方案gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}),20gydF4y2BaμgydF4y2BaL工作标准的分析物的解决方案,解决方案和200年gydF4y2BaμgydF4y2BaL盐酸溶液(2米)补充道。蛋白质沉淀了500gydF4y2BaμgydF4y2Ba乙腈的L。样品都摇动了5分钟,在4500转离心10分钟。然后,上层清液被转移到锥形管和蒸发干燥在环境温度下温柔的氮流。残留于500年重组gydF4y2BaμgydF4y2BaL甲醇和20gydF4y2BaμgydF4y2BaL是注入色谱柱。gydF4y2Ba

2.6。色谱条件gydF4y2Ba

的分离实现了BDS海泼斯尔合金CgydF4y2Ba_18gydF4y2Ba分析柱(250×4.6毫米,5gydF4y2BaμgydF4y2Ba米颗粒大小)。由一个移动阶段,10毫米磷酸(钠)缓冲溶液(pH = 2.6调整为85%磷酸);乙,乙腈;和C,甲醇。表中提供的梯度方案gydF4y2Ba1gydF4y2Ba。总运行时间是20分钟,流量是1毫升·分钟gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba},注射量是20gydF4y2BaμgydF4y2Bal .紫外线检测了220海里。gydF4y2Ba

2.7。方法验证gydF4y2Ba

我描述的方法被验证为指南(gydF4y2Ba35gydF4y2Ba]的线性、检测极限和量化精度,精度和稳定性测试。gydF4y2Ba

2.7.1。线性gydF4y2Ba

八点的线性方法确定浓度从0.008到2gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}硫酸氢氯吡格雷,0.01到4gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}羧酸的代谢物,0.005到2.5gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}阿托伐他汀。校准曲线是由绘制峰面积比(分析物/地区)与分析物的浓度。斜率、截距和相关系数计算。gydF4y2Ba

2.7.2。检测极限(LOD)和量化的下限(LLOQ)gydF4y2Ba

检测极限(LOD)估计使用信噪比3:1和量化的下限(LLOQ) 10: 1,准确性和标准偏差在20%按我指南(gydF4y2Ba35gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

2.7.3。准确度和精密度gydF4y2Ba

盘中准确度和精密度进行了质量控制的分析物浓度的0.25,0.5,1和2gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}硫酸氢氯吡格雷、0.5、1、2和4gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}羧酸的代谢物,0.2,0.3,和2.5gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}在复制(阿托伐他汀gydF4y2Ba)。Interday准确度和精密度都实现相同的质量控制在三个不同的日子。qc使用校准曲线进行了分析。准确性(表示为恢复)和精密(表示为相对标准偏差)不应偏离±15%的名义浓度。gydF4y2Ba

第2.7.4。稳定gydF4y2Ba

(1)短期稳定gydF4y2Ba。稳定的氯吡格雷羧酸代谢物和阿托伐他汀在人类血浆评估浓度为0.12和4gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}对氯吡格雷羧酸代谢物和0.5和2.5gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}阿托伐他汀在每个浓度三个复制在环境温度为6小时(短期稳定),然后处理和分析相同的样本程序。分析物的稳定性是决定对一个刚做好股票的解决方案。浓度的稳定是一致的,如果偏差在±15%。gydF4y2Ba

(2)长期稳定gydF4y2Ba。三个整除的低和高未加工的质量控制(0.12和4gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}对氯吡格雷羧酸代谢物和0.5和2.5gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}阿托伐他汀)保持在−20°C 30天。分析物的浓度,计算每个存储段时间后使用校准曲线,从刚做好的样品在相同的运行分析。样品被认为是稳定的,如果百分比浓度的变化在±15%。gydF4y2Ba

2.7.5。鲁棒性gydF4y2Ba

该方法鲁棒性是由评估色谱条件的微小变化的影响,如流量(±0.1gydF4y2Ba毫升·敏gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba})和pH值(±0.2单位)。流动相的流速是1毫升·分钟gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}从0.9到1.1毫升·敏和修改gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}。缓冲溶液的pH值为2.6,修改为2.8。gydF4y2Ba

2.7.6。系统适用性测试(SST)gydF4y2Ba

最重要的SST参数进行高效液相色谱分析的分辨率,保留时间,列效率(N),拖尾因子(T) SST限制了高效液相色谱法解决根据国际指导方针建议(决议> 2.0,尾矿系数≤2.0,平皿计数> 2000)。数据从六个复制注射用于海温和总结。色谱系统纳入符合系统适用性要求。gydF4y2Ba

2.7.7。降解研究gydF4y2Ba

根据我Q2B验证分析方法:方法,迫使退化进行了研究在不同压力条件下盐酸1 M, 1 M氢氧化钠,5% HgydF4y2Ba_2gydF4y2BaOgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba60°C三个小时。gydF4y2Ba

(1)对降解产物的制备过程gydF4y2Ba。股票的解决方案的硫酸氢氯吡格雷和阿托伐他汀钙在准备100的浓度gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}。10毫升的硫酸氢氯吡格雷和阿托伐他汀钙股票20解决方案分别与10毫升的1 M盐酸混合,1 M氢氧化钠,5% HgydF4y2Ba_2gydF4y2BaOgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba。溶液被加热在60°C三个小时,1 M氢氧化钠和1 M盐酸中和酸性和碱性降解,分别。从合成解决方案1毫升与甲醇的最终浓度稀释25gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}和20gydF4y2BaμgydF4y2BaL是注入系统。gydF4y2Ba

2.8。gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba应用程序gydF4y2Ba

同时量化的方法已经应用氯吡格雷,羧酸代谢物,和阿托伐他汀在病人的血浆后口服75毫克的氯吡格雷和20,40,80 mg阿托伐他汀在他们与这两种药物维持治疗。研究协议是医学伦理委员会的批准和药房从克拉约瓦大学,罗马尼亚,和患者签署知情同意。根据赫尔辛基宣言进行了研究和良好的临床实践指南gydF4y2Ba36gydF4y2Ba]。三个病人(两个男性和一个女性80年,60岁和53岁)被列入研究范围。收集血液样本,为0.25,0.5,1、3、6、9和12 h后政府的药物。整除的5毫升的血液被卷入一个EDTA管和等离子体由离心10分钟4500 rpm,储存在−20°C。gydF4y2Ba

2.9。药代动力学计算gydF4y2Ba

数据来自7个采样时间后12 h内多个口服药物摄入量被用来计算药代动力学参数:吸收速率常数,gydF4y2Ba,时间的峰值浓度,gydF4y2Ba最大血浆浓度,gydF4y2Ba消除速率常数,gydF4y2Ba,曲线下的面积为零gydF4y2Ba(gydF4y2Ba),曲线下的面积从0到时间无穷(gydF4y2Ba)。通过数学计算药代动力学参数来源于数据(gydF4y2Ba37gydF4y2Ba]。整个吸收过程被认为是一个一阶的过程,一个室药代动力学模型。血浆药物浓度与时间的斜率情节-gydF4y2Ba。终端斜率然后back-extrapolated浓度轴。吸收速率常数,gydF4y2Ba,估计通过应用残差的方法。消除半场(gydF4y2Ba)估计gydF4y2Ba。峰值浓度,gydF4y2Ba,是通过设置的变化率gydF4y2Ba(血浆浓度)与时间,gydF4y2Ba为零:gydF4y2Ba。曲线下的面积从0到时间gydF4y2Ba(gydF4y2Ba),gydF4y2Ba是最后一个可测量的时间,由梯形积分法计算。曲线下的面积从0到时间无穷(gydF4y2Ba)计算总计gydF4y2Ba来gydF4y2Ba,在那里gydF4y2Ba是最后一个可测量的浓度。gydF4y2Ba

3所示。结果与讨论gydF4y2Ba

3.1。方法验证gydF4y2Ba

3.1.1。线性gydF4y2Ba

峰面积与浓度的校准情节是线性范围的调查,0.008 - 2gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}氯吡格雷,0.01 - 4gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}羧酸的代谢物,-2.5和0.005gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}阿托伐他汀。回归方程和相关系数如下:gydF4y2Ba,gydF4y2Ba硫酸氢氯吡格雷,gydF4y2Ba,gydF4y2Ba对氯吡格雷羧酸代谢物gydF4y2Ba,gydF4y2Ba阿托伐他汀,分别以布洛芬为内部标准。gydF4y2Ba

3.1.2。检测和量化的极限gydF4y2Ba

硫酸氢氯吡格雷的LOD和LLOQ 0.003gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}和0.008gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}0.004,而羧酸的代谢物gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}和0.01gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}。阿托伐他汀的LOD和LLOQ 0.002gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}和0.005gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba},分别。gydF4y2Ba

3.1.3。准确度和精密度gydF4y2Ba

准确度和精密度结果总结在表gydF4y2Ba2gydF4y2Ba。盘中分析,准确性QS样本表示为复苏的96 - 98%的硫酸氢氯吡格雷,94 - 98%的代谢物,和阿托伐他汀90 - 98%,分别和interday测定96 - 97%氯吡格雷,94 - 98%的代谢物,并对阿托伐他汀90 - 99%。在盘中精度的情况下,相对标准偏差(RSD %)在硫酸氢氯吡格雷的范围2.03 - -4.17%,-4.26% - 1.02的代谢物,和阿托伐他汀的1.03 - -5.55%。interday试验,结果显示范围2.08 - -8.33%的硫酸氢氯吡格雷,1.04 - -2.12%的代谢物,和阿托伐他汀的0.40 - -6.90%。gydF4y2Ba

3.1.4。稳定gydF4y2Ba

获得的结果在短期和长期稳定的氯吡格雷羧酸代谢物和阿托伐他汀是显示在表gydF4y2Ba3gydF4y2Ba。氯吡格雷的复苏羧酸代谢物浓度介于97%和92之间的0.12和4gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}在短期测试和92和96%在长期稳定性研究在同一浓度。阿托伐他汀的复苏短期研究是在94 - 96%浓度的0.5和2.5gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba}长期稳定性研究和92 - 96%。gydF4y2Ba

3.1.5。鲁棒性和系统适用性测试gydF4y2Ba

硫酸氢氯吡格雷和阿托伐他汀钙的测定可变性是总结表gydF4y2Ba4gydF4y2Ba在故意不同色谱条件(流速和pH值)。系统适用性测试结果展示在表gydF4y2Ba5gydF4y2Ba。gydF4y2Ba

3.1.6。特异性gydF4y2Ba

梯度法允许最优分离矩阵分析物的干扰。无毒人力分析了等离子体十许多内生的存在。两个提取内源性化合物的保留时间2.673分钟,13.582分,分别,但他们没有洗提的同时分析物。没有明显的干扰峰出现在分析物的保留时间。氯吡格雷羧酸代谢物的保留时间,阿托伐他汀,IS-ibuprofen,和硫酸氢氯吡格雷是9.663,10.998,11.802,和12.682分钟。空白血浆的色谱,飙升等离子体和一个病人接受75毫克的氯吡格雷和40 mg剂量阿托伐他汀在40分钟后呈现在图gydF4y2Ba2gydF4y2Ba。gydF4y2Ba

3.1.7。降解研究gydF4y2Ba

纯硫酸氢氯吡格雷和阿托伐他汀钙的色谱图gydF4y2Ba3gydF4y2Ba。观察显著降解酸性(38%,gydF4y2Ba分钟),基本(30%,gydF4y2Ba),氧化为硫酸氢氯吡格雷(20%)条件呈现在图gydF4y2Ba4gydF4y2Ba,而对于阿托伐他汀钙在酸性和碱性条件下无显著退化观察(图gydF4y2Ba5gydF4y2Ba)。表gydF4y2Ba6gydF4y2Ba总结了分析物复苏后应力退化和退化的保留时间产品硫酸氢氯吡格雷和阿托伐他汀钙。降解产物的分离从父母峰值表明,该方法稳定性指示。gydF4y2Ba

3.2。gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba研究gydF4y2Ba

方法的适用性已经证明在药代动力学研究中,接受抗血小板治疗的患者与75毫克的氯吡格雷和阿托伐他汀在不同浓度(20、40和80毫克)。药代动力学参数总结在表gydF4y2Ba7gydF4y2Ba。氯吡格雷的平均血浆浓度时间曲线,其羧酸代谢物,阿托伐他汀患者在三个不同的给药方案如图gydF4y2Ba6gydF4y2Ba。等离子体的前体药物氯吡格雷超出3 h政府低于量化限制(LLOQ 0.008gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba})梯度法和等离子体水平的羧酸代谢物远高于氯吡格雷。阿托伐他汀达到低血浆的浓度由于其低生物利用度但提出增加半衰期时间根据其多种代谢物和原生质的蛋白结合的比例98%。这些结果与患者个体内的变化也直接相关假设的长时间耐多药治疗。gydF4y2Ba

阿托伐他汀对氯吡格雷药物动力学的影响是有限的患者纳入研究为了停止他们共同基于药物之间的相互作用。值得一提的是,小的药物动力学的变化可能引起主要心血管高危患者的影响。尽管氯吡格雷被批准以来长时间在市场上大量的临床研究,这种药物的药物代谢动力学情况仍然是完全由科学界未揭露的。gydF4y2Ba

4所示。结论gydF4y2Ba

一个敏感的、具体的和可再生的rp方法的开发和验证的同时分析硫酸氢氯吡格雷及其羧酸代谢物与阿托伐他汀临床样本。方法已成功申请中分析物的含量测定等离子体75 mg患者氯吡格雷和20,40岁,和阿托伐他汀80毫克每日重大敏感氯吡格雷羧酸代谢物(LLOQ = 0.01gydF4y2BaμgydF4y2Bag·毫升gydF4y2Ba^{−1gydF4y2Ba})。提取分析物的血清取得在一个一步蛋白质与乙腈沉淀,改善复苏范围96 - 98%的氯吡格雷,94 - 98%的氯吡格雷羧酸代谢物,分别和阿托伐他汀90 - 99%。提出了梯度程序开始时为了克服基体效应的分析和氯吡格雷的亲密保留时间和阿托伐他汀。gydF4y2Ba

利益冲突gydF4y2Ba

作者宣称没有利益冲突有关的出版。gydF4y2Ba

作者的贡献gydF4y2Ba

在准备这篇论文所有作者都有一个平等的贡献。gydF4y2Ba

确认gydF4y2Ba

Adela-Maria Spiridon是支持的项目“卓越计划的多学科的博士和博士后研究慢性疾病,”133377年POSDRU / 159/1.5 / S,和支持的部门运营项目人力资源开发,2007 - 2013年从欧洲社会基金资助。gydF4y2Ba

补充材料gydF4y2Ba

引用gydF4y2Ba

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