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智胜谢,Qundi Liu Zhikun Liang Mingqian赵,自汉代Yu Depo杨Xinjun徐, ”挥发组分的GC / MS分析提取的不同的方法Exocarpium Citri茅”,分析方法在化学杂志》上, 卷。2013年, 文章的ID918406年, 8 页面, 2013年。 https://doi.org/10.1155/2013/918406
挥发组分的GC / MS分析提取的不同的方法Exocarpium Citri茅
智胜谢
,1,2
Qundi刘,1,2
Zhikun梁,1,2
Mingqian赵,1,2
自汉代玉,1,2
Depo杨,1,2
和
Xinjun徐1,2
1制药科学学院、广州大型高等教育中心,中山大学,东外环路路132号,510006年广州,中国
2广东高级中医技术研究中心,510006年广州,中国
文摘
挥发性成分Exocarpium Citri茅(ECG),分别由三种方法提取的,也就是说,蒸汽蒸馏(SD)、顶空固相微萃取(HS-SPME)和溶剂萃取(SE)。共有81种化合物被确定通过气相色谱-光谱法包括77 (SD), 56 (HS-SPME),分别和48 (SE)的化合物。尽管提取方法,萜烯(39.98 ~ 57.81%)心电图的主要挥发性成分,主要germacrene-D、柠檬烯、2、6、8、10、14-hexadecapentaene, 2、6、11日15-tetramethyl、(E, E, E)和反式石竹烯。比较了三种方法提取的概要文件和财产。SD相对给整个剖面的波动通过长期提取心电图;SE启用低波动性、高分子量化合物的分析却失去了一些挥发物成分;HS-SPME生成令人满意的提取效率,给类似的结果的SD在分析水平,消耗更少的样本数量,缩短提取时间,简单的过程。尽管SD和SE挥发物被视为传统制备萃取技术在小批量和大规模HS-SPME加上GC / MS可能是有用的和专用的挥发组分的快速提取和定性分析从药用植物的分析水平。
1。介绍
Exocarpium Citri茅(ECG Huajuhong在中国),干生或成熟的水果皮植物等或植物等var. tomentosa长的矮,是一个著名的中国传统医学(1]。因为它已经被证明具有清除热量和咳痰的影响,调节至关重要的能量的流动,和刺激食欲,心电图已经用于治疗咳嗽、消化不良、恶心、喉咙痒,等等,这使得它广泛应用于实践在中国很长一段时间(2- - - - - -4]。心电图的植物“tomentosa”(Maojuhong中文)被公认是更好的质量比植物(l)在中国等(Guangjuhong)。心电图从Huazhou城市,广东省的植物来源植物“tomentosa”,通常被认为是真正的药材(5]。
心电图报告的主要植物化学的成分为挥发油、黄酮类、香豆素类、多糖(6- - - - - -8),其中挥发性成分研究全球和心电图的精油是广泛用作食品和调味剂的芳香味道掩盖药物在制药行业的令人不快的味道9]。烯烃是心电图的主要挥发性化合物通常包括柠檬烯、蒎烯、月桂烯(10]。的挥发组分的心电图中起着重要作用的药材质量。例如,柠檬烯,心电图的主要成分之一,具有体外抗菌、抗炎、化痰的活动(11]。
传统上,挥发性成分的提取心电图主要依靠蒸汽蒸馏(SD)和溶剂萃取(SE)分析和制备水平。然而,有罕见的研究从心电图挥发组分的比较不同的提取方法。创新性的固相微萃取(SPME)更快速、敏感、无溶剂相比,传统的方法。萃取被Pawliszyn教授和他的同事首次在1990年代和广泛采用空气、水、土壤和食品分析(12]。通常,分析物提取direct-immerse吸收气态或液态样品的固相微萃取(DI-SPME)或吸附在顶空固相微萃取(HS-SPME)和薄的聚合物涂层被固定在固体表面的纤维注射针(13]。因为HS-SPME是无污染的纤维与DI-SPME相比,它最终被选为与SD和SE。气相色谱分析-质谱法(GC / MS)使化合物鉴定通过比较得到的质谱分析物与真实的标准国家标准与技术研究院(NIST)和比较保留指数(RIs)与前一个可用的研究报道。
工作表示这是旨在填补空白的领域通过提取挥发性成分的分析心电图SD,单独HS-SPME和SE方法。GC / MS是用来确认化合物提取的样本。这将显示他们能提取多少挥发组分,因此帮助评价提取效率除了样本数量和提取时间。
2。材料和方法
2.1。材料和试剂
心电图(Huazhou,广东,中国)从Caizhilin药房购买,被许博士身份验证。是地面一定粒度(60目)的跟踪方法。无水硫酸钠是由广州化学试剂厂(广州)。无水乙醇、乙醚- - - - - -己烷是分析纯,购自大茂化学试剂(天津)工作。
2.2。蒸汽蒸馏过程
36克ECGpowder悬浮在300毫升的水通过蒸汽蒸馏收集挥发油5 h根据中国药典附录XD14]。一点一滴黄绿色稀释1毫升的石油己烷,通过添加适当的无水硫酸钠脱水。解决方案被离心5分钟获得样品挥发油。
2.3。HS-SPME过程
二乙烯基苯/ carboxen /聚二甲硅氧烷(DVB /汽车/ PDMS, 50/30μ米),这是专为与广泛的极性分析物(适用于C2- c20.(范围)15,16),购买从Supelco(美国宾夕法尼亚州Bellefonte Supelco公园)。附加在萃取持有人(Supelco)和用于实现吸收挥发组分尽可能全面的心电图进行定性分析。纤维被插入到条件之前使用GC注射口在280°C以下2 h 1毫升/分钟的气体流。心电图粉(0.2克)和无水硫酸钠(0.2 g)被混合在一个15毫升平底顶空瓶是密封的灰色丁基顶部空间塞和20毫米单褶帽使用卷缩机。萃取纤维被,暴露在瓶子的顶部空间挥发组分的吸收,与瓶加热持续40分钟80°C。最后,纤维被从瓶和分析物被暴露眠纤维注射口的GC / MS在250°C 2分钟。
2.4。乙醚萃取
3克的心电图粉提取使用乙醚(1:10 w / v)三次(每次15分钟)的协助下超声波。获得的浑浊溶液过滤,滤液的溶剂被旋转蒸发减少压力。然后浸膏与1毫升无水酒精稀释:己烷(1:1,v / v)和过滤是0.22μm膜过滤器。1μL后续滤液被注入的GC / MS进行分析。
2.5。气相挥发组分分析和识别
挥发物的分析心电图进行了GC / MS仪器(热电子公司(美国)配备DSQ Finnigan跟踪和电子(EI)离子源的影响。分析物的分离在DB-5MS毛细管柱(30 m×0.25毫米×0.25μm;美国安捷伦科技公司)与苯亚芳基聚合物涂层。烤箱温度程序如下:50°C最初1分钟,增加到145°C在5°C /分钟,增加到175°C 7°C /分钟,增加到195°C在5°C / min,然后增加到250°C 3°C /分钟;250°C维持10分钟。高纯氦(99.999%)是载气设置以恒定流量的1毫升·分钟−1。注射口,传输线和离子源的温度都是设定在250°C。70电动汽车采用EI和质量扫描范围从50到650集阿姆河在全扫描。注射是由分割模式的分流比10:1。溶剂延迟时间设定为3分钟对所有样品所产生的不同的方法。Xcalibur 2.0工作站被用来处理数据。
最不稳定成分提取心电图被确定通过比较获得的RIs和比较分析物的质谱与NIST的真实标准库(2005)和质谱发表之前(7,10,17]。RIs测定分析解决方案包含正常烷烃的同源系列(C7- c22),然后计算描述van Den Dool和Kratz18]。峰地区的所有组件的计算是通过Xcalibur 2.0,和相对数量(RAs)的挥发性化合物峰面积比值的基础上计算。
3所示。结果与讨论
3.1。在心电图分析挥发性化合物
提取的挥发性化合物在心电图样品HS-SPME,其次是解吸和与gc - ms分析。心电图也提取的挥发性化合物SD和SE方法。典型的总离子色谱图提取获得的SD, HS-SPME, SE是图所示1并表示挥发物成分不同方法之间的差异。共有81种化合物提取SD, HS-SPME, SE是识别和列在表中1的挥发性化合物,RIs和RAs心电图。详细表177、56和48个化合物被SD-GC /女士,HS-SPME-GC /女士,和SE-GC / MS方法,分别和HS-SPME-GC / MS方法共享56和34个化合物与SD-GC /女士和SE-GC / MS,分别。发现挥发物的家庭心电图中萜烯、醇类、酯类、有机酸、酮类和醛类的内容通过不同的方法被描述在图2。尽管这三个方法,萜烯构成最主要的化工集团在心电图挥发物(39.98 ~ 57.81%)。值得注意的是,germacrene-D(心电图挥发物最富有的萜类化合物)在心电图占有更大比例,与先前的报道[相比11,19]。二萜烯、醇类是另一个丰富的心电图常见类挥发物通过SD和HS-SPME,而酸在乙醚提取第二个大部分组成。如表所示1和图2,SD被证明是有效地提取萜烯(57.81%)和醇(19.61%)、相对含量高的两个家庭心电图;SE导致相对高百分比的萜烯(39.98%)、酸(16.97%)、酯类(14.82%)、醇类(14.76%)以乙醚为溶剂。在HS-SPME,挥发物主要使用DVB /汽车/ PDMS光纤是萜烯(55.47%)和醇(29.29%)。三种提取方法的结果表明,心电图的主要挥发物是萜烯、醇、酸、酯。
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使用一系列同源的保留指数的计算n烷烃(C7- c22)。 b挥发性化合物的识别是通过比较MS谱和RIs的组件在NIST心电图与真实的标准库(2005)和先前的研究。在MS谱的比较,SI和RSI的条件应该是超过800人。 c峰面积归一化的结果。 d拿拿淋:不是可用的。 |
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(一)
(b)
(c)
SD提取物(收益率:0.89%;黄绿色石油)显示比得到更高比例的萜烯和SE,不仅在类别(38),但也相对量(57.81%)。Germacrene-D(13.28%)和柠檬烯(11.77%)是最丰富的两个2、6、8、10、14-hexadecapentaene, 2、6、11日15-tetramethyl -、(E, E, E) - (6.54%),δ- - - - - -杜松烯(4.73%)、γ萜品烯(3.75%)、γ- - - - - -muurolene (2.87%),反式石竹烯(2.63%)、和β月桂烯(2.63%)。SD包括的主要醇反式-橙花叔醇(4.03%)、香叶基芳樟醇(3.54%)、和α-cadinol (2.61%)。酸,主要是棕榈酸(4.79%),可以有效地提取了SD。
作为一个温和的和简单的提取方法,SE与乙醚也进行了成分的提取从心电图,产生0.11克黄绿色粘性集中。SE的提取、萜烯仍最丰富的成分,但更在类别(17)和相对量(39.98%)比其它两种方法获得的,这可能是由于蒸发步骤SE过程中可能导致的损失的最不稳定的组件。但是,某些高分子量化合物(主要是酸)并未导致香气,如脂肪酸、提取大量的(16.97%)。在挥发性成分越少,棕榈酸的相对量达到11.7%,紧随其后α罂酸(4.14%)。
HS-SPME提取的挥发组分的主要组件是萜烯(55.47%),由SD在按照这些类别和百分比。HS-SPME主要包含germacrene-D的萜烯(11.36%)、2、6、8、10、14-hexadecapentaene, 2、6、11日15-tetramethyl、(E, E, E) -(8.49%)、柠檬烯(7.49%)、反式石竹烯(5.94%),等等。HS-SPME-GC /女士使大多数气味活性化合物的检测心电图和表示是更丰富醇(29.29%)比通过SD(19.61%)和SE (14.76%)。的醇提取HS-SPME丰富反式橙花叔醇(9.9%)、terpinen-4-ol(3.42%),和香叶基芳樟醇(3.31%)。然而,相比,HS-SPME可怜的能力在提取酸(1.06%),因为穷人的波动性和亲和力的纤维化合物。
正如上面提到的,在所有的化合物,germacrene-D, 2、6、8、10、14-hexadecapentaene, 2、6、11日15-tetramethyl、(E, E, E),反式橙花叔醇,反式-石竹烯总量中占了相当大比例(表示为RA %)。图3显示一个明确的比较RA %值的八个目标化合物提取的三个方法。目前HS-SPME-GC / MS方法获得更高的RA %反式-橙花叔醇,反式-石竹烯但低RA germacrene-D %值和香叶基芳樟醇。一方面,这是由于纤维的亲和力的差异这些化合物。另一方面,HS-SPME是一个相对温和的提取方式特别是那些热敏感化合物可部分或完全失去了在长期通过SD加热。HS-SPME之间的比较结果,SD,和SE方法表明,HS-SPME更好更多的热敏感的挥发性化合物,对挥发性化合物SD, SE高分子量化合物。总的来说,获得的资料HS-SPME被SD类似,这表明HS-SPME表现好的亲和力心电图的主要挥发性成分。
3.2。比较三种方法提取参数
除了大量的挥发组分提取通过上述三种方法(即。,SD,HS-SPME,和SE),other parameters in terms of extraction time, solvent volume, and economic cost about the three extraction methods were also compared. The results were detailed in Table2。购买,尽管它是相对昂贵的纤维,HS-SPME呈现明显优于其他两种方法定性分析在分析水平。首先,HS-SPME显示重大环境友好而SD和SE自无溶剂。然后,HS-SPME显然是快速和高效(40分钟),而5 h所需SD和SE的45分钟。最后但不是最少,所用的植物材料的数量远小于HS-SPME分析的SD(36克)和SE (3 g)。上述结果表明,HS-SPME有显著优势,植物材料和溶剂消耗快速提取和分析,相对于其他两种方法。然而,HS-SPME不如SD和SE定量分析自高不可攀的收益率从心电图粗提取液。
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不可用。 b度的经济成本被“+”表示。 |
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作为一个最经典的萃取技术精油、SD没有歧视最挥发物的提取,尽管它需要很长时间才能完成的过程。此外,与HS-SPME相比,SD和SE更加灵活和胜任制备提取在小批量和大规模。
4所示。结论
在这项研究中,三种萃取技术(SD、HS-SPME和SE)加上GC / MS比较而言挥发组分的种类和内容提取心电图和其他提取参数。77、56和48挥发组分,主要属于萜烯、醇、酸、酯,分别提取并成功地识别。Germacrene-D和柠檬烯是两个主要挥发物在心电图。三种提取方法中,SD给了一个相对完整的挥发物在心电图长期开采;SE启用低波动性的分析和高分子量的化合物。他们两个都胜任挥发物的提取分析和制备水平。HS-SPME可以有效和快速提取原则挥发组分从心电图分析水平,提供类似的资料通过SD挥发物。研究表明,HS-SPME适合快速挥发组分的定性分析心电图。这种技术可用于药用植物的常规质量控制分析在分析水平。
确认
本研究在经济上支持的工业大学研究合作项目从广东省科学技术厅(没有。2010 b090400533);和中国国际科技合作项目(没有。2009 dfa31230)。
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