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霍尔姆，尼尔森，埃里克森， ＂以丁香酮达嗪为显色底物的发酵样品中重组真菌漆酶活性的自动比色法测定"，化学分析方法杂志， 卷。20.， 文章的ID913298， 5 页面， 1998． https://doi.org/10.1155/S1463924698000261
以丁香酮达嗪为显色底物的发酵样品中重组真菌漆酶活性的自动比色法测定
摘要
建立了一种自动测定重组嗜热菌漆酶(rMtL)活性的Cobas Fara方法。显色底物为紫丁香酮。在好氧条件下，rMtL催化紫丁香酮氧化形成四甲氧基偶氮双亚甲基醌。在530 nm下动态测定了显现的紫色作为酶活性的表达，rMtL是一种非常敏感的氧化还原酶，因此必须仔细控制许多因素，以获得可靠的分析分析。为了稳定rMtL，在酶稀释培养基中加入PEG 6000。此外，Triton X-I00也包含在酶培养液中。对分析条件和工艺条件进行了优化，得到了精密度、灵敏度和速度较好的分析方法。米凯利斯-曼腾常数，K米，测定为22μM紫丁香醛达嗪。LOQ确定为0.010 Uml－1， LOD为0.0002 Uml－1酶稀释曲线的分析范围为0.01 ~ 0.044 Uml－1重复性为1.9%，重复性为3.1%。验证方法的稳健性，rMtL分析在下降范围内最敏感的因素为:孵育温度、Triton X-I00浓度、孵育缓冲液的摩尔浓度和pH，最后是紫丁香胺的浓度。
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