抗菌素的属性提取的印度对人类致病性细菌地衣

文摘

上下文。松萝ghattensisg . Awasthi(松萝科)特有的灌木状的地衣生长繁茂地在印度西高止山脉北部,它还包含地衣酸作为主要的化学测试和对一些人类致病菌。客观的。探索抗菌性能松萝ghattensis对一些人类致病菌。材料和方法。地衣中提取在丙酮、甲醇和乙醇。在体外最初的抗菌活性进行了测试Kirby-Bauer证实了光盘技术扩散方法和最低抑制浓度使用汤采用方法按照NCCLS指南。结果。乙醇提取是最有效的反对蜡样芽胞杆菌和铜绿假单胞菌抑制区29.8±0.6毫米和12.3±0.5毫米直径在0.2毫克/毫升的浓度。丙酮和甲醇提取证明几乎类似的活动金黄色葡萄球菌和抑制区为24.6±0.5,24.7±0.4毫米。只显示活动对甲醇提取物粪链球菌13.5±0.8毫米。MIC值表示反对金黄色葡萄球菌和粪链球菌是6.25μg / mL, 25岁μ克/毫升,而反对蜡样芽胞杆菌和铜绿假单胞菌,麦克风是3.125计算μ克/毫升和200年μ分别g / mL。结论。现在的研究表明这种地衣对的相对较高的活动不仅克(+)但也明显对克(−)细菌。这表明地衣可能拥有丰富有效的抗菌药物。

1。介绍

药用植物是众所周知的天然来源自古以来治疗各种疾病。地衣是最迷人的生物在这个星球上。地衣不是一个单一的有机体的大多数其他生物,而是这是一个组合的两种生物紧密生活在一起。真菌形成菌体或覆以地衣基质,可能包含在所有地衣次生代谢物特征(1]。地衣是有价值的植物资源,用作药品、食品、饲料、染料香水、香料,用于各种各样的目的。地衣植物相当差的附近的工业区和大城市2),如地衣对各种空气污染非常敏感。因此,这些生物被用作空气污染监控(3]。具体,甚至极端条件的存在,经济增长缓慢,长时间(最大一生跨越了几千年)符合他们的丰富保护代谢物对不同的物理和生物的影响(4]。地衣药用的各个时代,等冰岛衣属多毛(l)课时。(Parmeliaceae),肺衣属pulmonaria(Schreb)。Hoffm。(Lobariaceae)据报道是有效治疗肺结核(5]。

地衣在医学的使用是基于事实,它们包含独特而多样的生物活性物质,主要以抗菌行动。因为显著的抗菌活性的次生代谢产物,地衣,种,和维管植物吸引研究者的关注随着新生物活性物质的重要来源6- - - - - -9]。抗生素耐药性的集约使用抗生素已经选择因素和促进耐药微生物繁殖的传播。地衣代谢物种类繁多的生物行为包括抗生素、抗真菌的,抗病毒,抗炎,镇痛,退热剂,抗增殖和细胞毒性的影响10- - - - - -15]。虽然大约8%的陆地生态系统由地衣和超过20000种地衣物种分布在世界各地,他们的生物活性和生物活性化合物在很大程度上仍未知的(16]。

松萝ghattensis是一个流行的灌木状的地衣生长在不同的树木和灌木在印度西高止山脉北部。大部分的地衣物种属的松萝包含地衣酸的主要化学成分是传统上用于上呼吸道感染,和应用于治疗皮肤表面感染或外部溃疡。地衣酸已被用作人类乳头状瘤病毒(HPV)治疗和口腔卫生代理,有限的有效性。根据这些事实,在这项研究中,丙酮的抗菌活性,甲醇和乙醇提取物松萝ghattensis研究了在体外与测试微生物,其中一些促进疾病在人类,动物,植物,甚至产生毒素,引起食品变质。

2。材料和方法

2.1。微生物

总6个细菌,三个革兰氏阳性(金黄色葡萄球菌(写明ATCC 25923),粪链球菌(写明ATCC 33186)蜡样芽胞杆菌(写明ATCC 14579))和三个革兰氏阴性(大肠杆菌(写明ATCC 25922),铜绿假单胞菌(写明ATCC 29853)鼠伤寒沙门氏菌(写明ATCC 13311)),被用来评估测试样品的抗菌性。这些细菌在营养琼脂板保持在4°C,分别。用于实验,生物亚文化在血琼脂培养基和MacConkey的媒介。

2.2。地衣物质

的植物材料松萝ghattensis收集在2009年12月从Lingmala森林面积,Mahabaleshwar,萨达拉地区,马哈拉施特拉邦,印度北部西山路地区海拔1200至1340米。一个凭证标本保存在国家植物研究所的植物标本,勒克瑙()库工作小组将会忠实地。

2.2.1。地衣物质的提取

地衣样本洗清除残骸;空气干燥,粉粉,并存储在一个无菌玻璃瓶子在冰箱里。10 g的部分已筛粉加入100毫升溶剂(丙酮、乙醇、甲醇)在室温下,离开了三天。粗提取液是由减压,其次是通过棉布过滤,并进一步与绘画纸1号滤纸过滤,获得一个清晰的滤液。滤液被进一步纯化膜过滤器使用0.45μ孔隙大小的过滤器。提取被蒸发在减压干燥,各自重新溶解在溶剂达到所需的浓度为0.1毫克/毫升和0.2毫克/毫升抗菌筛查。这些提取保持在4°C到使用。

2.3。制备抗生素盘

个人粗提取物溶解在各自的溶剂。两种不同浓度的提取,0.1毫克/毫升和0.2毫克/毫升,用于准备盘。绘画纸滤纸与直径6毫米盘用于光盘做准备。每个盘都浸满10μL地衣的粗提取液,使溶剂蒸发之间的应用程序和离开光盘上的地衣中提取溶剂。这些刚做好的光盘用于抗菌活性的测定。

2.4。抗菌活性测定

抗菌药物敏感性试验所选的病原体是由阀瓣扩散法使用Kirby-Baeur技术(17),按NCCLS推荐(18]。所有的测试进行穆勒辛顿琼脂板上。暂停微生物培养物(0.5麦克法兰)接种的整个表面穆勒辛顿琼脂培养皿中媒体用无菌棉签棒。直径6毫米的无菌盘浸满地衣中提取解决方案(0.1毫克/毫升和0.2毫克/毫升)并放入培养的穆勒辛顿琼脂板上。接种板块在37°C孵化24小时。

第二天,盘子被测量在每个阀瓣的抑制区。细菌的抑制区直径是记录在毫米。纯丙酮、甲醇和乙醇作为消极的控制按照殉死和乔希,201119),而商业庆大霉素、头孢曲松钠作为积极的控制按照Owolabi et al ., 200720.]。庆大霉素是作为积极控制革兰氏阳性细菌和头孢曲松钠用于革兰氏阴性细菌。试验在一式三份,检查控制面板。确定地衣的情感作用原油提取在不同的卷,两种不同浓度的地衣原油提取每个纸上被盘,每个培养皿。

2.5。最低抑制浓度

最低抑制浓度(MIC)采用微量稀释法粗提物的技术在穆勒辛顿汤(MHB),根据美国国家临床实验室标准委员会指南(21]。一系列的两倍稀释浓度从100年μ0.195 g / mLμ克/毫升的甲醇提取物用于实验金黄色葡萄球菌,美国粪,b的仙人掌。为铜绿假单胞菌,没有做,因为没有稀释活动记录200以下μ克/毫升。两倍稀释的提取和组件准备在穆勒辛顿汤(MHB)细菌培养。孕生准备在同一介质密度调整到0.5麦克法兰浊度标准集落形成单位,和稀释1:10肉汤采用过程。然后,100年μL稀释提取物和100μL的细菌悬浮液在96年被分发无菌的微量滴定板。微量滴定板在37°C和孵化麦克风决心孵化24小时后。麦克风决心通过建立可见微生物的增长。稀释的边界没有任何可见的增长被定义为麦克风测试微生物在给定的浓度。未经处理的细菌被视为积极的控制和MHB作为消极的控制。所有实验进行了一式三份。

2.6。解释的结果

纸片扩散试验的结果表示为平均数±标准差在每个测试三个复制。

3所示。结果

3.1。阀瓣扩散分析

治疗后已经接种过的盘子被允许增加申请24小时,丙酮提取物和乙醇提取物美国ghattensis显示活动反对金黄色葡萄球菌、蜡样芽胞杆菌,铜绿假单胞菌虽然没有发现活动粪链球菌、大肠杆菌,鼠伤寒沙门氏菌。

甲醇提取物的浓度(0.1毫克/毫升和0.2毫克/毫升)显示活动反对所有的革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌。没有活动记录大肠杆菌,鼠伤寒沙门氏菌。的丙酮提取物抑制增长b的仙人掌意味着区为23.9±1.1毫米(0.2毫克/毫升浓缩的。),而乙醇提取的地衣的效果最大盘子接种蜡样芽胞杆菌平均29.8±0.6毫米的抑制区0.2毫克/毫升的浓度。丙酮和甲醇提取物显示出平等的抑制作用金黄色葡萄球菌平均抑制区24.6±0.5毫米和24.7±0.4毫米0.2毫克/毫升浓度,分别。

甲醇提取显示可怜的活动美国粪抑制区8.3±0.5毫米0.1毫克/毫升的浓度在0.2毫克/毫升浓度显示区13.5±0.8毫米的抑制。乙醇提取物显示出更大的影响铜绿假单胞菌抑制区为12.3±0.5毫米0.2毫克/毫升的浓度相比dia丙酮(8.4±0.6毫米。区)methanolic提取(8.7±0.4毫米)。尽管提取并不那么有效商业抗生素庆大霉素和头孢曲松钠,他们有强大的抗菌活性(表1)。

3.2。最低抑制浓度

的麦克风值提取相关测试菌株不同在25到3.125之间μg / mL的革兰氏阳性细菌。测量的MIC值提取金黄色葡萄球菌是6.25μ克/毫升时,麦克风与价值蜡样芽胞杆菌被发现是3.125μ克/毫升。粪链球菌也显示25μg / mL麦克风的价值。对铜绿假单胞菌MIC值指出,是200年μ克/毫升。积极控制显示出增长的细菌和消极的控制是明确的和不显示任何生长的细菌(表2)。

4所示。讨论

抗菌效果的强度取决于提取的类型,它的浓度和微生物测试。的测试浓度三个提取物所有细菌除了展示活动美国粪,只有甲醇提取物显示跟踪活动。对铜绿假单胞菌0.2毫克/毫升浓度展示活动,0.1毫克/毫升浓度是无效的。

丙酮和甲醇提取物显示出几乎相同的活动S.aureus而乙醇提取被发现更有效的对抗b的仙人掌和铜绿假单胞菌。的原因不同灵敏度的细菌可以在不同透明度的细胞壁22]。革兰氏阳性细菌的细胞壁由肽聚糖和磷壁酸(胞壁质);革兰氏阴性细胞的细胞壁由脂多糖、脂蛋白(23,24]。大多数Parmelloid地衣中表现出很强的抗菌活性(25- - - - - -27]。

根据霍尔德et al。28),罗et al。29日),和席尔瓦et al。30.),地衣主要抑制革兰氏阳性细菌,但注意提取的极大的兴趣美国ghattensis抑制革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌的增长在当前研究。

美国ghattensis表明,MIC值是不同的在25到3.125之间μ克/毫升。类似于其他松萝物种,美国ghattensis还显示平等的MIC值(31日]。

地衣及其代谢物有多方面的生物活性:抗病毒、抗生素、酶抑制,和过敏。Behera et al。32)报道,丙酮,甲醇,光石油提取地衣是有效的地衣芽孢杆菌,b . megaterium,金黄色葡萄球菌。Karagoz et al。33)水和ethanolic提取物的抗菌活性报道地衣Lecanora murali,Peltigera polydactyla,树花属farinacea,Xanthoria线虫。

5。结论

丙酮、甲醇和乙醇提取的美国ghattensis有一个潜在的抗菌活性。测试结果表明地衣中提取显示显著的抗菌活性相对于测试细菌,这可能是人类意义的治疗,动物和植物的疾病。进一步调查抗菌活性以及经济和地衣的代谢物的快速隔离是必要的。因此,植物的抗菌效果测试可以解释为新的研究通过使用不同的溶剂提取和其他细菌准确。

伦理批准

审批通过作者从研究伦理委员会的桑杰甘地研究生医学科学研究所(SGPGIMS)。

利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

确认

作者感谢国家植物研究所的主任(CSIR),勒克瑙,和微生物学系主任,桑杰甘地研究生医学科学研究所(SGPGI),勒克瑙,提供必要的实验室设施。

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