文摘

标记为不溶于水的,碱溶多糖(ASP)从营养菌丝体和子实体中提取的Cerrena单色的压力。单糖的ASP证明了孤立的生物聚合物主要由葡萄糖组成,木糖、甘露糖单体。甲基化的调查研究聚合物显示(1→3)有关- - - - - -D、相关p是主要的链组成(92.2%的葡聚糖从菌丝体与子实体和90.1%)。¹H NMR、ir和immunofluorescent标签决定证实,从子实体和菌丝体多糖分离。单色的(1→3)吗- - - - - -D葡聚糖。(1→3)——获得- - - - - -D葡聚糖显示在光学旋转粘度差异及相似的特征。(1→3)- - - - - -D葡聚糖从菌丝体和子实体中提取的c .单色的也用作潜力和具体mutanase合成的诱导物木霉属harzianum。最高mutanase活动(0.38 U /毫升)诱导后得到的酶(1→3)- - - - - -D葡聚糖孤立的菌丝体c .单色的,这个生物聚合物被建议作为一种新的替代链球菌mutan mutanase感应t . harzianum。(1→3)- - - - - -D-Glucan-induced mutanase显示高水解反应的潜力与dextranase-pretreated mutan,最大程度的糖化和增溶的细菌homoglucan(83.1%和78.4%,分别地。)达到3 h在45°C。

1。介绍

Cerrena单色的是一种白腐真菌属于Polyporaceae家族能够降解多糖和木质素化合物在木1]。在其中扮演了一个重要的角色在这个过程中漆酶和氧化酵素。真菌漆酶在行业广泛研究了它的使用,尤其是在众多解毒过程和废水再生(2]。潜在的生物活性生物技术的使用分数,漆酶,endopolysaccharides,和低分子量组件prooxidant和抗菌活性高、隔绝c .单色的最近也发表(3]。

真菌细胞壁的主要结构成分糖蛋白、多糖,确定其刚度在细胞生长和必要的灵活性。单个元素形式层结构,其中糖蛋白外和多糖(1→3)-- - - - - -D葡聚糖(1→6)- - - - - -D(1→3)-葡聚糖- - - - - -D葡聚糖,甲壳素是一个内部层(4]。葡聚糖是一个非常多样化的组糖聚合物,其结构取决于酶的合成。葡萄糖分子在多糖链可能与对方(1→3)-- (1→4)-,或(1→6)——债券决定他们的程度的分支和侧链的空间分布(5]。这些属性也影响的物理本质- - - - - -D葡聚糖及其溶解度。的一个重要组葡聚糖(1→3)- - - - - -D葡聚糖,是由细菌和真菌细胞(6]。(1→3)- - - - - -D葡聚糖是细胞壁的组件实现功能支持细胞壁,在某些病原体毒力因素,或储备材料(7,8]。一些immunomodulating和抗肿瘤的活性(1→3)-- - - - - -D葡聚糖已报告(9,10]。这种生物聚合物也被描述为一种有效的和特定的催化剂的合成mutanolytic酶(11]。

水解酶组- (1→3)-glucanases能够作用于(1→3)- - - - - -D葡聚糖。在这组酶降解链球菌mutan,叫做mutanases [6]。土壤微生物细菌mutanases生产主要是由(链霉菌属,芽孢杆菌,假单胞菌,黄杆菌属)的glucanolytic活动远远低于那些在真菌中发现文化(12]。目前,mutanase丝状真菌尤其是的主要来源木霉属属。应该强调,mutanolytic酶是重要的对抗蛀牙,因为它们降低牙菌斑形成粘性,水不溶物变形,由生龋齿的细菌变形链球菌和美国sobrinus。

Mutanases主要细胞外和诱导酶分解化合物包含- (1→3)-glucosidic联系。因此,这些催化剂的有效生物技术生产只能在文化媒体进行补充(1→3)- - - - - -D葡聚糖的特定兴奋剂mutanase合成(12]。直到现在,mutanase合成的主要和最强大的刺激是链球菌- - - - - -D葡聚糖被称为mutan [6]。除了mutan,真菌pseudonigeran细胞粟酒裂殖酵母,和碱溶- - - - - -D葡聚糖隔绝Polyporus tumulosus,5种,和Piptoporus betulinus也用作mutanase合成诱导物(13- - - - - -15]。此外,Wiater et al。11)表明,- - - - - -D葡聚糖隔绝Laetiporus sulphureus诱导显著来自mutanase活动t . harzianum文化。

这些调查的主要目的是隔离、识别、和结构表征(1→3)- - - - - -D葡聚糖来自实验室培养的营养菌丝体Cerrena单色的从自然环境和收获这种真菌的子实体。例如真菌多糖,从实验室分离培养c .单色的菌丝可以表达许多工业和生物医学应用(3]。这项研究还集中在评估使用孤立的可能性(1→3)-- - - - - -D葡聚糖mutanase合成的感应t . harzianum压力。水解(1→3)——的潜力- - - - - -D-glucan-induced mutanase是评估在反应dextranase-pretreated链球菌mutan。

2。材料和方法

2.1。微生物和文化条件

的子实体Cerrena单色的(牛)。来自阔叶树Murrill收集柳树caprea生长在Drobin、波兰(表1)。分子生物学试验的标本被发现的内部转录区(ITS) 5.8 s rDNA如下所述。凭证标本(CU-1A)存储在工业微生物学、玛丽亚Curie-Skłodowska大学(波兰卢布林)。Cerrena单色的菌株c - 139是来自文化集合的雷根斯堡大学(德国雷根斯堡)。检查微生物是存储在麦芽汁琼脂偏在4°C。菌丝体的c .单色的培养在早些时候在生长条件优化中所描述的劳拉et al。16]。木霉属harzianum应变为CCM f - 340(捷克的微生物,布尔诺,捷克共和国)作为一种文化用于mutanase生产(1→3)引起的- - - - - -D从子实体和营养菌丝体的葡聚糖c .单色的。股票的文化t . harzianum存储在马铃薯葡萄糖琼脂偏在4°C用于接种。液体介质曼德尔(pH值5.3)(17修改添加0.4% (1→3)- - - - - -D葡聚糖(从子实体和菌丝体c .单色的)、80二层的0.1%和0.05%眎蛋白胨用于mutanase生产。动摇的文化t . harzianum在500毫升玻璃瓶进行包含100毫升无菌培养基。真菌分生孢子的水瓶被播种的最终浓度约为2×10⁵分生孢子/毫升和放置在一个轨道旋转瓶(美国新布伦瑞克英诺华44)300 rpm和30°C 3天。

2.2。基因组DNA的隔离和PCR扩增的地区

提取过程进行描述的方法,博尔赫斯et al。18与我们的小修改)。大约20毫克的子实体是悬浮在裂解缓冲(10毫米EDTA, 10毫米巯基乙醇,亚精胺4毫米,0.1 M氯化钠,0.5% SDS和40毫米Tris-HCl, pH值8.0在65°C)和孵化了40分钟。准备这样的真菌子实体悬挂和苯酚和氯仿,在10000×g离心20分钟,用冰冷的乙醇沉淀。接下来,沉淀用70%乙醇洗净,晒干,再溶解在TE缓冲(1毫米Tris-HCl, 0.1 EDTA, pH值8)。净化度和浓度的DNA样本估计使用ND1000分光光度计(美国佛罗里达州西棕榈滩,热科学)。与引物聚合酶链反应扩增(PCR)(1、2、3和4)根据协议进行了白色的et al。19]。反应是在TPersonal thermocycler (Biometra,德国)。放大PCR产品量化了凝胶电泳(1%琼脂糖凝胶与溴化乙锭染色),GeneRuler 100 bp + DNA梯(热科学)和纯化微量过滤用清理工具(授权生物技术、波兰)。BigDye™终结者循环测序工具包,ABI 3730 XL音序器棱镜用于自动测序(美国应用生物系统公司,卡尔斯巴德,CA)。HM357713数量加入基因库被分配到的核苷酸序列在这项研究中(表确定1)。

2.3。Immunofluorescent标签的细胞壁(1→3)α- - - - - -D葡聚糖

(1→3)- - - - - -D葡聚糖内是局部的c .单色的细胞壁使用荧光标记的抗体(20.]。样品准备新鲜的菌丝c .单色的被放在Lab-Tek二室幻灯片(美国罗切斯特Nunc)和固定为3% (v / v)甲醛溶液在蒸馏水为30分钟65°C。接下来,固定真菌细胞被洗了三次在PBS缓冲(137毫米氯化钠,氯化钾2.7毫米,8.1毫米Na₂HPO₄,1.5毫米KH₂阿宝₄渗透之前,pH值7.4)1% (v / v)渐变20 PBS缓冲(PBS-T)。(1→3)——的存在- - - - - -D葡聚糖是150年被使用L解的鼠标IgM mopc - 104 e在PBS缓冲(0.1毫克/毫升)(σ,圣路易斯,密苏里州,美国)作为主要的抗体和相同数量的Alexa萤石488山羊anti-mouse IgM (链具体)(σ,圣路易斯,密苏里州,美国)作为二级抗体。样本如下:孵化主要抗体在一夜之间在4°C湿室和二次抗体2 h在黑暗在37°C。(1→3)- - - - - -D荧光显微镜观察葡聚糖(奥林巴斯BX 51岁的德国),在一个发射波长的525/550 nm和激发波长的470/500 nm。

2.4。隔离的碱溶多糖(asp)

新鲜营养菌丝体和子实体和c .单色的冻干和研磨,干材料用于隔离的碱溶多糖根据Wiater方法描述et al。11]。菌丝体的干物质(100克)和子实体(100克)铣削和治疗产生的粉末与水在121°C 1 h (×3)。墙体材料是被离心(30分钟10000 rpm)和冻干。孤立的碱溶分数,冻干材料悬浮在1 M氢氧化钠在不断搅拌。通宵在室温下孵化后,上层清液与1 M盐酸中和。不溶性分数被离心收集,用水洗(×3),和冻干给白色粉末(asp,净化(1→3)-- - - - - -D葡聚糖制剂)。

2.5。碳水化合物分析

糖分析,多糖水解2 M组织(100°C, h)。单糖的绝对构型,乙酰化的分析R- (-)2-butylglycosides使用(21]。研究糖被修改成alditol醋酸盐形式(22]。葡聚糖被甲基化的方法Hakomori [23Sep-Pak C)和净化₁₈筒根据纽约的方法等。24]。由此产生的物质被水解2 M组织(100°C, h)与NaBD减少₄。部分甲基化alditols转化为乙酸酯衍生品。准备alditol醋酸盐和部分甲基化alditol醋酸盐进行了分析使用gc - ms分析惠普(hewlett - packard)气相色谱仪(模型HP5890A,德国)配有质量选择检测器(MSD HP5971模型)。分离完成在毛细管柱(HP-5MS 30米×0.25毫米)和氦载气。程序温度为150°C(最初5分钟),然后提高到310°C的斜坡率3°C /分钟和最后一次20分钟。¹H NMR谱的多糖溶解在1 M NaOD D₂O记录与力量皇冠(300 MHz)谱仪。的¹H化学位移得到使用丙酮(- 2.225 ppm)作为内标。傅立叶变换红外光谱被记录的珀金埃尔默傅立叶变换红外分光光度计(1725型x,韦尔斯利,妈,美国)在400年和4000年之间的波长范围。溴化钾磁盘的标本制备方法。旋光率(c1 M氢氧化钠)决定在589 nm使用珀金埃尔默自动旋光计模型341 LC(美国韦尔斯利,MA)。多糖的粘度(c1 M氢氧化钠)与布氏粘度计测量模型3 DV(美国马斯托顿)20°C。

2.6。Mutanase化验

Mutanase活动估计使用Wiater描述的方法等。11]。反应混合物中含有0.5毫升的0.2% (w / v) dextranase-pretreated mutan (DTM)醋酸钠缓冲(pH值5.5)0.2米和0.5毫升的适当稀释酶解决方案。样本孵化1小时45°C,和明年发布的还原糖被Somogyi-Nelson量化方法(25,26]。合适的底物和酶空格包含纠正任何自由减少集团不是来自DTM。mutanase活动的一个单位(U)计算的酶水解dextranase-pretreated mutan (DTM)还原糖产量相当于1μ摩尔葡萄糖/分钟。Mutanase活动表示为单位每毫升的文化(U /毫升)。

2.7。制备Dextranase-Pretreated Mutan (DTM)

的决心mutanase活动,dextranase-pretreated mutan (DTM)衬底(50 U(葡聚糖酶/毫克的原生mutan孵化在pH值6.0,37°C, 3×24 h)。本机mutan合成根据Wiater等描述的过程。12]。葡聚糖酶的青霉菌sp。(酶活性为12.9 U /毫克准备,Sigma-Aldrich(圣路易斯,密苏里州,美国))是用于描述方法。演示了使用¹H NMR方法本机的链接结构和dextranase-pretreated mutan有mixed-linkage (1→3) -- - - - - - - - - (1→6)生物聚合物但更大比例的(1→3)-- - - - - - (1→6)——观察联系。

2.8。蛋白质估计

蛋白质含量测定的方法595海里的布拉德福德(27),使用牛血清白蛋白作为反应的标准浓度的范围从40克/毫升到400克/毫升。

2.9。还原糖估计

还原糖的浓度是由Somogyi-Nelson比色法(25,26]。测试解决方案(0.5毫升)和0.5毫升碱性铜试剂,然后在水浴煮20分钟。冷却后,0.5毫升的显色试剂(arsenomolybdate)和1.5毫升蒸馏水,吸光度测量的波长为520 nm。还原糖的浓度计算基于葡萄糖作为标准的校准曲线。还原糖的量是表达克/毫升。

2.10。感应的t . HarzianumMutanase (1→3)α- - - - - -D葡聚糖

的合成t . harzianummutanase被(1→3)诱导- - - - - -D葡聚糖隔绝的菌丝体和子实体c .单色的菌株。瓶水下文化的真菌t . harzianum由3天在曼德尔介质,pH值5.3,包含(g / L) KH吗₂阿宝₄2;(NH₄)所以₄1.4;尿素0.3;MgSO₄×7 h₂O 0.3;CaCl₂0.3;细菌蛋白胨0.5;二层1毫升/ L;和微量元素溶液1毫升/ L(1→3)——进行测试- - - - - -D葡聚糖(0.4 g的数量在100毫升的介质)mutanase诱导物。培养后,mutanase活动,蛋白质浓度和pH值估计。

2.11。水解实验

水解在执行插入使用0.05%南埃普多夫管₃作为防腐剂。反应混合物中含有1毫克的dextranase-pretreated mutan (DTM)和t . harzianummutanase(1→3)引起的- - - - - -D葡聚糖孤立的菌丝体c .单色的(1 U /毫升)1毫升的0.2米醋酸钠缓冲(pH值5.5)。样本孵化24 h在45°C和激动在300 rpm。接下来,mutan粉撤回在24 h和加热的不同时间间隔约为100°C 5分钟停止反应。总还原糖被Somogyi-Nelson分析方法(25,26]。计算包括酶和底物空白。mutanolysis的比例是由以下公式计算:糖化(%)=(还原糖形成(mg)×0.9 / mutan(毫克)]×100。此外,浊度分析剩余不溶性葡聚糖(560海里)。的程度mutan溶解计算和表示为一个百分比。

2.12。统计分析

数据分析使用单向方差分析之后,事后图基测试。所有的结果表示为平均数±标准差从三个实验()。的值据报告只有具有统计学意义。

3所示。结果与讨论

3.1。形态学和遗传的特点c .单色的菌株

的压力Cerrena的子实体收集来自哪里柳树caprea被发现在物种水平通过分析他们的地区。一个产品(长度648 bp)是获得与ITS1-ITS4 PCR引物,随后通过直接测序。这个产品的完整序列表示100%的身份Cerrena单色的其序列。下获得的序列存入基因库HM357713加入(表数量1)。菌丝体的比较测试,c .单色的139(加入顺序沉积在基因库DQ056858数量)从文化集合的雷根斯堡大学(德国雷根斯堡)使用28]。基于基因组序列的可用c .单色的未来的分析基因序列和表达要容易得多。这也适用于酶,例如,漆酶c .单色的生物技术的兴趣和生物活性的分数有抗氧化,抗菌,抗肿瘤,或免疫刺激性活动3]。

3.2。隔离和碱溶多糖的结构分析

成分分析c .单色的子实体显示水的存在(50%)、水不溶物(1→3)- - - - - -D葡聚糖(23.1%),其余部分由其他细胞壁的结构成分。冻干的asp得到的子实体和菌丝体c .单色的通过碱性溶液提取从子实体产量46.1%和9.5%从菌丝体。就像前面所述,真菌细胞壁中葡聚糖含量因物种而异(4]。果期的尸体Laetiporus sulphureus是最富有的来源(1→3)-- - - - - -D葡聚糖(56.3%)(11]。在的情况下黑曲霉菌丝体,这水不溶性生物聚合物构成只有9%的成分(29日),而这是缺席的酿酒酵母和白色念珠菌细胞壁(4]。(1→3)的检测- - - - - -D葡聚糖的c .单色的菌丝细胞壁,immunofluorescent标签与特定的抗体。这个方法以前使用的藤川et al。20.)可视化(1→3)的位置- - - - - -D葡聚糖的植物病原真菌稻瘟病菌这些多糖包括壳聚糖的主要成分是细胞的皮肤。(1→3)——的存在- - - - - -D葡聚糖的细胞壁c .单色的强调了使用荧光显微镜(图1)。在目前的报告,详细结构分析(1→3)-- - - - - -D葡聚糖进行使用¹傅立叶变换红外光谱、核磁共振谱技术。¹H NMR分析asp孤立子实体和菌丝体c .单色的显示葡萄糖分子的存在(1→3)-glucosidic债券(图2)。可以清楚地观察到单线态的存在为5.6408和5.6283。这两个值对应于5.200到5.650 ppm的区域描述葡萄糖α-anomers。早在葡聚糖的研究也获得了类似的调查结果隔绝l . sulphureus观察在5.33 ppm共振信号(11]。结构分析asp的傅立叶变换红外光谱的波长范围是4000年到500年。如图3的asp显示吸收光谱、傅立叶变换红外光谱3336.01和3313.04(葡聚糖孤立子实体和菌丝体resp)。这表明存在-哦,多糖链的特征(30.]。乐队在1000年和1100年之间(即。,1012。32 和1009.26)表示O-substituted葡萄糖残基的存在,联系在glucosidic链(31日]。此外,特征与糖基残留物为847.72和822.00获得了asp与菌丝体的c .单色的。的生物聚合物来自的子实体c .单色的我们还显示,类似于Kozarski et al。32),两座山峰为845.64和821.52,这表明,孤立的材料包含(1→3)- - - - - -D葡聚糖。傅立叶变换红外光谱的研究从细胞壁葡聚糖孤立Piptoporus betulinus,曲霉属真菌nidulans,和l . sulphureus观察光谱的相似的配置文件(11,33]。单糖分析asp孤立子实体和菌丝体c .单色的证明了这些多糖基本单体建筑是葡萄糖(93.5%,子实体,95.3%,菌丝体)(表2)。此外,一小部分其他单糖,木糖(3.6%和2.3)和甘露糖(2.9%和2.4),被发现。没有显著差异的百分比不同单糖孤立的c .单色的菌丝体和子实体。类似的成分(葡萄糖、木糖、甘露糖)葡聚糖孤立的细胞壁l . sulphureus报道了Grun [4]。甲基化分析葡聚糖从子实体和营养菌丝体中提取c .单色的显示(1→3)联系- - - - - -D、相关p是主要的链组成子实体和菌丝体的90.1%(92.2%)而(1→4)连接- - - - - -D、相关p(4.4%和7.4%,分别地。)是小一(表3)。结果证明,更大比例的(1→4)连接- - - - - -D、相关p发生在葡聚糖从菌丝体中提取更多的分支。此外,研究了葡聚糖的结构包含一个类型的翻倍代替葡萄糖残基(1→;→3、4)- - - - - -D、相关p。研究(1→3)-- - - - - -D葡聚糖制剂显示粘度差异及相似特征的光学旋转(表4)。具体的光学旋转葡聚糖+ 200°范围是+ 206°。粘度值的波动在2.12和7.55之间mPa·s。不同粘度的测试葡聚糖可能表明其分子质量的差异。基于对上述数据的分析可以得出结论,水不溶物,碱溶多糖孤立子实体和菌丝体c .单色的包含主要(1→3)- - - - - -D葡聚糖。

3.3。感应的t . harzianumMutanase (1→3)α- - - - - -D葡聚糖

Mutanase是一种诱导酶分解聚合物包含(1→3)——在他们的结构葡萄糖苷键。因此加剧了生产该催化剂发生只在中包含一个特定的诱导物,比如(1→3)- - - - - -D葡聚糖(10]。为了选择最好的mutanase合成的诱导物t . harzianum压力,动摇了真菌文化一直生长在曼德尔介质(pH值5.3)3天。在目前的工作(1→3)- - - - - -D葡聚糖的菌丝体和子实体c .单色的被用作一个潜在的mutanase诱导物。结果表明,最高mutanase的活动t . harzianum中检测出的文化补充(1→3)-- - - - - -D葡聚糖的菌丝体c .单色的(表5)。添加这个多糖中给了最大酶产量0.38 U /毫升。Wiater et al。11)获得更高mutanase活动(0.82 U /毫升)诱导后的合成(1→3)- - - - - -D葡聚糖从收获获得果期的尸体l . sulphureus。另一方面,结果通过我们略优于(0.33 U /毫升)由Wiater et al。34),用细菌mutan诱导mutanaset . harzianumf - 470的压力。反过来,有显著降低酶的生产水平t . harzianumOMZ 779 (0.16 U /毫升)所示古根海姆和哈勒35在摇瓶培养mutan为1%。对于细菌mutanases,迈耶和Phaff14达到最大mutanase活动(0.31 U /毫升)的文化芽孢杆菌circulansWL-12和整个细胞的补充粟酒裂殖酵母或纯化(1→3)-- - - - - -D葡聚糖从答:尼日尔。

使用后的感应mutanase纯(1→3)- - - - - -D葡聚糖孤立子实体的c .单色的,一个酶产量高(0.26 U /毫升)也会被记录下来。Sanz et al。36生产的mutanase]显示加剧T。asperellum诱导后的这种文化- - - - - -D葡聚糖隔绝葡萄孢菌菌丝体和Ait-Lahsen et al。37)用作mutanase活化剂的菌丝体答:尼日尔。总之,目前的研究表明(1→3)- - - - - -D葡聚糖准备,孤立的菌丝体和子实体c .单色的,有效地诱导mutanaset . harzianum并完全链球菌mutan代替。mutan相比,这些新的和强大的诱导mutanase合成兴奋剂是便宜,方便,安全的人类。因此,他们将是非常有用的促进mutanase生产以相对较低的成本在更大的规模和接受口服应用程序。从生物技术的角度使用c .单色的菌丝体作为(1→3)——的来源- - - - - -D葡聚糖似乎更有效率和有前途的经济原因。此外,mutanase将成为独立的生产的时间捡子实体菌的环境。

3.4。水解实验

酶法水解的dextranase-pretreated链球菌mutan (DTM)进行了使用部分纯化mutanase(1→3)引起的- - - - - -D葡聚糖孤立的菌丝体c .单色的。实验结果通过监测酶糖化的DTM及其溶解(数字4和5)。在这两种情况下,水解反应速率增加线性过程的初始阶段,后来几乎不变。最大程度的mutan糖化(83.1%)和其增溶后(78.4%)达到3 h的水解。有认为dextranase-pretreated mutan,准备在我们的实验室,是一个mixed-linkage葡聚糖为79.8摩尔% (1→3)α-glucosidic联系,可以得出这样的结论:几乎所有这些glucosidic债券降级在具体行动mutanase生物高聚物。Wiater et al。11)获得类似的结果t . harzianummutanase诱导的子实体l . sulphureus底物的水解程度的80%后达到3 h。反过来,科帕克和Vacca-Smith38),在不溶性mutan水解,得到只有15.3%糖化mutan-induced mutanaset . harzianum4 h后孵化30°C。类似的结果(水解收益率高达20%的48 - 64 h后37°C)获得葡聚糖酶50 l(商业制备包含几个水解活动)和glucanohydrolase dextranolytic和淀粉分解的活动Lipomyces starkeyi(39,40]。因此,在很短的时间内有效的增溶mutan给出了一个使用的机会t . harzianummutanase(1→3)引起的- - - - - -D葡聚糖的c .单色的在预防性牙科准备对抗蛀牙。效率高的mutan溶解6小时后(83%)也受到Pleszczyńska et al。41使用mutanase从后)Paenibacillussp。MP-1-inducedl . sulphureus菌丝体。

4所示。结论

在这项研究中,新(1→3)- - - - - -D葡聚糖制剂孤立的菌丝体和子实体Cerrena单色的准确识别和特征。两个测试葡聚糖被证明是有效和便利的mutanase合成的诱导物t . harzianum。简单的培养c .单色的菌丝体和集约化生产的规模是非常有趣的从技术的角度。事实上,获得大量的(1→3)- - - - - -D葡聚糖从这个来源可能大大加快生产mutanase这会增加的机会得到产品,可用于预防龋齿。Mutanase可以作为一个活跃的添加剂用于口腔卫生的准备工作,如漱口水、牙膏、牙胶,也洗涤和储存的假肢,假肢设备去除假牙斑块位于丙烯酸表面。作为活性成分,mutanase可以成为有用的补充机械用牙刷清洁牙齿和假牙,牙棒,牙线。

相互竞争的利益

作者宣称没有利益冲突。

确认

这项工作是由美国国家科学中心(波兰)没有根据的决定。DEC-2013/09 / B / BS /联电NZ9/01829和研究项目。