文摘

背景。高血压和多余的体重是很重要的内皮功能障碍的危险因素。最近的证据表明,高含量的多酚黑巧克力可以改善内皮功能,降低血压。本研究旨在评估协会70%的可可巧克力摄入量与代谢,氧化应激,炎症,血压,和内皮功能在第一阶段高血压药物过量的体重。方法。干预的临床试验包括22第一阶段高血压药物没有先前的降压治疗,年龄在18岁到60岁之间带来了身体质量指数25.0和34.9公斤/米²。所有的参与者被要求消费50克的巧克力可可70% /天(2135毫克的多酚)4周。内皮功能是由外周动脉张力测定法评估使用pat装置2000 (Itamar医学)。结果。20个参与者(10人)完成这项研究。张后干预的比较表明,(1)人体测量参数没有明显变化,身体脂肪百分比,葡萄糖代谢,血脂,炎症生物标记,粘附分子,氧化低密度脂蛋白,和血压;(2)评估内皮功能通过反应性充血指数显示显著增加:1.94±0.18,2.22±0.08,。结论在第一阶段高血压患者和多余的体重,高含量的多酚黑巧克力可以改善内皮功能。

1。介绍

血管内皮细胞已成为一个关键调节器的体内平衡,作为一个活跃的代谢信号传感器,血流动力学,和炎症因素修改功能和血管壁的形态。改变内皮细胞功能可以先于动脉粥样硬化的发展变化和心血管疾病的恶化1]。高血压和多余的体重(体重指数(BMI)≥25公斤/米²)条件与高发病率,内皮功能障碍的重要危险因素(2- - - - - -5]。据世界卫生组织(2009)(3高血压是负责全球死亡人数的13%,超重和肥胖负责5%。高血压和肥胖常常联系,因果肥胖和高血压之间的联系已经长了(6]。

生活方式干预,包括饮食,可能会影响内皮功能:高脂肪饮食损害血管内皮功能,和饮食,如地中海饮食与改善内皮功能(7]。最近,可可和cocoa-derived产品,如巧克力和可可(黑巧克力)70%或更多的证据引起了公众的关注,因为他们降低血压和改善血管内皮功能8- - - - - -14]。这些有利影响常常归结为黄酮类化合物,多酚的抗氧化物质家族的一组中,大量存在于水果、蔬菜、红酒、茶、可可。儿茶素及其异构体表儿茶素是类黄酮具有较强的抗氧化性能的一种。可可含有高浓度的表儿茶素,有抗氧化成分指出,两倍的红酒和绿茶的近三倍(15,16]。

有几种可能的机制多酚可以改善内皮功能,降低血压。除了抗氧化的影响,认为增加一氧化氮(NO)的biodisponibility,多酚类物质已被证明的形成没有增加内皮没有合酶通过增加钙水平和redox-sensitive激活磷酸肌醇3激酶/ Akt通路(PI3)。多酚也(1)加强生产endothelium-derived超极化因子(EDHF)和环前列腺素和(2)抑制血管收缩剂的合成,如endothelin-1和血管紧张素转换酶(14,17]。

最近的研究也表现出有利的黑巧克力和可可对胰岛素抵抗的影响(9,18- - - - - -20.),血脂(21,22),和炎症状态(23]。然而,许多研究评估的影响黑巧克力和可可这些心血管风险因素相对较低,和一些作者没有发现所有这些好处24,25]。

黑巧克力和可可粉的影响已经被评估在高血压患者9,10,19]。然而,缺乏研究评价其效果在高血压个体超重和肥胖。因此,本研究的目的是巧克力协会70%的可可摄入与代谢,氧化应激,炎症生物标记、血压和血管内皮功能在第一阶段高血压科目与多余的体重。

2。材料和方法

这张后试验是在实验室进行的临床和实验病理生理学,CLINEX,位于佩德罗·埃内斯托大学医院,里约热内卢州大学。书面知情同意了所有的病人。研究协议是通过人类的佩德罗·埃内斯托大学医院的伦理委员会。程序是在本研究按照机构的指导方针。

潜在的参与者招募的整形手术,lipoplasty候选人之一。候选人在这项研究中,由注册营养师进行资格审查。受试者筛选按照下列条件:年龄在18到60岁之间,身体质量指数从25.0到34.9公斤/米²和第一阶段的诊断高血压(没有以前的抗高血压治疗)(26]。排除标准是目前使用的抗氧化和膳食补充剂;使用任何药物干涉体重,血压,和代谢轮廓;最近的变化(前6个月内)膳食摄入量,体重(> 3公斤),和强度或体育锻炼的频率。患有饮食失调、抑郁或病史吸毒被排除在外。代谢性疾病,如糖尿病或甲状腺功能减退或慢性疾病严重影响心血管、胃肠道和肾脏系统也被排除在外。孕妇或哺乳期妇女不允许进入研究。

550人的最初筛选,28进入磨合过程。两周试车期间所有可可食品被排除在外,和潜在的参与者提交临床、饮食、人体测量、生化评价。六个科目未能完成试车期间,四个人,因为他们的血压水平并不在第一阶段高血压和两个因为失去了兴趣。所以在完成试车期间,22名参与者被包括在研究和20完成随访期间(4周),被包含在最终的分析(图1)。noncompleters离开研究由于调度冲突。

在干预阶段(4周),参与者提交临床和营养评估基线(0)周和周1,2,3,4。所有的参与者被要求消费50克的巧克力可可70% /天(含2135毫克的多酚)(表4周1)。他们收到指令消耗25 g在早上和下午25克。每周在基线和参与者收到巧克力的数量足够的研究为7天。的发展和强化策略在同一时间点进行了持续成功。

体重、腰围、臀围测量基线和周1,2,3,4。在基线和星期4参与者也提交给动态血压监测(ABPM)和评价内皮功能;身体成分和禁食血浆循环胰岛素水平,葡萄糖,瘦素、血脂(甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白(HDL)胆固醇和低密度脂蛋白(LDL)胆固醇),炎症生物标记(c反应蛋白、interleucina-6和肿瘤坏死因子-α)、氧化应激生物标志物(氧化低密度脂蛋白),和生物标志物内皮功能障碍(intracelluar粘附molecule-1 (ICAM-1),血管细胞粘附molecule-1 (VCAM-1)和E-selectin)。

膳食评估在试车期间使用为期3天的食物记录,覆盖2工作日,周末和1天,估计当前的消费能量和营养。为了避免体重增加在研究期间,患者要求按比例减少习惯性的能量摄入的能量提供的巧克力(280千卡/天;主要从lipid-rich食物)。在干预阶段,综述了食品记录和采访中澄清营养师每周评估饮食依从性。营养分析,进行为期3天的食物记录使用软件NutWin(圣保罗联邦大学,UNIFESP,圣保罗,巴西)。报告总能量,能量的百分比从蛋白质、脂肪和碳水化合物,纤维含量在试车阶段类似于上周的研究。受试者仔细指示避免富含类黄酮的食物和饮料,包括茶和酒;这些食品和饮料的列表是给每个参与者。所有与会者都鼓励继续他们的通常的体育活动在整个研究期间。

身高、体重、腰围和臀周长测量从喂饲10 h后12 h快。高度使用测距仪准确测定±0.5厘米,和重量得到刻度尺,±0.1公斤(Filizola S.A.准确巴西,圣保罗,SP),参与者穿衣服和鞋子。体重指数的计算方法是使用标准的方程(千克每平方米)。腰围测量站的位置,中途上肋骨下缘和髂嵴。在midexhalation进行了测量。臀围测量在臀部最宽的点/臀部区域卷尺与地面平行。腰臀比是决定除以腰围臀围。人体测量是两次,使用平均值在所有分析。的身体脂肪百分比由电气bioimpedance估计使用生物动力学bia - 450身体脂肪分析仪(美国生物动力学Corp .)、西雅图、佤邦)。

血液样本被收集在12 h禁食时间和储存在−80°C。总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇和甘油三酯浓度评估通过使用一个自动分析仪。低密度脂蛋白胆固醇是使用Friedewald公式计算(27)当甘油三酯没有超过400 mg / dL。等被用来确定血浆瘦素和胰岛素水平(Linco研究圣查尔斯,密苏里州,美国,双抗体固相酶免疫测定)。空腹血浆葡萄糖是由葡萄糖氧化酶的使用方法。胰岛素抵抗状态评估使用的内稳态模型评估胰岛素抵抗(HOMA-IR)指数,即血清胰岛素(μU /毫升)血浆葡萄糖(更易/ L) / 22.5 (28]。VCAM-1的值,ICAM-1 E-Selectin immunonephelometry酶免疫分析法测定使用多个剂量的商业工具(LINCO研究圣查尔斯,密苏里州,美国)。血浆TNF水平α和il - 6是由酶immunometric方法(TiterZyme EIA)使用商业套装(试验设计,安阿伯市,美国)。高度敏感的CRP (hs-CRP)是由比浊法,使用商业套装(生物系统,巴塞罗那,西班牙)。

2.1。内皮功能

内皮功能是由外周动脉张力测定法评价(PAT)使用PAT 2000 (Itamar医疗、该撒利亚、以色列),一个手指plethysmographic设备允许隔离检测跳动的动脉体积变化(29日]。pat装置2000是一种非侵入性技术,食品和药物管理局批准用于辅助诊断手段在缺血性心脏病的患者的症状和体征(30.]。有一个重要的证据hyperemia-induced手指脉搏波振幅变化之间的关系,定义为帕特充血比率,肱动脉血流介导扩张(31日]。

pat装置包括两个finger-mounted的探头,包括一个充气橡胶空气缓冲系统在一个严格的外部情况。调查设计允许应用程序一个常数和均匀分布near-diastolic反压力在整个调查,从而增加灵敏度,卸载动脉壁张力,防止静脉血液淤积避免venoarteriolar反射血管收缩。跳动的体积变化的指尖感觉到压力传感器和转移到个人电脑的信号带通滤过(0.3到30 Hz),放大,显示和存储29日]。pat装置进行了研究与患者仰卧位,两只手在同一水平舒适、热中性的环境。一个血压袖带放置在上臂(研究机构),而侧臂作为控制(对照组);pat装置探测被放置在一个手指的手(同一手指双手)。连续记录的双手开始悸动的血容量的回应。10分钟后平衡时期,研究臂上的血压袖带充气到60毫米汞柱以上收缩压为5分钟。袖口是泄气的诱发反应性充血,而帕特继续记录。反应性充血指数(开展)获得pat operator-independent地分析了一台电脑。

2.2。血压

在试车阶段血压记录通过使用校准Dinamap 1846 Critikon自动血压计(美国佛罗里达州坦帕,Critikon)在休息时间的坐姿至少10分钟。使用一个适当的手臂袖口。手臂位置调整,袖口是右心房水平。血压测量的非惯用的手臂每3分钟15分钟。第一个值是被丢弃的,过去五读数的意思是用于分析。患者认为第一阶段高血压如果收缩压水平在140 - 159毫米汞柱和/或舒张压在90 - 99毫米汞柱26]。

在基线(周0)和研究结束的(周4)血压评价动态血压监测(ABPM)血压提高“真正”的估计。动态血压记录使用太空医疗90207示波的血压监视器(美国太空医疗,雷蒙德,WA)对水银血压计校准使用前对每个病人。显示器是编程读血压和心率每20分钟从6点到18:00 h。每30分钟从18:00到6 h。意思是白天(6点到18:00 h),夜间(18:00 6 h)血压和心率计算。

2.3。统计分析

意味着±标准差被用来总结连续变量。测试可能巧克力70%的可可摄入营养协会的参数、生化变量,内皮功能,和血压,我们获得的数据相比基线(周0)结束时获取的数据(周4)。学生的配对研究t以及当变量使用正态分布和Wilcoxon测试用于变量正态分布。

进行了相关测试来确定感兴趣的开展和变量之间的关系。部分相关性不同的混杂因素的控制也使用。

在先前研究的基础9),这个试验是为了有80%功率检测在收缩压显著差异评价ABPM之前和之后的黑巧克力的摄入量。假设20%的辍学率,我们需要至少12参与这项研究。5.0 GraphPad棱镜(GraphPad软件公司、圣地亚哥、钙、美国),占据10.0(美国占据Corp .,大学城,TX)被用于统计分析。被认为是具有统计学意义。

3所示。结果

20个参与者(10男10女)完成这项研究,包括在最终的分析中。这些患者的平均年龄年,他们的体重指数公斤/米²。在试车阶段,收缩压和舒张压水平和毫米汞柱,分别。

如预期的实验设计,所有人体测量参数和体内脂肪的百分比仍然几乎不变巧克力补充(4周后的表2)。如表所示3在研究结束时,没有明显的葡萄糖代谢的变化,血脂,炎症生物标记物,氧化低密度脂蛋白。

值的比较分析得到ABPM 0和每周4之间并没有发现重大的修改。然而,有一个降低收缩压和舒张压在24 h,日间和夜间(图2)。

经过4周的巧克力补充奥镁(图有显著增加3)。血清水平的粘附分子,内皮功能障碍的生物标志物,也显示出减少,然而,没有达到统计学意义(图4)。

逆之间的观察和重大协会开展的基线和修改在这个指数在研究期间(;)。即使调整了混杂因素后,(这种联系仍然显著;)。这个分析的混杂因素包括年龄和体重指数变化在研究期间,总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇,甘油三酯,hs-CRP,贺马。

奥镁的变化在研究过程中提出了一个消极和重大协会与修改日收缩压和舒张压(;和;)在调整了年龄和体重指数的变化,HOMA, hs-CRP。修改在夜间和24小时血压并不存在显著的关联与奥镁的变化。

4所示。讨论

在目前的研究中,基于样本的主题与第一阶段高血压和多余的体重,主要的发现是,食用高含量的多酚70%黑巧克力可可(50克/天,在四个星期)改善内皮功能。

高含量的多酚可可后内皮功能的改善和/或黑巧克力摄入量在几项研究[9,11,12,18,19,32- - - - - -37]。这些研究有不同的设计,不同的主要是与时间和剂量的补充,与参与者的资格标准。即使有不同的设计的研究发现显著改善内皮功能评价试验的绝大多数血流介导的血管舒张肱动脉(9,11,12,19,34- - - - - -36]。据我们所知只有一项研究[12)评价内皮功能使用相同的方法,我们使用(脉搏波振幅的手指评估帕特),虽然在我们的研究中使用的设备是不同的。

研究不同的持续时间:有试验,观察急性效应(一般2 h后摄入的可可产品)(18,33- - - - - -36),或短期效应:5天(12),2周(9,11,19,37),4周(38),6周(32和12周18]。本研究的持续时间,虽然是不足以评估长期黑巧克力的摄入量对内皮功能的影响,大于几项研究的持续时间。

临床试验的参与者观察内皮功能的改善与可可补充包括健康个体11,12,37),hypercholesterolemic绝经后妇女(32)、心脏移植受者(33],吸烟者[35,36),高血压药物(9),高血压药物与葡萄糖不耐受,19),糖尿病患者(38],超重和肥胖的人(18]。正如之前提到的,只有患有高血压和过度的体重被包括在本研究中,创建一个不同于其他的研究,表明在这个高风险人口内皮功能障碍的补充高含量的多酚单独黑巧克力(没有特定的治疗高血压和多余的体重)可以改善内皮功能。

这项研究的参与者提出了降低血压水平,虽然没有达到统计学意义。这一发现与一些研究还评估的影响可可和/或丰富的巧克力在高血压患者8- - - - - -10,19]。

盖尔et al。(2010)8)进行了随机对照试验的荟萃分析评估的抗高血压作用的黄烷醇含量高的可可饮料产品。总共10个试验包括297个人被包括在内。研究人群是健康的血压正常的成年人或高血压前期/第一阶段高血压患者。这一荟萃分析证实黄烷醇含量高的可可饮料的降血压能力(8]。然而,在最近出版的荟萃分析(39)新研究均包括在内,总计15个试验,进行亚组分析基线血压(高血压/血压正常的人)。汇集了所有试验的荟萃分析显示纯可可巧克力与控制的重要血液减压效果。然而,子群分析高血压或pre-hypertensive子组才重要,尽管不是血压显著降低血压正常的子组(39]。

可能的解释缺乏显著降低血压在当下研究(1)基线血压水平,评估ABPM,在我们的病人比其他研究发现水平低,(2)剂量的黑巧克力也较低(9,19]。里德et al。(2009)40)没有发现血压降低50克黑巧克力的影响日常的8周在高血压前期人群。

在目前的研究中,血脂无显著的修改。然而,一些研究观察到显著的减少和/或低密度脂蛋白胆固醇摄入总量的黑巧克力或可可19,21,22]。Mursu et al。(2004)41)发现,黑巧克力的摄入75克/天15天增加高密度脂蛋白胆固醇。在血脂的变化在上面引用的研究是高度依赖于病人的剂量的可可消费和健康状况(16]。研究中使用的剂量的黑巧克力Mursu et al。(2004)41和格拉希et al . (2008)19)是75克/天,100克/天,分别。因此,重大变化的一个可能的解释血清脂类在我们的研究可能是巧克力的剂量。另一个可能的解释是,在基线参与者均值的血脂水平在正常范围内根据摘要(2001)(42]。

脂质在黑巧克力是高的内容。见表1,在目前的研究中,巧克力的摄入50克/天导致脂肪的摄入20克/天。尽管其脂肪含量高,可可本身并不认为对血清脂质产生意料之外的效果(在一些研究有有利影响),因为可可脂是由平均33%的油酸,棕榈酸25%,和33%的硬脂酸(43]。油酸是一种单不饱和脂肪酸,可以降低低密度脂蛋白胆固醇(42]虽然软脂酸和硬脂酸是饱和脂肪,硬脂酸与其他饱和脂肪酸相比降低低密度脂蛋白胆固醇(44,45]。

所有的参与者包括在本研究有多余的体重(体重指数从25.0到34.9公斤/米²)。减肥改善内皮功能,降低血压,而体重增加有相反的效果46- - - - - -48];我们的研究的一个重要问题是指导参与者保持体重。重要的是要注意,所有在场的病人包括在我们的研究中没有最近的体重变化研究和没有计划开始之前一个能量限制饮食和增加体力活动。在研究结束的所有参与者将咨询营养学家和内科医生开始治疗高血压和减肥。

有几个限制在我们的研究中。其中一个是缺乏对照组,并没有计划在最初设计的研究。然而,本研究在严格的合格标准,试图避免的混杂因素,如图1我们评估资格550个人,只有22可以包括在这项研究中。

5。结论

本研究的结果表明,在第一阶段高血压患者和多余的体重,食用高含量的多酚的黑巧克力与内皮功能的改善有关。

作者的贡献

利维亚德波拉Nogueira:研究概念和设计;数据收集、汇编、分析和解释;论文起草;批准最终版本的手稿。玛赛拉Paranhos Knibel:数据收集、汇编、分析、和解释;文稿起草;批准最终版本的手稿。玛西娅Regina硅镁层Goncalves托雷斯:数据分析和解释;文稿起草;批准最终版本的手稿。 José Firmino Nogueira Neto: laboratory analysis, manuscript drafting and approval of the manuscript final version. Antonio Felipe Sanjuliani: study conception and design; data analysis and interpretation; manuscript drafting and revision; approval of the manuscript final version.

承认

本研究支持Fundacao卡洛斯恰加斯球场德帕罗尽管带动做里约热内卢(FAPERJ)。