文摘
背景。根管闭塞是由杜仲胶锥和封口机。因此,这些材料,特别是密封材料,必须不会引起排斥的。这项研究调查了细胞毒性和矿化活动的两个钙silicate-based密封材料(Endoseal MTA和Ceraseal)和环氧树脂密封层(AH26)。材料和方法。在这个实验中,Endoseal MTA的细胞毒性,Ceraseal,人类牙龈成纤维细胞和AH26使用Methyl-Thiazol-Tetrazolium化验检查的时间间隔24、48、72年和120年人力资源。密封材料的矿化活动被茜素红染色试验评估。棱镜,版本。3,software was used to perform statistical tests. One-way analysis of variance analysis, followed by Tukey’s test, was used to determine the group differences.P值< 0.05被认为是具有统计学意义。结果。密封材料的细胞毒性逐渐降低( )。AH26显示细胞毒性的最高水平( )。在细胞毒性方面,没有观察到显著的差异之间的two-calcium silicate-based密封材料( )。AH26显示最低的矿化活动( )。在钙silicate-based密封材料、矿化和形成钙结节在Endoseal更频繁地观察MTA组( )。结论。研究了钙silicate-based密封材料有更少的细胞毒性和矿化活动高于树脂涂料(AH26)。有细胞毒性的微不足道的区别two-calcium silicate-based,但造成的细胞矿化Endoseal MTA更高。
1。背景
正确的根管治疗的牙齿根尖牙周炎是完全删除受感染的纸浆后,在根管预备紧随其后的是顶端的建立和冠海豹1]。根管闭塞的目的作为牙髓学的治疗的最后阶段是创建一个膨胀剂环境在整个根管系统,以防止复发性感染和根管的内部空间之间的任何沟通和牙根尖周组织(2]。
目前,在大多数情况下,牙根填塞了杜仲胶锥以及牙髓学的密封材料。主应用程序的牙髓学的密封材料来填补空空间之间的运河墙壁和杜仲胶锥(3]。密封材料防止微生物的渗透和繁殖在根管通过适当地密封在整个根管的空间,尤其是日冕和顶端区域(4]。相关使用密封材料的优点不仅是填补剩余的空白空间在运河也因为他们的抗菌性和防止细菌生长2]。
生物材料和组织之间的接触会导致交互;因此,这些材料应该不会引起排斥的而不是有害的生物环境(3]。封口机组件可能是细胞毒性对人体细胞,导致炎症和DNA损伤,导致基因组不稳定和增加致癌作用;这些物质干扰细胞元素,包括脂质、蛋白质和DNA可能损害膜的统一根据其表面的化学成分5]。
成纤维细胞有许多重要的角色,包括牙周组织的愈合。这些细胞是必要的再生纤维齿根之间的联系,齿龈,牙周韧带(6]。炎症介质是由成纤维细胞、免疫细胞结缔组织中,针对特定的病原体。通过识别病原体,招募炎症细胞,这些细胞表达促炎细胞因子,趋化因子,生长因子,以及抗菌肽、免疫特性。维持纸浆内稳态,使组织修复和再生,牙髓成纤维细胞调节他们的先天免疫反应7]。
有各种类型的密封材料,包括eugenol-based密封材料(氧化锌丁香酚),树脂密封材料(AH26啊+)和钙silicate-based密封材料称为“bioceramic”密封材料(4]。目前,环氧树脂密封材料广泛应用于根管治疗。不过,几个缺点关于这些密封材料的生物相容性报告,包括对成纤维细胞的细胞毒性的影响,潜在的诱变活性,诱导骨组织的严重的炎症反应。也提高了担心啊可能出现负面影响相邻宿主组织和延迟与根尖牙周炎牙齿的根尖周的治疗1]。
钙silicate-based密封材料密封材料的一个新组显示高度的亲水性和生物相容性。由于根管的内部环境是亲水性,水吸收和溶解性密封材料的基本性质与根管封闭剂的稳定性。同时,由于其生物活性的特性,对硬组织(他们有积极影响8]。
AH26 (Dentsplysirona Tusla,美国)是一种环氧树脂涂料,粉末和液体形式,最初介绍了单一闭塞和广泛应用是由于其合适的处理特点。在设置之前,这个封口机是比在设置有毒,随着时间的推移和毒性降低。
Endoseal MTA封口机(Maruchi, Wonju、铁原、韩国)是一个钙silicate-based根管封闭剂被注入。它含有增稠剂,radiopacifier,硫酸钙,硅酸钙,铝酸钙和有利的特点,如快速设置时间,粘结强度高,生物活性(2,9,10]。
Ceraseal (Metabiomed所领导、Chungcheongbuk-do、韩国)是一种新的bioceramic封口机使用注射,和它的成分包括硅酸钙、氧化锆、增稠剂(11]。
钙的研究性质silicate-based密封材料包括细胞迁移,对伤口愈合至关重要,细胞依恋,这periradicular修复过程中扮演着重要的角色,和离子释放。此外,研究抗炎特性,组织矿化的能力,促进组织修复,和基因表达,促进修复的潜力。相比Endoseal MTA,发现这些属性高Ceraseal密封材料(12]。
考虑纤维母细胞在免疫系统的重要性和牙周组织再生和自硅酸钙密封材料的应用越来越多,本研究进行了检查两个硅酸钙的影响密封材料的环氧树脂涂料相比,牙龈成纤维细胞的细胞毒性和矿化。
零假设是不会有任何显著差异在密封材料的细胞毒性和矿化牙龈成纤维细胞。
2。材料和方法
2.1。制备的细胞
人类是牙龈成纤维细胞系来自伊朗的巴斯德研究所。人牙龈成纤维细胞(类型C165)被移除的坦克和氮培养75厘米2瓶(Nunc-Denmark)包含杜尔贝科修改鹰介质(DMEM)富含胎牛血清和抗生素的边后卫。细胞在孵化器孵化37°C和5%的公司2,他们的培养基是改变每3天。当瓶的底部充满了细胞的通道,这些细胞被分发给几个烧瓶。
2.2。涂料的制备提取
本研究中使用的密封材料AH26, Ceraseal, Endoseal MTA。准备封口机提取,每个密封材料是根据工厂准备指令,并立即被设置之前,他们被安置在井24-well板(16.2毫米直径和高度2毫米)为每个检验员(1)。用紫外线消毒后,他们被放置在72小时的孵化器。然后2.5毫升的DMEM培养基含有抗生素没有的边后卫被添加到每个好,板是在37°C和5%孵化器有限公司248小时。这一时期后,培养基在每个材料被转移到试管,和10%的边后卫是补充道。
2.3。检查细胞毒性
后执行几个细胞通道,确保正常的增殖,细胞从培养瓶与胰蛋白酶中分离了出来。包含纤维母细胞的培养基的可行性评估和台盼蓝解决方案和移动到96孔培养板(细胞/ 0.5毫升/ 8000)没有任何有毒物质。随后,板放置在24小时的孵化器在上述标准条件下细胞的种子放在盘子里。细胞被检查后24、48、72年和120年人力资源。结束的时间间隔,细胞生存能力比例由Methyl-Thiazolyl-Tetrazolium评估(MTT) (3 - (4 5-dimethyl-2-thiazolyl) 2, 5-diphenyl-2H-tetrazolium溴)测试(13]。
2.4。MTT检测方法
预定接近结束的时候与封口机提取细胞,10µl (MTT的解决方案是添加到每个井的板块和放置在2 - 4小时的孵化器。细胞的培养基是排水,50µl(二甲亚砜(DMSO) (Merk-Germany)被添加到每个溶解减少甲瓒染料。产生颜色的强度光吸收当时评估的每个使用Elisa的读者(感知技术Inc .)的波长545 nm(630海里)的参考12,13]。
2.5。茜素红染色(ARS)测定
包含封口机的光盘被转移到一个锥形管包含20毫升新鲜培养液和放置在一个标准大气压在37°C公司为5%27天。这些准备的步骤后,解决方案是过滤了0.2µm过滤器。人牙龈成纤维细胞含有培养基中孵化24井密度为10000×2 24小时形成附件。矿化活动测量后15天,封口机的提取每3天了。
这些细胞被染色茜素2%解决方案20分钟,然后用无菌水冲洗5次。评估结果形特征,彩色细胞与10%氯化十六烷吡啶溶液中浸泡15分钟,并测量吸光度在560纳米是利用吸光度标(14]。
2.6。统计分析
棱镜,版本。3,software (GraphPad Software, La Jolla, CA) was used to perform statistical tests. One-way analysis of variance analysis, followed by Tukey’s test, was used to determine group differences.P值小于0.05被认为是具有统计学意义。
3所示。结果
在适当的时候,密封材料的细胞毒性降低,细胞活力的比例增加。根据实验结果,AH26显示最高的毒性和细胞生存能力实验人群(最低 )。没有相当大的区别两者之间的细胞毒性和细胞生存能力水平钙silicate-based密封材料(Ceraseal和Endoseal MTA) ( )(图1)。
0天,观察无显著差异的矿化和钙结节形成实验和对照组之间。15天,在所有密封材料的矿化量与对照组相比明显不同,与他们相比等效组0天( )。15天,在实验小组,AH26显示最低数量的矿化Ceraseal和Endoseal MTA密封材料相比,这种差异是重要的( )。
发现也相当不同的矿化Ceraseal与Endoseal MTA组15天( )。的矿化和钙结节形成较高Endoseal MTA组(图2)。
4所示。讨论
当注入管内部的封口机,一些反应发生牙根尖周组织,直到设置完成(15]。起源于密封材料细胞毒性牙根尖周组织通过释放有毒物质,即使封口机不推从顶端,导致根尖周的破坏,骨质疏松,伤口愈合变更、甚至牙齿脱落(3,16]。期间和之后的生物相容性和生物活性门封条封口机的设置与分泌的分子,这些分子之间的相互作用和细胞由于使用这些密封材料影响细胞增殖,分化和迁移17]。
树脂密封材料像AH26已经普遍应用于牙髓学。虽然,这些密封材料甲醛释放导致细胞毒性(18]。以前的研究已经表明这种封口机的最大毒性在第一个24小时,和这个封口机的毒性降低封口机集(14]。
氧化锆是一种radiopacifier在本研究的两个钙silicate-based密封材料。根据先前的研究,oxide-containing锆材料促进纤维母细胞生长,加速炎症反应的决议。在Endoseal封口机,铝是在高浓度的元素之一。从动物研究表明,铝基因毒性和毒性效应,该元素可以认为是封口机的根的细胞毒性12]。
钙silicate-based密封材料证明体外成骨细胞祖细胞,骨髓干细胞的发展,以及osteocementogenic基因超表达(19]。硅酸钙碱性的密封材料加强密封材料的生物相容性和抗菌性能,防止矿物的溶解中和破骨细胞(产生的乳酸13]。
评价细胞MTT比色接触毒物后可行性分析,这是一种水溶性四唑盐后会变成一个不溶性紫色甲瓒乳沟四唑环的线粒体琥珀酸脱氢酶。甲瓒不能穿过细胞膜,从而聚集在正常细胞(20.]。ARS方法为研究细胞矿化活动,被用来评估富含钙的沉积生长培养基(21]。
基于本研究的结果,零假设被拒绝,因为两个bioceramic密封材料(Ceraseal和Endoseal MTA)有更少的细胞毒性和矿化比树脂涂料对牙龈成纤维细胞(AH26)。
关于细胞毒性,没有显著的Ceraseal和Endoseal MTA的区别。此外,所有密封材料的细胞毒性降低。
Lim et al。22Endoseal)注意到更多可行的细胞群14天通过对比Endoseal和啊+组织细胞的生存能力,这是符合当前的研究的结果。通过使用MTT测定方法检测细胞的生存能力由公园等。23啊+集团]证明细胞生存能力低于Ceraseal Endoseal TCS组在整个研究中,这类似于当前研究的结果。
在评估由李等密封材料。3),包括Endoseal MTA啊+,最低的细胞生存能力在树脂涂料的研究,在目前的调查是一样的。虽然当前实验相比,细胞生存能力啊+和Endoseal MTA组显著减少在研究;同时,发表的一项研究中通过哦et al。(15),陶瓷密封材料和树脂密封材料相比细胞生存能力最高。类似于以前的和现在的研究,研究结果表明,钙silicate-based密封材料比环氧树脂密封材料生物相容性。然而,da Silva et al。24)认为Endoseal和啊+都是生物相容性。
在这项研究中由公园等。23),Ceraseal Endoseal TCS显示,吸收和细胞生存能力明显高于对照组的7天。细胞生存能力增加在整个实验过程中,在当前的研究中。
在当前的研究中,钙结节形成和细胞矿化活动,钙silicate-based密封材料进行更可取的树脂密封材料(AH26)由于钙离子释放。在钙silicate-based密封材料,比Ceraseal Endoseal MTA有更高的活动;洛佩斯-加西亚等人的研究。12),更高的细胞生存能力和矿化能力Endosequence BC和Ceraseal密封材料比Endoseal MTA被报道。搜索引擎优化等。13)观察到Endoseal MTA,公元前Endosequence BioRoot RCS形成矿化结节多啊。此外,哦et al。15)发现啊+树脂涂料染色后执行农业研究所化验显示低于Ceraseal Endoseal TCS。进行的一项研究的发现桑托斯et al。19]显示更重要的钙结节形成的钙silicate-based密封材料相比啊。这些发现符合当前研究矿化发生更多的钙silicate-based比环氧树脂密封材料密封材料集团。
临床调查表明,公元前Endosequence封口机曝光提高硬组织的沉积在人类牙周韧带干细胞(25]。钙的释放和随后的生产羟磷灰石公元前公元前Totalfill Hiflow和Totalfill密封材料也加强生物密封(26]。
此外,增加细胞增殖和矿化的牙髓干细胞BioRoot RCS和诱导细胞分化成odontoblast-like细胞一直在观察iRoot sp。同时,利用Endoseal MTA导致了生物矿化的牙本质小管(27,28]。
通过回顾当前的研究和其他研究的结果,很明显,大多数研究强调更理想的生物相容性的钙silicate-based密封材料相比,环氧树脂密封材料。
5。结论
研究结果显示钙silicate-based密封材料(Endoseal MTA和Ceraseal)比AH26更少的细胞毒性和更多的矿化活动。没有相当大的区别的细胞毒性两种钙silicate-based密封材料,但细胞矿化诱导Endoseal MTA更高。
数据可用性
使用的数据来支持本研究的发现可以从相应的作者。
伦理批准
目前的研究是医学伦理委员会批准马赞达兰大学医学科学与伦理IR.MAZUMS.REC.1400.581代码。
信息披露
这个手稿的预印本版本出现在研究方29日]。
的利益冲突
作者宣称没有利益冲突。
作者的贡献
阿扎姆Haddadi Kohsar参与概念化和方法论,穆罕默德Shokrzadeh和穆罕默德Ghorbani执行实验过程和数据收集,Farzaneh萨达特Motafeghi导致的解释数据和数据分析,船只Lotfizadeh参与了调查,数据分析和起草手稿,阿扎姆Haddadi Kohsar修订内容。所有作者的手稿的最后编辑和批准了这项内容。
资金
这项研究是由马赞达兰大学医学科学的研究中心。