文摘
客观的。红色激光的抗菌效果评估使用不同的敏化亚甲蓝和孔雀石绿等污染的monoradicular前磨牙粪大肠写明ATCC 29212。方法。这是一个体外实验研究。Monoradicular前磨牙(44、45、34和35)被使用,ProTaper处理下。工具修改之后,灌溉、消毒和愿望进行2毫升4% NaOCl NaviTip 30°G针(Ultradent,约旦、UT、美国)。组1:RL + MB(红色激光与亚甲蓝光敏剂),组2:RL +毫克(红激光与孔雀石绿光敏剂)和组3:控制(不处理)。的粪大肠应变是培养trypticase大豆琼脂(TSB)(美国MI Difco,底特律)和孵化24小时37°C。潜伏期后,每组菌落(CFU /毫升)的计算采用平皿计数法。方差分析检验的显著性水平 。结果。组1抗菌污染最低,平均只有530±581.3 CFU /毫升,而第二组的污染平均最高1990±542.5 CFU /毫升。比较显示,有统计上显著的差异RL + MB和RL +毫克组( )。结论。组1有最好的抗菌潜力,因为它污染最低的CFU /毫升粪大肠相比,组2和组3。
1。介绍
消毒是牙髓学的主要目的之一,因为减少根管系统中微生物的数量将决定的潜在成功或失败牙髓学的治疗,和其他疾病的口腔1- - - - - -4]。近年来,各种各样的技术和材料被用来实现理想的消毒、化学-机械准备是最广泛使用的牙髓学(5- - - - - -7]。然而,由于微生物的耐药性存在于牙根,往往很难达到完全消除与传统牙髓学的技术(8- - - - - -10]。
粪肠球菌最大抗牙髓学的治疗因其生存能力在根管系统在非常不利的条件,这就是为什么它已成为最流行的菌株在牙髓学的再感染的情况下(5- - - - - -8]。因此,寻找新的替代和/或补充传统的牙髓学的治疗方法是至关重要的减少的速度发生牙髓学的失败。目前,光动力治疗,它可以摧毁耐药微生物相结合的作用与特定波长光源和光敏剂的氧气,介绍了牙髓学领域的(11- - - - - -14]。
许多研究进行了不同的光源,与低功率二极管激光光动力治疗中最常用。此外,研究最多的一个敏亚甲蓝,可以激活一个光源波长从610纳米到660纳米(红灯)1- - - - - -3]。最近,光动力治疗的抗菌效应,研究了利用激光与红光波长(660海里)作为光源,与亚甲蓝作为光敏剂,对微生物在牙根。这些研究有良好的结果由于高亲和力的两人彼此(7- - - - - -10]。
另一种光敏剂在文献回顾的是孔雀石绿,可以激活不同的波长。该特性允许孔雀石绿比其他更多功能敏化的应用程序,因为它可以激活通过与不同波长光源,包括红光(8- - - - - -12]。因此,很可能具有良好的吸收相同的红色光源,孔雀石绿的礼物这样的抗菌效果或大于亚甲蓝。
因此,本研究旨在评估一个红色激光使用的抗菌效果不同的敏化,如亚甲蓝和孔雀石绿monoradicular人类污染的前磨牙粪大肠写明ATCC 29212。
2。方法
2.1。研究设计
这项研究是一个实验性的、前瞻性和比较研究。微生物实验室的实验进行了医院Nacional Hipolito Unanue,秘鲁首都利马、秘鲁。样本大小计算是基于数据从一个试点研究。样本大小的计算使用均值比较公式使用占据v。15日的最小大小n= 30 monoradicular人类前磨牙分为三组。组1:RL + MB(红色激光与亚甲蓝光敏剂)组2:RL +毫克(红色激光与孔雀石绿光敏剂)组三:控制(不处理)
2.1.1。选择标准
入选标准(我)永久monoradicular前臼齿最近提取原因矫正(2)前磨牙与单一,直条运河(3)没有根的存在骨折前磨牙(iv)前磨牙没有钙化排除标准(我)前磨牙与广泛龋的病变(2)前磨牙与曲率(3)前磨牙与先前的牙髓学的治疗(iv)与hypercementosis Monoradicular前磨牙(v)Biradicular前磨牙(vi)不完整顶端形成的根源(七)根与内部和/或外部吸收的迹象
2.2。样品制备
最近提取永久monoradicular磨牙收集与本研究无关的原因(牙)。牙齿被沉浸在一个容器4%次氯酸钠溶液2 h,消除杂质,在室温下保存在盐水。一旦样品被选中,冠分段使用马拉松手持微电机(Saeyang Microtech有限公司,有限公司,大邱,韩国)和钻石瓣(Hm22D20) 35000 rpm标准化15毫米的长度。
2.3。牙髓学的治疗
工作长度测定使用# 10 K型文件(Dentsply / Maillefer、Ballaigues、瑞士),和机械仪表进行到1毫米在顶端孔。根运河(前磨牙44岁,45岁,34和35)准备和标准化文件的直径40 #使用Protaper下旋转系统(Dentsply / Maillefer、Ballaigues、瑞士)。在每个乐器变化、灌溉和愿望进行2毫升4% NaOCl NaviTip 30 g针(Ultradent,约旦、UT、美国)。最后准备,运河灌溉了3毫升的17% EDTA (Maquira、Maringa、巴西),其次是5毫升生理溶液和干用无菌纸锥(Spident有限公司、仁川、韩国)。在准备,EDTA用于消除诽谤层的形成,然后继续感染大肠feacalis。接下来,每个牙垂直放置在以前被cryovial管和固定块Zetaplus硅胶材料(Zhermack SpA,十二月Polesine,意大利)。然后他们被放置在一个autoclavable框和样本热压处理过的20分钟的121°C。
2.4。接种的粪大肠
粪肠球菌(写明ATCC 29212株)从GenLab获得实验室。应变是生长在trypticase大豆琼脂(TSB)(美国MI Difco,底特律)和孵化24小时37°C。此外,细菌悬液制备在无菌生理盐水浓度相当于0.5麦克法兰和光学密度测量用浊度计(MicroScanturbidetMiller、西门子、美国)的波长620 nm的吸光度度在0.8和0.10之间,表明浓度相当于1.5 - -2.0×108CFU /毫升。随后,细菌悬液接种到每个根管直到结核菌素使用1毫升注射器和NaviTip 30 G针(Ultradent,约旦、UT、美国)。细菌悬液接种到观察细菌悬液的溢出的顶端部分。无菌纱布的牙根尖立刻干密封每根用后的小孔Estelite用光催化树脂(德山牙科公司、日本东京),通过顶点在接种预防细菌泄漏。最后,牙齿被孵化21天微量需氧的条件下生物膜的形成在37°C。
2.5。应用光动力治疗
组1,解决Chimiolux(亚甲蓝0.005%)(DMC,圣保罗,巴西)作为光敏剂。应用之前,多余的培养基被从根运河,为它灌溉2毫升生理溶液(氯化钠0.9%)和干用无菌纸锥。接下来,0.005%亚甲蓝光敏剂与结核菌素应用于每个根管注射器和NaviTip 30 G针(Ultradent,约旦、UT、美国),被扔在那里5分钟(preirradiation)。
组2,0.005%孔雀石绿的解决方案是使用光敏剂。这个解决方案是由溶解孔雀石绿粉(草酸孔雀石绿)(HiMedia实验室pvt Ltd .,孟买,印度)在无菌蒸馏水达到浓度,然后通过无菌过滤膜(孔径为0.22μm;女士®、东京、日本)presterilized集装箱供以后使用。接下来,0.005%孔雀石绿光敏剂与结核菌素应用于每个根管注射器和NaviTip 30 G针没有溢出,5分钟(preirradiation)。
敏化的preirradiation时间后,激光持续照射,治疗XT的激光设备(DMC,圣保罗,巴西)波长为660 nm(红色)和200的小费μ米直径(DMC,圣保罗,巴西)使用。
对照组,没有进行治疗,根运河被接种粪大肠写明ATCC 29212。
2.6。微生物分析
为粪大肠播种,循环损耗方法:首先,1毫升生理解决方案(氯化钠0.9%)被添加到每个cryovial管,进而包含一个宝塔纸管和动摇60秒稀释,使均匀样本。接下来,一个具有代表性的10μl是无菌循环和播种在Enterococcosel琼脂37°C 48 h。潜伏期后,菌落(CFU /毫升)统计每组采用平皿计数法。
2.7。统计分析
连续变量的均值和标准差(CFU /毫升)计算。通过直方图的正常数据分布确定情节和Shapiro-Wilk测试。推理分析组间进行使用单向方差分析。最后,进行简单的回归分析。所有统计测试进行95%置信水平( )。数据处理和分析使用占据v.15。
3所示。结果
3.1。红色激光的抗菌效果的比较
组1的意思是抗菌最低污染与530±581.3 CFU /毫升,而第二组最高污染与1990±542.5 CFU /毫升。所有的组织都是正态分布的连续数据,p> 0.05。单向方差分析显示有统计学意义差异RL + MB和RL +毫克组( )(表1)。
3.2。事后分析红色激光的抗菌效果
事后分析,只有显著差异的抗菌效果1组和3组,组2和组3, 在这两种情况下(表2)。
3.3。红色激光的线性回归的抗菌效果
平均抗菌功效是1460 CFU /毫升,CI(144.51 - -2775.4)在2组,第1组相比,差异具有统计学意义。此外,平均抗菌功效是10900 CFU /毫升,CI(9584.51 - -12215.48),对照组与第1组相比,具有统计学差异(图1和表3)。
4所示。讨论
牙髓学的主要是完整的根管消毒系统。然而,由于微生物的耐药性出现在牙根传统牙髓学的治疗,它已被证明他们完全消除是非常难实现的。粪大肠是一种最耐药微生物导致二次根管感染。因此,光动力治疗已被建议作为替代和/或补充传统的牙髓学的治疗因其低毒性主要是因为不存在耐药性微生物的治疗效果。同样,有一些变量时要考虑应用PDT,包括特定的光源,敏化和辐照参数。微生物的分析,可以分析使用的方法通过CFU /毫升细菌数。体外研究中,然而,由于这是一个方法论的设计可以改善能够评估变量微生物渗透到牙根通过电子显微镜图像。(13- - - - - -15]。
本研究中使用的敏化是亚甲蓝和孔雀石绿在0.005%的浓度直接比较。两人都耦合激光波长为660 nm(红色)兼容吸收光谱。激光装置和功率100 mW,用于90年代获得9 J的能量。对照组也进行了评估。在目前的研究中,克隆形成单位数(CFU /毫升),这是最常用的方法之一,这种类型的研究中,被用来评估的抗菌效果提出的解决方案。
我们的研究旨在评估红色激光使用的抗菌效果不同的敏化monoradicular人类污染的前磨牙粪肠球菌写明ATCC 29212。我们发现最低的平均抗菌污染而给出的组1组2污染,最高浓度两组之间的差异是团体之间的统计学意义。然而,Sebrao等人进行了一项研究比较粉红色孟加拉的功效和亚甲蓝敏化减少的可行性粪大肠,他们用不同浓度和光源:亚甲蓝,他们用浓度为31.2μmol / L(0.01%)与激光的波长660 nm(红色)和玫瑰红,他们使用的浓度为25μmol / L与激光的波长532 nm(绿色)。同样,激光设备都使用功率40 mW, 180年代获得7.2 J的能量。亚甲蓝光敏剂并未出现显著差异的控制,这与本研究结果不同,在从控制(亚甲蓝明显不同16]。
因此,研究中需要考虑的一个因素由Sebrao等人是较低的能量(7.2 J)是使用激光设备,导致较低的细菌减少而不是本研究的能源消耗较高(9 J)。同样地,当比较两个互相敏化,他们表现出显著差异,玫瑰红表现出最好的结果。
另一方面,席尔瓦et al。17)进行了一项研究比较亚甲蓝的抗菌效果和孔雀石绿,浓度为0.1%和与激光波长为660 nm(红色)。同样,使用激光设备功率40 mW 30, 60、120年代。发现两种敏化呈现显著差异的控制(60和120年代),这与本研究的结果相似。然而,当敏都与对方相比,他们没有表现出显著差异,从目前的调查结果,亚甲蓝和孔雀石绿,与对方相比,显示出统计上的显著差异。与我们的研究中,席尔瓦等人用更高浓度的敏化使用(0.1%),导致更大的细菌减少而不是目前的研究使用的浓度较低(0.005%)。然而,这0.1%的浓度可以染色的牙齿,使它不适合临床应用(18]。
体外研究的主要局限是,只有两个对照组被认为,尽管这将是重要的比较与其他消毒方法。要考虑的另一个限制是,在研究[17),他们没有使用牙片,这可能是临床不切实际,因为,在目前的研究中,牙片使用精确提供条件尽可能相似的临床条件对细菌生长和治疗的应用。因此,自协会红色激光与敏化浓度为0.005%(亚甲蓝或孔雀石绿)显示显著的抗菌效果粪大肠的可能性还有待进一步的研究孔雀石绿敏新浓度和特定的光源来促进他们对亚甲蓝代替使用光敏剂在光动力治疗在牙髓学及其应用19- - - - - -21]。
目前的工作旨在增加证据,与天然产物(一样22,23),抗菌效果的红色激光与不同敏化亚甲蓝和孔雀石绿等粪大肠写明ATCC 29212,因为这两个之间的关系表明对耐药微生物的良好效果。研究已经进行红色波长激光的应用与亚甲蓝两者之间由于存在的兼容性。然而,很少研究了孔雀石绿,尽管这种光敏剂不仅提出了关联着红色的波长,但还可以激活其他波长如蓝色和绿色,这让它胜过其他的敏化的应用程序。
5。结论
在目前的局限性在体外研究中,人们发现RL + MB组有最好的抗菌潜力,因为它提出了最低的污染CFU /毫升粪大肠相比RL +毫克组和对照组(无治疗)。
数据可用性
的数据支持本研究的发现可以从相应的作者在合理的请求。
的利益冲突
作者宣称没有利益冲突。