文摘
三十慢性牙周炎患者被随机分为3组:控制、盐水,必要油脂防腐剂(EO)。龈下的斑块从90口袋收集所有科目。随后,龈下的超声波仪器(隋)是由使用EO或盐水为灌溉的代理。后连续的嘴和EO或生理盐水冲洗在家里7天,龈下的斑再次取样。Periodontopathic细菌量化使用修改后的入侵者+试验。浅口袋中的细菌总数(囊袋深度(产后抑郁症)= 4 - 5毫米)在盐水(显著降低)和光电组()。细菌总数(),Porphyromonas gingivalis(),Tannerella连翘(在雄厚(产后抑郁症)计数毫米)只在EO组显著降低。改变比较的比例相对于基线值的总细菌数分类,生理盐水和光电组产后抑郁症对于产后抑郁症EO组4 - 5毫米,6毫米显示显著低比率()。EO的辅助使用可以有效地减少龈下的细菌计数在浅和深口袋。这个试验与UMIN临床试验注册中心注册UMIN000007484。
1。介绍
完善,牙周炎是由当地细菌感染病原微生物引起的殖民和增殖的牙龈缝隙和牙周袋易感主机(1,2]。牙周治疗的目的是消除口腔生物膜和微积分的机械去除(3]。然而,减少机械疗法的疗效越来越袖珍深度和分叉的参与;口袋,越大越深叉形参与,留下更多的存款(4]。因此,一种杀菌剂的使用与机械仪器被广泛应用于控制龈下的生物膜。许多临床和微生物进行研究;然而,他们的研究结果是不确定的5,6]。
各种防腐剂,包括洗必泰和聚乙烯吡咯酮碘,迄今为止用作灌溉代理。虽然洗必泰被认为是最有效的抗菌剂supragingival菌斑控制,它的使用作为一个irrigant结合龈下的超声波仪器(隋)与更多的临床和微生物效益(没有联系7- - - - - -9]。聚乙烯吡咯酮碘具有有益效果为龈下的灌溉解决方案(10,11];然而,防腐剂与过敏反应的风险增加有关,和它的长期使用与甲状腺功能障碍和染色的齿面和粘膜12- - - - - -14]。
基本油脂防腐剂(EO)是一种非处方漱口水含有2 phenol-related精油;EO与最少的副作用和杀死微生物的广泛破坏细胞壁和抑制酶活性(15,16]。EO能够提取木糖醇,理论上可以减少斑块致病性(17]。此外,在体外和在活的有机体内研究表明,EO穿透菌斑生物膜和活跃biofilm-embedded细菌(15,18]。这些特征可能支持潜力EO龈下的灌溉代理。
虽然有越来越多的证据的有效性和安全性EO当用于牙龈炎和supragingival菌斑控制(19- - - - - -21),足够的信息关于它对龈下的微生物群的影响。此外,在这些研究中,EO不是应用通过使用病人自己或家庭龈下的灌溉设备的专业灌溉与注射器。很少有研究评估隋灌溉与EO在微生物群的影响。最近,我们报道,隋和7天漱口水使用EO显著降低龈下的总细菌的细菌计数,Porphyromonas gingivalis(p . gingivalis),Tannerella连翘(t .连翘)[22]。然而,目前尚不清楚区别的功效的深度的口袋里。这个问题并没有被充分讨论和值得调查。因此在目前的研究中,我们评估的微生物影响光电结合隋和口腔冲洗在不同程度的慢性牙周炎患者牙周袋深度。
2。材料和方法
2.1。主题
三十对象是从病人参加新泻大学医学和牙科医院,新泻,日本,2007年1月至2008年10月。研究区域伦理委员会批准的协议是牙科学院,新泻大学(110号,2006年12月11日),和所有受试者知情同意参与研究之前提供。系统健康受试者的最低20牙齿和普遍严重慢性牙周炎,牙齿也被定义为拥有至少3的囊袋深度(产后抑郁症)≥4毫米在每个象限,被选中。
主题与下列条件被排除在外:患者全身性抗生素,抗炎药或免疫抑制药物实验前应在3个月内。那些接受牙周治疗的病人在六个月内在实验之前,那些经常使用口服灌溉设备和/或漱口水,和那些不兼容的齿列(例如,矫正乐队、局部假牙或牙齿不适合广泛的超声波缩放)也被排除在研究。
2.2。临床检查
彻底为每个病人获得医疗和药物的历史。吸烟习惯也记录(每天要吸几支香烟,多年的吸烟)。超过1个月前的研究中,所有受试者接受标准的口腔卫生指导和接受口中supragingival扩展并最终显示菌斑控制< 20%的记录。研究开始的前一周,嘴唇丰满牙周检查。以下临床参数记录:产后抑郁症,临床附件(CAL)水平,并在探测出血。产后抑郁症和卡尔都记录在6网站每齿(近中颊的颊,distobuccal, mesiolingual,舌,和distolingual)牙周探针(CP-12彩色编码探针;美国Hu-Friedy、芝加哥、IL)。象限出现最严重的牙周状况的基础上,临床发现被选为隋唐的网站。
2.3。临床协议
样本容量确定参照执行我们的以前的报告研究开始前(22]。共有30个受试者被随机分配到3组根据治疗协议(控制,;生理盐水,;EO,)通过使用随机表提供的报告的作者之一(D.A.)和有一个代码数字识别在整个研究。所有试验程序和收集的临床资料进行牙科诊所在新泻大学医学和牙科医院2007年2月至2008年12月。
后的选择治疗象限3最深的口袋,龈下的斑块收集基线从90所有3组的牙周袋。随后,象限使用超声波设备执行隋(Suprason P-Max灌溉工具;Satelec,波尔多,法国)和特定的技巧(HY1提示;Satelec),涉及灌溉EO 100毫升(EO组;新鲜的薄荷李斯德林;约翰逊和约翰逊k . k .消费公司,日本东京)或无菌生理盐水(生理盐水组;大冢生理盐水;大冢制药有限公司,日本东京)10分钟。隋唐之后,他们被要求进行口腔冲洗在家每天4次(每顿饭后和睡前)20年代20毫升EO (EO组)或盐水为7天(生理盐水组)根据我们的以前的报告,这是一个生产改性剂量的建议(22]。没有在对照组受试者进行治疗。7天后,龈下的斑又收集了3组。所有临床过程包括牙周检查和隋都由一个牙医(t . m .)训练,足以防止技术不一致。受试者被要求不要刷牙,只消耗液体取样前至少2 h。
2.4。龈下的斑块采样和量化细菌化验
删除supragingival斑块后,龈下的斑块样本被插入2无菌纸数量40分(就是secu * tanu减去VDW拉链吸收纸点,GmbH,慕尼黑,德国)连续的牙周袋10 s在每个选定的网站。
定量分析的细菌总数和periodontopathic细菌计数,包括p . gingivalis,普氏菌媒介物(p .媒介物),t .连翘使用修改的入侵者执行+试验(22- - - - - -24]。简单地说,从斑块样本中提取细菌的DNA是暂停到麦格纳1毫升的PBS使用纯LC总核酸隔离设备(罗氏、巴塞尔、瑞士)。得到了各个序列的细菌种类从公共数据库(国家生物技术信息中心,马里兰州贝塞斯达,美国)。为每一种引物设计基于16 s rRNA基因的一个地区。一对通用引物和一个通用探针用于细菌的总数。主要调查和入侵者寡核苷酸的设计使用入侵者技术创造者(美国WI HOLOGIC,麦迪逊)和基于序列在放大区域(25]。
模板DNA被添加到15μL反应混合物引物为每一个物种,50μ核苷酸,700 nM主要调查,70 nM入侵者益生元,2.5 U聚合酶链反应(PCR)酶(EagleTaq DNA聚合酶,罗氏)和入侵者核心试剂盒(Cleavase XI入侵者核心试剂盒,HOLOGIC)包含一个荧光共振能量转移(FRET)和酶/ Mgcl混合2解决方案。反应混合物在95°C 20分钟,预热和两步PCR反应进行了35周期(95°C 1分钟1和63°C)使用ABI棱镜7900 thermocycler(美国应用生物系统公司,培育城市,CA)。荧光值carboxyfluorescein (FAM;波长/带宽:励磁,485/20 nm;发射,530/25 nm)测量结束时孵化/扩展步骤为每个周期在63°C。
这种方法的检测极限是每个物种与稀释细菌的DNA决定的。标准曲线建立了基于穿越点由合适点的方法。
2.5。统计分析
进行了描述性分析(平均值和标准偏差(SD))收集的数据。组之间的差异在临床参数建立了利用克鲁斯卡尔-沃利斯检验。社会团体内部的比较龈下的生物进行使用Wilcoxon符号秩检验。龈下的生物组间比较采用方差分析是邓恩(方差分析)和Bonferroni /作为事后测试的测试。结果分析统计软件SPSS 12.0版Windows(美国SPSS Inc .,芝加哥,IL)。一个值< 0.05被认为是具有统计学意义。
3所示。结果
3.1。主题描述
所有参与者成功完成这项研究协议。任何主题不会丢失是由于产后抑郁症减少1个月后菌斑控制。所有的患者在研究报告任何普遍的健康问题。研究对象的临床和人口特征如表所示1;观察两组之间没有明显的统计学差异。同时,统计学上显著差异被认为在所有临床特征之间的采样站点(表浅和深口袋2)。
3.2。细菌在龈下的斑
意味着±SD龈下的细菌计数浅(产后抑郁症= 4 - 5毫米)和深度(产后抑郁症≥6毫米)口袋在基线和7天后如表所示3和4。产后抑郁症类别是根据这些提出的罗斯林et al。11]。
浅口袋,所有物种的细菌数7天后观察对照组类似于基线值。只有细菌总数在生理盐水组明显减少()。EO组显示细菌总数和显著减少p . gingivalis和t .连翘计数()。
雄厚,与细菌总数和显著增加p . gingivalis计数观察对照组(),显著降低细菌总数(),p . gingivalis(),t .连翘()计数的EO组。没有明显差异,任何物种的生理盐水组。
图1组间比较的结果显示后龈下的细菌数量的变化比7天相对于基线值总细菌和选择牙周细菌在牙周袋分为3产后抑郁症类别(4 - 5毫米,6毫米,≥7毫米)。生理盐水和光电组总细菌比明显低于对照组的产后抑郁症(4 - 5毫米);然而,没有显著差异为每个单独的物种。产后抑郁症的6毫米,只有EO组显示显著降低细菌总数和比例p . gingivalis和t .连翘率比对照组()。特别是总细菌比光电组明显低于生理盐水组()。产后抑郁症的≥7毫米,p . gingivalis比光电组显著低于对照组();然而,细菌总比没有显著差异,其他的物种。的p .媒介物比对于所有类型产后抑郁症发生率在3组。
4所示。讨论
本研究的目的是评估的微生物影响光电结合隋和嘴巴为各种牙周袋深度清洗。我们证明了一个联合治疗与隋和嘴清洗EO是有效减少龈下的细菌计数浅和深口袋。
据报道,吸烟可能有害地影响龈下的微生物区系的组成(26]。然而,在目前的研究中,没有观察到显著差异之间的吸烟者和非吸烟者对龈下的细菌计数。这可能是因为包容的轻度吸烟者(平均9.4包年)和采样站点的使用受吸烟的影响最小。
在这项研究中,细菌总数的浅口袋(产后抑郁症= 4 - 5毫米)是显著降低在盐水和光电组。然而,EO组剧烈减少,显著减少periodontopathic细菌等p . gingivalis和t .连翘只在光电组。相比之下,仅观察到光电组显示,微生物数量显著减少当雄厚(产后抑郁症≥6毫米)进行分析。细菌总数的变化比率EO组也显著低于其他组产后抑郁症的4 - 5和6毫米。这些结果表明,组合使用隋和7天与EO漱口水是有效地降低龈下的细菌量浅和深口袋。此外,冯卡尔等人最近报道,明显增加收益和减少产后抑郁症是观察到隋灌溉EO比消极的解决方案在雄厚(产后抑郁症≥7毫米)(27]。这些数据意味着EO在深牙周袋的临床疗效。
实验协议是指在我们以前的报告,证明了降低细菌计数的牙周袋由于隋和7天使用EO漱口水。在目前的研究中,我们进一步评估龈下的微生物群在3组织控制,光电,和一个新引入的盐水一无所知,以便评估是否机械或化学作用占主导地位。生理盐水组显示的总细菌数显著减少浅的口袋。这表明隋和口腔冲洗无防腐剂也有一些影响减少龈下的微生物在浅的口袋。很可能由于龈下的斑去除和细菌细胞破坏通过振动凿行动的提示,cavitational活动,和声学microstreaming隋。EO组假定这些机制改善EO的杀菌效果,导致更大的减少龈下的微生物区系(28,29日]。进一步,更频繁的漱口水在这个协议可以在一定程度上影响降低。
有趣的是,社会团体内部的组间比较显示,对无显著差异p .媒介物计数。这可能是由于细菌计数低大约1/100-1/10相比其他细菌检查。这些数据符合的结果Rhemrev et al。30.和波特罗等。31日),报告说p .媒介物计数的沟病变的慢性牙周炎网站非常低,即使检出率高。的可能性p .媒介物是耐EO似乎遥远。
细菌计数光电组显著减少后7天浅和深口袋。在短期的研究中,然而,隋可能深刻地影响到龈下的微生物群。细等人报道的影响持续使用口服灌溉设备为6周(EO在家每天一次20.]。牙周细菌物种包括细菌计数梭菌属sp。Capnocytophagasp。链球菌引起的杂志,和p .媒介物相比明显减少1或3周后基线;然而,它相当3或6周后。因此,它似乎是难以长期维持低龈下的细菌由于其再生。
在研究设计中,生物膜上的超越和龈下的斑块首次将被基于隋机械处理,导致细菌的总数的减少。然后,预计每天嘴巴洗后与EO隋扰乱了相邻supragingival牙菌斑和龈下的细菌的再生将会保持到最低限度。研究已经证明,口腔冲洗与光电效应的变化龈下的植物在牙周袋(32,33]。同时,据博伊德et al .,漱口水使用牙菌斑显示解决方案只能穿透深达0.1毫米到牙周袋(34),这可能表明,口腔冲洗的参与对龈下的微生物群重要的是轻度影响。因此,我们推测,口腔冲洗和EO对龈下的植物虽然具有一定影响的程度是有限的。
5。结论
本研究的结果表明,辅助使用EO隋和嘴清洗是有效减少龈下的细菌计数浅和深口袋。这项研究是第一个报道牙周袋深度的有效范围与隋和口腔综合治疗使用EO冲洗。作为进一步的研究,细菌和临床数据之间的相关性在某些时间点,改变口腔卫生水平基于菌斑指数,和几个比较进一步分类组织将为这种联合治疗提供有益的信息。研究在不同类别的牙周袋深度也需要验证这个辅助治疗的潜在功效。此外,开发新型抗菌物质,如酶和肽,可干扰细菌活动,为未来的研究是一个问题。
确认
作者感谢Shoji竹中平藏博士,新泻,大学研究生院医学和牙科科学、新泻、日本建议和有用的评论。这项工作是支持的补助金的年轻科学家(B) 19791607教育部,文化,体育,科学,技术的日本,日本东京。作者宣称没有利益冲突。