文摘

本研究旨在考察交流电离子透入疗法的效果在大鼠慢性收缩损伤(CCI)通过动物实验来眼眶下的神经。CCI模型老鼠分成四组,即接受全身麻醉的大鼠60分钟除了AC眼压(CCI:),AC眼压0.9%生理盐水为60分钟(CCI +生理盐水AC IOP:),AC眼压4%盐酸利多卡因60分钟(CCI +利多卡因AC IOP:),附件的两个电极浸泡4%盐酸利多卡因的面部皮肤60分钟(CCI +附加利多卡因:)。CCI AC IOP +利多卡因组,一个撤军后观察阈值AC眼压升高,和功效的持续时间更长时间的价格相比CCI +盐水AC眼压和CCI +附加利多卡因组。的数量明显降低Fos-like免疫反应性的(李)中可观察到细胞CCI +利多卡因AC眼压组的价格相比CCI组。这些发现表明,CCI +利多卡因AC眼压组的影响可能是由于利多卡因的积极渗透的面部皮肤和电刺激三叉神经核。

1。介绍

很难控制疼痛引起的神经损伤与抗炎剂和抗生素等药物。神经性疼痛的药物推荐抗抑郁药、钙通道a2-d配体,阿片受体激动剂,曲马多,等等1]。在我们的诊所,许多药物如抗抑郁药、抗惊厥药物和抗焦虑药物通常一起使用认知行为治疗来治疗这些患者。邮政寿险局(日本传统医学)和针灸疗法也使用。此外,我们提供光动力治疗和交流电(AC)电离子透入疗法(图1)。

经皮肤给药可以增强化学和物理增强系统。离子电渗疗法是使用电能(物理增强系统2,3]。相距两个电极放置在皮肤上,并被指控通过电泳药物通过皮肤运输。电渗皮肤内产生的电流也使交通水化水离子在皮肤(4,5]。

电离子透入疗法的原理是在1747年第一次被Veratti,在上个世纪,实验使用一系列不同的药剂。1975年,Echols等人研究了电离子透入疗法对粘膜的影响豚鼠内耳的用4%盐酸利多卡因6],耳鼻喉科和牙科领域的研究主要集中在其应用程序作为局部麻醉的方法。

直流电(DC)通常用于电离子透入疗法;然而,它经常引起皮肤过敏,烧伤,和炎症7]。除了其副作用,电极极化通常发生在直流离子电渗疗法表明该方法不能申请更长时间(8,9]。为了克服这些副作用,Reinauer等人在1993年提出了AC电离子透入疗法的使用(10]。AC电离子透入疗法导致皮肤过敏,不会导致电极极化;因此,它可以用于比直流离子电渗疗法更长的持续时间。利用这些特征,我们临床应用与4%盐酸利多卡因在我们部门交流电离子透入疗法治疗神经性疼痛。

对提高经皮吸收的机制AC电离子透入疗法,Shibaji等人推测在2001年减少有效的斯托克斯的离子半径的增加引起的振动能量的离子电极之间的交流电势应用在离子运输中起着决定性的作用[11]。

尽管交流电离子透入疗法已被证实是临床有效,作用机制仍不清楚。在目前的研究中,AC电离子透入疗法的效果在老鼠实验检查。

2。材料和方法

动物实验用慢性收缩损伤(CCI)作为模型的神经性疼痛评估交流电离子透入疗法的效果。

2.1。动物

45岁男性Sprague-Dawley老鼠(240克~ 300克)。老鼠们被安置在一个12小时的光/暗周期提供食物和水随意。大鼠治疗的指南国际疼痛研究协会(12]。本研究机构动物保健和使用委员会批准东京医疗和牙科大学(没有。0080093)。

2.2。慢性收缩损伤(CCI)大鼠模型

退出阈值测量用冯·弗雷单丝在操作之前。CCI是使用的方法执行导演今村昌平et al。13]。老鼠与戊巴比妥钠麻醉(50毫克/公斤腹腔内(i.p)];intraorally了一个口子,左眼眶下的神经被曝光。两个松散紧缩绳索系在4.0铬肠道的神经缝合。在这之后,切口缝合使用4.0丝。

撤军阈值再次手术后7天测量并与手术前的数据。老鼠显示明显降低提取阈值被认为CCI模型大鼠。

虚假的操作是一样的CCI操作除了神经结扎()。

2.3。交流电电离子透入疗法(AC IOP)

用于AC眼压的电刺激器是一个临床设备(cs - 504;制药电气有限公司、日本)。电极是由棉花和铜网。一个电极浸泡0.05毫升的4%盐酸利多卡因或0.9%生理盐水。两个电极放置在上颌神经的面部皮肤面积和固定手术胶带,和一个脉冲交流电压(1 V, 50赫兹)申请60分钟。

2.4。行为实验

CCI模型老鼠分成四组,也就是说,老鼠接受麻醉60分钟除了AC眼压(CCI集团),AC眼压0.9%生理盐水的老鼠申请60分钟(CCI +生理盐水AC眼压组,),AC眼压4%盐酸利多卡因应用于大鼠60分钟(CCI +利多卡因AC眼压组,),放置两个电极浸泡4%盐酸利多卡因的面部皮肤60分钟(CCI +附加利多卡因组:)。

麻醉前机械撤出阈值测量使用·冯·弗雷单丝。机械刺激应用须垫和交替应用到侧(右)和侧(左)。机械阈值确定撤军作为最低的力量导致戒断反应。每个单丝应用三次每隔5秒。如果一个老鼠显示头戒断反应或修饰须垫,甚至三倍,相应的力被认为是导致戒断反应。机械撤出阈值测量五次,和中间的五个值确定机械鼠撤军阈值。这些值被平均为每个组。机械提取阈值的CCI组相比在虚假的组证明提取阈值的变化不是由炎症引起的,因为操作。

老鼠与戊巴比妥钠麻醉(50毫克/公斤i.p),和两个电极放置在上颌神经的面部皮肤区域,用医用胶带固定。全身麻醉维持1% ~ 4%氟烷。每组治疗60分钟。机械撤出阈值为0,30、60、90和120分钟后治疗。

2.5。Immunohistological实验

二十CCI模型老鼠分成四组看到的行为实验。治疗后,机械刺激(60克,0.5赫兹,10分钟)是应用于大鼠·冯·弗雷单丝。两个小时后,老鼠与戊巴比妥钠麻醉(80毫克/公斤i.p)。并通过主动脉灌注生理盐水300毫升0.9%和4%多聚甲醛在0.1 M磷酸盐缓冲剂(PB) 300毫升。大脑和髓质被移除,沉浸在4%多聚甲醛在0.1 PB 3天在4°C,并转移到蔗糖30% (w / v) 0.1 PB cryoprotection好几天。

被削减的部分在冷冻切片机厚度30μm,第四节都收集在0.02磷酸缓冲盐(PBS)。自由浮动的部分是在PBS洗,然后用3%过氧化氢(H₂O₂在PBS) 10分钟。与PBS三洗后,部分被孵化3%正常山羊血清(上天)2小时。这之后,部分与兔子anti-Fos孵化(1:10000;c-fos ab-5,致癌基因,剑桥,美国马)在3%的门店在一夜之间25°C。与PBS三洗后,与生物素化的二次孵化的部分免疫球蛋白g (1: 200;美国向量实验室,伯林盖姆,CA) 2小时25°C。与PBS三洗后,部分是孵化peroxidase-conjugated avidin-biotin复杂(1:100;ABC,向量实验室)2小时25°C。以下三个冲洗PBS和一个用0.05三羟甲基氨基甲烷缓冲液洗净(结核病),沉浸在0.035%的部分3,3′-diaminobenzidine-tetra盐酸(轻拍,σ,圣路易斯,密苏里州,美国),硫酸镍铵0.2%,0.05%的过氧化0.05结核病。最后,部分在PBS冲洗,安装在gelatin-coated幻灯片在酒精脱水,二甲苯清除,覆盖着Eukitt (o . Kindler,弗莱堡,德国)。

黑色存款在细胞核的细胞被认为是Fos-like免疫反应性的细胞(李连杰饰)。Fos-LI细胞数的数量每部分老鼠。”丛书李津细胞的平均数计算五大鼠。

2.6。分析

数据提出了意味着±标准平均误差(SEM)。单向方差分析是用来分析组织行为之间的差异和immunohistological实验。事后进行了比较与Bonferroni测试评估机械阈值在7天后CCI撤军。和事后比较进行Dunnett测试来评估治疗后机械提取阈值的变化和分布的表达式Fos-LI细胞在三叉神经核。P小于0.05的值被认为是具有统计学意义。

3所示。结果

机械撤出阈值在所有组大鼠接受CCI显著降低身体的同侧的一侧与虚假的组(图2)。CCI +利多卡因AC眼压组退出阈值在行为实验在AC眼压升高,和功效的持续时间更长时间的价格相比CCI +生理盐水AC眼压组和CCI +附加利多卡因组(图3)。

immunohistological实验显示表达式Fos-LI三叉神经脊髓细胞细胞核(数字4和5)。CCI组的表达无数Fos-LI细胞观察颅面积1.2毫米和3.6毫米obex尾。CCI +利多卡因AC眼压组显著减少观察Fos-LI的表达细胞的价格相比CCI集团尾面积0.6毫米到2.4毫米obex尾。该区域的位置对应于三叉subnucleus caudalis。Fos-LI细胞的数量减少也观察到尾面积1.2毫米到1.8毫米尾obex的CCI +盐水AC眼压和CCI +附加利多卡因组。

因此,Fos-LI细胞的表达被抑制在一个广阔的区域内CCI +利多卡因AC眼压组的价格相比其他两组。

4所示。讨论

通过颚骨内神经纤维进入牙齿,和许多牙科手术可能会影响这些神经纤维。事实上,牙科治疗可能偶尔会导致神经性疼痛(14,15]。

神经性疼痛已经被各种治疗方法。在我们部门,我们通常采用AC电离子透入疗法作为一种方法来管理神经性疼痛(16- - - - - -19]。

离子电渗疗法是利用电能的方法运输药物通过皮肤。直流离子电渗疗法已广泛应用于各个领域,如眼科手术,麻醉的鼓膜,多汗的囊性纤维化的诊断和治疗20.- - - - - -23]。尽管商业设备,直流离子电渗疗法产生了一些问题,如皮肤烧伤(7和电极极化8,9]。

因此,交流电离子透入疗法用于治疗orofacial痛苦在我们的诊所,以避免这些缺点的直流离子电渗疗法。

在目前的研究中,提取阈值升高和降低的Fos-LI细胞观察CCI +生理盐水AC眼压组和CCI +利多卡因AC眼压组。盐水没有局部麻醉效果,表明电刺激对中枢疼痛通路可能施加一些影响。

海拔撤军的时间阈值的CCI +利多卡因AC眼压组更长时间的价格相比CCI +生理盐水AC眼压组和CCI +附加利多卡因组。4%盐酸利多卡因AC电离子透入疗法治疗的影响在我们的临床病例(持续了好几天12,13]。CCI +盐水AC眼压组的影响可能是电刺激引起的三叉神经核,CCI +附加利多卡因组的影响可能是被动扩散引起的利多卡因面部皮肤。木下光男等。报道,利多卡因的皮肤交付AC电离子透入疗法有可能用于局部麻醉和皮肤的疼痛管理24]。因此,交流电离子透入疗法可能允许利多卡因通过积极通过皮肤。这些发现表明,CCI +利多卡因AC眼压组的影响可能是由于活跃的利多卡因扩散通过面部皮肤和电刺激三叉神经核。

因此,这项研究表明,AC电离子透入疗法有可能是一个有用的治疗患有神经性疼痛引起的口腔颌面外科。

最近,许多研究已经进行AC电离子透入疗法。这些研究表明,利多卡因运输取决于电压、时间和频率(25,26]。电波形和电极的研究也一直在进行(27,28]。然而,还需要进一步的研究来提供安全有效的交流电离子透入疗法治疗。

确认

本研究支持了2007 - 2008年日本促进社会科学(jsp)补助金年轻科学家2010 - 2011 (B)和jsp科研补助金(C)。

AC电离子透入疗法的概念是基于最初的想法和理论提出的晚Shibaji高雄和进步仍在这一领域的研究。作者承认他有价值的贡献。