在活的有机体内和在体外研究的Polylactide-Fiber-Reinforcedβ磷酸三钙复合笼在一个绵羊的颈椎前路Intercorporal融合模型

文摘

保利- 70 l / 30 dl-lactide (PLA70)β磷酸三钙(βtcp)复合植入钢筋连续pla - 96 l / 4 d-lactide (PLA96)纤维设计在活的有机体内脊柱融合术。试验研究了有四个羊,使用钛笼植入物作为控制。复合植入未能直接骨骼生长,而骨接触和适当的集成与控制植入后6个月明显。因此,PLA70 /β进一步分析了tcp复合基质材料在体外实验由人类和绵羊的脂肪干细胞(hASCs和oASCs)。复合材料是生物相容性试验证实了生活/死了。oASCs的增殖率高于hASCs 28 d文化时期。此外,复合材料只有一个小对oASCs成骨的影响,而hASC PLA70 /骨生成βtcp复合材料是显而易见的。总之,复合植入材料与hASCs可以应用组织工程而不是被评估在活的有机体内与羊。

1。介绍

颈椎退行性或创伤性条件的一般治疗颈椎前路椎间盘摘除和融合1]。这种技术的融合率最高的报告当黄金标准,自体骨,单独使用取代了椎间盘(2,3]。然而,这种方法有主要的缺点,因此各种生物材料如金属(3- - - - - -5),聚合物(6- - - - - -8),和复合材料9- - - - - -12)对椎体融合设备(ibfd)深入研究。金属设备是一个传统的选择但不是一种理想的人由于一些缺点如笼迁移、沉降、骨折不愈合、应力屏蔽,工件在成像方法11]。相反,polymer-ceramic复合材料通常是利用自优化力学性能可以根据特定的应用程序(9,13]。聚合物组件提供力量、成形性和生物降解性,而陶瓷组件提供了生物活性的复合(13,14]。

的生物可降解聚合物聚α羟基酸)的家人尤其是脊柱的应用都进行了广泛的调查,因为他们的良好的生物相容性15]。最受欢迎的聚,聚- 70 l / 30 dl-lactide (PLA70),已被广泛用于各种应用,比如引导骨再生(16)和轨道的修复骨缺损墙(17除了脊髓缺陷。此外,它已成功应用骨碎片固定,以及股骨和桡骨头骨折13,18,19]。特别是PLA70容忍杀菌的能力没有显著影响其力学性能(13使其在骨科多功能使用应用程序。重要的是,PLA70别针已经证明的降解产物在体外和在活的有机体内不会导致任何临床相关的联合或淋巴结炎症(19]。

在生物活性成分,β磷酸三钙(βtcp)已经使用了几十年的各种整形应用程序由于其综合分析和自然生物降解20.]。虽然βtcp有几个有利的特性,机械性能差,因此骨折风险升高。因此更适合作为填充材料比单独使用承载应用程序的主要骨架缺陷(14]。

虽然几个intercorporal polymer-ceramic研究了复合材料在脊柱融合术,理想bioabsorbable负重核聚变装置,将推动融合不会引起异物反应或生物力学失败还没有被发现。在我们的研究中,我们想改善先前介绍PLA70 /βtcp复合融合笼(21),增强其潜在的成骨特性,提高其机械稳定性将圆周保利- 96 l / 4 d-lactide (PLA96)连续纤维复合材料。本研究的主要目的是评估在活的有机体内小说的骨形成能力融合笼在绵羊的脊柱融合模型。评估成骨的潜在的生物相容性,并确保PLA70 /βtcp基质材料,我们执行在体外化验使用人力和绵羊的脂肪干细胞(hASCs和oASCs)。

2。材料和方法

2.1。复合植入制造业在活的有机体内和在体外研究

的在活的有机体内复合植入由3种不同bioabsorbable原材料:PLA70(殷格翰集团莱茵,勃林格殷格翰集团GmbH德国)被用作母体聚合物的笼子里的身体,PLA96(学生物化学PURAC Gorinchem,荷兰)作为增强纤维材料,和β磷酸三钙(βtcp,等离子体Biotal有限公司,英国德比郡)的综合分析填料PLA70矩阵。

矩阵聚合物PLA70和30 wt %βtcp是双螺杆挤出机熔体混合使用20毫米。预先形成被加工的复合矩阵包含30 wt %的聚合物杆βtcp。加强纤维制成的PLA96被融化处理使用相同的挤压设备和随后的0.3毫米厚的纤维。此外,2米的强化纤维缠绕预成型。空心内部压缩成型后加工到最终植入形状包括大幅山脊向椎体终板,以确保足够的主要固定。由于这种生产技术,陶瓷颗粒不受母体聚合物和是免费的与周围的液体。(数据1 (c),1 (d),1 (e))。的植入物的大小在活的有机体内研究是14毫米×16毫米,脊柱前凸的5°角,和三个不同高度5、6和7毫米被使用为了适应不同盘高度研究的动物。

的在体外复合样本包括70 wt % PLA70和30 wt %βtcp。样品制造同样的在活的有机体内基复合材料植入物。自定义在压缩成型模具是用来确保每个样品的均匀性。聚苯乙烯(PS)细胞培养井24-well板(Nunclon复盘,Nunc,鲁开德那样,丹麦)被用作参考。两种复合样品的大小和PS井是相等的(ø15毫米)。

这两个在活的有机体内复合植入物和在体外复合样本由Bioretec制造有限公司(坦佩雷,芬兰)和伽马消毒Gamma-Service Produktbestrahlung GmbH是一家(Radeberg、德国)使用17.5 kGy的辐照。

2.2。用于控制植入物和其他硬件在活的有机体内研究

CeSpace Plasmapore纯钛涂层钛笼(Aesculap AG / Co。公斤Tuttlingen,德国)大小14毫米×11.5毫米,脊柱前凸的5°角被用作控制植入。植入物的高度选择根据阀瓣高度从5到7毫米1毫米的增量。主要稳定通过颅和尾固定皇冠三分之一管板3.5 w /衣领,5孔,长度64毫米(辛迪思Oberdorf、瑞士),和皮质螺钉3.5毫米直径16 - 20毫米长度(辛迪思)是用于学习小组。一个板和两个螺丝是申请每个固定。

2.3。在活的有机体内实验一个绵羊的前脊柱融合模型

2.3.1。植入过程和跟踪

研究伦理许可协议是由省级国家动物伦理委员会办公室的西方芬兰(不允许。1666/06),所有程序都按照指南进行当地的动物福利委员会。四3-4-year-old羊从一个类MV3增殖(Reipelt、芬兰)49 - 78公斤被用于这个试点研究。飞行员动物被随机分配接受控制植入物()或复合植入物()。肌内(坜)术前用药法使用咪达唑仑。芬太尼、氯胺酮、异丙酚静脉注射接种(注射)对诱导麻醉,并注入异丙酚用于维持麻醉。当地利多卡因喷喉插管前。阿莫西林1 g是手术前注射。

在严格的无菌手术条件下,每个羊单层椎间盘切除术和接受手术前融合C3/4。对于自体收获,8厘米的切口是在胸骨。皮肤和皮下组织的部分反射后,使用5毫米Kerrison穿孔(Aesculap AG / Co。公斤Tuttlingen、德国),0.5厘米³自皮质和松质骨切除。胸骨切口网站被关闭使用resorbable皮下缝合Safil 2.0 (Aesculap、企业百汇中心山谷,PA,美国)和不锈钢皮斯台普斯添城市订书机(Autosuture /泰科医疗、英国汉普郡)。

腹侧暴露和椎间盘切除术被执行。透视下感兴趣的水平了。中线腹侧切口,胸骨舌骨的配对和胸锁乳突肌里面的肌肉分离中线。长肌的肌肉在中线切入,椎间盘C3 / C4暴露和完整椎间盘切除术。在侧被血骨,使用高速毛刺。植入的中空内部就挤满了从胸骨的自体移植骨与植入在荧光镜的成像。前稳定三分之一的管板和皮层螺丝被执行,以防止挤压的植入物由于过度扩展运动。主要植入后稳定是确保通过颅和尾固定的植入和前板和螺钉固定。二次稳定性是通过骨到产生的表面积增加控制植入的Plasmapore涂层。

长肌肌肉腱膜、筋膜、皮下组织被封闭在层和满是伤口局部抗生素粉,Bacibact(杆菌肽250 iu和新霉素5毫克,猎户座,芬兰)和液体创可贴(Hansaplast,汉堡,德国)。

术后,动物收到0.01毫克/公斤的丁丙诺啡坜第一2天,每天4次,在接下来的两天,一天两次。动物的健康监测每天两次在整个研究。羊被允许随意剩下的后续活动。飞行员动物被牺牲了手术后6个月。安乐死是在麻醉通过放血,脊柱部分感兴趣的是收获和清除软组织。

2.3.2。数字x光照片

标准前后(p)射线照片的脊柱手术后段拍摄之前,牺牲在数字图像板(富士IP磁带,富士胶片影像有限公司、日本)使用标准固定x光机(飞利浦、荷兰)。所有羊进行了计算机断层扫描(CT)的颈椎的解剖骨块使用64 -探测器行CT系统(西门子Somatom感觉64年,医学成像,埃朗根,德国)。马斯CT技术参数包括140、120千伏和三重建图像集:轴向片与1毫米截面厚度和增量大幅内核,冠状切片截面厚度0.4毫米和0.2增量与锋利的内核,和矢状截面厚度0.4毫米和0.2增量与锋利的内核。矩阵是512×512片集。

2.3.3。组织学

C3 / C4运动部分正常缓冲福尔马林固定为2 - 4周10%其次是按升序浓度的乙醇脱水。清算进行二甲苯为4天,样本然后嵌入式undecalcified isobornylmethacrylate (Technovit 1200 VLC, Kulzer,阿果,德国)。

标本在矢状面切成大约5μ与徕卡m厚部分重型滑动切片机(徕卡,位于德国)。部分被苏木精和伊红染色())和修改van Gieson污渍。组织学部分成像是使用一个奥林巴斯B51虚拟显微镜附带U-CMAD3相机(奥林巴斯光学有限公司,东京,日本)。异物反应是分级根据霍夫曼的分数22]。

2.4。在体外实验

2.4.1。ASC隔离、文化和播种

hASCs从2捐助者被从脂肪组织分离获得了外科手术的整形手术,坦佩雷大学医院。oASCs从2只羊被提供的医学院,坦佩雷大学。ASC隔离的组织样本进行了按照毕卡医院的伦理委员会,坦佩雷,芬兰。

切碎的组织样本和胶原酶消化I型(1.5毫克/毫升;表达载体,佩斯利,英国)如前所述23,24]。对asc分离培养和扩大在t - 75厘米²烧瓶在维护介质组成的杜尔贝科修改鹰中/火腿的营养混合物F-12 (DMEM / F-12 1: 1 1 x;表达载体),10%胎牛血清(的边后卫,英杰公司)、谷酰胺(GlutaMAX我,英杰公司)1%,1%的抗生素/抗真菌的(100 U /毫升青霉素,链霉素0.1毫克/毫升、和0.25毫克/毫升两性霉素B;英杰公司)[25- - - - - -27]。当细胞达到融合,他们储存在−70°C和解冻实验。每个ASC的immunophenotype行验证了使用流式细胞仪(FACSAria, BD生物科学、Erembodegem、比利时)(28]。

细胞通道3 - 4被用于实验。每个复合样本使用维护中48 h在37°C 24-well板块(Nunclon复盘,Nunc)。样品与25000细胞被播种在最后一卷1毫升的维护媒介文化。

2.4.2。ASC附件和生存能力

细胞附着和可行性评估定性使用生活/ dead-viability化验(分子探针,尤金,矿石,美国),14日和28 d时间点。二乙酸CellTracker绿色5-chloromethylfluorescein (CMFDA);分子探针和ethidium homodimer-1 (EthD-1;分子探针)是利用染料可行的细胞(绿色荧光)和死细胞(红色荧光),分别为(25- - - - - -27]。

2.4.3。细胞增殖及碱性磷酸酶活性的定量分析

当天的分析,250年μL 0.1% Triton-X 100缓冲区(西格玛奥德里奇,圣路易斯,密苏里州,美国)添加到每个好,彻底被停职。孔板是储存在−70°C溶解细胞至少过夜。ASC复合和PS样本的DNA含量测定后7日,14日和28 d文化时期使用CyQUANT细胞增殖试验装备(分子Probes-Invitrogen)根据制造商的协议以及早些时候描述(29日]。维克多的荧光测量1420 Multilabel柜台,(Wallac,图尔库,芬兰)。定量碱性磷酸酶(ALP)测定了14岁和28 d时间点根据σ高山过程(西格玛奥德里奇)26与一些细微的修改。定量高山活动结果归一化总DNA量测量相同的溶菌产物。

2.4.4。矿化

冯Kossa染色用于定性估计矿化结节形成对asc的成骨分化。先前所描述的方法(30.)是使用小的修改。简单地说,文化是与4%多聚甲醛固定为2分钟,其次是双用蒸馏水清洗。5%的硝酸银(AgNO₃)解决方案添加到井,盘子被孵化下一个紫外线(UV)灯没有覆盖60分钟。AgNO₃被移除,文化是用蒸馏水洗净,盘子用数码相机拍摄。

2.4.5。的统计分析在体外结果

与SPSS统计分析,14版本。数据提出了均值±标准差(SD)的定量分析。平等的方差的假设被列文的测试检查。所有在显著性水平进行了统计分析使用单向方差分析(方差分析)t以及。Bonferroni事后修正使用多个修正。不同培养时间的影响(7和14日和28 d)和样品材料(复合与PS)为两个物种进行评估。样品被认为是独立的在每个时间点。

3所示。结果

术后愈合得平淡无奇,除了1从复合移植组动物遭受ORF病毒病。由于疲软的后腿,动物必须安乐死手术后5个月。

3.1。影像学评估融合

横向普通x射线显示良好结合椎骨各学习小组(数字2(一)-2(c))。复合移植组的CT图像显示,植入和分裂前其他植入冠状骨折线,但没有迁移的碎片。没有观察到连续通过植入骨骼生长,和没有发现移植骨融合(数字2(e) -2(f))。有一个吸收的自体移植物。观察硬化在侧骨连接不正。没有骨炎被认为在任何的迹象的学习小组。控制植入组一个先进的融合被认为在植入,小梁取向和几乎完全集成的自体相邻椎骨(图2(d))。

3.2。Histomorphological研究

Histomorphological分析两组在6个月支持影像学检查的结果。组织学检查一个温和的异物反应复合移植组的开发,根据霍夫曼的分数31日]。有明显吸收的自体移植物和多核异物巨噬细胞在植入。致密纤维胶囊复合植入包围,并没有发现骨接触(数据2(h) -2(我))。此外,没有发现急性感染的迹象。植入物之一是分散在6个月跟踪,但没有观察到迁移的片段。终是密集的,和预期的小梁取向融合现场消失了畸形愈合。

6个月后,有一个先进的椎体融合在对照组视为通过植入骨头长在肉内。改善的垂直和水平对齐观察骨小梁。有直接在植入骨性终板骨接触。有迹象表明黑细颗粒周围的植入,在宝丽来光暗示metallosis可见(图2(g))。

3.3。在体外实验

3.3.1。ASC表征

流对asc仪分析了表达式标记充实间充质细胞的起源和显示低或缺乏表达的标记表明造血和血管生成的起源细胞(表1)。描述数据符合现有结果hASCs [23,28,32- - - - - -35]和oASCs [36- - - - - -38]。

3.3.2。细胞生存能力

微观观测显示,经过7天的文化,两个物种对asc的正常形态和他们在复合样品和PS(图3)。大多数的细胞两种都是可行的,和死细胞的数量很低。hASCs同质复合样品和PS传播。相比之下,oASCs倾向于分离更多的复合表面比hASCs在所有时间点。此外,oASCs的数量估计在PS高于复合样品。oASCs高增殖率和有限的增长空间最终导致完全超然oASCs在一些PS 28 d井如图3。

3.3.3。细胞增殖和成骨分化

本在两个样本的数量对asc是定量评估使用CyQUANT扩散方法(图4(一)),这是基于相对吸光度值的DNA。oASCs较高的数量在每个时间点相比hASCs材料。此外,hASCs的数量明显高于PS复合样品相比只有7 d时间点(),而PS oASCs较高的数量在整个文化时期。这种差异在7(重要)和14 d时间点()。进一步,hASCs有显著增加的数量只有7至14 d两材料(时间点)。现象被认为与oASCs相同,但只在复合样品()。

根据高山活动分析,oASCs没有任何成骨分化的迹象。规范化高山hASCs活动随着时间的增加在PS(图4 (b))。复合,提高高山之间的活动是很有意义的时间点14至28 d ()。hASCs较高的相对高山活动组合在28天,比PS,但差异无统计学意义。

冯Kossa染色表明,PS没有影响对asc的矿化的物种在任何时间点(图5)。hASCs矿化复合材料,验证了的黑暗染色颗粒。然而,没有时间点之间的区别。hASCs更密集的染色oASCs相比,只有表现出轻微染色结果。

4所示。讨论

本研究评估了在活的有机体内骨形成的功效PLA96-fiber-reinforced PLA70 /βtcp复合笼与钛笼进行比较,广泛应用于临床实践。的在活的有机体内模型选择这个项目是绵羊的颈椎融合和椎间盘模型由于其广泛使用在脊柱研究[8,31日,39,40]。羊继续成为最受欢迎的动物模型为骨科研究人类由于他们的相似之处,特别是重量、大小、联合结构,骨/软骨再生过程(41]。

临床证据表明不同的PLA /βtcp复合材料是生物安全,他们可能可行的替代材料bioabsorbable脊柱融合术植入物(10,42- - - - - -44]。因此,本研究中使用的复合植入有很相似的弹性模量与骨小梁,因此一个有益的选择关于应力屏蔽。随着材料吸收,额外的负载转移到发展质量。

研究显示高融合成绩使用有代理,例如骨形成蛋白2 (BMP-2)代替自体骨(7]。在这项研究中,我们试图调查材料属性和选择使用自体填充在两个组别。此外,镀前强制在绵羊的模型中,从而使企图融合网站更加严格。一些临床研究显示,这导致增加融合和减少失败率,特别是多级程序(45,46]。然而,目前的研究结果不佳的骨化复合植入的绵羊的融合模型,而控制植入了一个非常更好的椎骨的骨化。这个结果很清楚,尽管我们承认,这项研究是有限的小动物的数量和时间点。

失败的可能原因之一是复合植入的过早退化所表示的畸形愈合在射线探伤检测。出于同样的原因,复合植入没有提供足够的支撑结构,允许治疗领域的融合。穷人骨性融合的复合移植本身会使故通过允许的运动部分。本研究中使用的单镀前不提供足够的刚性保险丝段;相反,植入的主要任务是为了避免挤压通过消除过度治疗领域的延伸。轻微的异物反应是观察复合移植组,但它不是认为是畸形愈合的原因。尽管密集纤维复合植入胶囊了,其次,形成畸形愈合。此外,发现了巨噬细胞在植入物,这是作为一个符号的自体吸收复合的内部网站。作为比较,Kandziora et al。11]研究了复合磷酸polymer-calcium融合笼,显示更高级别的异物反应由霍夫曼年级比这项研究和优越的生物力学属性tricortical骨相比,虽然没有干扰的形成骨结合羊颈椎融合模型。这些结果进一步表明,畸形愈合的异物反应无法解释这项研究。复合植入物的降解时间可能会进一步提高提供更长的安全裕度是否推迟形成骨性结合。然而,明显,骨愈合至关重要对于这种类型的固定和更长时间的退化时间最有可能不产生更好的结果,就失败在稍后的阶段。为了促进融合,提供足够的支撑结构、稍慢的降解聚合物,如PLA96矩阵和poly-L-lactide(丙交脂)纤维,可以选择保留时间长强度。在绵羊的模型中,必须考虑到绵羊的体温是三度高于人类导致退化显著高于建议的计算基于阿仑尼乌斯方程。对复合材料,在活的有机体内和在体外复合材料加工和随后压缩成型以完全相同的方式导致均匀表面结构没有任何隔离聚合物薄膜,从而阻碍了生物活性βtcp组件的表面。

进一步确定为什么骨化的复合移植是不成功的,在体外生物相容性对asc和osteoconductivity化验来自人类和羊进行。我们使用对asc在成骨细胞评估的能力βtcp在诱导间充质干细胞成骨分化。hASCs的成骨的潜力也从早期的研究特点47- - - - - -49),但与oASCs它并没有被广泛地研究过了。然而,ovine-derived成人干细胞的成骨分化潜能已经证实:罗德等人与绵羊的从骨髓间充质干细胞(bmsc)在三维培养透明质支架(50)和尼迈耶等人oASCs分化在体外没有任何生物材料(51]。在两项研究中,细胞在细胞培养处理成骨分化的因素。应该注意的是,没有成骨的媒介使用在我们的研究中,因此只有评价复合材料的成骨的影响。

在在体外部分,我们选择了把重点放在PLA70 /βtcp矩阵,因为它被认为是最重要的组件的组合移植骨形成。PS是用于在体外评估控制细胞行为更好的评估标准。的在体外hASC研究显示,没有区别,oASC可行性综合样本和PS的死细胞和正常的少量附件表面。相反,oASCs的增殖率明显高于hASCs,这在一定程度上脱离了oASCs由于缺少发展空间。另一方面,PS oASCs是更大的数量在每个时间点,而hASCs增长同样PS和复合。的成骨分化hASCs验证了复合样品,检测到的高山活动测量和冯Kossa染色。这个结果符合我们之前的研究中,我们表明,中国人民解放军/βtcp复合支架的成骨分化增强hASCs在平原PLA支架(27]。有趣的是,冯Kossa染色oASCs证明弱矿化的结果,而PLA70 /βtcp矩阵未能诱导的成骨分化oASCs根据高山活动测量。我们的研究结果表明,PLA70 /βtcp不支持绵羊的成骨分化的间充质干细胞来源于脂肪组织。因此,这可能部分解释了失败的骨整合的结果在活的有机体内研究。应该进一步验证这一结论,然而,与其他间充质干细胞。

在临床的骨组织工程应用,自体的细胞是最好的选择,也为产品,涉及脚手架。重要的是要注意,如果对asc之间相似或不同来自不同物种仍然未知,关于细胞特征的信息不能被利用在理想的临床前研究中设置。鉴于这样的知识,可以选择一个合适的动物模型为每个治疗骨缺损的应用组织工程结构和随后对asc评估自体的可用性。

5。结论

本研究未能证明在活的有机体内PLA70 /骨形成能力βtcp / PLA96复合融合笼在绵羊的选择模型。根据在体外结果,PLA70 /βtcp复合基质材料诱导只在oASCs成骨反应弱,而材料的成骨效应对hASCs强劲。

作者的贡献

a . Palli和j . Frantzen同样的纸。

确认

作者感谢女士Anna-Maija Honkala和女士明娜Salomaki优秀的技术援助。他们也想表达自己的感激之情,拉斐尔•弗里亚斯博士先生Tero Karhi,和夫人Katja Sikka在进行经验的建议和帮助在活的有机体内这项研究的一部分。这项研究支持的财务竞争力的研究经费坦佩雷大学医院(赠款9 k097 9 l057 9 k117, 9 l100 9 m058,和9 j014),芬兰资助机构对技术和创新(tek),坦佩雷,芬兰文化基金会和TBDP-National博士项目的肌肉骨骼疾病和生物材料。

引用

1. w·m . c . Wang Kreuter如此说道,c, e . Wolfla d . j .梅曼和r . a . Deyo”趋势和变化在颈椎手术在美国:医疗保险受益人,1992年到2005年,“脊柱,34卷,不。9日,第961 - 955页,2009年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
2. a . m .洲和r·j·莫伯斯”骨移植替代物在颈椎前路椎间盘摘除和融合,“欧洲脊柱杂志》,18卷,不。4、449 - 464年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
3. t . c . Ryken r·f·Heary p·g . Matz et al .,“颈椎椎体嫁接的技术。”神经外科杂志:脊柱,11卷,不。2、203 - 220年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
4. c . c .妞妞,j·c·廖w . j . Chen和l·h·陈,“结果1和2中使用的椎体融合笼颈椎前路椎间盘摘除和融合:钛笼和polyetheretherketone (PEEK)的笼子里,”脊柱疾病和技术杂志》上,23卷,不。5,310 - 316年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
5. d·b·莫兰h·l·阿希d . e . Clabeaux et al .,“颈椎前路椎间盘摘除和融合植入钛笼:最初的印象,病人结果和融合与同种异体移植物相比,“脊柱杂志,4卷,不。2、184 - 191年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
6. t·h·Lanman和t·j·霍普金斯,“早期发现的试点研究颈椎前路椎体融合重组的人类骨形成protein-2使用保利(L-lactide-co-D L-lactide) bioabsorbable植入,”Neurosurg焦点,16卷,不。3,p。E6, 2004年。视图:谷歌学术搜索
7. c·r·利普曼m .西北b•爱博夏尔·g·马丁,r·w·恩格尔曼和d·w·卡希尔,”使用生物可吸收材料颈椎融合的笼子里。”Neurosurg焦点,16卷,不。3,p。E4, 2004年。视图:谷歌学术搜索
8. k·a·托马斯·j·m·托斯:r·克劳福德et al .,“Bioresorbable聚交酯椎体植入在绵羊的颈椎前路椎间盘摘除和融合模型:三年的结果,“脊柱,33卷,不。7,734 - 742年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
9. 夸夸其谈的人,“关于复合材料及其在骨科手术使用,“受伤补充4卷。31日,D48-D53, 2000页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
10. f . Debusscher s Aunoble y Alsawad, d·克莱门特和j·c·勒Huec“颈椎前路融合与bio-resorbable复合笼(βTCP-PLLA):临床和放射学结果20位患者的前瞻性研究,“欧洲脊柱杂志》,18卷,不。9日,第1320 - 1314页,2009年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
11. f . Kandziora r . Pflugmacher m·朔尔茨t . Eindorf k . j . Schnake和n . p .哈斯”Bioabsorbable椎体的笼子里的一只羊颈椎融合模型,”脊柱卷,29号17日,第1855 - 1845页,2004年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
12. d . w . s . a . Abbah c x Lam Hutmacher, j . c . h .吴作栋和h k . Wong“生物polycaprolactone-based脚手架作为融合笼设备的性能在一个大脊椎重建手术的动物模型,”生物材料,30卷,不。28日,第5093 - 5086页,2009年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
13. l·e·克拉斯a . a .伊格内修斯k·e·雷姆曾为此写过和c·朔尔茨,”新bioresorbable销减少小骨碎片:设计、力学性能和体外降解,”生物材料,17卷,不。16,1621 - 1626年,1996页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
14. d . w . Hutmacher j . t .注意力c x Lam k . c . Tan和t . c . Lim”状态的艺术和scaffold-based骨工程未来的发展方向从生物的角度来看,“组织工程和再生医学杂志》上,1卷,不。4、245 - 260年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
15. s . j . Peter m . j·米勒,a . w . Yasko雅斯曼斯基m . j ., a·g·巫女,“聚合物组织工程的概念,”生物医学材料研究杂志》上,43卷,不。4、422 - 427年,1998页。视图:谷歌学术搜索
16. m . Kellomaki h . Niiranen k . Puumanen n . Ashammakhi t·瓦里斯- p . Tormala,“Bioabsorbable支架引导骨再生和一代。”生物材料,21卷,不。24日,第2505 - 2495页,2000年。视图:谷歌学术搜索
17. j . Al-Sukhun j . Tornwall c Lindqvist, r . Kontio”Bioresorbable poly-L / DL-lactide (P L / DL LA 70/30)板块可靠修复大型眶下壁骨缺陷:一个试点研究,“口腔颌面外科杂志》上,卷64,不。1,47-55,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
18. h . j .车辆疾驰,a . h神h·施密德,m·内格尔j .利和k·e·雷姆曾为此写过“可降解植入与流离失所的标准金属固定桡骨头骨折。一项前瞻性、随机、多中心的研究”杂志的肩部和肘部手术,15卷,不。4、479 - 485年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
19. a . h神a . Jubel h . j .车辆疾驰et al .,“软组织的反应不同的可生物降解的聚乳酸植入,”生物材料,25卷,不。2、259 - 267年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
20. m . bohn“钙分析医学:从陶瓷到磷酸钙水泥,”受伤补充4卷。31日,D37-D47, 2000页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
21. m . Huttunen: Ashammakhi、p . Tormala和m . Kellomaki“纤维增强复合材料bioresorbable脊柱手术。”Acta Biomaterialia,卷2,不。5,575 - 587年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
22. r·霍夫曼a·维勒·h·j .车辆疾驰,c . Krettek和k·e·雷姆曾为此写过“本地异物反应可降解植入物:一个分类系统,”Unfallchirurg,卷100,不。8,658 - 666年,1997页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
23. j . m .平衡台和f . Guilak脂肪中提取成人干细胞:隔离、表征和分化潜能,”Cytotherapy,5卷,不。5,362 - 369年,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
24. s . m . Niemela当天艳阳高照,y Konttinen et al .,“脂肪组织:意见重建和剥削,”颅面外科杂志》,18卷,不。2、325 - 335年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
25. j . Pelto s Haimi大肠Puukilainen et al .,“Electroactivity polypyrrole-hyaluronic酸多壁碳纳米管复合材料的生物相容性,”生物医学材料研究杂志》的一部分,卷93,不。3、1056 - 1067年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
26. s . Haimi l . Moimas大肠Pirhonen et al .,“磷酸钙生物活性玻璃表面处理的原因推迟早期成骨分化的脂肪干细胞,”生物医学材料研究杂志》的一部分,卷91,不。2、540 - 547年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
27. s . Haimi n . Suuriniemi a . m . Haaparanta et al .,“增长和脂肪干细胞成骨分化人民解放军/生物活性玻璃和PLA /βtcp支架。”组织工程,部分,15卷,不。7,1473 - 1480年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
28. b . Lindroos鲍彻,l .追逐et al .,“无血清,xeno-free文化媒体保持脂肪干细胞的增殖率和multipotentiality体外,”Cytotherapy,11卷,不。7,958 - 972年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
29. b . Lindroos k . Maenpaa t . Ylikomi h . Oja r . Suuronen和美国比赛当天艳阳高照,”描述的人类牙齿干细胞和颊粘膜成纤维细胞,”生物化学和生物物理研究通信,卷368,不。2、329 - 335年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
30. d . c .希恩和比比Hrapchak理论和实践组织工艺学简历Mosby公司,圣路易斯,密苏里州,美国,1973年。
31. m·a·Slivka d . b . Spenciner h . b . Seim三世,w·c·韦尔奇,h·a·Serhan和a·s·特纳“高羊前后颈椎棘突椎体融合的手术缝合时可吸收和植入设备,“脊柱没有,卷。31日。24日,第2777 - 2772页,2006年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
32. b . Lindroos K.-L。哦,h . Kuokkanen et al .,“在脂肪干细胞培养同种异体基因差异表达人类血清和胎牛血清,”组织工程,部分,16卷,不。7,2281 - 2294年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
33. k·麦金托什,s . Zvonic s Garrett et al .,“人类脂肪细胞的免疫原性:时间改变体外,”干细胞,24卷,不。5,1246 - 1253年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
34. k·麦金托什,j·b·米切尔s Zvonic et al .,“Immunophenotype人类脂肪细胞:颞stromal-associated和茎细胞相关标志物的变化,“干细胞,24卷,不。2、376 - 385年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
35. s . Gronthos d·m·富兰克林·h·a . Leddy et al .,“人类脂肪tissue-derived基质细胞表面蛋白特性,”细胞生理学杂志,卷189,不。1,54 - 63年,2001页。视图:谷歌学术搜索
36. d . Mrugala c .骨:七巧板et al .,“羊的间充质干细胞的表型和功能描述:应用软骨缺损模型,”风湿性疾病上,卷67,不。3、288 - 295年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
37. l·曼库索Liuzzo, s . Fadda et al .,“实验分析和建模的间充质干细胞体外增殖,”细胞增殖,42卷,不。5,602 - 616年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
38. m . j . Martinez-Lorenzo m . Royo-Canas大肠Alegre-Aguaron et al .,“表现型和chondrogenic间充质细胞分化的脂肪组织不同的物种,”骨科研究期刊》的研究,27卷,不。11日,第1507 - 1499页,2009年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
39. f . Kandziora r . Pflugmacher m .朔尔茨et al .,“羊和人类颈椎棘突之间的比较:一个解剖,射线,骨矿物质密度,和生物力学研究中,“脊柱,26卷,不。9日,第1037 - 1028页,2001年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
40. a . s . Turner,”在大型动物模型:脊柱手术经验和限制,“欧洲细胞和材料p。34卷。10日,2005年。视图:谷歌学术搜索
41. r·c·麦卡蒂Gronthos, a·c·Zannettino b·k·福斯特和c j .西安”的人物塑造和发展潜力绵羊的骨髓间充质干细胞,”细胞生理学杂志,卷219,不。2、324 - 333年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
42. r·c·奥斯汀c . l .分支Jr .)和j·t·亚历山大,“小说bioabsorbable椎体融合spacer-assisted融合脊柱畸形的矫正,”神经外科焦点,14卷,不。1,p . e11 2003。视图:谷歌学术搜索
43. t·g·劳和j·d·科”,在单边transforaminal Bioresorbable聚合物植入椎体间融合术手术,”整形外科,25卷,不。10、pp. s1179-s1183, 2002年。视图:谷歌学术搜索
44. b·h·a·r·Vaccaro铁刀木,p . m . Kelleher et al .,“使用bioabsorbable颈椎前路钢板治疗颈椎退行性和创伤性磁盘中断,”整形外科,25卷,不。10、pp. s1191-s1199, 2002年。视图:谷歌学术搜索
45. k . j .歌曲,c, e . Taghavi k·b·李,j . h .歌曲和j.p.恩,“板块构造的疗效增加和笼子里独自在颈椎前路融合,“脊柱,34卷,不。26日,第2892 - 2886页,2009年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
46. r·w·m·g·凯瑟Haid Jr . b . r . Subach b·巴恩斯和g . e . Rodts Jr .)“颈椎前路椎间盘摘除后镀增强关节固定术与皮质同种异体移植物和融合,“神经外科,50卷,不。2、229 - 236年,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
47. y . c . Halvorsen w . o . Wilkison, j . m .平衡台“脂肪基质细胞这些效用和骨形成的潜力,”国际肥胖期刊和相关的代谢紊乱补充4卷。24日,S41-S44, 2000页。视图:谷歌学术搜索
48. p·a·祖克m·朱p Ashjian et al .,“人类脂肪组织是一个多功能干细胞的来源,”细胞的分子生物学,13卷,不。12日,第4295 - 4279页,2002年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
49. p·a·祖克m·朱h .美津浓et al .,“Multilineage从人类脂肪组织细胞:细胞疗法,”组织工程,7卷,不。2、211 - 228年,2001页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
50. n·p·罗兹,j·k·斯利瓦斯塔瓦,r·f·史密斯和c . Longinotti”的间充质干细胞生长代谢和组织学分析3 d hyaluronan-based支架,”材料科学杂志:材料在医学,15卷,不。4、391 - 395年,2004页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
51. p·k . Fechner s Milz et al .,“比较的间充质干细胞从骨髓和脂肪组织中骨再生的关键尺寸缺陷羊胫骨和富含血小板血浆的影响,“生物材料没有,卷。31日。13日,3572 - 3579年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

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