文摘
之间的关联rs4810479磷脂转运蛋白(PLTP)基因单核苷酸多态性(SNP)和血清脂质水平在很大程度上是未知的。本研究旨在评价之间的关系PLTP rs4810479 SNP,几个环境风险因素和血清脂质参数在中国毛南族和汉民族。聚合酶链reaction-restriction片段长度多态性、凝胶电泳和直接测序是用来确定PLTP rs4810479基因型在633年毛南族和646年汉参与者。CC的频率、CT和TT基因型和C等位基因不同毛南族和汉族组(29.07%,53.08%,17.85%,55.61%和35.60%,49.70%,14.70%,和60.45%,分别 )。C等位基因携带者毛南族组有更高的比C等位基因非高密度脂蛋白胆固醇的水平,但这一发现是只存在于毛南族男性而不是女性。C等位基因携带者在汉族男性降低总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇水平比C等位基因非携带者。血清血脂水平也受到一些传统心血管危险因素在两个人群。可能有一个民族,和/或性别之间的协会PLTP rs4810479 SNP和血清脂质特征。
1。介绍
心血管疾病(CVD)是一个全球残疾和早期死亡的主要原因,约占三分之一的全球死亡率(1]。心血管疾病的成本构成主要的社会经济负担(2]。许多研究证明,血清或血浆中甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(低密度脂蛋白)和高密度脂蛋白胆固醇(hdl - c)浓度是心血管疾病的独立危险因素3- - - - - -5]。
众所周知,各种遗传和环境因素可能会导致异常的血浆脂质和脂蛋白(6- - - - - -8]。本身就是高度heritable-estimates血浆脂质和脂蛋白浓度从40%到60%不等。的全基因组关联研究(gwas)已经确定了95多个基因位点与血浆脂质表型有关。的一个新发现的基因座是磷脂转运蛋白(PLTP)基因9- - - - - -12]。
PLTP(也称为脂质转运蛋白2)属于脂质转移/脂多糖(LPS)结合蛋白家族。这个家庭包括PLTP LPS-binding蛋白质(LBP)、杀菌/ permeability-increasing蛋白(BPI)和胆固醇酯转运蛋白(CETP) [13- - - - - -15]。有两种分子量PLTP, 55岁kDa, 81 kDa。这可能是由于不同的糖基化15]。PLTP是一个单体的和非特异性脂质转运蛋白,可以有效地转移自由胆固醇、甘油二酯,α生育酚、脑苷脂有限合伙人、磷脂和sphingosine-1-phosphate [13- - - - - -15]。有两种形式的lipoprotein-associated等离子PLTP(活性高和低活性),与载脂蛋白A1 - ApoE-containing脂蛋白(Apo),分别为(16]。然而,原因在等离子体的存在活跃的和不活跃的PLTP尚不清楚。很可能PLTP可能有其他活动除了其脂质传递函数(15]。PLTP产生各种类型的细胞和分泌到等离子体。它是人体组织中高度表达,如卵巢胸腺,胎盘、肺17)、肝脏和小肠和巨噬细胞(18,19和动脉粥样硬化病变19,20.]。基因编码PLTP (PLTP)坐落在人类染色体20。互补脱氧核糖核酸的1750个碱基对长度,其中包括一个开放阅读框1518个核苷酸的3′未翻译区(UTR)的184个核苷酸。成熟PLTP含有476个氨基酸和6 N-glycosylation网站,允许它改变它的分子量(55岁或81 kDa)后不同程度的糖基化修饰(17]。一些先前的研究已经发现,PLTP是一个新兴的心脏代谢因素产生发展的一个重要组成部分血脂代谢和动脉粥样硬化21,22]。PLTP是一个主要因素调节高密度脂蛋白粒子的大小和构成的循环,起着重要的作用在控制血浆高密度脂蛋白胆固醇水平(23]。PLTP缺乏小鼠能降低总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇,和ApoA1但TG水平显著增加,高密度脂蛋白(生物质量的影响24],减弱脂肪食源性胰岛素抵抗和肥胖25]。等离子体PLTP活动(PLTPa)与颈动脉疾病显著负相关性(体),减少了9%的几率CAAD PLTPa每增加1单位。等离子体TG水平,糖尿病,他汀类药物的使用,和PLTP rs4810479 SNP也与PLTPa显著相关(26]。在人类研究中,PLTP质量和PLTPa都与血浆脂质特征有关,调节葡萄糖和动脉粥样硬化。常见变异在PLTP结构可以解释30%的变异位点区域PLTPa [27]。PLTP变异与PLTP mRNA水平有关(28和心血管疾病的风险27,29日]。
作为一个孤立的和保守的少数民族在中国,毛南族人口国籍是107166(排名37)据统计中国的2010年第六次全国人口普查。他们有自己独特的文化和生活习俗,比如intraethnic婚姻,服装、特殊的生活方式和饮食结构。这些特征是不同于那些最大的民族,汉族。因此,我们假设一些脂质代谢相关的基因型分布和遗传性状的基因毛南族的民族可能不同于那些在汉族。在中国人口,没有之前的研究探索之间的关联PLTP rs4810479 SNP和血清脂质水平。因此,本研究的目的是评价之间的关联PLTP rs4810479 SNP,几个环境风险因素和血清脂质特征毛南族和汉民族。
2。材料和方法
2.1。主题
研究群体随机选择从我们先前分层随机样本。详细的纳入和排除标准已经在以前的报告中描述(30.]。简而言之,所有选中的人基本上是健康的,没有任何慢性疾病如心脏病的证据,肝、肾、甲状腺疾病。的参与者有心脏病或心肌梗死,中风,充血性心力衰竭,糖尿病被排除在外。他们没有使用药物等影响血清脂质水平降脂药物(他汀类药物或一类),β阻断剂、利尿剂或激素。目前的研究包括633名无关毛南族参与者(251男性,39.65%,382,60.35%)和646例汉族无关(268男性,41.49%,378,58.51%)[30.]。参与者从22到92岁(平均:55.92±14.30年毛南族和54.50±14.50年汉族组)。年龄结构和性别比例两个种群之间的匹配。所有参与者的基本信息和健康状况是指我们的先前的研究(31日]。本研究项目是第一附属医院伦理委员会批准,广西医科大学(没有。lunshen - 2014 - ky -字词- 001年3月7日,2014)。这项研究之前所有参与者提供书面知情同意。
2.2。流行病学调查
使用一个国际标准化的方法调查(32]。一个标准化的问卷用于收集相关信息的人口统计数据,社会经济地位和生活方式因素。饮酒和吸烟是分组根据每日消费(0≤25和> 25和0≤20日和> 20日分别)。几个参数如体重、身体质量指数(BMI)、身高、腰围、血压也获得。
2.3。生化测量
禁食12小时后,前臂的静脉血液样本得到5毫升的所有参与者。生化测量包括TC、TG、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白ApoA1、飞机观测,血糖进行如前所述[33,34]。
2.4。DNA扩增的基因
样品提取的基因组DNA phenol-chloroform方法(34]。聚合酶链reaction-restriction片段长度多态性(PCR-RFLP)是用来确定的基因型PLTP rs4810479 SNP。正向和反向引物对PCR扩增5′-ATCCTCCGATCTTGGCTTCC-3′, 5′-CCAGGTAGAGGGAACAGCAA-3′,分别。具体反应条件是5分钟在95°C预处理,变性在95°C 30年代,退火在59°C 30年代,紧随其后的是扩展了40年代在72°C 33周期,最后7分钟在72°C扩展。KpnI限制性内切酶。在2.0%琼脂糖凝胶电泳后包含0.5μ溴化乙锭的g / ml,结果在紫外线照射下。六个样本的PCR产物也证实了直接测序使用ABI棱镜3100(应用生物系统公司)在上海Sangon生物工程技术与服务有限公司有限公司,中国。
2.5。诊断标准
血清脂质参数的正常参考价值包括TG, TC,低密度脂蛋白,高密度脂蛋白胆固醇,ApoA1、飞机观测浓度,ApoA1 /飞机观测比率以及高脂血症的诊断标准,高血压和2型糖尿病,和正常体重,超重,肥胖已经详细描述我们的先前的研究的一些研究30.,31日,33- - - - - -35]。
2.6。统计分析
在这个研究是研究样本的数量估计使用Quanto软件。所有的统计分析都使用SPSS软件(版本23.0)来实现的。正态分布定量变量表示为平均值±标准偏差(非正态的分布血清TG水平表示为中位数和四分位数)。直接计算和拟合优度检验标准被用来确定等位基因频率和验证哈迪温伯格平衡(HWE),分别。基因型分布进行了卡方检验,两个民族之间的一般特征分析未配对t以及。基因型和血清脂质参数之间的关系进行协方差分析(ANCOVA)、年龄、性别、血压、体重指数、吸烟和饮酒是作为协变量。逐步多元线性回归建模分析是用来确定血清脂质参数的相关风险因素毛南族,汉族,男,和女性(CC / CT基因型= 1和TT基因型= 2),分别。两国值< 0.05被认为是具有统计学意义。
3所示。结果
3.1。通用功能和血清血脂水平
提出了功能和血清脂质水平表1。性别比例的值、年龄结构、身体质量指数、体重和身高;吸烟和饮酒的百分比;的血糖水平、TC、低密度ApoA1、和飞机观测;和的比值ApoA1 /飞机观测毛南族和汉族人群(没有差异 对于所有)。然而,腰围的水平,脉压,舒张期和收缩期血压,和血清TG更高,而毛南族的高密度脂蛋白胆固醇的水平低于汉族族群 。
3.2。基因型和基因型
PCR产物电泳后,609个基点核苷酸序列的产品在所有样本(图观察1)。图中给出的三个基因型的乐队2:CT基因型(286、323和609个基点),CC基因型(286和323个基点),TT基因型(609个基点)。酶的基因型的区别是限制站点(C等位基因)或缺席(T等位基因)。直接测序的样品的结果如图所示3。
(一)
(b)
(c)
3.3。基因型和等位基因频率
如表所示2,在CC的频率有显著差异,CT, TT基因型和C等位基因之间毛南族和汉族人群(29.07%,53.08%,17.85%,55.61%和35.60%,49.70%,14.70%,和60.45%,分别 )。然而,rs4810479 SNP的基因型和等位基因频率在两个民族男女之间没有显著差异( 对于所有)。
3.4。基因型和血清脂质浓度
总结如表3和4毛南族组,血清高密度脂蛋白胆固醇浓度明显不同的三个基因型 ,和血清高密度脂蛋白胆固醇浓度C等位基因携带者中高于C等位基因非携带者,但这个发现只是局限于男性而不是女性。降低TC和低密度脂蛋白浓度在汉族男性也观察到C等位基因携带者比C等位基因非携带者( 对于所有)。
3.5。血清脂质参数的相关因素
多元线性回归分析表明,血清高密度脂蛋白胆固醇和ApoA1毛南族组的浓度都与PLTP rs4810479基因型( ;表5)。血清高密度脂蛋白胆固醇浓度毛南族男性,高密度脂蛋白胆固醇和毛南族ApoA1浓度雌性,TC和低密度脂蛋白浓度在汉族男性与基因型( ;表6)。除了PLTP rs4810479基因型、血清脂质特征的参与者也受到一些风险因素如性别、年龄、腰围、体重指数、脉压、舒张压、收缩压、空腹血糖、饮酒和吸烟( 对于所有;表5和6)。
4所示。讨论
目前的研究显示,毛南族的民族有更高的TG和高密度脂蛋白胆固醇浓度低于汉族( 为每个)。在TC没有明显差异,低密度ApoA1、飞机观测浓度和ApoA1 /飞机观测毛南族之间的比例和汉族人群( 对于所有)。众所周知,血脂异常是主要的心血管疾病的风险因素之一,是一个主要的心血管疾病死亡率的预测(1]。血清脂质这两个种群之间的差异可能是由于不同的环境,遗传因素及其相互作用。毛南族国籍是中国55个少数民族之一。作为一个山地民族,毛南族有其独特的历史,习俗,文化,如intraethnic婚姻,特定的服装,独特的生活方式和饮食习惯。毛南族大多数人从事农业生产,辅以畜牧业、水产养殖业和其他副业产业。他们的主食大米和玉米,南瓜,红薯,小米是补充食品。酸性食品的偏好是他们饮食文化最大的特点。他们有独特的饮食习惯和生活方式与其他民族相比。毛南族民族主张intraethnic婚姻。他们的婚姻是父母包办的。 These results suggest that the genetic traits of some genes related to lipid metabolism may be different between the Maonan and Han ethnic groups.
根据国际1000基因组数据库的结果(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/variation/tools/1000genomes/),我们知道rs4810479C等位基因频率是26.37%在英国英格兰和苏格兰(GBR);27.27%在犹他州居民(CEPH)北部和西部欧洲血统(CEU);32.45%在哥伦比亚麦德林、哥伦比亚(CLM);33.84%在芬兰芬兰(鳍);41.67%的非洲裔加勒比人巴巴多斯(ACB);42.62%在非洲血统的美国人在美国西南部(ASW);在尼日利亚43.43% Esan (ESN);51.46%在印度古吉拉特语从休斯顿,德克萨斯州(GIH);在北京55.34%,汉族,中国(慢性乙肝);57.56%的孟加拉从孟加拉国(BEB); 64.29% in Southern Han Chinese (CHS); and 68.82% in Chinese Dai in Xishuangbanna, China (CDX). In the present study, we found that the Maonan ethnic group had lower rs4810479C allele frequency than the Han ethnic group (55.61% vs. 60.45%, )。的基因型分布PLTP rs4810479 SNP在当下研究两个民族之间也是不同的 ,但是没有显著差异在男性和女性之间的基因型和等位基因频率在两个人群。这些发现表明,PLTP rs4810479 SNP可能有种族/民族的特异性。
之间的关联PLTP rs4810479 SNP和血清脂质浓度在不同的种族/民族是在很大程度上仍然不清楚。在以前,Musunuru et al。36)提示,PLTP rs4810479 SNP在欧洲人口与高密度脂蛋白胆固醇浓度有关。在目前的研究中,我们指出PLTP rs4810479 SNP与几个显著相关血清脂质表型毛南族和汉族人群。亚组分析显示血清血脂水平性表明,C等位基因携带者中高密度脂蛋白胆固醇浓度较高毛南族男性和降低TC和低密度脂蛋白浓度比C等位基因非汉族男性。这些结果表明,可能有一个种族或性别之间的协会PLTP rs4810479 SNP和血清脂质特征在我们研究少数民族。
众所周知,血清脂质浓度也受到许多环境危险因素如人口特征、生活方式、饮食结构和缺乏身体活动(37]。在当前的研究中,我们还发现,血清脂质浓度与几个环境风险因素在两个民族。在先前的研究中,我们发现,总膳食脂肪的摄入量,胆固醇,和能源高毛南族的汉民族(30.]。生活环境的差异,饮食习惯,生活方式,和两个种群之间的遗传背景可能是血清脂质浓度不同的主要原因。大米、玉米和其他富含碳水化合物的食物是毛南族人民的日常主食。他们也擅长制作各种补充食品大米。他们喜欢吃辣和酸性食品含有大量的油和盐。大量的碳水化合物的摄入,油和盐可以增加的腰围和血压毛南族人民。多项研究表明,长期高盐饮食是一个重要的风险因素影响血压水平(38,39]。荟萃分析显示,减少钠摄入量可以降低血压水平有或没有高血压的人(40]。此外,毛南族的人也喜欢吃猪肉、牛肉、动物内脏和/或在一个火锅富含饱和脂肪酸。许多先前的研究表明饮食本身可以解释血脂水平的变化(41]。长期大量饱和脂肪饮食与肥胖、高血压、血脂异常、动脉粥样硬化(42,43]。因此,不同的环境风险因素等不健康的生活方式和饮食结构可能会进一步改变遗传变异之间的关系和我们的研究人群的血脂浓度。
我们的工作可能会有一些限制。首先,我们不能排除饮食以及其他环境风险因素的影响在统计分析。其次,我们也不能排除无症状的疾病的影响。第三,一个协会之间的PLTP rs4810479 SNP观察和血清脂质浓度在这项研究中,但许多无边无际的因素应考虑包括遗传和环境危险因素。最后,在我们的研究人群中样本容量有点小。因此,有必要进一步扩大样本量,尤其是基因基因,基因-环境和environment-environment交互对血清脂质参数确认我们的发现。
5。结论
有显著差异的基因型和等位基因分布PLTP rs4810479毛南族和汉族人群之间的SNP。之间的关联PLTP rs4810479 SNP和血清脂质参数也是不同的两个民族之间的男性和女性之间。可能会有种族/民族——和/或性别之间的联系PLTP rs4810479 SNP和我们的研究人群的血清脂质浓度。
缩写
| ANCOVA: | 协方差分析 |
| 7月: | 载脂蛋白 |
| 体重指数: | 身体质量指数 |
| BPI: | 杀菌/ permeability-increasing蛋白质 |
| 展望: | 颈动脉疾病 |
| 计算机辅助设计: | 冠状动脉疾病 |
| CETP: | 胆固醇酯转移蛋白 |
| 心血管疾病: | 心血管疾病 |
| 背景: | 脱氧核糖核酸 |
| GWAS: | 全基因组关联研究 |
| 高密度脂蛋白胆固醇: | 高密度脂蛋白胆固醇 |
| 腰痛: | Lipopolysaccharide-binding蛋白质 |
| 密度: | 低密度脂蛋白胆固醇 |
| 有限合伙人: | 脂多糖 |
| 聚合酶链反应: | 聚合酶链反应 |
| PLTP: | 磷脂转运蛋白 |
| PLTPa: | PLTP活动 |
| RFLP: | 限制片段长度多态性 |
| SNP: | 单核苷酸多态性 |
| TC: | 总胆固醇 |
| TG: | 甘油三酸酯 |
| UTR: | 未翻译。 |
数据可用性
在当前研究中生成的数据集是不公开,因为详细的遗传信息的每个参与者都包含在这些材料。
信息披露
没有作用的资助机构的设计研究和收集、分析和解释数据和书面的手稿。
的利益冲突
作者宣称没有利益冲突。
作者的贡献
F.-H。z构思研究,参与了设计,进行了基因分型结果,进行统计分析,起草了手稿。R.-X。y构思研究,参与了设计,开展流行病学调查,收集样品,帮助起草手稿。L.-M。Y。,W。-X. L., J.-Z. W., and D.-Z. Y. carried out the epidemiological survey and collected the samples. All authors read and approved the final manuscript.
确认
作者感谢国家自然科学基金会提供的资金支持中国。81460169)。他们还大大感谢所有本研究的参与者。