文摘

Galectin-3是galectin主监管机构免疫内稳态的家庭成员,尤其是传染病。然而,其在真菌性角膜炎的免疫调节机制尚未深入研究。我们的研究旨在澄清的作用galectin-3真菌性角膜炎的小鼠体内,从而提供一个新的生物标志物的抗真菌治疗。在我们的研究中,曲霉属真菌,最常见的真菌性角膜炎的病原真菌,是识别和孤立的角膜组织真菌培养。然后,galectin家人的RNA表达水平眼角膜的小鼠模型来自烟曲霉菌角膜炎被转录组测序筛选(RNA-seq)。galectin-3的表达是由定量实时聚合酶链反应检测(qPCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫荧光真菌性角膜炎角膜组织的小鼠模型。招募中性粒细胞的co-immunofluorescence galectin-3和相关标记在角膜组织流式细胞术测定分析和免疫荧光染色。的监管作用galectin-3促炎细胞因子和中性粒细胞被敲除小鼠模型的验证。Galectin-3淘汰赛恶化的条件抑制Galectin-3 benefecial了真菌角膜病变的生存和发展。这些结果表明,在眼部真菌感染,galectin-3能够调节通过调节中性粒细胞招募真菌性角膜炎的发病机制。 The deterioration of fungal keratitis and increased fungal load in corneal lesions of galectin-3 knockout mice proved the regulatory role of galectin-3 in fungal keratitis. In conclusion, galectin-3 is going to be an essential target to modulate neutrophil recruitment and its related antifungal immune response in fungal keratitis.

1。介绍

人类的身体,一个复杂的系统保护我们免受微生物攻击和入侵。微生物生活在我们体内/和人体生理学动荡中扮演关键性的角色,和免疫疾病(1]。真菌性角膜炎(颗),其中最有害的真菌感染引起的眼部疾病,波及范围如此之广的重要健康问题重视[2,3]。至少有100000种已知的真菌。然而,只有不到500人被证明是导致动物疾病,包括人类。曲霉属真菌的发生率是最高的致病性真菌,根据流行病学研究[4- - - - - -6]。微生物感染性疾病的免疫机制包括病原体清除和抗感染免疫反应(7]。微生物眼部疾病已经极大的兴趣我们十多年来(8,9]。

Galectins作为家庭的特点是galactose-specific carbohydrate-binding域与半乳糖交互位于半个表面糖蛋白细胞膜的脂质双分子层10- - - - - -12]。galectin组由15种不同galectins已经被确认在结构上和功能上12- - - - - -14]。这个家庭的成员免疫内稳态调节(扮演着不同的角色15]。Galectin-1触发稳态信号关掉t细胞效应函数,galectin-9促进促炎细胞因子释放的信号toll样受体下调,galectin-7和galectin-12对细胞凋亡的影响。Galectin-3总是表现为炎症级联放大器,从而发挥关键作用在炎性疾病16- - - - - -19]。Galectin-3,唯一的成员包含碳水化合物识别域扩展n端,表现为监管机构放大炎症级联的过程(20.]。越来越多的证据表明,galectin-3对于许多生物和pathobiological功能是有帮助的。Galectin-3可以调节免疫反应在真菌肾病等传染病,链球菌肺炎,通过控制免疫细胞活化HSC病毒感染,招聘、和分化15,21- - - - - -27]。

值得注意的是,galectin-3先天免疫细胞内稳态中起着重要的作用,尤其是对中性粒细胞,真菌的主要疾病过程中炎症细胞keratit [28]。Galectin-3提高依从性中性粒细胞与内皮细胞以及矩阵组成的单层膜蛋白质和体外纤连蛋白(29日,30.]。galectin-3免疫细胞调节的作用仍有待公布了它最有助于antipathogen免疫反应在传染病,尤其是中性粒细胞的规定。当前新的信息积累未来描绘了一个场景,galectin-3可以作为潜在的抗炎介质和特定调制器的炎症免疫反应和传染病,可能通过调节中性粒细胞和其他相关的免疫反应。然而,它在调节眼部真菌感染方面的作用仍然是未知的。

本研究旨在探讨潜在目标和底层机制引起的真菌性角膜炎的典型菌株致病性真菌发病率高。真菌感染小鼠模型的建立,关键的免疫细胞和生物标记物之间的关系探讨。本研究设计旨在提供证据支持在真菌性角膜炎galectin-3免疫障碍的重要作用,指出关键疾病标记。针对galectin-3基于新兴的抗真菌治疗结果相关的生物学和病理学galectin-3成熟起来。因此,要对真菌性角膜炎患者世界各地。

2。方法

2.1。病人和组织标本

组织样本,眼部图像周期性acid-Schiff染色(PAS),和微生物培养结果收集病人临床确诊为真菌性角膜炎,角膜刮文化和接受角膜移植从2020年5月到2021年5月在中山眼科中心。本研究经中山眼科中心医学研究伦理委员会(协议编号:2020 kypj115)。所有的参与者在这项研究提供的书面同意。角膜移植手术期间受感染的角膜组织收集并快速存储在低温冰箱在-80°C。

2.2。准备来自烟曲霉属真菌的孢子

典型的真菌菌株培养在马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)或Sabouraud葡萄糖琼脂(SDA、Difco、底特律、密歇根、美国)在30°C。真菌的存在证实了患者的角膜染色特性分支菌丝和颗粒曲霉属真菌的孢子在显微镜下。本调查中使用的压力来自烟曲霉属真菌是3.1320,从广东微生物菌种保藏中心,购买中国Gouangzhou。来自烟曲霉菌株生长在Sabouraud葡萄糖琼脂(Difco、底特律、MI) 30°C为4天。洗碗后磷酸盐0.1%渐变20 (PBST),收获了孢子悬液洗在无菌磷酸盐(PBS)。所有被稀释到孢子的解决方案 菌落(CFU) /毫升浓度与细胞计数室。来自烟曲霉属真菌孢子的制备是在实验室完成的广州市妇女儿童医疗中心(广州)。

2.3。实验动物

150名女性C57BL / 6 n小鼠(6 - 8周大),重21克,购自北京重要河流实验动物技术有限公司和galectin-3建设的完整基因敲除小鼠是委托Saiye生物学(菌株名称:C57BL / 6 n-lgals3em1cyagen,应变数字:kocmp - 16854 - lgals3 b6n - va)。老鼠被分为四组:野生型群体,野生型真菌性角膜炎组,galectin-3^{- / -}组和galectin-3^{- / -}真菌性角膜炎组。动物饲养和实验进行了具体的无菌(SPF)动物房间实验动物中心的中山大学中山眼科中心。所有的动物治疗后提供的指导方针眼科和视觉研究动物使用视觉和眼科学研究协会和中山眼科中心机构审查委员会批准(道德号码:2020 - 011)。所有实验动物使用了视觉和眼科学研究协会(下午)的要求。

2.4。动物模型体内

建立真菌性角膜炎模型体内,C57BL / 6 n小鼠或galectin-3^{- / -}小鼠麻醉与戊巴比妥钠腹腔内(1%)和盐酸利多卡因(0.5%)被应用于眼球表面两次或更多的角膜麻醉。首先,30-gauge针被用来形成一个隧道的右眼角膜基质。然后,我们使用一个33-gauge注射器通过隧道和穿刺注射5μL孢子的解决方案( CFU /毫升)在角膜基质,直到角膜基质变成了一个统一的白色。每个鼠标的未经处理的左眼被认为是控制真菌性角膜炎的发病。与过量的麻醉老鼠牺牲后,角膜组织是收获。

为了说明疾病进展,鼠标眼角膜拍摄确定临床分数5天postinfection (dpi)。真菌性角膜炎的严重程度分级规模从0到12根据评分系统由吴et al。31日]。临床评分的计算是通过三个方面:角膜透明度(0 - 4),角膜透明度(0 - 4),密度和角膜表面规律(0 - 4)。

2.5。RNA-seq和数据分析

RNA样本提取眼角膜真菌性角膜炎的小鼠模型在5 dpi ( /组/时间点)过程后所指示的RNeasy +迷你包(美国试剂盒,瓦伦西亚,CA)。RNA-seq图书馆建设和计算机测序被Annoyoda生物技术有限公司完成,和trimmomatic软件应用删除适配器从原始数据序列,劣质基地,和低质量的读取。我们用Hisat2软件比较有效的读取人类GRCh38参考基因组和RSEM软件来计算每个样本的TPM价值。R包DESeq2被用来分析差异表达基因。差异基因表达被定义为log2 - 和值< 0.05。集群R包分析器是用于执行BP和KEGG富集分析差异的基因。截止0.01和价值截止值的0.05阈值过滤显著富集条件。

2.6。定量实时聚合酶链反应(存在)

检查galectin-3 mRNA表达在真菌性角膜炎老鼠和比较C-X-C主题的表达趋化因子配体1(处于)和Interleukin-1β(il - 1β)mRNA在野生型和真菌性角膜炎老鼠,真菌性角膜炎老鼠,和Galectin-3淘汰赛真菌性角膜炎老鼠,我们首先使用试剂盒RNA提取工具来提取总RNA真菌性角膜炎角膜的老鼠,根据指令和豆类逆转录工具包执行RNA逆转录PCR机。记录通过SYBR量化绿色qPCR执行智商Thermocycler ABI (Bio-Rad)或使用定量Studio设计v1.3。相对RNA的表达是规范化,使用2−数据进行了分析ΔΔCt方法。所有存在实验重复三次。引物从英杰公司购买,和它们的序列如下所示:(1)Galectin-3:向前,5 - - - - - -GCTTATCCTGGCCCAACTGC-3 ;反向:5 - - - - - -CCCCGCTGGACCACTGACGG-3(2)il - 1β:向前,5 - - - - - -TGTCGGACCCATATGAGCTG-3 ;反向:5 - - - - - -TCCTTTGAGGCCCAAGGCCA-3(3)CXCL-1:向前,5 - - - - - -CAAACCGAAGTCATAGCCAC-3 ;相反,5 - - - - - -TGGGGACACCTTTTAGCATC-3(4)GAPDH:向前,5 - - - - - -CTCATGACCACAGTCCATGC-3 ;相反,5 - - - - - -TTCAGCTCTGGGATGACCTT-3

2.7。酶联免疫吸附试验(ELISA)

galectin-3的蛋白质含量处于受控和有选择地使用ELISA试剂盒(研发系统)进行了测试。角膜真菌性角膜炎小鼠单独收集样品在0.5毫升5 dpi和均质包含0.1% Tween-20 PBS。所有样本离心5分钟,然后,上层的化验下制造商的指示。

2.8。流式细胞术分析

确定的中性粒细胞比例在不同阶段的真菌性角膜炎老鼠,眼角膜感染在收获5 dpi后切成块(约1毫米³)在显微镜下。根据制造商的指示,每个管增加了60 U /毫升Liberase TL(美国罗氏诊断)和1640 mL无血清培养基和放置在一个37°C孵化器裂解大约45分钟,每15分钟摇晃几次。消化组织及其悬挂过滤70μ米尼龙网1640年10%成单个细胞悬液中染色。之后,与非结合的细胞被封锁anti-CD32 / anti-CD16马伯15分钟的流式细胞仪缓冲区在PBS(2%胎牛血清)。接下来,细胞治疗FITC-conjugated CD45抗体,PE-conjugated Ly6G抗体,和421 -共轭CD11b BV抗体对冰30分钟。流式细胞仪的细胞被resuspended染色缓冲和分析Cyto-FLEX年代流式细胞分析仪(美国贝克曼)。

2.9。免疫荧光染色

检测细胞角蛋白的表达12 (CK12) galectin-3, CD11b真菌性角膜炎,免疫荧光染色法在小鼠角膜的真菌性角膜炎。角膜组织与4%多聚甲醛固定10分钟。鼠标角膜组织然后cryoprotection一夜之间平衡30%蔗糖溶液中,嵌入在10月媒体和分段使用低温恒温器设定在10μ米每一节。幻灯片的角膜组织充满0.5% Triton x - 100在PBS 60分钟,阻止了3% BSA 30分钟。幻灯片和细胞孵化主要抗体特定CK12 (Abcam 1: 200年,英国),galectin-3 (Abcam 1: 200年,英国),和CD11b (Abcam 1: 500年,英国)在室温下一个小时。洗后5分钟,3次在PBS,幻灯片和各自的二次孵化抗体的Alexa萤石594 -共轭免疫球蛋白(Abcam 1: 300年,英国)或Alexa萤石488 -共轭免疫球蛋白(Abcam 1: 300年,英国)一小时在室温下,原子核是沾染了4 ,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) 10分钟。荧光图像是通过激光共聚焦荧光显微镜(LSM800;卡尔蔡司显微镜,白色平原,纽约,美国)。

2.10。Hematoxylin-Eosin(他)染色

确定真菌性角膜炎的病理变化,整个眼球真菌性角膜炎的老鼠( /组/时间点)在5 dpi,收获与4%甲醛固定过夜。然后,角膜组织通过一系列梯度乙醇脱水(70 - 99%),嵌入在石蜡,切成段(5μ米厚),沾着他。

2.11。双光子显微镜(TPM)

检测体内菌丝的存在,我们进行角膜成像两颗老鼠和galectin-3淘汰赛颗老鼠使用定制的TPM系统。角膜刮了获得角膜样本进行成像。TPM使用Ti-Sapphire飞秒激光(变色龙超二世;连贯,Inc .,圣克拉拉,CA)作为光源。×20物镜(XLUMPlanFLN×20日1.0数值孔径(NA),水浸法;奥林巴斯)是使用。成像视场和成像速度大约是 μ在横 - - - - - - 飞机组成的 像素和0.1帧/ s,分别。激发波长为780 nm内在对比和moxifloxacin-based成像。自发荧光和宋惠乔收集信号在两个检测通道通过分离发射光430长传球二向色镜。然后,ImageJ被用来形成真菌菌丝颜色的图像。

2.12。真菌负荷计算

受感染的老鼠眼角膜( /组/时间点)在收获5 dpi,然后清洗,并在1000年使类同μL正常的无菌生理盐水。连续稀释了相应实现每个板上适当数量的殖民地。总共有100μL角膜组织的悬浮液均匀落在了各自的PDA板块和传播撒布机。CFU计数计算18 - 24 h孵化后37°C。来自烟曲霉菌的负载被表示为CFU /毫升。培养皿,只有暴露在洁净工作台10年代被认为是消极的控制。

2.13。统计方法

给出的结果 (SEM)值。使用SPSS统计分析为Windows(版本22.0;国际商业机器公司)。一个独立的 - - - - - -测试是用来比较两组之间的差异。单向方差分析(方差分析)与Dunnett测试多个比较进行评估的实验组与对照组的重要性。生成的图像是GraphPad棱镜为Windows 7(版本7.04;GraphPad软件)。值小于0.05被认为是重要的。

3所示。结果

3.1。曲霉属真菌是最常见的一种真菌性角膜炎的病原真菌

曲霉属真菌是最常见的一种真菌性角膜炎的病原真菌,和图1(一)典型代表真菌性角膜炎临床迹象显示角膜炎症溃疡和角膜组织PAS染色显示大量的真菌的存在(绿色箭头)基质(数字1(一)和1 (b))。的主要病原微生物检测患者的角膜,角膜组织和培养真菌中提取。然后,比例最高的真菌筛选实验室部门进一步培养,显示特征棉纱状曲霉菌外观(图1 (c))。真菌的乳酸酚棉兰染色显示树突菌丝和分散的颗粒状孢子在显微镜下,证明曲霉菌的典型特征(图1 (d))。

3.2。Galectin-3的表达显著增加角膜病变的真菌性角膜炎模型

RNA-seq测序分析小鼠模型提取的眼角膜的屏幕真菌性角膜炎的关键目标。在检测到基因,3025个调节和2654个表达下调的基因被发现在被感染后的第五天,疾病的峰值(图2(一个))。与此同时,galectin家庭显著调节基因表达谱,这引起了我们的注意,我们进一步分析了它们。结果表明,galectin-3的表达增加galectin家族成员之间最重要的。(图2 (b))。此外,RNA的表达galectin-3 ( )(图2 (c))或蛋白表达水平的galectin-3(图2 (d)在眼角膜)( )还显示,galectin-3显著增加的疾病模型与正常组相比。它表明,在真菌性角膜炎galectin-3可能发挥重要的作用。

3.3。Galectin-3和中性粒细胞与在真菌性角膜炎的疾病发展

真菌性角膜炎的小鼠模型建立了进一步验证galectin-3在真菌性角膜炎的高表达和其潜在的调控机制。我们计算的变化水平的嗜中性粒细胞激活期间疾病通过流式细胞术分析。图3(一个)表明,中性粒细胞(CD45 + ly6G + CD11b +)显然被激活过程中疾病( )在眼角膜,表明中性粒细胞的主要功能细胞亚型在抗真菌免疫反应。与此同时,免疫荧光结果显示galectin-3(绿色荧光)在角膜上皮细胞层coexpressed角膜上皮细胞标记CK12(红色荧光),这说明galectin-3是位于角膜上皮。此外,galectin-3和中性粒细胞标记CD11b coexpressed在角膜上皮细胞和基质层,表明galectin-3和中性粒细胞免疫反应相关的真菌性角膜炎(图3 (b))。这是暗示的表达galectin-3有积极影响在真菌性角膜炎中性粒细胞招募。

3.4。Galectin-3淘汰赛显著影响真菌性角膜炎的进展

进一步研究galectin-3在真菌性角膜炎的规定,我们建立了小鼠模型的野生型小鼠和galectin-3淘汰赛(galectin-3^{- / -})小鼠评估对病程的影响。前部分摄影(图4(一))和临床评分(galectin-3^{- / -}颗与野生型FK D1队: vs。 ;D3: vs。 ;D5: vs。 )(图4 (b)显示,与野生型相比FK组,队galectin-3的状况^{- / -}颗集团迅速加重感染后的第三天,主要由穿孔率(galectin-3增加引起的^{- / -}颗与野生型FK D1队: vs。 ;D3: vs。 ;D5: vs。 )(图4 (e))。而角膜水肿(galectin-3的趋势^{- / -}颗与野生型FK D1队: vs。 ;D3: vs。 ;D5: vs。 )和溃疡覆盖率(galectin-3^{- / -}颗与野生型FK D1队: vs。 ;D3: vs。 ;D5: vs。 )两组之间的相似(数据吗4 (c)和4 (d))。它暗示antifunal炎症细胞抵抗真菌攻击的免疫功能受损galectin-3击倒。病理部分还显示,炎症和角膜水肿严重程度galectin-3的小鼠模型^{- / -}真菌性角膜炎组显著增加比野生型FK组,队和炎性细胞浸润的深度逐渐增加(图4 (f)),这是符合疾病的分数。

此外,galectin-3在抗真菌活性的影响在本研究验证。双光子显微镜用于观察的数量和形态真菌菌丝在野生型颗老鼠和galectin-3眼角膜^{- / -}颗小鼠感染后5天。这是发现菌丝galectin-3的眼角膜^{- / -}颗老鼠明显密度比正常小鼠(图4 (g))。相应的,结果角膜真菌负载(CFU)(图4 (h))表明,在感染后5天,野生型的CFU颗老鼠和galectin-3^{- / -}颗老鼠是 ,这意味着在galectin-3真菌^{- / -}模型生长良好,积极。上述结果表明,galectin-3可能预防和/或抑制真菌性角膜炎积极进展和调节炎症细胞的真菌间隙。

3.5。Galectin-3淘汰赛受损招募中性粒细胞在真菌性角膜炎的小鼠模型

为了说明galectin-3对免疫细胞的影响在真菌性角膜炎的小鼠模型,我们首先研究了中性粒细胞在不同条件下的水平。流式细胞仪分析显示中性粒细胞(CD45 + ly6G + CD11b +)显著激活在正常小鼠角膜真菌性角膜炎。与此同时,这一现象在galectin-3抑制^{- / -}疾病模型(野生型与野生型模型: ;野生型与galectin-3模型^{- / -}模型: )(数据5(一个)和5 (b))。

此外,眼角膜的老鼠收集在感染后5天的RNA和蛋白质含量检测中性粒细胞趋化因子处于受控和il - 1β。结果表明,RNA水平处于增加正常小鼠和减少在基因敲除小鼠(野生型与野生型颗: ;野生型颗与galectin-3^{- / -}颗: )(图5 (c)),蛋白质含量在眼角膜显示相同的趋势(野生型与野生型颗: ;野生型与galectin-3^{- / -}颗: )(图5 (e))以及淋巴结(野生型与野生型颗: ;野生型颗与galectin-3^{- / -}颗: )(图5 (f))。il - 1的表达趋势β在蛋白质水平(野生型与野生型颗: ;野生型颗与galectin-3^{- / -}颗: )(图5 (d))处于相似的统计差异。以上这些数据暗示galectin-3发挥了免疫作用通过促进中性粒细胞的激活在真菌性角膜炎。此外,中性粒细胞减少活动,负责真菌控制和抗原表达,也解释了galectin-3角膜穿孔的越快^{- / -}真菌性角膜炎的老鼠。

4所示。讨论

Galectin-3主监管机构的传染病。这项研究表明galectin-3可能发挥重要的抗真菌作用的免疫反应来对抗真菌入侵的中性粒细胞招募颗小鼠模型。验证,galectin-3基因敲除小鼠遭受更严重的出现颗角膜病变临床评分较高的深度、区域和角膜水肿程度与野生型小鼠相比。低水平的中性粒细胞和促炎细胞因子被发现galectin-3基因敲除小鼠组与野生型小鼠模型组相比,这表明监管galectin-3在体内免疫反应中的作用。真菌的负载和真菌形态活动在galectin-3更高淘汰赛组比模型组。这些数据表明,galectin-3可能是一个必要的监管生物标志物在免疫反应对抗真菌入侵眼部表面,和galectin-3击倒在很大程度上损害了抗真菌免疫反应。

Galectin-3起着关键作用的微生物感染,如细菌、真菌、病毒和寄生虫(32- - - - - -34]。主流的观点在传染病发病galectin-3支持是有益的。例如,在病毒传染病,galectin-3往往影响,如hiv - 1病毒(人类免疫缺陷virus-1) MV-Mp(鼠标protoparvovirus)分钟的病毒,和EV71肠病毒(71年),如病毒组合,复制,萌芽,和传播,其次是infection-associated炎症,和内源性galectins为细胞因子通过调节病毒感染与细胞组件交互在病毒劫持或炎症由病毒复制(35]。Galectin-3被认为是一个目标来调节调节病毒感染病毒的免疫应答。在细菌感染,大多数研究表明,细菌感染链球菌galectin-3基因敲除小鼠有较高的细菌负担和增强性肾炎和肾功能不全与野生型小鼠相比36,37]。许多研究表明,galectin-3似乎调解中性粒细胞迁移和招聘差异感染动物模型(37]。我们的研究是在协议galectin-3淘汰赛传染病复苏是有害的,导致严重疾病的发展,甚至角膜穿孔。假设galectin-3可能履行其免疫调节通过招募颗发病机理的关键免疫细胞亚型,尤其是中性粒细胞招募。

Galectin-3对中性粒细胞的激活和招聘很重要在传染病的免疫反应20.]。中性粒细胞反应积极响应真菌入侵,杀死并清除外来病原体通过吞噬作用。研究galectin-3中性粒细胞报道,粘附受体之间固有的中性粒细胞和内皮细胞增加,所以促炎细胞因子的表达水平37]。招聘和激活galectin-3对中性粒细胞的影响表明,抑制galectin-3可能下调的原因的先天免疫反应炎症疾病,尤其是传染病。最近的研究表明,galectin-3基因敲除小鼠显示出高的中性粒细胞数量和减少真菌感染的主要焦点加载在真菌性肺炎病变和腹膜腔由真菌感染引起30.]。保护作用的galectin-3缺乏真菌性角膜炎证明galectin-3中性白细胞细胞亚型的监管作用;因此,我们的数据暗示的重要性galectin-3先天免疫的真菌感染。在一起,当前的研究支持的监管作用galectin-3中性粒细胞的激活和招聘在炎性疾病,尤其是传染病。我们的研究证明了的监管作用galectin-3关键免疫在抗真菌炎症亚型。说到galectin-3涉及免疫介导的细胞因子,我们也证实下游细胞因子在炎症级联;蛋白质处于受控和il - 1的表达水平β明显增加。这些都是积极与中性粒细胞炎症反应。处于上游信号是一个网站积极迁移的单核细胞和中性粒细胞聚集及时角膜病变组织。il - 1β有助于炎症级联的监管下NLRP3 inflammasome,中心蛋白质复杂的感官和裂解细胞因子功能形式。

一旦先天免疫系统识别病原体,眼表面的屏障将第一行武力对抗真菌入侵。眼表面屏障由角膜上皮细胞、结膜细胞,等等29日]。Galectin-3促进船粘膜屏障功能,皮肤层和眼表面保护的内部系统交互微生物无处不在。Galectin-3报道可有效控制细菌感染扩展肺部感染和肾真菌感染(37,38]。HCE的屏障功能在人类眼部表面有助于健康的微环境保护内部细胞氧化应激等不利因素,物理创伤和工作负荷压力过大愿景。假设眼屏障功能可能重要病原体从结算和代39,40]。我们的数据表明,淘汰赛galectin-3加剧眼屏障的损伤真菌入侵。缺乏galectin-3可能在真菌间隙做恶,在角膜组织更好的发展状态下双光子显微镜的观察。我们的数据表明galectin-3可能调节障碍函数来防止组织损伤炎性疾病的开始在真菌传染病,这表明galectin-3的关键作用更大领域的传染病。

在我们的研究中,结果表明:galectin-3颗老鼠模型中抑制中性粒细胞减少。抗真菌免疫反应发生由于组织感染和/或屏障功能损伤。抗真菌免疫反应旨在消除侵略者和当地内稳态平衡。Galectin-3调节真菌keratits抗感染免疫信号通路。这是一个过程,对宿主的免疫系统是至关重要的中性粒细胞的激活和招募。因此,针对galectin-3在抗感染免疫反应将是一个潜在的治疗真菌性角膜炎的替代。更好地理解galectin-3的分子和细胞机制,相关的是提供一种新的抗真菌治疗真菌性角膜炎患者,和/或从其他真菌传染病患者。

数据可用性

数据和材料用于支持本研究的发现可以从相应的作者。

的利益冲突

作者声明没有竞争的经济利益。

作者的贡献

晋元指导项目。肖一尘和杨Jiahui构思这个项目。肖一尘,杨Jiahui实验设计。傅一尘,杨、镇远,Zhile Xiong,曹国伟,和大连他进行实验。肖一尘,杨、傅镇远和大连,他分析了数据。肖一尘和杨Jiahui手稿草案写道。晋元修订后的手稿。肖一尘和杨Jiahui co-first作者。

确认

这项工作得到了国家自然科学基金(81870633号和82101086号)。