Cancer-Derived Exosomal mir - 651作为诊断标记抑制顺铂耐药性和直接目标ATG3宫颈癌

文摘

客观的。Cancer-derived液能促进宫颈癌的耐药性。然而,机制仍然是难以捉摸的。在此,我们观察到的角色exosomal mir - 651顺铂耐药性的宫颈癌。方法。循环mir - 651检测在宫颈癌和健康的人。诊断效果。在转染mir - 651模拟时,顺铂耐药性,细胞凋亡和增殖进行了评估。共鉴定了cancer-derived液囊。我们观察到PKH67-labeled的吸收液由海拉细胞/ S。与液coculture后由海拉/ S或海拉/ DDP细胞分泌,在海拉/ S细胞恶性行为检查。ATG3之间的交互和mir - 651双荧光素酶报告进行验证。生物行为研究为海拉细胞/ S cocultured液分泌mir - 651 mimic-transfected海拉/ DDP细胞。结果。表达下调循环mir - 651被发现在癌症比健康人受试者。它具有高灵敏度和准确性在诊断宫颈癌( )。mir - 651表达证实海拉低比海拉/ S / DDP细胞。迫使mir - 651减少顺铂耐药性的扩散和高架在海拉细胞凋亡。ATG3 mir - 651的直接目标。从海拉细胞分离液是富含CD63, CD9、和蛋白质的研究,从而确定隔离液。液分泌由海拉/ DDP细胞可以吸收海拉细胞/ S。当被海拉与液分泌cocultured / DDP细胞恶性行为的海拉/ S细胞增强,改善的mir - 651模拟液。结论。我们的研究结果表明,cancer-derived exosomal mir - 651抑制顺铂耐药性和直接目标ATG3,表明exosomal mir - 651可能是一个治疗的代理。

1。介绍

宫颈癌是一个主要杀手,严重威胁着妇女的健康1]。虽然宫颈癌疫苗的应用可以有效地降低宫颈癌的发病率,死亡率和发病率的全球妇女恶性肿瘤仍排名第四(2]。目前宫颈癌的治疗方法是全面的,如手术、化疗、放疗、免疫治疗(3]。然而,不是所有的科目都能取得令人满意的成果,尤其是对受试者晚期(4- - - - - -6]。为本地先进个人,目前的治疗策略是新辅助化疗随后手术对于chemotherapy-sensitive患者,而不敏感的病人直接转换为放射治疗(7]。如果有指标,可以有效地预测患者对化疗的敏感性,这部分患者对化疗不敏感可以节省时间和费用的新辅助化疗和直接转移到放射治疗以获得更好的结果(8]。因此,继续研究宫颈癌的发病机制,寻找具体的治疗目标和指标预测化疗敏感性仍极其宫颈癌治疗的关键。

细胞外液是囊泡直径50 - 140纳米,这是由细胞通过内吞作用等监管流程,融合,和流出9- - - - - -11]。液细胞间传递信号的传输小分子生物活性物质如小分子核糖核酸(microrna) [12]。液可以分开各种体液和细胞培养上清液,和它们的功能和组成是由他们的细胞来源13]。液在恶性肿瘤的微环境,丰富参与入侵的过程、转移、血管生成、化疗抵抗的恶性肿瘤14,15]。microrna是内生的,非编码小核糖核酸单链,19号核苷酸长度(16]。成熟的microrna的功能抑制目标mRNA表达转录后(17]。各种microrna标志物已确定为宫颈癌。Exosomal microrna已经有前途的球员宫颈癌(18]。先前的研究已经强调了mir - 651对非小细胞肺癌的影响(19和鼻咽癌20.]。不幸的是,它仍然是一个未知的关于mir - 651在宫颈癌。在这里,我们的研究发现循环mir - 651作为诊断标记在这个恶性肿瘤。此外,迫使exosomal mir - 651可以直接抑制顺铂耐药性,目标ATG3宫颈癌细胞,表明mir - 651的作用在宫颈癌的进展。

2。材料和方法

2.1。病人和标本

从2018年1月到2019年1月,30新诊断宫颈癌患者招募了衣冠楚楚的医院,军队医科大学。所有患者组织病理学证实。与此同时,30健康与个人选择。这项研究排除宫颈癌受试者经历了手术、放疗、化疗,等。此外,主题与严重的器官疾病史或其他全身性肿瘤也被排除在外。所有参与者提供书面知情同意。本研究遇到了衣冠楚楚的医院的伦理委员会的要求,军队医科大学(2018002)。5毫升全血样品从每个主题用EDTA抗凝管。离心分离后,样本收集在一个EP管和存储在-80°C,供以后使用。

2.2。定量实时聚合酶链反应(存在)

组织或细胞溶解1毫升试剂盒(美国表达载体)冰10分钟。溶菌产物转移到EP管。后增加200μL氯仿,样本站了5分钟,离心机在4°C 12000 g 30分钟。上部水层的解决方案是用移液器吸取与同等体积的异丙醇混合。在12000 g离心后15分钟在4°C,样本被和85%乙醇沉淀。添加适量的DEPC水溶解RNA。存在是由SYBR绿色荧光定量检测设备(Beyotime,北京)。引物序列如下:mir - 651 - 5 - - - - - -TGGGTAAAGTGCTTATAGTGC3(向前)和5 - - - - - -CACCAGGGTCCGAGGT-3(反向);ATG3-5 - - - - - -GACCCCGGTCCTCAAGGAA-3(向前)和5 - - - - - -TGTAGCCCATTGCCATGTTGG-3(反向);U6-5⁃TGCGGGTGCTCGCTTCGGCAGC⁃3(向前)和5⁃CCAGTG⁃CAGGGTCCGAGGT⁃3 ;和GAPDH-5 - - - - - -CTGGGCTACACTGAGCACC-3(向前)和5 - - - - - -AAGTGGTCGTTGAGGGCAATG-3(反向)。阈值周期(Ct)确定每个样本。相对表达决心使用2^{——∆∆Ct}方法。

2.3。细胞培养

人类正常宫颈上皮细胞(HcerEpic) C33A,少海,顺铂(DDP)敏感宫颈癌细胞系海拉/ S,和海拉DDP-resistant细胞系/ DDP购自上海生物科学研究所,中国科学院(中国)。这些细胞生长在DMEM培养基(美国Hyclone) +胎牛血清(的边后卫;美国Hyclone) 37°C恒定的温度和5%的公司₂孵化器。

2.4。转染

海拉细胞被播种24-well板( 细胞/)。第二天,mir - 651的细胞转染模仿(Genepharma、上海、中国),mir - 651抑制剂(Genepharma、上海、中国),或消极的控制(数控;中国上海Genepharma)。50μ1.25 L无血清培养基Opti-MEM被用来稀释μL mir - 651模拟,mir - 651抑制剂,或数控的浓度为20μmol / L和在室温下培养5分钟。同样,1μ与50 L Lipofectamine™2000稀释μ在室温下无血清培养系统L Opti-MEM和孵化为5分钟。稀释mir - 651模拟,mir - 651抑制剂,或数控混合Lipofectamine™2000和孵化20年代,然后添加到24个盘子。培养5 h后,混合培养基被取代和新鲜培养基,然后培养持续了24小时。

2.5。细胞计数Kit-8 (CCK-8)

海拉细胞接种到96孔板( 细胞/)。后继续孵化12 h, DMEM培养基被丢弃,和200年μL DMEM培养基添加包含0,50岁,100年,200年、400年和800年μ克/毫升DDP。48小时后,20μL CCK-8解决方案(Dojindo、日本)被添加到每个。培养2 h后,培养基被丢弃。450纳米的吸光度测定多功能微型板块的读者。DDP的半数抑制浓度(IC50)测定海拉细胞。

2.6。流式细胞术

这些细胞被使胰蛋白酶化到单个细胞悬液,用PBS洗。细胞接种到6-well板( /)。5μL膜联蛋白V-FITC和5μ添加了美国Lπ(σ),分别。充分混合后,细胞培养在黑暗中在室温下10分钟。细胞流式细胞分析仪上进行测试(BD,德国)。

2.7。集落形成实验

海拉细胞使胰蛋白酶化准备细胞悬液。计数细胞后,他们传播6-well板(300个细胞/)。每组有3多个洞。这些细胞被重复用移液器吸取和动摇防止细胞形成团块。经过2周的文化,这些细胞被固定在4%多聚甲醛和沾0.1%结晶紫(σ,美国)。殖民地的数量是在显微镜下计数(奥林巴斯、日本)。

2.8。Exosome-Free血清的制备

的边后卫在100 000克70分钟离心机,和沉淀被获得exosome-free的边后卫。海拉/ S RPMI 1640培养基培养细胞(美国Hyclone) exosome-free 10%的边后卫。

2.9。在细胞培养上清液外来体集合

海拉的对数增长/ S和海拉/ DDP细胞使胰蛋白酶化和培养RPMI 1640中10%的边后卫没有液48 h。海拉细胞培养上清液的/ S和海拉/ DDP细胞培养基收集。在500 g离心后10分钟,然后在12000 g 20分钟,上层的收集。过滤后通过一个0.22μ米孔隙过滤器,上层清液离心机在100000 g 2 h和resuspended磷酸盐(PBS)的解决方案。在100000 g 2 h,离心后沉淀在PBS resuspended形成海拉/ S和海拉/ DDP液存储供以后使用。

2.10。免疫印迹CD63, CD9和研究

蛋白质免疫印迹是用于检测exosomal标记包括CD63, CD9和研究。20μL resuspended液和添加10μL蛋白裂解缓冲。细胞溶解在冰30分钟后,样本在12000 g离心20分钟。上层清液收集得到exosomal蛋白质。80年μ2 h g exosomal蛋白质在电泳和转移到膜。然后,膜被封锁与脱脂奶粉1 h和孵化与相应的抗体主要包含CD63 (1/200;ab216130;美国Abcam), CD9 (1/500;ab223052;美国Abcam)和研究(1/1000;ab109201;美国Abcam)过夜。然后,膜与二次孵化抗体(1/2000;ab7090; Abcam, USA) for 1 h. After ECL (Absin, Shanghai, China) color development, dark room exposure, and development, we obtained protein bands through a gel imaging system.

2.11。吸收液

PKH67是一个膜标记染料,可以绑定到的脂质膜液并发出绿色荧光,可以用来识别液的存在。100年μL液与1孵化μL PKH-26染料,然后孵化1毫升稀释剂C, 200μL 1% BSA / PBS,和3μL PKH-26染料为20分钟。在100 000克70分钟,离心的PKH67-labeled外来体颗粒。海拉/ S细胞培养在12-well盘子。当他们融合达到了70%,取而代之的是新的介质包含PKH67-labeled液和孵化24 h。与PBS洗涤后,细胞与多聚甲醛固定(美国σ)20分钟。使用DAPI染色细胞核。由海拉/ S细胞的吸收液共焦荧光显微镜下研究(德国徕卡)。

2.12。免疫印迹,ATG3 LC3II /我和p62

组织和细胞添加蛋白质裂解缓冲包含100×蛋白酶和磷酸酶抑制剂和反复用移液器吸取。离心后,上清液被转移到一个新的EP管。美国BCA(σ)测定总蛋白浓度。沸腾和变性后,样品被加载到8% sds - page电泳。蛋白质都被转移到PVDF膜(美国微孔)。5%的脱脂奶粉被用于密封膜在室温下2 h。与TBST洗3次后,膜是孵化主要包含ATG3抗体(1/500;ab233562;美国Abcam), LC3I / II (1/1000;ab128025; Abcam, USA), p62 (1/1000; ab91526; Abcam, USA), and GAPDH (1/10000; ab181602; Abcam, USA) at 4°C overnight. Following washing with TBST, secondary antibody (1/10000; ab7090; Abcam, USA) incubation was presented for 2 h at room temperature. The bands were exposed by ECL chemiluminescence. GAPDH was utilized as an internal reference.

2.13。双荧光素酶报告

3 - - - - - -UTR mir - 651序列预测目标基因ATG3从NCBI检索网站。ATG3基因3 - - - - - -UTR质粒pLUC-ATG3构建综合(GenePharma、上海、中国)。海拉/ S和海拉/ DDP细胞,分别播种在24-well盘子。根据Lipofectamine™2000指令,100 ng pLUC-ATG3 cotransfected了50 nmol / L mir - 651模拟或数控。48小时后,荧光素酶的活动是由双荧光素酶报告基因检测设备。

2.14。统计分析

测量数据所表达的 。SPSS 18.0软件(SPSS Inc .)、美国)是用于统计分析。通过学生的对比组进行测试或单向方差分析。接受者操作特性曲线(roc),和曲线下的面积(AUC)计算评估诊断的潜力在宫颈癌循环mir - 651。使用UALCAN ATG3表达式分析了数据库(http://ualcan.path.uab.edu/analysis.html)。皮尔森的分析提出了mir - 651和ATG3之间30对宫颈癌和健康的人。值< 0.05显示统计学意义。

3所示。结果

3.1。循环mir - 651作为宫颈癌预后标记

本研究招募了30宫颈癌患者和30名健康个体。通过RT-qPCR循环mir - 651表达检测。数据表明,降低mir - 651表达被发现在宫颈癌等离子体比正常标本( ;图1(一))。我们评估了诊断潜在循环mir - 651的子宫颈癌。在图1 (b),数据显示,mir - 651循环显示高度敏感和准确诊断宫颈癌的能力( , )。上述研究结果表明循环mir - 651作为一个潜在的诊断宫颈癌的标志。

3.2。Downregulation DDP-Resistant mir - 651的宫颈癌细胞

调查的角色mir - 651在宫颈癌的顺铂耐药性,本研究首先检查在宫颈癌细胞的水平。其表达式比较HcerEpic C33A少海,海拉/ S,和海拉/ DDP细胞系通过RT-qPCR化验。如图2(一个)HcerEpic正常宫颈上皮细胞相比,发现差别mir - 651对这些C33A ( ),少海( ),海拉/ S ( ),和海拉/ DDP ( )宫颈癌细胞。更重要的是,mir - 651表现出减少表达海拉比海拉细胞/ S / DDP细胞( )。上述数据表明,表达下调mir - 651可能参与诱导宫颈癌的顺铂耐药性。

3.3。迫使mir - 651产生抑制作用对顺铂耐药性和核扩散和激励在宫颈癌细胞凋亡

然后,本研究评估是否强迫mir - 651改善宫颈癌细胞的顺铂耐药性。海拉/ S以及海拉/ DDP细胞分别转染mir - 651模拟。RT-qPCR, mir - 651表达决心。正如所料,迫使mir - 651表达被证实在海拉/ S和海拉/ DDP ( )细胞系(图2 (b))。这证明了成功的海拔mir - 651在两个细胞表达。mir - 651模拟,NC-induced海拉/ S以及海拉/ DDP细胞处理一系列DDP浓度。IC50值分别计算在所有组的细胞。在图2 (c),减少IC50值中检测出mir - 651 mimic-induced海拉/ S细胞( )。类似地,mir - 651模拟减少海拉/ DDP细胞的IC50值( ;图2 (d))。放在一起,迫使mir - 651可以减轻顺铂耐药性的宫颈癌。凋亡水平的评估,提出了通过流式细胞术。数据表明,mir - 651模拟海拉/ S细胞的转染细胞凋亡率升高( ;图2 (e))。相同的研究结果证实了在海拉/ DDP细胞( ;图2 (f))。因此,迫使mir - 651加快宫颈癌细胞凋亡。流式细胞仪等对每组的代表是在数字展出2 (g)和2 (h)。与mir - 651转染后模仿,集落形成数海拉/ S比数控转染细胞显著降低( ;数据2(我)和2 (j))。与此同时,我们海拉/ DDP细胞的集落形成数计算。同样,集落形成数的下降是验证和mir - 651模拟海拉/ DDP细胞转染( ;数据2 (k)和2(左))。上述数据表明,迫使mir - 651抑制宫颈癌细胞的增殖能力。

3.4。敏感的宫颈癌细胞消化液分泌有顺铂耐药性癌细胞

本研究观察到的功能液在宫颈癌顺铂耐药性。我们在文化隔离液浮在表面的海拉/ DDP细胞通过高速离心。评估液是否成功分离,免疫印迹是用于检查外来体表面生物标志物包括CD63, CD9和白色沉淀的研究样本。在图3(一个),白色沉淀样品展出CD63、CD9和研究表情,象征成功的隔离液。然后我们调查了海拉/ S细胞是否具有吸收液分泌的功能有顺铂耐药性癌细胞。coculturing有顺铂耐药性液和海拉/ S细胞后,本研究发现PKH67-labeled绿色荧光表现出均匀分布的海拉细胞细胞质(图3 (b))。这些发现证实液分泌有顺铂耐药性肿瘤细胞可以被敏感的宫颈癌细胞吸收。

3.5。有顺铂耐药性液促进顺铂耐药性和在宫颈癌细胞增殖和抑制细胞凋亡

在这里,我们从海拉隔离液/ S和海拉/ DDP细胞,这与海拉cocultured / S细胞。用不同浓度的DDP治疗后持续48 h,我们确定为海拉IC50值/ S细胞样本。在图4(一)海拉/ S细胞相比,IC50值表现出明显增加对那些有顺铂耐药性外来体coculture ( )。此外,海拉细胞/ S cocultured与有顺铂耐药性液比cocultured IC50值的增加与海拉/ S液分泌细胞( )。这表明DDP-resistant液可以诱导耐药性的宫颈癌。然后,我们提出了评估在集落形成能力。Coculture液分泌的海拉/ DDP细胞明显加剧海拉/ S细胞的集落形成能力( ;数据4 (b)和4 (c))。与此同时,从海拉/ S液细胞相比,集落形成能力的增加的海拉/ S cocultured液从海拉/ DDP细胞被证实( )。因此,DDP-resistant液高架集落形成扩散。如流式细胞仪所示,从海拉/ DDP细胞与液coculture之后,海拉/ S细胞凋亡明显抑制( ;数据4 (d)和4 (e))。相比coculture海拉的液/ S细胞,在细胞凋亡有明显减少的海拉细胞/ S cocultured液从海拉/ DDP细胞( )。上述数据表明,有顺铂耐药性液降低宫颈癌细胞凋亡水平。

3.6。Upregulation ATG3的宫颈癌

预测后,ATG3宫颈癌的下游是一个潜在的目标。从TCGA数据库,我们首先评估ATG3表达式在宫颈癌组织标本。高架ATG3表达式原发肿瘤中被发现( )比正常组织( ),如图5(一个)( )。然后,我们比较了ATG3表达式不同阶段之间的差异。因此,与正常相比,阶段1 ( ),第二阶段( ),和第四阶段( )表现出更高的ATG3表达式(图5 (b))。与此同时,我们的数据显示,相比于正常组织无区域淋巴结转移(N0; )或在1到3腋窝淋巴结转移(N1; )显示增加ATG3表达式(图5 (c))。同时,我们发现ATG3血浆样本中表达宫颈癌和正常个体。蛋白质免疫印迹的数据证实了upregulation ATG3宫颈癌比正常样本( ;数据5 (d)和5 (e))。图5 (f)表明循环ATG3表达增加宫颈癌等离子体比正常标本( )。相关分析显示,mir - 651表现出负面的互动ATG3宫颈癌科目( , ;图5 (g))。

3.7。ATG3直接在宫颈癌mir - 651的目标

确认mir - 651和ATG3之间的相互作用,提出了双荧光素酶报告(图6(一))。在ATG3-WT-induced海拉细胞/ S, mir - 651模拟比数控减少荧光素酶活性( ;图6 (b))。然而,mir - 651模拟并没有改变荧光素酶活动ATG3-Mut-induced海拉细胞/ S。类似的结果是海拉(图/ DDP细胞中发现的6 (c))。因此,ATG3可能直接在宫颈癌mir - 651的目标。本研究评估mir - 651是否影响ATG3在宫颈癌细胞表达。在图6 (d)数据显示,mir - 651模拟显著降低ATG3 mRNA表达在海拉/ S ( )和海拉/ DDP细胞( )。与此同时,ATG3表达式被免疫印迹检测。数据6 (e)和6 (f)发现表明,减少ATG3表达式在海拉/ S ( )和海拉/ DDP细胞( )mir - 651比数控模拟转染。转染后mir - 651抑制剂,ATG3 mRNA表达显示增加表达相比,数控在海拉/ S ( )和海拉/ DDP细胞( ;图6 (g))。与此同时,通过免疫印迹ATG3表达式进行评估。我们发现数控转染相比,mir - 651抑制剂高架ATG3表达式在海拉/ S ( )和海拉/ DDP细胞( ;数据6 (h)和6(我))。放在一起,ATG3 mir - 651的目标,迫使mir - 651可能在宫颈癌减轻ATG3表达式。

3.8。Exosome-Shuttled mir - 651抑制顺铂耐药性,在宫颈癌细胞增殖和促进细胞凋亡

据报道,顺铂耐药液可以促进宫颈癌细胞的耐药性(21]。在这里,本研究调查的角色exosomal mir - 651在宫颈癌细胞。海拉/ DDP细胞转染mir - 651模拟与海拉细胞/ S cocultured持续24小时。然后,我们确定的IC50值海拉细胞/ S。我们的数据显示,相比,数控,减少IC50值检测的海拉细胞/ S cocultured海拉/ DDP细胞转染mir - 651模拟( ;图7(一))。此外,本研究发现coculture模型展出集落形成数的减少与NC组( ;数据7 (b)和7 (c))。同时,海拉/ S细胞的凋亡水平升高与海拉/ DDP细胞转染coculturing后mir - 651模拟( ;数据7 (d)和7 (e))。综上所述,exosome-shuttled mir - 651抑制顺铂耐药性,在宫颈癌细胞增殖和促进细胞凋亡。

3.9。Exosome-Shuttled mir - 651在宫颈癌细胞减少ATG3表达式

后coculture mir - 651 mimic-transfected海拉/ DDP细胞,我们检查了ATG3表达海拉细胞/ S。数据显示,ATG3显示表达的减少在海拉细胞/ S cocultured海拉/ DDP细胞转染和mir - 651模拟( ;数据8(一个)和8 (b))。此外,其他autophagy-related蛋白质包括LC3II /我和p62测定。结果表明,LC3II /我水平相对较低( )和p62表达式( )在海拉/ S增强细胞和mir - 651 cocultured mimic-transfected海拉/ DDP细胞(数据吗8 (c)和8 (d))。的原理图exosomal mir - 651 / ATG3宫颈癌是描绘在图9。

4所示。讨论

本研究确定了循环mir - 651在宫颈癌表达下调,可以用作标记诊断恶性肿瘤。Cancer-derived exosomal mir - 651可能改善顺铂耐药性和宫颈癌的恶性进展,强调exosomal mir - 651对宫颈癌治疗代理。

液所携带的microrna是高度保守和稳定,这被认为是诊断标记或治疗宫颈癌的代理(22]。郑等人证实exosomal let-7d-3p和miR-30d-5p标记诊断宫颈癌(23]。Konishi等人证实,exosomal miR-22可能成为一种很有前途的药物输送系统关于宫颈癌放射治疗(24]。马等人提出了一个循环miRNA-signature包含mir - 146 a - 5 - p, mir - 151 - a - 3 - p, mir - 2110, miR-21-5p在宫颈癌诊断(25]。本研究证实了循环mir - 651的差别,对这些子宫颈癌。AUC为0.9050,这表明循环mir - 651可能是一个敏感和准确诊断宫颈癌的标志。其诊断价值将验证在一个队列和一个更大的样本量。有趣的是,低miR-21-5p表达式被确认在海拉比海拉/ S / DDP细胞,并迫使其表达式DDP的IC50值降低,表明在差别miR-21-5p对这些基因与顺铂耐药性的关系。以前,史等人发现mir - 144可能改善宫颈癌的顺铂耐药性LHX2 [26]。杨等人提出,mir - 497可以调节顺铂化学敏感性的恶性肿瘤通过转酮醇酶27]。这些发现强调了microrna耐药的影响。此外,我们的数据表明,迫使mir - 651诱导细胞凋亡并削弱了海拉细胞增殖,表明mir - 651作为一个肿瘤抑制基因。

在这项研究中,超速离心法被用来成功地隔离液的海拉/ S和海拉/ DDP细胞。海拉/ S细胞可能由海拉/ DDP细胞消化液分泌,始终与先前的研究[21]。我们发现,海拉/ DDP细胞衍生液能促进海拉/ S细胞增殖和抑制细胞凋亡,表明液由海拉/ DDP细胞分泌可能诱发恶变。与此同时,从海拉/ DDP细胞诱导液分泌顺铂耐药性的海拉细胞/ S。一项研究表明,mir - 106 A / b从顺铂耐药肝癌细胞可能在宫颈癌细胞促进顺铂耐药性(28]。在这里,我们发现液分泌从mir - 651 mimic-transfected海拉/ DDP细胞扩散减弱和降低对海拉/ S细胞凋亡水平。ATG3 mir - 651的直接目标在宫颈癌。mir - 651由液减少ATG3海拉/ S细胞的表达。陈等人开发了一个autophagy-related模型,该模型可以预测宫颈癌受试者的结果(29日]。抑制自噬可能削弱这种恶性肿瘤的进展30.]。因此,cancer-derived exosomal mir - 651可以通过ATG3抑制宫颈癌细胞的恶性行为。此前,针对自噬可能改善各种恶性肿瘤转移和药物抗性31日- - - - - -33]。此外,液从mir - 651 mimics-transfected海拉/ DDP细胞分泌抑制自噬的海拉细胞/ S。这些数据表明,exosomal mir - 651改善耐药减少宫颈癌的自噬。然而,一些我们的研究应该指出的局限性。首先,exosomal mir - 651的临床意义将验证在一个更大的宫颈癌组。第二,exosomal mir - 651的作用在宫颈癌发展应该验证体内。

5。结论

总的来说,这项研究表明,cancer-derived exosomal mir - 651可以直接抑制顺铂耐药性,进展和目标ATG3宫颈癌。因此,exosomal mir - 651可能是一个治疗代理人对宫颈癌。

缩写

microrna:	小分子核糖核酸
存在:	定量实时聚合酶链反应
Ct:	阈值周期
DDP:	顺铂
的边后卫:	胎牛血清
CCK-8:	细胞计数kit-8
IC50:	半数抑制浓度
中华民国:	接受者操作特性曲线
AUC:	曲线下的面积。

数据可用性

数据分析了在目前的研究可从相应的作者以合理的要求。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

引用

1. 张,h .徐l . Zhang和y俏,“宫颈癌:流行病学、风险因素和筛选,“中国癌症研究杂志》上,32卷,不。6,720 - 728年,2020页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
2. c . Acuti Martellucci,野村,d . Yoneoka et al .,“人类乳头状瘤病毒疫苗效力在宫颈癌筛查项目:队列研究,“问卷,卷128,不。3、532 - 539年,2021页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
3. m . k . Canfell j . j . Kim Brisson et al .,“实现人宫颈癌死亡率的影响消除目标:78年比较建模分析低收入和中等收入国家,“《柳叶刀》,卷395,不。10224年,第603 - 591页,2020年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
4. p·a·科恩,a . Jhingran a . Oaknin l .丹尼,“宫颈癌”《柳叶刀》,卷393,不。10167年,第182 - 169页,2019年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
5. c . a . Leath第三和b . j .和尚,“21世纪宫颈癌管理:历史的角度来看妇科肿瘤组/ NRG的肿瘤在过去的二十年,“妇科肿瘤,卷150,不。3、391 - 397年,2018页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
6. p .那伽Ch l . Gurram Chopra,和美国Mahantshetty,“局部晚期宫颈癌的管理,”目前在肿瘤的意见,30卷,不。5,323 - 329年,2018页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
7. c . Gennigens m . de Cuypere j . Hermesse f . Kridelka g .耶路撒冷,“最佳治疗局部晚期宫颈癌,”抗癌治疗的专家审查,21卷,不。6,657 - 671年,2021页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
8. l . l . x, h . Chen Li高,l . Wang和x呗,”术后辅助化疗改善局部晚期宫颈癌患者预后的最优应对新辅助化疗,”在肿瘤领域第608333条,卷。10日,2020年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
9. j . Meldolesi“液和外皮层细胞间通信,”当代生物学,28卷,不。8日,R435-r444, 2018页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
10. 张和d . Yu .“液在癌症发展、转移和免疫力,”Biochimica et Biophysica学报(BBA)——评论癌症卷,1879年,第468 - 455页,2019年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
11. r . Kalluri和v . s . LeBleu生物学、功能和生物医学应用液,”科学,卷367,不。6478,p . eaau6977 2020。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
12. s . Mathivanan h .霁,r·j·辛普森“细胞外液:细胞器重要的细胞间通信,”蛋白质组学杂志》,卷73,不。10日,1907 - 1920年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
13. v . c .角和c . c . Yu”Cancer-derived液:他们的角色在癌症生物学和生物标志物的发展,“国际期刊的纳米卷卷15日,第8036 - 8019页,2020年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
14. l . Mashouri h . Yousefi a。r .奥阿哈迪,f . Molaei和s . k . Alahari“液:组合、生物起源在癌症转移和耐药机制,“分子癌症,18卷,不。1,p。75年,2019。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
15. r . Sahebi h . Langari z Fathinezhad et al .,“液:洞察癌症机制。”细胞生物化学杂志》上,卷121,不。1、7 - 16,2020页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
16. Mishra, t·亚达夫,诉王妃,“探索基于microrna在癌症诊断和治疗方法,“肿瘤学和血液学的关键评论于,卷98,页12日至23日,2016年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
17. r . Rupaimoole f . j .松弛,“微rna治疗:走向一个新时代管理癌症和其他疾病,”自然评论。药物发现,16卷,不。3、203 - 222年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
18. j . s . Nahand n . r . Vandchali h . Darabi et al .,“Exosomal小分子核糖核酸:小说在宫颈癌的球员,”表观基因组学,12卷,不。18日,第1660 - 1651页,2020年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
19. x Pu、j·a·罗斯·m·a·Hildebrandt et al .,“MicroRNA-related基因变异与早期非小细胞肺癌患者的临床结果,“癌症研究,卷73,不。6,1867 - 1875年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
20. j . j . Wang, z聂et al .,“环状RNA Hsa_circ_0066755作为癌基因通过骗取mir - 651承诺为鼻咽癌诊断的生物标志物,”国际医学科学杂志》上,17卷,不。11日,第1507 - 1499页,2020年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
21. x罗,j .魏f·l·杨et al .,“Exosomal lncRNA HNF1A-AS1顺铂耐药性的影响宫颈癌细胞通过调节microRNA-34b / TUFT1轴,“癌细胞国际,19卷,不。1,p。323年,2019。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
22. c·f·周x g . Wu y . m . Zhang et al .,“Cancer-derived exosomal mir - 221 - 3 - p促进血管生成针对THBS2在宫颈鳞状细胞癌,”血管生成,22卷,不。3、397 - 410年,2019页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
23. m .郑l .侯y马et al .,“Exosomal let-7d-3p和miR-30d-5p作为非侵入性宫颈癌的筛查和诊断生物标记前体,”分子癌症,18卷,不。1,p。76年,2019。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
24. h . Konishi m . Hayashi k谷口et al .,”的治疗潜力exosomal miR-22宫颈癌放射治疗,”癌症生物学和治疗,21卷,不。12日,第1135 - 1128页,2020年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
25. g, g .歌曲,x邹et al .,“循环对宫颈癌的诊断等离子体微签名,“癌症生物标记物,26卷,不。4、491 - 500年,2019页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
26. f·史,j . Su z . Liu j . Wang和t . Wang”mir - 144通过针对LHX2宫颈癌做顺铂耐药性的逆转,”细胞生物化学杂志》上,卷120,不。9日,第15026 - 15018页,2019年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
27. k·h·h·杨,x l . Wu吴et al .,“微- 497针对转酮醇酶的调节子宫颈癌的顺铂化学敏感性,”美国癌症研究杂志》上》第六卷,没有。11日,第2699 - 2690页,2016年。视图:谷歌学术搜索
28. g·r·Raji t . v . Sruthi l . Edatt k . Haritha s Sharath Shankar和v b Sameer Kumar“mir - 106 a / b的水平转移从顺铂耐药肝癌细胞可以改变宫颈癌细胞对顺铂的敏感性,”细胞信号,38卷,第158 - 146页,2017年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
29. h·h·陈,邓,w . Wang Tao,和y高,“识别autophagy-related基因签名的生存预测宫颈癌患者,”卵巢癌研究期刊》的研究,13卷,不。1,p。131年,2020。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
30. x y y . Wang Chen Chen等人“Angelicin抑制人类宫颈癌的恶性行为可能通过抑制自噬,”实验和医学治疗,18卷,不。5,3365 - 3374年,2019页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
31. g . j .郭m . Chen Ai, w .毛,h·李和j .周”Hsa_circ_0023404提高宫颈癌转移和药物抗性VEGFA骗取mir - 5047和自噬信号,”生物医学和药物治疗,第115卷,第108957页,2019年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
32. z, m . Cai, y, l .道和r·郭”miR-29c-3p抑制自噬和卵巢癌顺铂耐药性通过调节FOXP1 / ATG14途径,”细胞周期,19卷,不。2、193 - 206年,2020页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
33. f .周x, h .赵et al .,”下调的油气痕迹促进顺铂耐药性诱导自噬在卵巢癌中,“开展,8卷,不。19日,5200 - 5212年,2018页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

版权

版权©2021 Xiaofan朱镕基等。这是一个开放分布式下文章知识共享归属许可,它允许无限制的使用、分配和复制在任何媒介,提供最初的工作是正确引用。