使用核基质蛋白22膀胱切克试验检测原发性和复发的尿路上皮癌

抽象

目的。目的评价核基质蛋白22 (NMP22)膀胱切克试验在泌尿道上皮癌(UC)中的应用效果。方法。我们回顾性分析谁进行NMP22 BladderChek测试1318个例。其中，103例为原发性UC患者，其中90名手术治疗溃疡性结肠炎患者和1125例为良性疾病的患者。在NMP22 BladderChek测试为原发和复发UC的诊断的性能进行了评价。此外，尿细胞学的性能和NMP22 BladderChek测试初级UC的诊断在90名可用的受试者包括48名主UC患者和42周良性疾病的患者进行比较。结果。NMP22 BladderChek试验诊断原发性UC的敏感性和特异性分别为37.9%和95.8% ( )。NMP22 BladderChek试验诊断复发性UC的对应参数分别为31.0%和88.5% ( )。尿液细胞学诊断原发性UC的敏感性和特异性分别为54.2%和97.6% ( );在NMP22 BladderChek测试的对应的参数分别为41.7％和83.3％;两个测试组合的相应的参数分别为64.6％和83.3％。有没有在NMP22 BladderChek测试和尿细胞学或两次测试的组合之间的业绩差异显著（和0.001，分别地）。结论。在NMP22 BladderChek测试具有用于检测原发和复发UC一个低的灵敏度。尿细胞学优于NMP22 BladderChek测试，和组合使用两种测试的改善在检测主UC的灵敏度。

1.简介

尿路上皮癌(UC)起源于下尿路(尿道和膀胱)或上尿路(输尿管和肾盂)的尿路上皮。根据美国国家癌症研究所的数据，UC占膀胱癌的绝大部分(>90%)。2017年美国膀胱癌新增病例和死亡人数分别为79030人和16870人[1]。与美国相比，2015年中国分别有80500人和32900人[2]。目前检测膀胱癌的标准方法是侵入性膀胱镜检查。尿液细胞学检查是最准确的无创检查，是膀胱镜检查后的次要检查方法。膀胱癌检测的6种尿检(UroVysion™、Immunocyt™、BTA stat、BTA TRAK、NMP22 ELISA和NMP22 BladderChek)已获得美国FDA批准[3.，尽管它们都没有足够的准确性来替代尿液细胞学[4]。在这些尿液测试中，只有NMP22 BladderChek测试获得了中国FDA的批准。NMP22 BladderChek试验是基于NMP22的检测，NMP22是一种从死亡细胞(如凋亡细胞)中释放出来的核有丝分裂器蛋白。在UC细胞中，NMP22升高与恶性细胞核的结构形态变化特征一致。因此，NMP22 BladderChek试验可以用于UC的检测。NMP22 BladderChek试验已在中国临床使用多年。然而，对这一测试的效果的评价是缺乏的。在本研究中，我们的目的是评估NMP22 BladderChek试验在原发性UC诊断中的表现，并将其与尿液细胞学检查的表现进行比较。此外，还将评估NMP22 BladderChek检测复发性UC的性能。

2.材料和方法

2.1。耐心

我们回顾性回顾了2015年1月至2017年1月在北京大学人民医院检验科进行NMP22 BladderChek试验的所有患者。根据病历资料，本研究共选取1318例患者。其中原发性UC患者103例，术后UC患者90例，良性病变患者1125例。48例原发性UC患者和42例良性疾病患者进行了尿液细胞学检查。90例手术治疗UC患者中，9例进行尿细胞学检查，29例复发UC。良性疾病患者中结石40例，血尿485例，尿道感染231例，前列腺良性疾病274例，肾脏良性疾病73例，膀胱良性疾病22例。经北京大学人民医院病理化验室膀胱镜及/或组织病理学检查，确诊为原发性或复发性UC。UC分期按TNM标准分级，分级采用2004年WHO/国际泌尿病理学会(International Society of Urological Pathology, ISUP)共识分级。本研究经北京大学人民医院机构审查委员会批准。

2.2。实验室分析

从病人身上收集排尿样本。NMP22 BladderChek检测(Alere Scarborough, Inc.， Maine, USA)在北京大学人民医院临床检验科进行，2015年获得美国病理学家学会认证。样品是按照制造商的说明进行测试和解释的。在北京大学人民医院病理科进行的尿液细胞学检查是根据巴黎分型。在本研究中被列为阳性的细胞学样本包括可疑的高级别UC、低级别UC、高级别UC和其他类型的癌症。

2.3。统计数据

连续可变的年龄表示为中位数（25^th-75年^th百分位)。的Mann-Whitney采用检验方法比较两组数值资料。分类变量用a分析或费雪精确检验，用百分比表示。采用McNemar试验比较NMP22膀胱试验、尿液细胞学检查及两者联合检查的诊断价值。一个<0.05为差异有统计学意义。所有统计分析均采用SPSS 20.0版本软件进行。(SPSS, Inc.，芝加哥，伊利诺斯)

3.结果

3.1。患者的人口特征和临床特征

病人的人口统计资料如表所示1。简单地说，主要的原发性或复发性UC是老年男性。根据现场，分期和分级的原发性和复发性UC的分布示于表2。UC主要发生在膀胱内，以高级别为主，分期主要为Ta、T1、T2。


集团	年龄中位数年(25^th-75年^th百分位)	男性人数(%)


主加州大学( )	66 (59 - 75)	70（68.0％）
良性疾病( )	62 (52 - 72)	680例(60.4%)
值	< 0.001^__	0.134^‡
^#
主加州大学( )	69 (59 - 77)	33 (68.8%)
良性疾病( )	59 (46 - 71)	24 (57.1%)
值	0.002^__	0.254^‡
^&
加州大学(复发 )	75年(62 - 79)	21（72.4％）
Nonrecurrent UC ( )	64 (60 - 73)	38 (62.3%)
值	0.010^__	0.345^‡

注:UC，移行细胞癌;患者进行NMP22 BladderChek测试;^#患者进行NMP22膀胱检查和尿液细胞学检查;^&手术治疗UC患者;^__在Mann-Whitney检验用于计算双面值;^‡分类变量用a分析测试。


网站/阶段/年级	主人数(%)	主 ^# 人数(%)	复发性人数(%)

网站
Bladder	68例(66.0%)	22 (45.8%)	29 (100.0%)
输尿管	15（14.6％）	11 (22.9%)	0 (0.0%)
肾盂	12 (11.6%)	9 (18.8%)	0 (0.0%)
肾集合管	1 (1.0%)	1 (2.1%)	0 (0.0%)
膀胱和肾盂	2 (1.9%)	1 (2.1%)	0 (0.0%)
膀胱，输尿管和肾盂	1 (1.0%)	0 (0.0%)	0 (0.0%)
输尿管和renal pelvis	4 (3.9%)	4 (8.3%)	0 (0.0%)
阶段
助教	34 (33.0%)	8（16.7％）	7 (24.1%)
T1	31 (30.1%)	15 (31.2%)	12 (41.4%)
T2	28 (27.2%)	20 (41.7%)	6 (20.7%)
T3 + T4	10 (9.7%)	5 (10.4%)	4（13.8％）
年级
PNLMP	9 (8.7%)	0 (0.0%)	0 (0.0%)
低	29（28.2％）	11 (22.9%)	5 (17.2%)
High	65（63.1％）	37 (77.1%)	24 (82.8%)

注意:患者进行NMP22 BladderChek测试;^#患者进行NMP22膀胱检查和尿液细胞学检查;低恶性的乳头状肿瘤。

3.2。尿液测试对原发性UC诊断的诊断效果

表3.显示NMP22膀胱膀胱试验、尿液细胞学检查和两种检查结合诊断原发性UC的诊断效果。


生物标志物	主要UC		%的敏感性(95%置信区间)	%特异性(95%置信区间)	％的准确度（95％CI）	PPV %(95%置信区间)	% NPV(95%置信区间)
	不。的患者
	是的	没有


NMP22			37.9	95.8	91.0	45.3	94.4
积极的	39	47	(28.5 - -48.0)	(94.5 - -96.9)	(89.4 - -92.6)	（34.6-56.5）	（92.9-95.7）
负	64	1078
^#
NMP22			41.7	83.3	61.1	74.1	55.6
积极的	20.	7	(27.6 - -56.8)	(68.6 - -93.0)	(50.8 - -71.4)	(56.4 - -91.7)	(42.9 - -68.2)
负	28	35
细胞学			54.2	97.6	74.4	96.3	65.1
积极的	26	1	(39.2 - -68.6)	(87.4 - -99.9)	（65.3-83.6）	(80.6 - -99.9)	(52.0 - -76.7)
负	22	41
结合			64.6	83.3	73.3	81.6	67.3
积极的	31	7	(49.5 - -77.8)	(68.6 - -93.0)	（64.0-82.6）	(65.4 - -92.4)	(52.7 - -79.8)
负	17	35

注意:患者进行NMP22 BladderChek测试;^#患者进行NMP22膀胱检查和尿液细胞学检查;加州大学,移行细胞癌;CI,置信区间;PPV，阳性预测值;NPV，阴性预测值。

3.3。尿检对原发性UC诊断的敏感性按肿瘤部位、侵袭性和级别分层

表4显示NMP22膀胱细胞试验和尿液细胞学在诊断原发性UC分层的肿瘤位置、侵袭性和级别上的敏感性。


	NMP22积极人数(%)	细胞学阳性人数(%)	值


网站			0.010^__;0.772^‡;0.013^∮;0.024^§
Bladder	21 (30.9%)
输尿管	4 (26.7%)
肾脏	9 (69.2%)
Multisites	5 (71.4%)
侵袭性			0.005
Nonmuscle入侵	18 (27.7%)
肌肉入侵	21 (55.3%)
年级			0.001^&;0.006^※
PNLMP	0 (0.0%)
低	6 (20.7%)
High	33 (50.8%)
^#
网站			0.635
Bladder		13 (59.1%)
输尿管		4 (36.4%)
肾脏		6 (60.0%)
Multisites		3 (60.0%)
侵袭性			0.790
Nonmuscle入侵		12 (52.2%)
肌肉入侵		14 (56.0%)
年级			0.041
低		3 (27.3%)
High		23 (62.2%)

注意:患者进行NMP22 BladderChek测试;^#患者进行NMP22膀胱检查和尿液细胞学检查;PNLMP，低恶性潜力的乳头状肿瘤;分类变量用a分析或Fisher精确检验;^__比较NMP22膀胱溃疡性结肠炎对膀胱溃疡性结肠炎、输尿管溃疡性结肠炎、肾脏溃疡性结肠炎和多位点溃疡性结肠炎的敏感性;^‡膀胱UC vs输尿管UC;^∮膀胱UC与肾UC;^§输尿管UC vs肾UC;^&比较NMP22 BladderChek试验在PNLMP UC、低级别UC和高级别UC之间的敏感性;^※低等级UC vs高等级UC。

3.4。在NMP22 BladderChek试验，尿细胞学检查，以及两次测试的组合中的诊断性能比较

表5示出的诊断性能用于检测主UC的NMP22 BladderChek测试中，尿细胞学，以及基于临床诊断两项测试的结合进行比较。


的患者数量	细胞学		NMP22		值
的患者数量	协议	分歧	协议	分歧	值

NMP22					0.017
协议	50	5
分歧	17	18
结合					1.000^#;0.001^&
协议	61	5	55	11
分歧	6	18	0	24

注:采用McNemar试验比较NMP22 BladderChek试验、尿液细胞学检查及两者联合检查的诊断价值;NMP22与细胞学;^#结合与细胞学;^&与NMP22组合。

3.5。NMP22 BladderChek试验对复发性UC的诊断性能

表6显示NMP22 BladderChek试验对复发性UC的诊断性能。


生物标志物	复发性溃疡性结肠炎		%的敏感性(95%置信区间)	%特异性(95%置信区间)	％的准确度（95％CI）	PPV %(95%置信区间)	% NPV(95%置信区间)
	不。的患者
	是的	没有

NMP22			31.0	88.5	70.0	56.2	73.0
积极的	9	7	(15.3 - -50.8)	(77.8 - -95.3)	(60.3 - -79.7)	(29.9 - -80.2)	(61.4 - -82.6)
负	20.	54

注:UC，移行细胞癌;CI,置信区间。

3.6。NMP22 BladderChek试验假阳性率

对于良性疾病患者，NMP22 BladderChek试验的假阳性率为4.2%(47/1125)。尿路结石、血尿、尿路感染、良性前列腺疾病、良性肾脏疾病和良性膀胱疾病患者NMP22膀胱膀胱试验的假阳性率分别为20.0、2.1、6.9、1.5、2.7和31.8% ( )。

4。讨论

既往研究报道了NMP22 BladderChek试验的性能，并将其性能与其他尿液试验(包括尿液细胞学检查)进行了比较，以检测膀胱癌或UC [5- - - - - -18]。对于原发性膀胱癌或UC的诊断，NMP22 BladderChek试验的总体敏感性和特异性分别为16.7% ~ 70.5%和40% ~ 100%。尿细胞学检查结果分别为15.8% ~ 58.8%和78% ~ 100%。对于复发性膀胱癌或UC的检测，NMP22 BladderChek试验的总体敏感性和特异性分别为11% ~ 85%和69.6% ~ 100%。在这些研究中，这两种尿检的效果有显著差异。造成这些差异的原因可能与不同的研究人群和不同的研究设计有关。

在本研究中，NMP22 BladderChek测试初级UC的在1228名患者的诊断的灵敏度和特异性分别为37.9％和95.8％;在90例患者对应的数据分别为41.7％和83.3％。两个研究种群特异性的差异可能是由于良性疾病患者选择偏倚。尿细胞学，对于初级UC的90例诊断的敏感性和特异性分别为54.2％和97.6％。尿细胞学和NMP22 BladderChek测试的组合可提高灵敏度，以64.6％，同时减小特异性83.3％。在90例手术治疗，其灵敏度和特异性NMP22 BladderChek测试的检测复发性UC的分别为31.0％和88.5％。在NMP22 BladderChek试验和尿细胞学用于检测在我们的研究主要UC的的灵敏度（分别为37.9％和56.1％，）的那些相似O'Sullivan等的研究[14]。我们的研究表明，NMP22 BladderChek测试和尿细胞学检查为主要UC的诊断敏感性低，新的更加敏感的生物标志物应在检测UC的使用。据报道，具有Cxbladder在检测原发和复发的UC极好的灵敏度[14,17]。

有几项研究报道，NMP22 BladderChek试验和尿液细胞学检测UC的敏感性随着分期或等级的升高而升高[10,18]。在我们的研究中，我们分析了NMP22 BladderChek试验和尿液细胞学对不同肿瘤部位、侵袭性和级别的敏感性。首先，我们发现NMP22 BladderChek试验在肾UC中的敏感性高于膀胱UC和输尿管UC (69.2% vs. 30.9%和26.7%)。因此，NMP22 BladderChek检测可能更适用于肾UC的检测。肾UC、输尿管UC和膀胱UC的尿液细胞学敏感性无显著差异。其次，我们的研究表明，NMP22 BladderChek检测的敏感性随着肿瘤侵袭性或级别的升高而升高。尿液细胞学检查的敏感性随着肿瘤级别的升高而升高，而不是肿瘤侵袭性的升高。

先前的研究比较了NMP22膀胱试验和尿液细胞学的表现[5- - - - - -18]。我们的研究显示，尿液细胞学的表现优于NMP22 BladderChek试验，两种试验的结合不能提高对原发性UC的检测效果。然而，两种检查的结合可以增加诊断原发性UC的敏感性。

有研究报道许多因素可导致NMP22 BladderChek试验的假阳性结果[19,20.]。这些因素包括白细胞、目前使用的血压控制药物、尿结石、肌酐、复发性尿路感染和血尿。在本研究中，我们发现良性膀胱疾病和尿路结石是NMP22 BladderChek试验假阳性的两个最重要的因素。因此，考虑NMP22 BladderChek试验阳性结果的影响因素是很重要的。

本研究主要评价大样本量的NMP22 BladderChek试验对原发性UC的诊断效果。然而，它有几个限制。首先，这是一项单中心的回顾性研究。其次，并非所有患者都进行尿液细胞学检查。在未来，我们将致力于通过开展前瞻性多中心研究来解决这些问题。

5.结论

总之，我们的研究表明，NMP22 BladderChek试验对原发性和复发性UC的检测敏感性较低。尿液细胞学优于NMP22 BladderChek试验，两种试验的结合提高了对原发性UC的检测敏感性。此外，新的更敏感的生物标志物应该用于UC。

数据可用性

在本研究中使用和/或分析的数据集可在合理要求下由通讯作者提供。

利益冲突

作者宣称，有兴趣对此文件发表任何冲突。

作者的贡献

夏长生、范春红设计了本研究，分析了资料，并起草了手稿。苏明、王庆松、鲍慧章参与了患者资料的收集和数据分析。夏长生和范春红对这项工作的贡献是一样的。

致谢

感谢刘红、何晓、刘大敏、春迪完成了部分NMP22 BladderChek测试。这项工作得到了国家教育部博士基金(资助号:20120001120053)的资助。夏长生是赞助商。

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疾病标记

抽象