文摘
目标。梅尼埃病(又名内耳眩晕病(MD)是一种内耳疾病的特点是情景性眩晕,耳朵丰满,和听力损失;通常在特定时期内眩晕攻击集群。我们研究了MD患者chromogranin的循环水平(注册会计师)和vasostatin-1(打1)分泌的神经内分泌系统和参与内皮屏障功能的规定。方法。37 MD患者的血清水平评估和36控制。打1和注册会计师之间的比例计算。结果。注册会计师提高在病人相比,对照组(1.46和0.67纳米,),同时检测中没有发现区别为打1(0.41和0.39,分别地)。注册会计师水平在患者呈正相关的频率眩晕法术在前4周()和消极的时间从最后一天眩晕攻击()。此外,打1 /注册会计师与眩晕法术的频率比率负相关(),从去年攻击与时间呈正相关()。结论。结果表明,不同的水平,但不打1,发生在患者的血液活跃的MD,根据眩晕法术的频率和时间从去年危机。
1。介绍
梅尼埃病(又名内耳眩晕病(MD)是一种内耳疾病的特点是情景与低频感音神经性听力损失相关的眩晕,耳鸣、耳闷。普遍接受的病理生理学包括增加内淋巴的压力(水肿)。组织病理发现颞骨支持这一假设[1),虽然积水和MD症状之间的关系仍然是未经证实的。此外,据作者,积水可能MD的附带现象出现在最后阶段由于各种损害内耳的过程(2,3]。大多数医学病例是零星的,而且被认为来自于遗传和环境因素的相互作用。通常MD攻击集群定义时期,其次是静止的时期(4,5]。nongenetic因素之一,不同的可能性可能会导致煽动MD复发,包括病毒(6,7),过敏(8),自身免疫(9- - - - - -11),和液体和离子稳态有关的因素12,13]。自从MD患者存在较高的偏头痛,一些常见的病理生理机制之间的两个障碍已经假定(14]。最后,MD患者还存在较高的精神疾病,最重要的是抑郁和焦虑(15]。
Chromogranin (CgA)是一个长439 -渣蛋白最初发现作为主要肾上腺髓质嗜铬细胞分泌蛋白和被发现后存储在其他神经内分泌细胞的分泌颗粒和神经元16,17]。这种蛋白质是exocytotically发布在流通,连同coresident激素,在适当的细胞的刺激。超出正常水平的免疫反应性的注册会计师已发现在神经内分泌肿瘤患者的血液和心脏衰竭,具有重要的诊断和预后的影响18]。增加水平被发现在其他一些病理条件下,包括肾功能衰竭,风湿性关节炎,萎缩性胃炎,炎症性肠病,败血症,或在受试者接受质子泵抑制剂(一类药物通常用于治疗消化性溃疡疾病)(17- - - - - -19]。
这种蛋白质起着细胞内功能生物起源和激素分泌颗粒凝结和细胞外的功能,在分泌,作为多种生物活性肽的前体和碎片16,17]。
注册会计师可能经历各种转译后的修改,包括糖基化、硫酸盐化作用,磷酸化和蛋白水解处理17,20.]。越来越多的证据表明,注册会计师碎片施加不同的甚至相反的生物效应。例如,肽对应残留352 - 372,叫catestatin,充当nicotinic-cholinergic刺激的有效抑制剂儿茶酚胺分泌,导致人体血管舒张,施加proangiogenic效果,起着cardioregulatory作用[16,21,22]。对应于一个片段氨基地区1 - 76,名叫vasostatin-1(第1),在孤立的血管,抑制血管收缩神经毒素在神经元/小胶质细胞培养,发挥抗菌作用,调节细胞粘附,抑制了心肌收缩性/放松,抵消β-adrenergic-induced积极inotropism,调节冠状基调(17,23]。此外,打1是一个强有力的抑制剂引起的内皮细胞激活细胞因子,提高内皮屏障功能,保护船只免受TNF-induced血管渗漏,和产生抗血管新生的影响在不同的体外和体内试验(23- - - - - -26]。注册会计师已被证实能被表达在不同的豚鼠内耳部分,包括螺旋器,椭圆囊、球囊(27]。此外,其他调查显示catestatin在听觉和前庭神经通路的存在,证明其作为一个可能的作用neuromodulatory肽(28]。
基于这样的概念:注册会计师和打1可以扮演重要角色在内皮屏障功能和血管内稳态,改变流体内稳态可能代表MD发病的事件,我们研究了MD患者的这些多肽的循环水平。我们发现打1的相对水平和注册会计师变化在MD的频率取决于眩晕法术和从最后攻击的时间。
2。材料和方法
2.1。研究人群
研究人群包括连续37 MD患者(24女性,平均年龄年),招募的门诊诊所前庭疾病单元在圣拉斐尔医院,米兰,意大利。所有病人履行了全部AAO-NHSF标准明确的医学根据份子指南(29日)和被选当提到至少与一个眩晕过去30天的攻击。伦理委员会批准的这项研究是圣拉斐尔的科学研究所和所有受试者签署知情同意。排除标准是临床治疗的历史与质子泵抑制剂或5 -羟色胺选择性再摄取抑制剂在月前招聘和病史的心,肝或肾功能衰竭。
以下为每个MD患者临床数据记录:(a)高血压史偏头痛的头痛或偏头痛和第一攻击;(b)家族的历史情景的眩晕;(c)积极性的自身抗体:核,平滑肌,线粒体,甲状腺,心磷脂,β2糖蛋白,lupus-like抗凝,和类风湿因子;(d)从眩晕的最后攻击的时间(天)和攻击的数量在过去的30天;和(e)年龄在第一次眩晕攻击。
对照组()被称为负眩晕病史,没有临床条件已知的排气口与水平的提高有关。他们选择的性别分布和平均年龄与患者(平均年龄重叠年;22日是女性)。排除标准包括质子泵抑制剂治疗或5 -羟色胺选择性再摄取抑制剂在采血前30天。
两组受试者的身体质量指数计算;性别、年龄、身体质量指数(BMI)对照组和MD患者报告在表1。
2.2。CgA -和VS-1-ELISAs
对照组和病人的血液样本被收集成管状无抗凝血剂(正、法国),浸在冰,并立即送往实验室进行处理。允许血液凝块30分钟,离心机(3000 g×10分钟),并存储在−20°C。
CgA-ELISA。血清水平的注册会计师使用夹心ELISA检测,先前描述,基于使用,在捕获步骤中,对一个单克隆抗体(mAb) B4E11抗原决定基位于排气口残留68 - 71,在检测步骤中,一只兔子anti-recombinant海巡署多克隆抗体对抗原表位位于中部地区的海巡署(immunodominant抗原表位90 - 133,163 - 187,222 - 256,和315 - 338年)。这个分析识别长篇cga1 - 439和片段含有氨基和部分或全部中部地区(例如,cga1 - 436, cga1 - 409, cga1 - 400和cga1 - 373),但不是cga1 - 76(第1)[25]。这个ELISA曾经用于注册会计师发现在癌症患者的血液,心脏衰竭,肾功能衰竭,风湿性关节炎,或其他疾病(19,26]。
VS-1-ELISA。血清水平的打1使用夹心ELISA检测,先前描述,基于使用马伯5 a8(针对一种抗原决定基位于残留53-57 CgA)在兔多克隆抗体捕获步骤和提高对肽KERAHQQ(自由羧基)耦合到锁眼坚守岗位的检测步骤中血蓝蛋白(25]。这种抗体,对肽序列对应于c端cga1 - 76(第1),可以识别打1,但不是完整的注册会计师前兆。因此,VS-1-ELISA可以检测打1,但不是大片段或完整的注册会计师。使用这个组合的抗体夹心ELISA检测的之前已经报道过了打1在脓毒症患者的血清26]。CgA-ELISA的剂量反应曲线和VS-1-ELISA显示这些分析物的检测特异性和动态范围在图所示1。
2.3。统计分析
连续变量被描述为平均值和标准偏差。组间差异显著性评价以及独立样本。Mann-Whitney测试执行当数据不存在一个正态分布。斯皮尔曼测试之间的联系进行探讨CgA,打1,和比例值和偏头痛、高血压、家族性眩晕的历史,积极性对于自身抗体,眩晕法术在上个月,频率和时间(天)从眩晕的最后攻击;最后,一般线性模型进行评估的独立角色年龄、BMI、注册会计师和频率的眩晕技能水平。
3所示。结果
五37 MD患者的动脉高血压(14%),16日有偏头痛的诊断(43%),11是自身抗体的阳性至少一个测试(30%),和9称为家族的历史情景性眩晕(24%)。眩晕的第一次攻击的时代年。时间的平均值从眩晕的最后攻击天;均值的施法数量在过去30天内从采血。
注册会计师的循环水平,打1,打1 /注册会计师比率在病人和控制报告在表2和图2。MD患者提出更高的血清水平的CgA,同时为打1观察无显著差异。值得注意的是,一些患者水平的异常升高循环排气口。
由于注册会计师值在病人没有显示一个正态分布,斯皮尔曼测试执行与其他临床评估的相关变量。血清水平的注册会计师与眩晕发生频率呈正相关采血前30天内(rs统计0.43;)和负相关的时间天最后眩晕攻击(rs stat−0.39;)(图3)。值得注意的是,受试者值大于中位数CgA值(0.75海里)有较高的眩晕技能上个月(与,)(图3)。注册会计师之间没有相关性观察水平和偏头痛,高血压、自身抗体的至少一个积极性,家族例阵发性眩晕。此外一般线性模型的测试演示了CgA水平和BMI之间没有联系()或年龄()。此外,每增加一个攻击决定增加注册会计师值为0.363 (;SD 0.101)。
(一)
(b)
(c)
(d)
(e)
打1之间没有相关性观察血清水平和危机在过去一个月,时间从最后的攻击。因此我们观察到打1 /注册会计师比率之间的负相关和眩晕的频率在过去的30天(枪兵;rs =−0.36;)和正相关与天的时间从上次危机(rs = 0.47;)(图3)。这些临床变量之间没有相关性观察和临床偏头痛史,高血压,家庭情况,积极为至少一个自身抗体。
4所示。讨论
结果表明,注册会计师水平的变化,但不打1,发生在患者的血液活跃的MD,根据眩晕法术的频率和时间从去年危机。特别是,结果表明,血清水平的注册会计师,而不是打1,与危机的数量在过去30天内从血液收集和上次眩晕攻击的时候,在更多的眩晕患者高法术在上个月和患者提到最近的攻击。考虑到CgA存储和coreleased与5 -羟色胺和其他细胞儿茶酚胺的神经内分泌系统(30.),循环水平的增加注册会计师发现在MD患者提到大量的眩晕技能在过去一个月可能与自主系统的激活(血清素已被证明是一个重要的神经递质)的前庭重载(31日]。此外,由于血清素存在于内耳前庭神经核的老鼠32),我们不能排除重复的前庭刺激和可能的顺向的释放这些大脑区域可能有助于提高这种蛋白质的循环水平。在打1方差没有检测到不同水平的控制和病人。因此,显著减少打1 /注册会计师比发生在MD患者更高的眩晕法术复发。此外打1 /注册会计师比积极与上次攻击的时候,指着一个可能的变化的蛋白水解处理注册会计师或微分分泌代谢这些多肽的患者增加眩晕的集群。鉴于打1和注册会计师碎片可以产生复杂的甚至是相反的效果在血管的内皮细胞的体内平衡调节26),这些发现可能有重要的病理生理意义。例如,有可能是注册会计师/ VS-1-dependent稳态机制相关内皮屏障的变化可能在积水的作用,因此,在眩晕集群攻击。
进一步的研究是必要的来验证这个假设。尽管这是一个描述性的研究进行一个小样本大小和没有连续样本(代表重要的研究限制),我们的研究结果可能会刺激新的研究更大的MD患者,旨在评估检测循环排气口是否有一个关于眩晕复发预测价值。
利益冲突
作者宣称没有利益冲突有关的出版。