文摘

背景。急性冠脉综合征(ACS)的重要影响公共卫生与高发病率和死亡率。凝血和促炎州参与疾病的发病机理。纤溶酶原激活物inhibitor-1 (PAI-1)的主要抑制纤维蛋白溶解,是免疫反应的一部分。-844 G > A基因多态性与PAI-1蛋白质含量增加。这项研究的目的是评估协会与ACS -844 G > A PAI-1多态性。方法。总共有646人从墨西哥西部招募:350不相关的健康受试者和296例ACS的诊断。结果。我们的人口中最重要的危险因素是高血压,紧随其后的是吸烟。一个等位基因的遗传分布显示一个协会(,)和AA基因型(,与ACS)。隐性模型显示类似的结果(,)。作为额外的发现,我们观察到显著差异的基因分布ACS dyslipidemic患者(,)。-844年的一个等位基因和AA基因型多态性PAI-1基因的ACS的危险因素。AA基因型可能与ACS患者的血脂异常的发展有关。

1。介绍

急性冠状动脉综合征(ACS)是一个日益严重的问题在世界各地,死亡的主要原因,和残疾的一个重要原因1,2]。它被定义为一群临床实体已作为共同physiopathological机制斑块的破裂和血栓形成导致急性心肌缺血。临床表现包括不稳定性心绞痛,心肌梗塞有肝素)和没有(NSTEMI) ST段[3]。

ACS是一种复杂的疾病,环境和遗传因素发挥的作用在它的进步。它始于一个改变脂质代谢和炎症反应,其次是动脉粥样硬化斑块的发展。然而,在大多数情况下,斑块的破裂,形成血栓,血管腔闭塞需要触发事件(急性心肌4]。

血栓形成的止血剂系统是一个关键因素。众所周知,多个基因调节coagulation-fibrinolysis平衡;因此他们可能atherothrombotic脆弱性的影响5]。PAI-1作为纤溶的生物功能抑制剂地处ACS的基因作为一种重要的候选人。

PAI-1基因的一部分serpine总科。它位于7 q21.3-q22和包含9个外显子6]。编码糖蛋白PAI-1是组织的主要抑制剂(tPA)和尿激酶纤溶酶原激活物物(uPA),纤维蛋白降解蛋白酶负责任的。因此,PAI-1抑制纤维蛋白溶解和功能作为血栓稳定器(6]。此外,它已被观察到,PAI-1参与新生血管性形成的过程(7),也接受了ACS生理病理学的重要一步。

有越来越多的证据表明,更高水平的PAI-1是一个独立的危险因素对血管疾病的发展,包括脑血管和心血管疾病(8,9]。此外,几个多态性PAI-1相关基因已被确认和原生质的变化PAI-1水平(10),包括-844 G > A多态性(rs2227631)。鸟嘌呤核苷酸替换的腺嘌呤在-844位置生成一个共识Ets核蛋白质序列。以前的研究报道关系-844 G > a多态性基因表达的变化与血浆的蛋白质含量(11,12]。因此,当前数据支撑-844 G > A多态性的ACS的危险标志。

本工作的目的是分析协会-844 G > A多态性与ACS在墨西哥西部人口。

2。材料和方法

2.1。研究小组和人口

这项研究是在从墨西哥西部共有646人,分成两个不同的组:296 ACS患者和350名健康受试者(HS)。ACS患者诊断的标准按照美国心脏病学会(ACC) (13]。古典的医疗记录的风险因素,根据定义ACC,注册并归类为现在或缺席。海关的入选标准是没有任何慢性(2型糖尿病(DM2)、高血压(HBP)、心血管疾病)或传染病。

所有受试者年龄和从医院招募de Especialidades del Centro医生Nacional de Occidente德尔研究院Mexicano del原本社会(CMNO-IMSS)。只有那些为三代人,包括自己,出生在墨西哥被认为是西方。

2.2。道德的考虑

所有科目和病人同意参与,签署知情同意书。执行的研究是按照2013年赫尔辛基宣言的道德准则和道德委员会批准的Centro de Ciencias de la祝您健康大学UdeG (C.I. 069 - 2012)。

2.3。DNA分析

从外周血基因组DNA提取根据盐析法(14]。分析-844 G > A多态性进行聚合酶链反应(PCR)。引物序列向前,5′gtc TGG gg亚美大陆煤层气有限公司gg ATA亚美大陆煤层气有限公司广汽AA-3′,和反向5′有条件现金援助插科打诨GGC TCT CTT GTG柠檬酸AC-3′。PCR扩增的总量进行了25μL包含1μ克gDNA 1.25 U /μL的Taq DNA聚合酶(生命表达载体技术),提供缓冲酶1 x 20μMgCl每个寡核苷酸的米,2.5毫米₂和2.5毫米deoxynucleotide三磷酸核苷酸英杰公司生命技术)。

热循环条件下的初始变性步骤3分钟在94°C,紧随其后的是20多岁30周期每个在94°C, 57°C, 72°C,最终扩展步骤1分钟的72°C。PCR产品510个碱基对(bp)消化了1 h在37°C 3 UXho我限制性内切酶(新英格兰生物学实验室,贝弗利,MA)。G等位基因生成一个Xho我限制站点(5 -′TCGA C /G3′)导致生产两个片段的364和146个基点。-844 G > A PAI-1多态性分析了银染色聚丙烯酰胺凝胶(29:1;丙烯酰胺:bisacrylamide)。基因分型结果的质量控制,每个纯合子基因型的一个随机样本是由自动化测序方法(ABI棱镜377基因分析仪,应用生物系统公司,促进城市、钙、美国)。

2.4。统计分析

SPSS统计软件包版本20.0,Excel 2010和遗传数据分析(15用于统计分析。连续变量表示为意味着±标准差(SD)。Kolmogorov-Smirnov测试样本量和被认为是为了参量的分类(以及,方差分析)和nonparametrical测试(斯皮尔曼相关,克鲁斯卡尔-沃利斯检验和Mann-Whitney测试)。定性数据和哈迪温伯格平衡进行了分析测试或确切概率法,当适用。等位基因频率计数法测定。显性和隐性等位基因模型进行了测试测试。< 0.05显著性水平。协会的测量优势比(或)。二元和多元逻辑回归分析完成调整风险对于每个独立变量和知道多态性与ACS的危险。独立变量被风险因素分类,包括糖尿病、高血压、吸烟、血脂异常、肥胖。

基于小样本大小计算等位基因频率的-844 G > A PAI-1多态性报道墨西哥混血儿人口Padilla-Gutierrez et al。16),我们获得了至少148等位基因使用Kelsey公式(17]。这意味着,为了检测差异,至少需要74人每组和95%置信区间统计80%的力量。

3所示。结果

3.1。临床变量的描述

HS和ACS患者组的平均年龄56.7岁(±8.3 SD)和62.91 (±11.81 SD),分别。表中所示1,ACS组由3倍的男性多于女性。心脏生物标记的值,包括肌钙蛋白T、肌酸磷酸激酶(CK),以及增加。同样,原生质的血糖高于正常的价值观。

最常见的危险因素是高血压,紧随其后的是吸烟和2型糖尿病(DM2)。抗血小板治疗包括政府(阿司匹林、氯吡格雷),肝素、他汀类药物(阿托伐他汀)和抗高血压药物。

-844 G > A多态性分析。HS集团在哈迪温伯格平衡()。我们比较HS频率与其他人群。A等位基因患病率为23%在撒哈拉以南非洲,27%在墨西哥,28%的美国黑人,41%的西班牙裔,49%在亚洲,56%在欧洲人16,18]。-844 G > A多态性的基因分布在这个群体是不同的报道在撒哈拉以南非洲,亚洲和欧洲的人口()。

等位基因和基因型频率HS和ACS组之间的比较(表2)。的分布在统计学上的不同,一个等位基因(,)和AA基因型(,)在ACS对比HS组更普遍。我们还包括显性和隐性的模型分析。前模型中没有发现协会,而隐性模型显示一个重要协会(,)。

此外,ACS组是由基因型和分层用来评估最常见的危险因素(表和其他特征3)。我们发现一个离散与两个变量:血脂异常和吸烟。一个等位基因的纯合子的航空公司有更多的概率比G等位基因携带者的血脂异常(,在隐性模式。DM2变量超重/肥胖,血脂异常,并分析了HBP通过隐性逻辑回归模型依赖变量,保持它们的重要性在ACS患者dyslipidemic AA基因型()。没有发现差异基因频率在其他特征之一。

4所示。讨论

Atherothrombotic和新血管形成过程在ACS是心血管疾病的重要机制。正如上面强调的,PAI-1分子参与两个过程(7]。相关属性的PAI-1血管生成相关的表达内皮细胞粘附的监管,移民,和增长7]。此外,它限制了细胞外基质的过度破坏血管生成(7]。对血栓形成的过程,PAI-1抑制tPA uPA和因此减少纤维蛋白降解,维持一个更稳定的血栓和血管阻塞的风险增加(19]。因此,在ACS PAI-1被认为是一个重要的分子。

年龄和性别是ACS的最重要的因素,一个高龄和男性被认为是风险增加20.]。在我们的人口平均年龄和男性/女性的比例与先前的报道是一致的(20.]。增加心脏生物标记值和高血糖的州可以解释,因为我们的大多数患者住院期间的急性事件。据报道,高血糖可以找到与ACS甚至超过50%的住院病人,可辨认的死亡率的预测因素21]。心脏生物标志物的诊断NSTEMI和STEMI ACS (13),结果他们的水平上升预期的发现。

最常见的危险因素在我们的人口方面,其次是吸烟,DM2和血脂异常。在反对我们的发现,RENASICA研究显示吸烟的患病率高于HBP [20.]。解释这两个结果之间的差异是我们的人口属于更清楚地说明地区和样本较小。相比之下,其他的研究有相似之处的风险因素的发生我们的人口22]。

成立之前,我们发现不同的基因分布在HS组与其他人群相比,包括欧洲人,亚洲人,和撒哈拉以南的非洲人,而不是与美国黑人集团和西方墨西哥人的以前的报告16]。墨西哥混血儿人群的遗传结构,主要由与西班牙(53.2%)和美国本土(30.8%)基因,可以解释这些差异(23]。获得数据强调了种群间的遗传变异识别价值。

在我们的研究中,我们发现一个协会与ACS -844 G > A多态性。一个等位基因比商品更频繁的患者的1.27倍(36.7和31.3%,,)。AA基因型携带者有1.86对ACS(14.2和8.6%,,)。按照遗传模型,一个等位基因的两个副本都需要修改ACS易感性(,)。

PAI-1是个了不起的分子调节动脉粥样硬化和心血管疾病的发展19,24]。相关的机制包括对凝血纤维蛋白溶解状态的改变,改变血管重建,协会与其他风险因素(19]。虽然很少有研究调查-844 G > A多态性的关系与心脏病,Fu和合作者在2001年没有发现这种多态性之间的关系和心肌梗死25]。然而,Abboud和合作者观察一个增广的风险等位基因携带与心肌梗死(26),而另一些发现它在不吸烟者的冠心病和心肌梗死(10,27]。

G的基础上改变-844的位置与不同的疾病有关,包括静脉血栓形成、子痫前期,中风、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、代谢综合征、心肌梗死。参与血管、代谢、炎症和/或血栓性系统是这些疾病和ACS(之间的联系9,12,16,26,28- - - - - -30.]。

此外,先前的报道支持现有-844 G > A多态性之间的关系和原生质的PAI-1水平,等位基因和AA基因型与优越的蛋白质(10,26,31日,32),信使rna (28]。上面说,变异生成绑定Ets-1共识序列PAI-1启动子转录的基因增加率(33]。的参与Ets-1转录因子在血管炎症和重塑路径(34)把斑块破裂及相关并发症。众所周知,增加PAI-1的血浆水平与冠心病(24),提供支持我们的研究结果与基因型。然而其他人研究尚未发现该协会(35)或者它被发现与其他位点单体型分析(36,37]。一定要提到我们不能测量血浆的PAI-1或mRNA水平。

此外,隐性模型表示的风险更大ACS病人血脂异常在AA基因型携带者AG)和GG基因型相比,这表明这两个等位基因修改的必要性血脂异常的风险。2002年,Haselbauer和合作者没有发现一个协会的-844 G > A多态性与冠状动脉疾病和心肌梗塞;然而Gensini积分,评估冠状动脉侧枝循环,在AA基因型携带者更高的患者不宜血脂(38]。de la Cruz-Mosso和同事发现了一个协会的等位基因和AA基因型dyslipidemic概要文件(9]。此外,他们发现了一个基因与肥胖协会,这与我们的研究结果,可以解释为选择标准的差异,特别是年龄和诊断。也在这个问题限制在我们的工作缺乏严格审查我们的病人的身体质量指数,可能掩盖了真正的肥胖和基因型的关系。

5。结论

AA基因型进行的-844 G > A PAI多态性有1.86开发SCA的易感性。同时,隐性遗传模型下这在SCA多态性与血脂异常有关。

缩写

ACC:	美国心脏病学会
ACS:	急性冠脉综合征
英国石油公司:	碱基对
CMNO-IMSS:	Centro医生Nacional de Occidente德尔研究院Mexicano del原本社会
DM2:	2型糖尿病
CK:	肌酸磷酸激酶
6:	高血压
海关:	健康受试者
NSTEMI:	没有ST抬高心肌梗死
或者:	优势比
PAI-1:	纤溶酶原激活物抑制剂1
聚合酶链反应:	聚合酶链反应
STEMI:	心肌梗死与圣高程
tPA:	组织纤溶酶原激活物
uPA:	尿激酶纤溶酶原激活物。

利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

确认

本研究支持批准号2012-07-190437从洋底Jorge Ramon Padilla-Gutierrez Mixto CONACYT-Gobierno del Estado de哈利斯科。