文摘

本研究的目的是调查患者的血清水平IL17克罗恩病(CD)和探讨血清IL17水平与疾病活动之间的关系。方法。五十CD和患者性别,年龄40健康对照组纳入研究。血清IL17水平、全血细胞计数、血液化学、红细胞沉降率(ESR)、c反应蛋白(CRP)水平测定,计算和克罗恩病活动使用克罗恩病活动指数(CDAI)。结果。CD患者的平均血清IL17水平与健康对照组(没有差别 )。没有区别的平均血清IL水平积极CD患者和静止CD患者( )。然而,活跃的患者的平均IL17水平低于对照组( )。血清IL17并不与炎症标记物(ESR、CRP、白细胞计数、血小板计数,和白蛋白)和CDAI。结论。外周血CD患者的血清IL17水平不高于健康对照组,而且,血清IL17水平没有与临床疾病相关的活动。外围IL17测量不是一个有用的工具来检测和监测克罗恩氏病,据悉,复杂的发病机理。

1。介绍

克罗恩病(CD)是一种慢性复发性炎症性疾病影响胃肠道和呈现extraintestinal表现。尽管这种疾病的发病机理并不完全理解,这似乎是受到一些环境因素在个体遗传易感性1,2]。T辅助淋巴细胞(Th)发挥重要作用在CD。克罗恩病的发病机理是假设被Th1细胞介导炎症疾病,最近也通过Th17细胞(3]。

Th17细胞是主要贡献者一些自身免疫性疾病,以前认为是Th1细胞主要疾病。可以列出这些自身免疫性疾病如类风湿性关节炎、牛皮癣、系统性红斑狼疮、硬皮病、多发性硬化症、炎症性肠病、自身免疫性心肌炎,子宫内膜异位症(4]。Th17细胞中也扮演着重要的角色在维持肠道粘膜屏障功能影响先天和适应性反应。粘膜Th17细胞防止病原体的移民破坏粘膜体循环通过中性粒细胞和巨噬细胞的趋化作用。

Th17细胞的重要特征之一是平衡粘膜炎症通过调节免疫原性反应对自体抗原或肠道病原体由于他们与调节性T细胞的关系。另一种是可塑性,这些细胞分化的能力其他T细胞子组在不同类型的刺激。Th17细胞诱导体外转化生长因子β(TGFβ)和白介素6 (IL)单独生产IL17和抑制性细胞因子IL10并且不引起炎症,而Th17细胞被刺激后与IL23 TGF刺激β和il - 6产生其他促炎细胞因子和趋化因子,但不是il - 10,并参与炎症(5]。由Th17细胞分泌的细胞因子IL21, IL23, IL26,肿瘤坏死因子α,干扰素γ,主要IL17 [6]。

IL17是由T细胞,巨噬细胞、树突状细胞、自然杀伤细胞和其他T细胞。因此,IL17影响免疫系统的几种类型的细胞,尤其是B细胞和抗原呈递细胞,诱导表达的一些细胞因子,趋化因子,趋化因子受体,metalloproteases [4,7,8]。在CD和IL17 Th17细胞细胞因子的作用并不是完全理解,和数据在这个问题上取得了从动物模型和组织样本研究粘膜发炎(9- - - - - -11]。另一方面,CD患者的血清IL17水平尚未研究。在目前的研究中,IL17水平的CD患者进行调查。IL17水平的关系与疾病活动和其他炎性标记也被评估。

2。材料和方法

2.1。病人

50个病人诊断为40 CD和控制被包含在2012年1月至2012年8月之间的研究。人口学特征、疾病特性(位置、行为疾病持续时间和extraintestinal表现),药物,和CD患者的疾病活动被记录了下来。CD患者的疾病活动被评估克罗恩病活动指数(CDAI) [12]。得分在150年接受不活跃的疾病,而CDAI得分超过150被认为是活动性疾病(13]。药物被分类为“肿瘤坏死因子阻滞剂(anti-TNF)”集团(anti-TNF /没有免疫调节和/没有mesalazine),免疫调节组(免疫调节药物有/无糖皮质激素和没有mesalazine),和mesalazine集团(mesalazine /无糖皮质激素)。对照组由40岁——和sex-matched科目来医院消化不良的投诉。受试者有炎性疾病或障碍的特点改变IL17被排除在对照组水平。怀孕和年龄小于18岁被其他病人和排除标准控制。协议是经当地伦理委员会批准。知情同意是获得所有科目之前获得样本。外周血样本被允许凝块,然后被离心机。血清是冻结在样本收集后立即−80°C。

2.2。测量酶联免疫吸附试验(ELISA)对人类IL17

IL17水平的样本化验与人类IL17酶联免疫试剂盒(EastBiopharm、杭州、中国)根据制造商的指示。50μL标准和血清样本添加到井中。50μL的生物素化的抗体被添加到每个孵化。两个小时后,井洗和100μL streptavidin-HRP添加溶液,在室温下孵化为一个小时。标准曲线计算在450 nm分光光度计的ELISA技术。检测的限制是2 ng / L。

2.3。统计分析

社会科学统计软件包(SPSS) 11.0版本被用于分析。正态分布描述变量表示为平均数±标准差;变量与偏态分布表示为中值和范围(最小和最大)。学生的 以及用于连续变量正态分布的比较;Wilcoxon rank-sum测试如果分布是不正常的。在两组以上的比较,方差分析是用于参数变量和克鲁斯卡尔-沃利斯检验被用于非参数变量。由皮尔森相关测试或合适的斯皮尔曼相关测试。使用Mann-Whitney进行了统计分析 测试和斯皮尔曼等级相关测试。差异导致 值小于0.05被认为是具有统计学意义。

3所示。结果

共有50个CD患者(男性25日/ 25个女性)和40对照组(19男性/女性21日)这项研究招募了。没有差别的年龄(38.5 39.0 CD患者与控制; )和性别。平均红细胞沉降率(ESR)、c反应蛋白(CRP)和血小板计数的CD患者高于对照组。另一方面,白蛋白降低CD组。IL17水平没有显著差异之间的主题与CD和健康受试者( 与 ; )(图1)。人口和实验室数据CD患者和对照组如表所示1和病人血清IL17水平和控制图1。

表1
基线特征和实验室克罗恩病的患者和对照组的值。

图1
箱线图的血清IL17克罗恩病的患者和控制水平。

21 CD患者回肠疾病而27岁患者ileocolonic疾病。只有两个患者结肠疾病。十八岁的CD患者穿透疾病的行为。另一方面,只有三个患者狭窄疾病。IL17水平在两组之间没有差别(表根据疾病位置和疾病的行为2)。二十CD患者有活动性疾病的评估期。CDAI中值为124.5 (1 - 394)。活动在缓解病人和病人的IL17水平是相似的( ng / L和 ng / L,分别地; )。活跃的患者的平均IL17水平低于对照组( ng / L和 ng / L; IL17之间),而没有发现差异的CD患者在缓解期和对照组水平。治疗组的血清IL17水平是相同的。此外,血清IL17水平的病人服用免疫抑制治疗的患者(免疫调节组和anti-TNF组)和只采取mesalazine(表没有什么差别2)。

表2
疾病特点和药物治疗克罗恩病的患者根据IL17测量和评估。

没有IL17和CDAI之间的关系。IL17之间的相关性和其他炎性标志物、ESR、CRP、白细胞计数、血小板计数、血红蛋白,白蛋白,并没有发现。CDAI与c反应蛋白( :0.03, :0.300)。血红蛋白和白蛋白也与CDAI负相关( :< 0.01, :−0.411和 :< 0.01, :−0.601,职责)。

4所示。讨论

被发现后Th17细胞,这些细胞的重要性在CD的发病机理,从这些细胞和分泌细胞因子通路参与Th17细胞被认为是疾病活动的监测和治疗新靶点的影响。在先前的研究表明,Th17和IL17水平增加粘膜发炎。Veny等人发现,活跃血液IL17生产CD患者高于在CD患者在缓解期和健康受试者14]。另一方面,血清的单核细胞表达IL17高活跃的和不活跃的克罗恩病的病人与健康受试者相比,和IL17血液单核细胞的表达与疾病相关的活动。在相同的研究中,结果表明:活动性疾病患者长时间(超过1年)诊断有显著提高的百分比IL17产生T细胞和血液IL17生产与活跃早期患者相比(疾病发作32周内),不活跃的患者和健康者。在另一个先前的研究中,IL17表达在结肠粘膜的CD和溃疡性结肠炎(UC),而不是发现传染性结肠炎结肠粘膜标本,缺血性结肠炎,健康受试者9]。他们还发现血清IL17水平升高仅在10主动CD患者和10主动UC患者。患者招募到这个研究只接受水杨酸治疗。与上述研究的结果相比,我们在目前的研究中发现,循环IL17 CD患者水平不高于对照组。此外,活跃的CD患者血清IL17水平较低。

Th17细胞和IL17有助于炎症通路在许多疾病和自身免疫性疾病,如类风湿性关节炎、系统性硬化症、系统性红斑狼疮、干燥综合征、牛皮癣、家族性地中海热,多发性硬化症,溃疡性结肠炎4]。白介素17水平被发现的这些自身免疫性疾病患者的血清4,15,16]。此外,结果表明,免疫调节治疗抑制IL17。在类风湿性关节炎患者的一项研究中,结果表明,治疗后血清IL17水平下降与adalimumab和甲氨蝶呤17]。类风湿性关节炎患者的另一项研究表明,基线血清IL17水平的患者比健康受试者的18]。anti-TNF治疗后,外周血Th17细胞计数,血清IL17水平,血清TNF水平减少治疗反应组。另一方面,血清肿瘤坏死因子水平降低时,外围Th17细胞计数和血清IL17 nonresponders水平增加。这些研究表明,免疫抑制疗法影响血清IL17水平治疗反应的病人,这解释了为什么血清水平IL17 CD患者没有不同于健康受试者的血清IL17水平。

克罗恩病成为一个复杂、multigenic疾病识别频繁突变和罕见的突变,而不是高外显率的突变基因分析(19]。这种基因异质性导致不同表型的演讲的CD作用在许多不同的细胞和不同的通路,并不是所有人在所有患者(20.]。最近的一项研究表明,anti-TNF疗法抑制肠道炎症在IBD患者巨噬细胞和Th17通路基因的差别通过对这些21]。在这项研究中,有很大一部分已经免疫抑制药物的病人(68%)时加入了这项研究。只有6个病人IL17水平超过40 ng / L;两人在anti-TNF治疗,其中一个是新诊断患者(图1)。从十CD病人服用一种anti-TNF药物,只有两个病人IL17水平较高。我们的研究结果表明,anti-TNF治疗未能抑制Th17驱动一些CD患者的炎症(nonresponders)。

本研究的一个有趣的结果是,活跃CD患者血清IL17水平比对照组低。这可能与活跃的CD患者轻度或中度活动性疾病。另一个原因是,IL17产生炎症细胞免疫抑制药物可能有效控制。我们建议血清IL 17级不是一个好的指标区分活动性疾病的能力,不活跃的疾病,也许这不是一个准确的监测疾病活动的标志。还需要进一步的研究与串行IL17测量评估血清IL17疾病监测指标。此外,还需要进一步的研究和更大的系列评估严重活跃的病人的血清IL17水平和与健康受试者进行比较。

早期的研究表明Th17刺激,IL17 mRNA表达相关,在粘膜发炎和IL17生产样品的CD和UC患者(10,22- - - - - -24]。有有限的数据对IBD患者血清IL17水平。在最近的一项研究中,血清IL17 UC患者发现水平高于健康者(25]。对比研究的结果与UC患者,我们并没有发现任何差异在IL 17 CD患者和健康者之间的水平。此外,我们还发现,没有活跃的CD患者和不活跃的CD患者之间的差异。Schwarzmaier等人在研究评价外周单核细胞功能IL17表达和释放,相比其他促炎细胞因子的表达和释放,不活跃的CD患者和健康对照组没有差异(26]。不活跃的患者加入了这项研究只接受水杨酸或圆锥形布地奈德没有任何免疫调节药物或anti-TNF药物。人口增加Th17粘膜发炎和外周血单核细胞培养是在早期的研究(27]。令人惊讶的是,我们的结果并没有建立一个类似的增加血清IL17水平。这一发现可能是由于血清IL17可能不是一个系统有效的中介。相反,IL17作为触发炎症反应在肠道炎症的网站(10,28]。

血清IL17水平与CDAI和其他血清炎性标志物如ESR、CRP、白蛋白和血红蛋白。另一方面,CDAI与血红蛋白,c反应蛋白和白蛋白。这一发现表明,血清IL17水平不适合决定疾病活动。相反,血红蛋白、c反应蛋白和白蛋白更合适的测试。克罗恩病活动指数是一个复合索引包含临床实验室参数和主要临床特征。然而,CDAI分数并不能反映持续的充分肠道炎症。这就解释了为什么CDAI不是与炎症标记物和促炎细胞因子,如白介素17。

因此,尽管Th17细胞的重要性已经被定义在克罗恩病发病机理,IL17,主要来自这些细胞,细胞因子在CD患者的血清不会增加。IL17测量并不是一个合适的测试CD患者与健康对照组和CD患者不活跃的CD患者也活跃。

利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。