文摘
这项研究的目的是调查恶病质综合征和血清抵抗素之间的关系,脂联素、组织apelin胃食管的癌症患者(GEC)。材料和方法。Adipocytokines 85年血清浓度测定GEC患者和60名健康对照组。他们也适当评估肿瘤组织和正常粘膜38的癌症患者。结果。GEC患者抵抗素和组织apelin浓度显著高于比控制。发现抵抗素水平最高的恶病的患者和患者的远处转移。患者血清脂联素显著降低GEC区域和远处转移。恶病的患者的血清组织apelin显著高于控制。组织Apelin呈正相关,hsCRP水平。抵抗素在肿瘤组织和组织apelin水平显著增加。弱阳性血清adipocytokines水平之间的相关性和在肿瘤组织中观察到。结论。抵抗素与通用电气的恶病质和转移过程相关。血清脂联素的降低反映了脂肪组织浪费与通用电气发展。相关的组织apelin hsCRP可以反映可能有的角色组织apelin在食管癌和胃癌的系统性炎症反应。
1。介绍
先进的食道肿瘤、esophageal-gastric结和胃与减肥有关,肌肉萎缩,厌食,hypercatabolism,吸收不良,急性期蛋白的生产,导致癌症恶病质(1,2]。癌症恶病质的机制是多方面的,不能完全解释道。几项研究显示癌症恶病质的发展模式与肿瘤导致慢性炎症(2- - - - - -4]。在这个模型中,低级的存在肿瘤诱导宿主免疫反应,导致慢性炎症反应。,肿瘤与宿主细胞产生不同的介质,例如,c反应蛋白(CRP)、促炎细胞因子与肿瘤坏死因子-α(肿瘤坏死因子-α)、白细胞介素- 6 (il - 6)、干扰素-γ(IFN -γ)[3,4],adipocytokines [5,6]。一方面,这些因素有保护作用在第一阶段的癌症发展,另一方面,无限的炎症过程有害的影响。系统性炎症反应在晚期癌症与长期坚持大分子分解代谢和后果与不良预后,缩短患者的生存2,3]。
Adipocytokines,来源于脂肪组织,与自分泌蛋白质,旁分泌和内分泌功能。他们扮演着重要的角色在脂质和糖代谢,调节能量平衡,身体内稳态,炎症过程的监管5- - - - - -7]。Adipocytokines已经涉及到几种肿瘤和许多研究显示其重要作用发展,发展,和许多类型的癌症的预后7- - - - - -10]。
脂联素是一种保护性的荷尔蒙,它影响抗炎,抗肿瘤,抗血管新生的影响8]。一些报告表明血清脂联素水平之间的关系和癌症恶病质的存在,但是这些数据不同的乳腺癌、肺癌、结肠癌、胃癌(8- - - - - -11]。
抵抗素是脂肪细胞分泌的形式,但它也是由外周血单核细胞和巨噬细胞(8]。先前的研究结果表明抵抗素可以施加影响,相反那些产生的脂联素(8]。高水平的血清抵抗素在肺癌和结直肠癌中被发现(8,10]。
组织Apelin肽表达的各种组织,包括胃肠道、心脏、肺、肝脏和骨骼(12]。据报道在实验和临床研究,组织apelin内皮细胞的促有丝分裂的因素和促进肿瘤血管生成12]。
潜在作用的抵抗素、脂联素和组织apelin在胃食管的癌症(GEC)及其影响癌症恶化和恶病质综合征并不完全解释道。本研究的目的是调查(a)可能的癌症恶病质和血清脂联素水平之间的关系,组织apelin,抵抗素和(b)血清adipocytokines相关性的临床、病理和血液参数的癌症患者。我们也分析了adipocytokines水平GEC患者的肿瘤组织和正常黏膜。
2。材料和方法
2.1。研究人群
我们招收了145名个人当前的研究:85癌症患者组织学证实胃食管(GEC)(男女比例:61/24;平均年龄:年),胃肠道和普通外科住院的弗罗茨瓦夫医科大学从2008年4月到2012年12月,和60显然健康个体没有癌症疾病作为参考(男女比例:47/13;平均年龄:年)。
患者伴随严重的疾病,其他恶性肿瘤,感染,和主要业务在当前住院6个月前被排除在研究之外。任何治疗之前收集的样本。患者临床诊断和分级的基础上,上消化道内镜活检,计算机断层扫描和磁共振和举行肿瘤切除术后病理根据UICC TNM系统[13]。有39名患者被诊断为食管的鳞状细胞癌,22与胃食管交界处的腺癌,并与胃腺癌24。手术切除的肿瘤进行了38(44.7%)的通用电气和姑息手术病人在剩余的情况下提供。恶病质被定义为强迫减肥超过5%之前的三个月期间基线体重(14]。对照组的年龄和sex-matched(分别地。和区域中心的)健康献血者献血和疗法,波兰弗罗茨瓦夫。详细研究人群的特点给出了表1。
2.2。道德的考虑
研究协议遵循道德标准详细在赫尔辛基宣言,作为1983年修订,并经弗罗茨瓦夫医科大学医学伦理委员会批准,波兰弗罗茨瓦夫(KB-784/12数量)。从所有参与者取得知情同意。
2.3。分析方法
通宵禁食后,血液从体静脉治疗的病人到serum-separator管,凝允许30分钟,然后离心机(720 g×10分钟,RT)。收集血清整除,存储在−45°C到分析。
组织部分的肿瘤和正常粘膜从肿瘤(约10厘米)被来自38个接受治疗的患者的术后切除和0.9%生理盐水冲洗。随后,样本均质在冰上1:2 (w / v)与1毫米10毫米Tris-HCl EDTA, pH值7.4缓冲,离心机(1850×g, 10分钟,4°C)。浮在表面的整除,储存在−45°C到分析。
血清脂联素、抵抗素水平和组织衡量immunoenzymatic化验使用商用ELISA试剂盒研发系统(英国阿宾顿),根据制造商的指示。脂联素的敏感性分析是0.246 ng / mL而内部和interassay变异系数(CV)分别为2.5 -4.7%和5.8 -6.9%,分别。抵抗素的敏感性分析是0.026 ng / mL,和内部,interassay CVs分别为3.8 -5.3%和7.8 -9.2%,分别。组织Apelin使用ELISA检测血清和组织样本测量提供的凤凰制药有限公司(美国加州伯林盖姆)根据制造商的指示。检测灵敏度为0.09 ng / mL和内部,interassay CVs,分别为5 - 10%,< 15%。
血清c反应蛋白(hsCRP)是由高敏感immunoturbidimetric方法与Quantia-CRP紫外线(印度果阿郁金香诊断有限公司),在检出限为0.1毫克/毫升。
基线血液参数:血清总蛋白、白蛋白、血红蛋白、淋巴细胞总数和测量使用自动化的过程,从第一个大学医院中心实验室,弗罗茨瓦夫,波兰或区域中心实验室的献血和疗法,波兰弗罗茨瓦夫。身体质量指数(BMI)计算如下:体重(公斤)除以身高的平方[m]。各自的数据从病历检索。
2.4。统计分析
数据分布进行了测试与Shapiro-Wilk正常测试和方差的同质性与列文的测试检查。正态分布数据进行对数转换获得,如果不是另有规定,意味着±SD。差异意味着使用单向方差分析与图基的事后检查测试。数据coexamined使用双向方差分析(分类数据)和ANCOVA(分类和连续的数据)。分析了频率使用Fisher精确检验或与耶茨校正卡方检验。配对样本以及用于肿瘤adipocytokines水平的比较和匹配控制组织。与皮尔森相关分析进行了测试。使用线性回归模型多元回归分析。只有变量在单变量分析值< 0.10合格的多变量分析模型。关联的强度是由接收机工作特性(ROC)分析和表达的ROC曲线下面积(AUC)。敏感性和特异性在最优截止值确定Youden指数最高的国家之一计算。双尾值≤0.05被认为是具有统计学意义。除了ROC分析都使用Statistica执行10.0软件(StatSoft Inc .)、塔尔萨,美国)。使用MedCalc ROC分析进行统计软件版本13.2.2 (MedCalc软件,奥斯坦德,比利时;http://www.medcalc.org/;2014)。
3所示。结果
3.1。人口、恶病的病理、生化特征和Noncachectic GEC患者与健康对照组相比
是显示在表1、人口和clinic-pathological控制和电气特性或没有恶病质患者没有表现出差异除了BMI(最低的恶病的癌症患者)和疾病阶段分布(先进的癌症患病率更高恶病的患者)。
癌症患者有显著降低血清总蛋白和血红蛋白浓度和hsCRP水平较高,不管他们的恶病质状态。恶病的患者的白蛋白水平高于noncachectic,但它不显著(表2)。
3.2。抵抗素在通用电气
在癌症患者血清抵抗素显著高于控制。抵抗素水平显著增加和GEC患者恶病质(表的存在2)。之间的关联强度血清抵抗素和恶病质是评估使用ROC分析(图1)。抵抗素作为一个潜在的总体精度指标的恶病质是温和(AUC = 0.71(95%置信区间:0.60—-0.81),)。使用9.4 ng / mL作为最优截止浓度,抵抗素在辨别恶病的敏感性和特异性noncachectic GEC患者分别为56%和68%,分别。
血清抵抗素与BMI虽然没有对指数负相关营养状况、贫血、炎症(表都可以看到3)。协方差分析表明,恶病质状态(),而不是体重指数()与血清抵抗素显著相关。clinic-pathological变量中,血清抵抗素水平明显高于GEC远处转移患者(表4)。因为有转移性癌症的患病率更高恶病的患者(使用双向方差分析),我们重新分析数据,发现恶病质()和转移状态(独立)与血清抵抗素有关。
有弱阳性血清抵抗素浓度之间的相关性及其在肿瘤组织的水平(,)。肿瘤组织中抵抗素含量略高于正常粘膜(宏观上匹配ng / g的组织对比纳克/克的组织,),但没有明显与恶病质状态()或任何病态的变量(这种疾病的阶段,对于T状态和N状况)。
3.3。脂联素在通用电气
血清脂联素显著低于恶病的GEC病人比对照组(表2),与BMI呈正相关(表3)。与组织学观察发现没有关联,但血清脂联素水平明显降低GEC转移性疾病,患者区域和遥远的(表4)。
虽然相关系数为组织和血清脂联素水平是可容忍的(,),脂联素水平差异肿瘤组织和控制组织是微不足道的(μ与g / g的组织μg / g的组织,)。肿瘤组织中脂联素水平没有明显伴有恶病质状态()和病态的变量(疾病阶段,对于T状态和N状况)。
3.4。组织Apelin在通用电气
血清组织apelin明显高于GEC患者与健康对照组相比,特别是在恶病的病人(表2)。组织Apelin hsCRP呈正相关,与血红蛋白水平呈负相关(表3)。多重回归分析证实,与血清组织apelin hsCRP水平呈正相关()。
任何重大关系clinic-pathological参数显示,但血清组织apelin浓度往往会增加患者食管鳞状细胞癌(表4)。
有弱阳性血清组织apelin浓度之间的相关性及其在肿瘤组织的水平(,)。肿瘤组织组织Apelin水平略高于正常粘膜(ng / g的组织对比纳克/克的组织,)。肿瘤组织apelin没有明显与恶病质状态()或任何病态的变量(这种疾病的阶段,对于T状态和N状况)。
4所示。讨论
在本研究,我们表明,血清抵抗素水平明显高于GEC患者比控制。这个结果与之前的研究结果相一致,报道肺癌血清抵抗素水平升高,大肠癌,胃和食道癌症8,10,15- - - - - -19]。
抵抗素,其他adipocytokines,参与监管系统性炎症反应,刺激生产的il - 6,引发,白介素、肿瘤坏死因子-α在白色脂肪组织20.- - - - - -22]。抵抗素诱导生长、分化和内皮细胞的迁移,这是很重要的在肿瘤发生和血管生成过程16,20.,22- - - - - -24]。我们的研究结果表明,血清抵抗素浓度可以增加在cytokine-stimulated GEC患者的炎症反应。
我们还观察到明显高于血清抵抗素水平比noncachectic恶病的病人。此外,抵抗素与体重指数负相关,anorexia-associated参数。癌症恶病质综合征的特点是,除此之外,通过减少热量摄入和增加能量消耗的1- - - - - -4]。系统性炎症反应,与生产的促炎细胞因子肿瘤质量和免疫系统细胞,可能会导致损失的食物能量采集、代谢障碍,减少癌症患者的BMI (1- - - - - -4,19,25]。Karapanagiotou et al。15]表明抵抗素浓度增加肺癌患者和减肥。作者表明抵抗素可能导致相关的恶病质减肥通过其参与分解代谢的过程。然而,Kerem et al。16)报道,血清抵抗素浓度高noncachectic和恶病的胃癌患者。我们的ROC分析的结果也表明抵抗素的重要性作为一个恶病质的标志并不令人满意。尽管抵抗素与恶病质发展有关,它不能作为诊断的标志这一过程。
我们还表明,血清抵抗素明显高于在通用电气有远处转移的病人。它已经表明抵抗素水平增加有关TMN阶段和胃原发肿瘤进展和食道癌17,18]。我们的研究是第一个,分析影响相互作用的恶病质,远处转移,在通用电气和抵抗素水平。我们发现恶病质和转移状态独立与血清抵抗素有关。上述观察的基础上(15,19),我们的研究结果,我们认为抵抗素水平的变化可以影响系统性炎症反应在恶病质和转移。
抵抗素在癌症恶病质的重要性似乎是不同的,在我们之前的研究提出了瘦素(26]。我们已经表明,减少癌症患者瘦素水平可能分解恶病质过程中变化的结果。然而,瘦素主要是由白色脂肪组织分泌的各种营养和炎症介质和低生产恶病质可能与脂肪组织有关质量退化,而人类抵抗素主要表现在骨髓、胎盘滋养层细胞、滑膜组织和液体,胃肠道上皮细胞,血液循环(20.,21]。低水平的抵抗素被发现在白色脂肪组织,这种蛋白质的主要来源的单核细胞和巨噬细胞21]。Steppan et al。27]表明抵抗素-βresistin-like分子家族的成员,在胃肠道的内皮细胞分泌,在肿瘤。它表明可能作用的细胞因子在肿瘤发生和增殖的癌细胞(20.,27]。肿瘤组织是促炎因子的来源之一。正因为如此,我们对抵抗素水平操作GEC患者原发肿瘤和正常黏膜。然而,肿瘤组织抵抗素水平略高于与宏观上正常的粘膜。弱阳性血清抵抗素浓度之间的相关性观察肿瘤组织和它的水平。没有肿瘤抵抗素和clinic-pathological参数之间的关系。进一步的研究是必要的为了更好的澄清GEC的抵抗素的主要来源。
脂联素是一种多肽激素,显示抗炎活性。保护功能的蛋白质代谢紊乱的发展已经证明(6,10]。在癌症中,脂联素表明反血管增生和抗肿瘤活动通过感应激活内皮细胞的凋亡10,28- - - - - -30.]。我们的结果显示显著降低患者血清脂联素浓度淋巴结和远处转移。负面关系减少血清脂联素水平和疾病进展或肿瘤生长在食道癌和胃癌报道(5,6,11,29日,30.]。这些研究结果支持假设,先进的通用电气,患者脂联素的表达可能会减少和预防行动的肽可能抑制。
在我们的研究中,血清脂联素浓度显著降低在极瘦弱的GEC患者比健康者。另外,脂联素之间的正相关和BMI在癌症病人被观察到。这与之前的研究结果相矛盾,表明脂联素水平显著增加在极瘦弱的胃和胃肠道癌症患者16,19]或保持不变在极瘦弱的和noncachectic患者乳腺癌、大肠癌、肺癌(9,31日]。
脂肪组织分泌的激素,不与炎症在恶病质(19]。浪费他们的水平反映,而脂肪组织,积极参与cachexia-associated流程。脂联素是这种类型的adipocytokines [8,19]。一个现有的理论假定这个因子的分泌会增加由于降解过程浪费和不受控制的在脂肪组织增加能量消耗恶病质(16,19]。然而,在我们之前的研究中,我们建议,降低生产脂肪细胞的细胞因子可能反映了脂肪组织破坏与恶病质过程(25]。因此,分解反应和控制能源消费可能导致脂肪组织脂联素表达的退化和减少。除了这一假设,假定各种细胞因子,特别是TNF -α,可能抑制脂联素的分泌脂肪细胞(7,9,11,32]。肿瘤坏死因子-α集中由肿瘤细胞在晚期癌症和它可能抑制脂肪组织中脂联素的表达。我们的结果与这些假设相对应。据我们所知,我们证明,作为第一批,肿瘤组织脂联素水平没有不同于控制粘膜。它表明,流通的脂联素水平反映了主要的表达这个因素在GEC患者脂肪组织。
组织Apelin表示在许多组织包括胃肠道、心脏、肺、肝脏(33]。观察到,这个生物活性蛋白质刺激视网膜内皮细胞的增殖和迁移和血管的正常发展所需12,34]。组织Apelin一直显示为一个重要的潜在的proangiogenic因素在癌症12,33- - - - - -35]。
我们证明GEC患者血清组织apelin水平明显高于健康对照组,尤其在恶病的病人。我们的研究并没有显示出显著的组织apelin水平和癌症患者clinic-pathological参数之间的关联。我们观察到的最高水平的倾向在食管鳞状细胞癌患者组织apelin浓度相比,胃腺癌患者。食管鳞状细胞癌非常积极与原发肿瘤的快速增长和区域淋巴结转移(26]。这种类型的癌症组织apelin水平的增加可能与肿瘤血管生成。
此外,我们显示出明显高于hsCRP水平和总蛋白浓度显著降低,在癌症患者白蛋白和血红蛋白。在癌症患者中,我们作为第一批示范组织apelin和hsCRP水平之间的正相关和负相关组织apelin之间和血红蛋白水平。我们之前的研究表明,血清hsCRP水平增加GEC区域淋巴结转移患者的存在(36]。所有提到的结果表明,组织apelin生产可能是系统性炎症反应有关通用电气的病人。
总之,抵抗素与通用电气的恶病质和转移过程相关。血清脂联素的降低反映了脂肪组织浪费与通用电气发展。相关的组织apelin hsCRP可以反映可能有的角色组织apelin在食管癌和胃癌的系统性炎症反应。
利益冲突
作者声明没有财务或其他利益冲突存在于关系。
确认
作者要感谢博士Elżbieta Klausa献血的区域中心和疗法Wrocław提供健康个体的血清,和团队的安娜Żołnowska博士大学医院nr 1,弗罗茨瓦夫,协助血液和组织样本收集。