美西螈幼虫肠道内腔真菌引起的腹胀

摘要

Axolotls show a remarkable regeneration capacity compared with higher vertebrates, regenerating missing appendages such as limbs and tail as well as other body parts (i.e., apex of the heart, forebrain, and jaw) after amputations which makes this animal a very interesting research model for tissue regeneration mechanisms. Larvae are individually housed in a 20% Holtfreter’s solution within clear plastic containers. The photoperiod light : darkness cycle is 12 : 12 h. Larvae with a total body length of less than 5 cm are fed once a day with large brine shrimp and blood worm. Albino larvae appeared to have a tendency to exhibit abdominal distention. No clinical signs of illness seemed to be associated with the condition; however, these animals exhibit a relatively slower growth rate. To better characterize this condition, we performed histological sectioning for cross sectional slide preparation on wild type and albino axolotl larvae following euthanasia. The only lesion seen in the albino larvae was a thickened gut wall and the presence of fungi within the intestines. We hypothesize that this may be due to a lower efficacy of the albino larvae’s immune system.

1.介绍

墨西哥Axolotl（墨西哥钝口螈）是Ambystomatidae家族的尿嘧啶两栖动物。Axolotl是一个诱导的迫害性新星，除非人为地诱导成熟1］．

作为其他尿素两栖动物，腋下与高脊椎动物相比，XOLOTLS显示出显着的再生能力。它们可以在截肢之后再生缺少的附属物，例如四肢和尾部，以及像心脏的顶点一样再生其他身体部位，他们的颌骨的顶点[2］．Thanks to this unique feature, these animals represent a widespread research model in the field of embryology, aging, and regenerative medicine and hopefully, in the future, we will achieve more knowledge from urodele amphibian’s physiology, which will help to find applications to organ damage in higher vertebrates.

蝾螈通常是生命力旺盛的动物。当他们的健康确实出现问题时，疾病可能会成为一个严重的问题，可归因于不同的原因，通常被确定为非传染性和传染性。健康状况不佳的第一个也是最重要的原因是不理想的环境条件，而其他不太常见的问题则与细菌感染和寄生虫感染有关[3.］．

非传染性疾病的原因，如水质差和其他不适当的饲养条件(营养、水温控制和环境压力源)，可以是痛苦和死亡的直接原因，它们也可以是慢性压力的来源，导致由条件致病菌，如放线菌，航空玉米菌那沙门氏菌那假单胞菌那不动杆菌那蛋白质,产碱杆菌属［4.］．

如果成年人相对容易维持;然而，幼龄幼虫似乎很容易感染疾病，很难治疗。避免发病率和死亡率的最有效策略是慷慨地喂养它们、严格注意水质和避免过度拥挤[5.］．

2.案例展示

Axolotl幼虫在蒙特利尔大学的饲养室内维持在牙科牙科院系的口腔医学系。这种殖民地的动物购自阿比斯塔姆遗传中心股票(列克星敦，肯塔基，美国)和测量从鼻子到尾巴尖在2.0厘米到8.5厘米之间，在到达。幼虫被单独安置在透明塑料容器中，容器内装满20% Holtfreter 's溶液(一种缓冲(pH 7.0)碳过滤去离子水盐溶液)，温度从20°C到23°C不等。光周期为12:12(光:暗)周期。体长小于5厘米的幼虫每天喂食一次大型盐水虾和血虫(Hikari Aquatic Diets, Hayward, CA, USA)，体长超过5厘米的幼虫每周喂食3次相同的产品。总体长为9厘米的为幼体，体长超过9厘米的为成年体。它们都被安置在简单的水族箱里，其中的水处理只通过碳过滤系统进行净化。

我们已经观察到，主要是白化腋窝幼虫（小于3厘米）可能显示出腹胀，未识别出以前的原因（图1)．没有明显的疾病或不适的临床症状似乎与这种情况有关。据报道，这些幼虫的体长不能超过4-5厘米，因此不会成熟。由于不能用于研究人员的实验目的，它们被丢弃了。

由于此类物种的出版文献非常稀缺，因此可以获得很少的信息。为了更好地了解这些动物腹胀的可能原因，我们对受这种情况影响的腋窝幼虫（10周龄）进行了组织病理学。我们还评估了同一年龄的健康野生型幼虫中的正常组织学方面。通过将动物在0.2％的MS-222（Tricaine甲磺酸盐）缓冲溶液中放置在0.2％的MS-222（Tricaine甲烷磺酸盐）缓冲溶液中进行的Euthanasia进行了20分钟。之后用甲醛10％的溶液进行整个体的固定。幼虫嵌入石蜡中，纵向或横截面（10 µM厚)，然后用苏木精和伊红染色。数字2显示正常野生型美西螈的横截面。当观察所有器官时，在这些动物中没有观察到明显的感染或损伤迹象。

有趣的是，感染幼虫的组织学切片显示在肠管中存在真菌(图)3.)．也可以理解的是齿轮的清晰外观和与健康肠相比的厚度增加。尚未建立这种情况的原因;然而，我们假设这可能是由于白化物幼虫的免疫系统的效果较低，考虑到在野生型幼虫中，该病症尚未经常观察，并且已知白化腋窝具有一些免疫缺陷。

3.讨论

这是第一个在蝾螈幼虫腹胀的病例报告，显示真菌异常存在于肠腔内。验证真菌是否可能负责释放化学因子，从而引起血管通透性或肠道细胞功能的改变，并随后在受影响的受试者中引发这种情况，这将是一件有趣的事情。对人类来说，腹胀有时与真菌有关[6.] 如假丝酵母一种已知能产生多种毒素的植物[7.]可能改变正常生理功能[8.］．在未来，研究真菌的特性将是很有意义的，以更好地理解病理，并可能通过抗真菌治疗根除或减少这种情况。

利益冲突

本案宣布本案例报告的出版物没有利益冲突。

致谢

作者希望感谢Stéphane Roy博士(Département de Stomatologie, Université de Montréal)让他们能够接触到美西螈的幼虫。组织病理学费用由fonde Développement en Médecine des Animaux de Laboratoire (Pascal Vachon)支持。

参考文献

1. c·c·马丁和r·戈登，《分化树，垃圾DNA分子钟，蝾螈幼态进化》进化生物学杂志，第8卷，第2期3，页339-354,1995。视图:出版商的网站|谷歌学者
2. M.Lévesque，é。Villiard和S. Roy，“腋下的皮肤伤口愈合：无缺骨，”实验动物学杂志B辑:分子与发育进化第314卷第1期8，页684-697,2010。视图:出版商的网站|谷歌学者
3. p·w·斯科特,蝾螈:圈养中的护理和繁殖，热带鱼爱好者出版物，海王星城，美国新泽西州，1995。
4. S.T. Duhon，“Axolotls的疾病”美西螈的发育生物学，J.B. B. Armstrong和G. M.Malacinski，EDS。，PP。264-269，牛津大学出版社，纽约，纽约，美国，1989年。视图:谷歌学者
5. J. B. Armstrong，S.T. Duhon和G. M. Malacinski，“培养船只以囚禁”美西螈的发育生物学阿姆斯特朗(J. B. Armstrong)和埃德斯(Eds)的马拉辛斯基(g.m. Malacinski)。那pp. 220–227, Oxford University Press, New York, NY, USA, 1989.视图:谷歌学者
6. A.埃尔多安和S. S.拉奥，《小肠真菌过度生长》当前的胃肠病学报告，第十七卷，第二期4、2015。视图:出版商的网站|谷歌学者
7. F. L. Mayer, D. Wilson，和B. Hube，《白色念珠菌的致病机制》，毒力，卷。4，不。2，pp。119-128，2013。视图:出版商的网站|谷歌学者
8. M. Polke, B. Hube, and I. D. Jacobsen，《念珠菌生存策略应用微生物学研究进展，第91卷应用微生物学研究进展，页139-235，爱思唯尔，2015。视图:出版商的网站|谷歌学者

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