犬脑血管壁周围肿瘤

摘要

一只9岁的德国混血母牧羊犬出现癫痫。磁共振成像显示一个边缘不规则的脑实质内肿块。尸检脑组织显微镜检查显示，血管周围有纺锤形细胞，呈螺旋状和交织状。免疫组化检测肿瘤细胞波形蛋白阳性，而因子ⅷ相关抗原、CD18、CD45、CD3、CD20、GFAP、S-100、desmin阴性。免疫组化结果，结合组织病理形态，提示血管壁周围肿瘤。据作者所知，这是第一个利用组织病理学和免疫组织化学描述狗脑血管壁肿瘤的病例报告。

1.介绍

犬血管壁肿瘤是一组由血管壁的结构细胞和支持细胞引起的软组织肉瘤[1]．在2007年的一份报告之前，“血管外皮细胞瘤”一词被广泛用于描述所有犬血管周围壁肿瘤[2]．由于这些肿瘤可能有除周细胞外的多种组织学来源，因此更广泛的术语“血管壁周围肿瘤”已被建议[2]．本集团包括衍生自不同类型的血管壁细胞的肿瘤，除了内皮细胞[2]．肿瘤的起源细胞包括周细胞、肌周细胞、肌成纤维细胞、平滑肌细胞和成纤维细胞[2]．犬羽毛壁肿瘤的特异性类型包括血管血素，近代肌瘤，血管纤维细胞瘤，血管瘤和血管纤维瘤[2]．当在下列报告中引用犬血管素瘤的参考文献时，作者推断出该信息也适用于血管壁肿瘤。由于这些肿瘤被描述为形态连续体，因此它们可能难以亚型[1]．已经描述了利用广泛的免疫组织化学标记物，试图基于人的子类化方案的亚型犬血管壁瘤[2]．

犬血管外皮细胞瘤传统上的组织学特征是在血管周围呈同心层状排列的梭形螺旋细胞[3.]．然而，犬羽毛壁肿瘤可以显示其他组织学模式，例如捆绑[2]．血管泛酵母和其他血管外骨膜肿瘤最常发生在皮肤和狗的皮下[4，5]．然而，已有肺部原发性血管外皮细胞瘤和血管周围壁肿瘤的报道[6]，轨道[7]，脾脏[8，盆腔[9),肠系膜(10，鼻腔[11]，正面窦[12]和狗的鼻咽[13]．

对于作者的知识，这是用英语语言写入狗或任何其他非人类物种的脑血管壁肿瘤的第一个案例报告。利用组织学外观与免疫组织化学结合的诊断。以抛光为单位的一个案例报告描述了狗的大脑中的血管胚菌[14]．然而，在那篇论文中，诊断仅仅基于组织病理学特征;未进行免疫组化[14]．

2.案例介绍

美国华盛顿州立大学(WSU)兽医教学医院收治一只9岁的德国混血绝育母狗，原因是急性癫痫发作。在转诊到兽医教学医院前2.5周发生了三次全身性癫痫发作。全血细胞计数和化学特征显示没有明显的发现。患者使用苯巴比妥(2.3 mg/kg口服，每12小时)。在WSU报到时，身体和神经检查正常;尿检及胸片未见异常。

1.0特斯拉磁体磁共振成像(Philips Gyroscan, Philips Medical Systems, Andover, Massachusetts, USA)显示右侧梨状叶内有一个边缘不规则的实质内肿块。这个物体的直径为1.5 × 1.3厘米。在静脉注射钆dtpa -二甲基谷氨酰胺(Magnevist, Bayer Healthcare Pharmaceuticals, Wayne, New Jersey, USA)后获得的t1加权图像上，病灶有不均匀的增强(图)1)。在t2加权成像和FLAIR像上均可见明显的实质高信号，包括白质和灰质，提示病灶周围水肿(图)2)。除右侧吻侧和尾丘外，在丘脑间黏附水平也观察到占位效应，导致右侧脑室受压。这种病变的主要区别包括肿瘤病变和炎症病变。

对寰枕部位收集的脑脊液(CSF)进行分析，发现微量蛋白水平升高104.5 mg/dL(参考值范围< 30 mg/dL)，细胞计数正常1个有核细胞/μL(参考范围< 5 cells/μ脑脊液细胞学检查正常，极少见淋巴细胞和红细胞。强的松(0.5 mg/kg口服，每12小时)、氟康唑(4 mg/kg口服，每12小时)、甲氧苄氨嘧啶(10 mg/kg口服，每12小时)和克林霉素(11 mg/kg口服，每12小时)在等待传染病检测结果的同时开始试验。脑脊液和尿液的细菌和真菌培养以及真菌和原虫的血液和脑脊液滴度均为阴性。这包括检测失败球孢子菌属，组织血统，芽生菌,曲霉属真菌通过免疫扩散检测血清中的抗体新型隐球菌乳胶血清中的抗原隐性球菌凝集,刚地弓形虫酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清和脑脊液中抗体Neospora Caninum.免疫荧光法检测血清和脑脊液中抗体。

如前所述，使用改良的Brainsight立体定向系统进行了脑活检[15]．显微镜检查呈现出血管壁肿瘤的突出血管型细胞突出的血管外磨牙。由于细胞的液体图案，还考虑了异常和渗透脑膜瘤的诊断。

在磁共振成像之前的初步筛查过程中，腹部超声显示左侧髂内侧淋巴结肿大。超声引导下的经切淋巴结活检的组织学评价与神经内分泌癌一致。随后，胸部和腹部计算机断层扫描(CT)进行了对比前后的图像，以试图确定原发性神经内分泌肿瘤的位置。然而，CT未发现原发性神经内分泌肿瘤。CT也未发现任何由原发脑肿瘤引起的转移性病变的证据。

诊断后两个月，在开始任何特定的肿瘤治疗之前，由于病因不明的急性坏死性肠炎和弥散性血管内凝血(DIC)，狗被安乐死。手术、放疗和/或化疗治疗脑肿瘤的决定已经推迟，等待免疫组化结果。

进行了完整的尸检。采集脑组织标本，用10%中性缓冲福尔马林固定，进行组织病理学检查。固定后，在大脑切面发现累及右侧梨状叶的软化病灶约2.5 × 2.0 × 1.0 cm(图)3.)。多灶性出血见于胃浆膜、胃和空肠粘膜、胰腺和肠系膜。这些出血被认为与DIC相关的变化一致。DIC的根本原因尚不明确。左侧髂内侧淋巴结区有一个5.0 × 3.5 × 3.0 cm不规则，黄褐色到灰色的斑驳肿块。

组织标本常规处理，苏木精和伊红染色进行组织病理学检查。脑软化灶镜下表现为右侧梨状叶神经pil区域内一大片空洞性坏死。病灶内严重稀疏，轻度胶质增生，大量巨噬细胞浸润，胞浆呈泡沫状。靠近病灶背侧边缘有一密度大、界限不清的细胞肿物浸润邻近的神经pil。在某些区域，肿块主要由纺锤形细胞交织成束组成(图)4），而在其他区域中，主要模式是增殖细胞的大脑血管液体（图5-6)。大脑螺纹厚度从三到十个细胞变化。增殖细胞的细胞核在圆形到椭圆形的形状和培养基中的大小而变化，并且具有精细染色的染色质和小核仁。减速器平均每五个400x字段。麦芽糖和增殖组织没有延伸到大脑的脑膜表面，并且没有浅表裂解物的肿块的通信显而易见地显着或显微镜。这些显微镜发现类似于抗恶体活检样品，除了抗恶体样品中的坏死非常有限。

显微镜检查左髂内侧淋巴结证实活检诊断为神经内分泌肿瘤。尽管该肿瘤被怀疑是转移性病变，但在完整的尸检中，包括甲状腺、肾上腺和胰腺的组织学评估，未发现原发性神经内分泌肿瘤。此外，在尸检中没有发现由原发性脑肿瘤引起的转移性疾病的证据。

在脑组织样品上进行免疫组织化学染色通过脑活组织检查和蛋白质组织进行脑组织样本。在华盛顿州立大学（华盛顿动物疾病诊断实验室）和密歇根州立大学（人口和动物健康诊断中心）进行染色程序。所有免疫组织化学程序均用阳性对照组织同时进行;试验和对照样品用阳性和无关的阴性抗体进行。

用抗体的抗体，因子VIII相关抗原，CD3，胶质纤维酸性蛋白（GFAP），S-100，Desmin，突触菌，Chromogranin A（Dako，Carpinteria，California，USA），CD18，CD45（白细胞抗原生物实验室，戴维斯，加利福尼亚，美国）和CD20（Thermo Scientific，Fremont，加利福尼亚，美国）。增殖性肿瘤细胞测试了Vimentin的阳性（图7-8)， viii因子相关抗原CD18、CD45、CD3、CD20、GFAP、S-100、synaptophysin、chromogranin A、desmin阴性。免疫组化结果显示肿瘤来源为间充质细胞。结合组织病理形态，提示肿瘤起源于血管周壁。

3.讨论

应用免疫组化方法确诊为血管壁周围肿瘤，并排除其他主要差异。波形蛋白染色阳性显示增生细胞为间叶细胞或圆形细胞来源[16]．因子viii相关抗原和GFAP的阴性染色分别排除了内皮细胞起源(血管肉瘤)和星形细胞起源(星形细胞瘤)[16]．CD18，CD45，CD3（T细胞）和CD20（B细胞）的负染色排出了起源的白细胞细胞（组织细胞肉瘤和淋巴瘤）[16]．

GFAP和S-100的阴性染色使周围神经鞘肿瘤的可能性降低[2]．犬颅内实质内周围神经鞘肿瘤虽然少见，但也有报道，与颅神经没有任何关联[17]．然而，观察到梭形细胞在血管周围旋转和旋转模式的突出，对周围神经鞘肿瘤的支持也较少[3.]．阴性S-100染色也比脑膜瘤血管壁瘤更暗示[18]．在回顾性研究30个犬颅内脑膜瘤中，97％的肿瘤对于S-100阳性[18]．相反，在一项对31例犬血管外皮细胞瘤的研究中，所有肿瘤S-100染色均为阴性[4]．此外，在移行脑膜瘤的一个亚群中可以发现梭形细胞围绕毛细血管旋转[19，较大的血管周围有大量梭形细胞呈螺旋状排列，这在脑膜瘤中是不常见的。结合S-100染色阴性、血管周围明显的旋痕和软脑膜浅表没有延伸，脑膜瘤被认为是不可能的[18]．

已经提出了德米林，以帮助幼虫皮肤血管壁肿瘤的亚型[2]．然而，去霉素的阴性结果对于任何一种类型的血管壁肿瘤都不是特异性的[2]．同时进行Synaptophysin和chromogranin A染色，观察脑肿瘤是否与左侧髂内侧淋巴结神经内分泌肿瘤有关。synaptophysin和嗜铬粒素A阴性染色证实这不是脑神经内分泌肿瘤，患者中发现的两个肿瘤无关。

虽然犬羽毛壁肿瘤只有很少在皮肤和软骨外呈现，但这种颅内肿瘤的组织病理学外观和免疫组织化学结果与犬皮肤血管壁肿瘤的含量一致[2，4，20.]．在一项对20例犬皮肤血管周围壁肿瘤的研究中，所有肿瘤的波形蛋白强烈阳性，而CD18、因子viii相关抗原、GFAP和S-100均为阴性[2]．关于皮肤和亚科科特外部发生的犬血管素瘤的病例报告也染色阳性，对S-100负阴性和阴性[6，9]．由于没有针对血管壁肿瘤的特异性免疫组织化学标记，因此诊断基于组织病理学外观与免疫组织化学研究相结合[2]．

颅内血管壁周围肿瘤已被报道在人类，尽管它们是罕见的[21]．Hemangiopericytomas占人类所有中枢神经系统肿瘤的不到1％的1％[22]．病例报告也描述了人颅内肌周细胞瘤和血管平滑肌瘤[23，24]．然而，这些颅内肿瘤比人类颅内血管外皮细胞瘤更少见[23，24]．人体肌肌瘤和血管管肌瘤最常见于肢体的皮下组织中[23，25，这种分布类似于狗的分布。虽然人类血管外皮细胞瘤也常见于四肢，但腹膜后区域是最常见的部位[26]．中年人最常受这三种肿瘤的影响[25- - - - - -27，其年龄可与本病例报告中犬类患者的年龄相媲美。在MRI上，这些颅内肿瘤通常位于轴外;然而，已报道过轴内位置[21，23，25，28]．

手术切除和放疗是治疗颅内血管外皮细胞瘤、肌外皮细胞瘤和人血管平滑肌瘤的基本方法[23，25，29]．颅内肌周细胞瘤和血管平滑肌瘤的临床表现为良性，手术完全切除后预后良好[23，25]．相比之下，颅内血管外皮细胞瘤尽管进行了完整的手术切除和辅助放疗，但复发和转移是常见的[29]．

犬皮肤血管壁周围肿瘤是局部侵袭性的，偶尔复发[30.]但是生长缓慢，转移潜力很低[31.]．当肿瘤局部复发时，它们通常会经过很长一段时间的潜伏期[5]．虽然犬皮肤血管瘤瘤和血管壁瘤被描述为具有低的转移性潜力，但报告表明，血管泛酵母菌中的坏死的存在可能表明恶性行为的潜力增加[3.]．大肿瘤大小(>5 cm)也被认为是犬皮肤血管壁周围肿瘤的重要预后指标[5]．除了广泛坏死和局部浸润外，该颅内血管壁周围肿瘤未表现出任何提示恶性肿瘤加重的特征。犬皮肤血管壁周围肿瘤的特异性亚分类已通过大量免疫组织化学肌肉标记物描述[2]．然而，尚未有研究探讨血管壁肿瘤亚分类对判断预后的意义。此外，血管壁周围肿瘤的治疗目前是基于软组织肉瘤组的普遍推荐。

在犬类中，皮肤血管外皮细胞瘤的根治性手术切除传统上被推荐用于治疗[32.]．最近的研究同样突出了完全外科切除治疗犬皮肤羽毛壁肿瘤的重要性[33.]．一项研究发现，在所有皮肤血管壁周围肿瘤手术边缘完整的病例中，均未观察到复发[33.]．有报道称放射治疗在不可切除软组织肉瘤的病例中取得了成功[34.];然而不幸的是，目前还没有关于犬血管周围肿瘤放射治疗的有效性的数据。此外，没有兽医研究对皮肤和皮下的血管周围肿瘤进行手术治疗和放疗治疗的效果进行调查。在犬颅内肿瘤的病例中，广泛的手术切除通常是不可行的。因此，姑息性放疗和边缘切除联合放疗是治疗犬脑血管壁肿瘤的潜在方法。

本文报告一例原发不明的转移性肿瘤，经腹部和胸部CT及尸检证实。尽管尸检病理证实髂内淋巴结为神经内分泌癌，但原发肿瘤从未被发现。一项对21只狗的回顾性研究表明，原发癌是最常见的组织学类型。35]．此外，在本研究中的狗与癌作为组织学型，67％的狗只有一个转移性部位[35]．据报道，原发不明的转移性癌症犬的中位生存时间为30天[35]．本前报告中狗的生存时间为左侧内和神经内分泌癌诊断后56天。然而，安乐死的原因是坏死性肠炎，其似乎与神经内分泌癌无关。

4.结论

这个病例报告描述了一个血管壁肿瘤在狗的大脑，肿瘤类型很少被识别在人类的大脑。虽然是一种不常见的肿瘤，但血管壁周围肿瘤应被认为是犬脑实质内肿块的鉴别诊断。

利益冲突

作者声明本文的发表不存在利益冲突。

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