侵入性的黑曲霉是唯一病因代理人CSOM:临床病例来自尼泊尔吗

文摘

曲霉属真菌导致慢性化脓性中耳炎(CSOM)是罕见的免疫活性的人;然而,它可以作为一个重要的机会性病原体发生在免疫功能低下的患者。在这里,在我们的研究中,一个53岁的糖尿病患者有一个历史的CSOM访问Otorhinolaryngology-Head部和颈部手术(ENT-HNS),布汶大学教学医院(真理),尼泊尔,2016年3月。虽然他是在药物的抗菌耳坠去年10天,他的右耳被授予耳漏,瘙痒,耳痛、耳闷、听力障碍、耳鸣的3 - 4个月。初步,右耳的耳镜检查显示真菌的存在质量。为进一步诊断,耳朵放电无菌收集和发送到实验室确认病因代理人。实验室分析的结果表明,革兰氏染色法的听觉放电显示脓细胞,真菌孢子,但没有表现出细菌。此外,氢氧化钾(KOH)山发现的真菌孢子和菌丝有隔膜的两个分支的特点。文化在四个不同的细菌媒体(巧克力琼脂、血琼脂、MacConkey琼脂和罗伯逊的煮熟的肉培养基)公布了没有细菌生长。然而,观察真菌生长在细菌和真菌的媒体。 Thereafter, the fungal colony was investigated via a lactophenol cotton blue (LPCB) tease mount which displayed the structure of曲霉属真菌。黑曲霉被专门描述微生物符合特定表型biseriate phialides结构和黑的分生孢子。对药物,病人是坦诚对待耳坠与克霉唑1% (w / v) +利多卡因2% (w / v) 4周的成功改善病情。

1。介绍

慢性化脓性中耳炎(CSOM)是一种慢性炎症性中耳裂条件恶化的部分或完全丧失的鼓膜和鼓膜,常常导致永久性的后遗症,表现为耳聋和持久的耳朵放电(1]。在全球范围内,CSOM负担的疾病占28000人死亡;65 - 330与排水的耳朵和39 - 200人遭受重大听力障碍(2]。在尼泊尔,这是一个重大的公共卫生负担高流行率(3]。如果CSOM大于3的流行,它是一个高风险的重点疾病。尼泊尔属于高流行的CSOM患病率为3.5% (3- - - - - -5]。我们报告一例CSOM病人最初是用局部抗生素治疗,而实验室诊断是安全评价的真菌发病机理,揭示入侵黑曲霉为唯一病因的代理。因此,我们强烈推荐指标的临床怀疑支持的标准和相关微生物分析,以避免误诊为一种有效的治疗选择。

2。案例展示

53岁的男人有一个历史的CSOM右耳遭受了超过3个月。他已经参观了各种医疗设施和医院。他是一种抗菌药物从过去10天,但没有受益。最后,他参观了ENT与头颈外科门诊部当三级医院和2016年3月进行了临床研究和治疗。

3所示。调查结果

访Otorhinolaryngology-Head部和颈部手术(ENT-HNS),布汶大学教学医院(真理),一个医疗小组观察到他的耳朵耳镜,立即发现耳朵感染真菌,即。,otomycosis。此外,医生进行微观吸入清除真菌质量。随后,局部抗生素的使用是停止。

临床调查,我们从右耳无菌收集四个拭子样本放电和下游进行分析,主要是微生物调查,革兰氏染色剂,KOH挂载,细菌和真菌的放电的文化。病人被告知后续一周后进一步治疗。

第一耳拭子是加工制备的革兰氏染色法和氢氧化钾(KOH)准备。第二拭子被接种到罗伯逊的煮熟的肉(RCM)介质,而第三个整除的营养肉汤(NB)然后aliquots被接种到巧克力琼脂(巧克力)、5%羊血琼脂(BAP),分别和MacConkey介质(MAC)。第四拭子是利用文化Sabouraud葡萄糖琼脂(SDA),和克隆选择和亚文化进行特定的媒体,即。、麦芽酵母琼脂(缅甸)和玉米粉琼脂(CMA)。所有临床研究过程执行依照临床微生物学的指导方针程序手册,卷2×林恩·s·加西亚,和医学真菌学的教科书,贾格迪什Chander第三版。所有的实验进行了一式三份利用相关的积极的和消极的控制。

听觉放电的革兰氏染色法显示的存在大量脓细胞,真菌孢子(分生孢子);然而,未发现细菌(图1)。

KOH挂载展出的有隔膜的真菌的菌丝与两个分支(一个典型的特性曲霉属真菌spp)(图2)。为进一步的微生物鉴定和调查,文化是孵化的整除18 - 24小时在所有三个媒体板块,即。、巧克力琼脂、血琼脂和MacConkey琼脂。结果表明,没有细菌生长;然而,观察真菌生长在所有三个媒体板块(图3)。

排除细菌生长,与菌落进行革兰氏染色剂/增长从所有三个媒体板块。的精确的表型鉴定真菌生长,LPCB准备评估和观察。

在RCM 48小时的潜伏期后,进一步增长subcultivated与磁盘甲硝哒唑+庆大霉素和血琼脂培养厌氧48小时。铜绿假单胞菌(之前孤立系)被用作控制应变有氧文化sporogenes梭状芽胞杆菌(先前孤立系)是用来控制厌氧文化在这个研究。

在血琼脂培养基,观察细菌生长;然而,光发现了真菌的增长是符合通过革兰氏染色法和LPCB山准备。

48小时后的孵化SDA介质,真菌生长(图4)进一步接种成玉米粉琼脂(CMA)和培养72小时。真菌殖民地从SDA和CMA媒体进行入乳酚棉蓝色(LPCB)取笑山。LPCB挂载的显微镜结果揭示了存在多个分生孢子,分生孢子,囊泡,phialides, metulae类似曲霉属真菌spp。(图5)。此外,我们还进行了克隆选择和利用麦芽酵母琼脂(缅甸)和CMA-specific文化媒体的发展曲霉属真菌种虫害,并成功地孤立和证实黑曲霉。从所有微生物的观察和分析,发现的重要特征的具体biseriate phialides结构和黑的分生孢子表型确认黑曲霉作为这个CSOM唯一病因代理人。

4所示。讨论

Otomycosis是一种慢性反复霉菌病外耳道。otomycosis的发生率高在热带地区,和物种曲霉属真菌被认为是主要的病因因素占整个的48.9% otomycosis表现(6]。

CSOM是慢性耳炎的类型。它是无所不在地由特定的细菌和真菌引起的。病因的代理人CSOM重要的有氧细菌起源铜绿假单胞菌,金黄色葡萄球菌,变形杆菌,肺炎克雷伯菌,大肠杆菌,而厌氧细菌的起源梭状芽胞杆菌spp。消化链球菌属spp。梭菌属spp。,韦永氏球菌属spp。主要参与CSOM真菌物种曲霉属真菌spp。假丝酵母spp。根霉年代页,青霉菌spp。7,8]。长期的和不合理的局部使用抗菌药物(抗生素或antibiotics-steroids)滴耳剂可以转移,抑制共生体,出现机会主义的菌群9]。

CSOM是一种常见的卫生负担在低收入和中等收入国家,社会经济地位,总体健康、卫生和卫生条件,营养状况,和可访问性医疗服务严重受损。此外,频繁的上呼吸道感染,非理性的抗生素治疗和鼻腔疾病被认为是重要的诱发因素CSOM [10,11]。没有精确的CSOM病因诊断,抗生素的不合理使用导致耐多药微生物菌株的出现产生了严重的并发症,是一种终极挑战目前面临的低收入和中等收入国家。每年,CSOM占了成千上万的人死亡,直接影响数以百万计的人患有听力障碍。

曲霉属真菌物种是最主要的真菌在CSOM病因。曲霉属真菌分生孢子分散在空气中的尘埃、殖民和快速增长的耳道耵聍营养支持的存在和微酸性环境条件。数以百计的曲霉属真菌分生孢子可以生存在空气;因此,即使是吸入,没有疾病可以进展到immune-competent个人。然而,糖尿病的免疫功能不全的主机,类固醇,艾滋病毒感染,化疗,恶性肿瘤易受CSOM真菌感染(12]。免疫抑制健康状况增加了机会病原体传播的风险曲霉属真菌种虫害成各种身体器官通过循环或通过直接组织入侵(13]。曲霉属真菌物种无所不在地出现在不同的环境和他们的分生孢子主要分散在空气中。如果任何人暴露在这些分生孢子,otomycosis / CSOM进展的风险最小为immune-competent个人(14]。黑曲霉是一个重要的和主要的侵入性真菌病原体感染复发排水的CSOM负责。

正确的临床诊断的CSOM由细菌和真菌学的评估标准。微生物表型研究特别关注真菌文化,潮湿的山,和染色能够区分CSOM在实验室资源约束的具体病因代理设置。因此,临床调查和诊断病因代理人的CSOM可以通过观察/演示各种微生物证据的标准方法,主要是革兰氏染色法,KOH挂载的准备,而细菌和真菌在选择性和微分媒体文化。

临床上在这个案例研究中,我们调查了右耳听觉放电的53岁男子患有CSOM。病人可能被感染的免疫功能不全的由于他的糖尿病状态。我们有系统地调查这个案例研究与标准化微生物评估的流程图所示(图研究6)。研究结果显示没有细菌生长能够从病人的样本收集的培养;然而,真菌被隔离和标识。

克隆选择和具体的文化在缅甸和CMA生成黑色的殖民地曲霉属真菌种虫害表型上进一步调查。为进一步描述曲霉属真菌spp,分生孢子的特定表型特征的启示,囊泡,metulae, biseriate phialides,表型和分生孢子在显微镜证实黑曲霉这种情况下的唯一病因代理人的CSOM。

当前的推荐治疗otomycosis由于曲霉属真菌种虫害是克霉唑滴耳剂1% (w / v),和他们有3 - 4周。这被认为是有效的抗真菌治疗的选择,因为它阻止真菌生长在耳朵阻塞形成的保护层(15,16]。

治疗的临床病例,病人也接受推荐的坦诚与利多卡因耳坠药物2% (w / v) +克霉唑1% (w / v)为4周。当我们随访4周的治疗后,病人接受整体耳朵检查调查,他的耳朵和卫生条件得到了显著提高。为进一步的临床研究,也无菌拭子样本收集的双耳和微生物进行了评估;然而,没有分离和检测微生物的增长。

5。结论

CSOM造成的细菌和真菌的起源在实验室诊断经常被报道;然而,CSOM独自与临床相关的真菌菌群是一个独特的案例。

在本临床病例报告中,我们有临床和微生物调查CSOM患者的听觉放电,孤立和表型上杰出的入侵黑曲霉作为唯一与CSOM相关病因病原体。

总之,对抗菌素的不合理和长期使用滴耳剂可能导致微生物的出现superinfection-CSOM与机会主义致命的病原体。因此,一个明确的提示真菌病原学调查和标准化的实验室评估建议为每个CSOM例后来指导适当的和及时的管理和治疗的CSOM和防止CSOM-associated严重的并发症。

缩写

软面包卷:	5%的羊血琼脂板
CMA:	玉米粉琼脂
巧克力:	巧克力琼脂
CSOM:	慢性化脓性中耳炎
ENT-HNS:	Otorhinolaryngology-head和颈部手术
艾滋病毒:	人类免疫缺陷病毒
KOH:	氢氧化钾
LPCB:	乳酚棉蓝色
麦克:	MacConkey琼脂
米娅:	麦芽酵母琼脂
注:	营养肉汤
门诊部当:	门诊部
RCM:	罗伯逊的煮熟的肉
SDA:	Sabouraud葡萄糖琼脂
真理:	布汶大学教学医院。

数据可用性

没有数据被用来支持本研究。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

确认

所有作者感谢安妮塔女士Chaulagain, MSc。,for her contributions in proofreading and scientific suggestions.

引用

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