体内gydF4y2Ba80％的甲醇和水的树皮提取物的抗疟疾活性gydF4y2Ba榄仁野百合gydF4y2BaFresen。（君子）对gydF4y2Ba鼠体内gydF4y2Ba在小鼠gydF4y2Ba

摘要gydF4y2Ba

背景gydF4y2Ba。尽管在过去二十年里大幅科学进步，疟疾仍然是一个世界性的负担。恒丰性对现有的抗疟疾药物是抗击疟疾的一种挑战。药用植物有新的药物有前途的源来解决这个问题。因此，本研究旨在评估的抗疟原虫活性gydF4y2Ba榄仁野百合gydF4y2Ba在gydF4y2Ba鼠体内gydF4y2Ba受感染的老鼠。gydF4y2Ba方法gydF4y2Ba。A 4天抑制试验来评估80％的甲醇和水的树皮提取物的抗疟疾作用gydF4y2Bat . browniigydF4y2Ba反对gydF4y2Bap .鼠gydF4y2Ba在瑞士的白化小鼠中。gydF4y2Ba结果gydF4y2Ba。的gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba急性毒性试验表明，两种提取物均具有明显的毒性gydF4y2Bat . browniigydF4y2Ba不会导致死亡4天的早期感染试验表明，80%的甲醇和水提取物对寄生虫血症有明显的抑制作用gydF4y2Ba 与消极控制相比。化学抑制的最高水平(60.2%)表现在400 mg/kg剂量的80%甲醇提取物。此外，80%甲醇提取物表现出显著性gydF4y2Ba 贫血的衰减与感染以剂量依赖性的方式相关联。的一个queous extract, on the other hand, exhibited a percent inhibition of 51.1% at the highest dose (400 mg/kg/day).结论gydF4y2Ba。本研究表明，树皮的水提物和醇提物均有一定的活性gydF4y2Bat . browniigydF4y2Ba具有一个有前途的抗疟活性，与由所述提取hydromethanolic表现出较高的效果。gydF4y2Ba

1.背景gydF4y2Ba

疟疾是一种威胁生命的疾病引起的gydF4y2Ba疟原虫gydF4y2Ba通过受感染女性的叮咬传播给人类的寄生虫gydF4y2Ba按蚊gydF4y2Ba蚊子(gydF4y2Ba1gydF4y2Ba]。四种gydF4y2Ba疟原虫gydF4y2Ba在自然界中很长一段时间被认为可以感染人类。另外，有一个物种，gydF4y2Ba诺氏疟原虫gydF4y2Ba，自然感染猕猴，并在最近被认为是人畜共患疟疾导致人类[gydF4y2Ba2gydF4y2Ba,gydF4y2Ba3.gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

据世界卫生组织的疟疾报告，有在2016年疟疾死亡的人数估计在同年站在445000 2.16亿箱子疟疾。在2016年，非洲地区是家庭到90％的疟疾病例和疟疾死亡人数的91％[gydF4y2Ba1gydF4y2Ba]。此外，疟疾仍然是5岁以下儿童的主要杀手，每两分钟就有一个儿童死亡[gydF4y2Ba1gydF4y2Ba]。在埃塞俄比亚，疟疾也是一种严重的疾病，那里75%的土地都有疟疾，5400多万人易受感染[gydF4y2Ba4gydF4y2Ba,gydF4y2Ba5gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

尽管在过去20年里取得了重大的科学进步，疟疾仍然是一个世界性的负担[gydF4y2Ba6gydF4y2Ba]。利用核心疾病预防工具、及时诊断和抗疟药物治疗，在防治疟疾方面作出了巨大努力。然而，疟疾发病率和死亡率下降的速度在一些地区停滞不前，甚至出现逆转[gydF4y2Ba7gydF4y2Ba]。对现有抗疟药物的耐药性对防治疟疾的努力构成严重挑战。gydF4y2Ba

构成的新药有前途源，药用植物被赋予全球搜索安全有效的抗疟原虫药物的植物[优先权益gydF4y2Ba8gydF4y2Ba]。青蒿素衍生物和金鸡纳生物碱，如奎宁，是这种断言的典型例子。埃塞俄比亚拥有丰富的药用植物资源和传统的药用习俗[gydF4y2Ba9gydF4y2Ba]。对几种传统上声称是埃塞俄比亚药用植物的研究证实了它们的抗疟作用[gydF4y2Ba10gydF4y2Ba- - - - - -gydF4y2Ba16gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

因此，本研究旨在调查gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba埃塞俄比亚民间医学中用于治疗疟疾的最重要的植物的抗疟活性，gydF4y2Ba榄仁野百合gydF4y2Ba(gydF4y2Ba17gydF4y2Ba]。它是一种多叶落叶乔木，通常高4-15米，顶部扁平，树冠圆展，树干直。在最近的研究中[gydF4y2Ba18gydF4y2Ba，从该植物的茎皮提取物中分离出的两种含高岭土酰基团的化合物在展览中表现出来gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba对氯喹敏感株和氯喹耐药株的抗疟原虫活性gydF4y2Ba恶性疟原虫。gydF4y2Ba但，gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba的抗疟活性gydF4y2Bat . browniigydF4y2Ba树皮没有调查。本研究中，因此，评价了gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba甲醇和水提取物的抗疟活性为80%gydF4y2Bat . browniigydF4y2Ba叫对gydF4y2Bap .鼠gydF4y2Ba在小鼠。gydF4y2Ba

2.材料和方法gydF4y2Ba

2.1。植物材料的收集和鉴定gydF4y2Ba

新鲜树皮gydF4y2Bat . browniigydF4y2BaFresen。于2017年8月在埃塞俄比亚东部哈拉尔镇采集。收集到的植物材料由亚的斯亚贝巴大学生物系的国家植物标本室的分类学家鉴定，那里保存着一个代用标本(HB001)以备将来参考。gydF4y2Ba

2.2。实验动物gydF4y2Ba

Healthy Swiss albino mice (22–31 g), aged 6–8 weeks (female for toxicity and male for the study), were purchased from the Ethiopian Public Health Institute (EPHI) and kept in the animal house at the School of Pharmacy, Addis Ababa University. Animals were acclimatized for a week just before the experimentation began. Animals were housed in polyethylene cages at room temperature with a 12 h light-dark cycle and provided with a commercial food and water ad libitum. All procedures and techniques used in this study were in accordance with the Guide for Care and Use of Laboratory Animals [19gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

2.3。啮齿动物寄生虫gydF4y2Ba

的氯喹敏感株gydF4y2Ba鼠体内gydF4y2Ba（ANKA）从EPHI获得用于gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba抗疟化验。寄生虫是通过每周从感染的小鼠到未感染的小鼠的血液循环来维持的。gydF4y2Ba

2.4。提取gydF4y2Ba

收集的树皮用自来水彻底清洗，用纱布清洗，去除污垢和土壤。手工磨碎的树皮在阴凉处晾干，然后在提取前用研钵和杵捣成粉，得到粗粉。将粉末状植物原料(600g)均匀分为两份，80%甲醇和水萃取。gydF4y2Ba

第一部分(300克)经冷浸提取(100克粉末，含500毫升80%甲醇)。浸渍过程使用轨道振动器，每分钟145转，持续72小时。混合物是用棉布过滤的。滤液再通过艾氏滤纸(No. 1)，残渣用同样的程序再浸两次。甲醇萃取液滤液中的甲醇通过旋转蒸发器(Buchi type TRE121，瑞士)在减压条件下，在45 rpm、40℃下去除，得到80%的甲醇萃取液。用冻干机(Wagtech Jouan Nordic DK-3450 Allerod，丹麦)将提取物进一步浓缩至干燥，温度为- 50℃，减压(200 mBar)。在步骤结束时，收获60克干燥的粗氢甲醇提取物(20%收率)。gydF4y2Ba

水提法是将树皮粉(300克)在1500毫升蒸馏水中煮沸1小时。然后用细布过滤混合物，滤液通过Whatman滤纸(No. 1)。为了抽出植物部分，这个过程重复了两次。水浸液被冷冻在一个深冰箱过夜，然后用冻干机冻干，使用类似的条件上面所述。水提法得干提物54克，收率18%。两种提取物均保存在螺旋盖小瓶中，在−4℃的冰箱中保存直到使用。gydF4y2Ba

2.5。急性毒性研究和剂量的选择gydF4y2Ba

80%的甲醇和水提取物gydF4y2Bat . BrowniigydF4y2Ba根据经济合作与发展组织(OECD)指南，评估其对未感染的瑞士雌性白化病小鼠的急性毒性[gydF4y2Ba20gydF4y2Ba]。对于每个提取物，使用五只女老鼠。All mice were fasted for 4 h before and 2 h after the administration of the extract. First, a sighting study was performed to determine the starting dose in one mouse. For this, a single dose of 2,000 mg/kg was administered orally. No death was observed within 24 h. Therefore, an additional four mice were given the same dose of the extract. The animals were observed for overt toxicities such as diarrhea, weight loss, tremor, lethargy, and paralysis periodically for the first four hours during the 24 h period and then followed for 14 days for any lethality. After acute toxicity test, three dose levels (100 mg/kg, 200 mg/kg, and 400 mg/kg) were selected for both extracts [20gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

2.6。寄生虫接种gydF4y2Ba

为感染小鼠，在含有枸橼酸三钠抗凝剂的培养皿中收集约32-37%的供体小鼠血液[gydF4y2Ba21gydF4y2Ba]。的blood was then diluted in normal saline so that the final suspension would contain about 1 × 10^7gydF4y2Ba在fected RBCs in every 0.2 ml suspension. Therefore, each mouse used was infected intraperitoneally with 0.2 ml of infected blood containing about 1 × 10^7gydF4y2Bap .鼠gydF4y2Ba寄生红细胞。gydF4y2Ba

2.7。动物分组和给药gydF4y2Ba

p .鼠gydF4y2Ba感染小鼠随机分为8组，每组五只小鼠。Group I received 0.2 ml/kg of distilled water and served as a negative control. Group II received 25 mg/kg dose of chloroquine (CQ), the standard antimalarial drug. Groups III, IV, and V were treated with 80% methanol extract at a dose of 100 mg/kg, 200 mg/kg, and 400 mg/kg, respectively. The remaining groups, groups VI, VII, and VIII, were treated with aqueous extract at 100 mg/kg, 200 mg/kg, and 400 mg/kg doses, respectively. Each dose was reconstituted by distilled water and administered orally using oral gavage.

2.8。为期四天的抑制性测试gydF4y2Ba

根据Peter等人的方法对该植物在早期感染时的裂体杀灭活性进行评价[gydF4y2Ba22gydF4y2Ba]。处理，如本节所述gydF4y2Ba2.7gydF4y2Ba，在第0天小鼠接种寄生虫后2小时开始。然后继续每日治疗4天(从第0天到第3天)gydF4y2Ba^日gydF4y2Ba天（D4），将血液从每只小鼠的尾部使用干净，不油腻幻灯片收集，并且薄血膜相应地做出。然后，空气干燥血膜用甲醇固定的几滴和在pH为7.2用吉姆萨染色。寄生虫血症是使用光学显微镜（奥林巴斯N-二120A，菲律宾）与X100目的用于确定血液寄生虫抑制检查。此外，每只小鼠每天出席的生存时间治疗后的决心。收集细胞体积（PCV）只是感染之前以及在实验结束时被记录下来。gydF4y2Ba

2.8.1发布。寄生虫血症和生存时间测定gydF4y2Ba

通过在显微镜的随机视野计数寄生的红血细胞（PRBC）的数出总红细胞获得的寄生虫血症百分数。使用如下公式进行了检查每只小鼠的两个染色的载玻片[gydF4y2Ba23gydF4y2Ba]:gydF4y2Ba

寄生虫血症抑制百分率按下式计算[gydF4y2Ba23gydF4y2Ba]:gydF4y2Ba

每天对小鼠进行监测，记录每只治疗组和对照组小鼠从接种到死亡的天数。各组平均生存时间(MST)计算如下[gydF4y2Ba14gydF4y2Ba]:gydF4y2Ba

2.8.2。红细胞压积测量gydF4y2Ba

PCV测定以评估防止的溶血作用的两种提取物的效果gydF4y2Ba疟原虫gydF4y2Ba寄生虫。用肝素化毛细管从小鼠尾部采血。管子被填充到3/4gydF4y2Ba^日gydF4y2Ba在高处被血封闭，在枯干的尽头被泥封住。然后将试管放置在微血细胞压积离心机(Centurion Scientific, UK)上，密封的一端面向外周，在11000 rpm离心5分钟。最后，使用标准红细胞压积阅读器(Hawksley and Sons, England)测定PCV [gydF4y2Ba22gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

2.8.3。测量体重和直肠温度gydF4y2Ba

每组小鼠采用敏感数字称量秤称重，直肠数字温度计测量直肠温度。然后计算其平均值在处理前后的百分比变化。gydF4y2Ba

2.9。初步植物化学分析gydF4y2Ba

两种提取物进行筛选，不同的植物化学成分按照标准方法[存在gydF4y2Ba24gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

2.10。数据分析gydF4y2Ba

结果的study are expressed as mean ± standard error of mean (SEM). Data were analyzed using SPSS, version 20. Statistical significance was determined by one-way analysis of variance (ANOVA) followed by Tukey post hoc test to compare the levels of parasitemia, survival time, and changes in body weight, PCV, and rectal temperature of thep .鼠gydF4y2Ba对照组和提取组之间的感染小鼠。gydF4y2Ba值<0.05被认为是统计学显著。gydF4y2Ba

3.结果gydF4y2Ba

3.1。急性毒性研究gydF4y2Ba

在里面gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba一个cute toxicity test at a limit dose of 2,000 mg/kg, both extracts oft . browniigydF4y2Ba在最初的24小时内以及随后的14天内都不会导致死亡和体重下降。此外，在14天的随访中，身体和行为观察研究未发现明显的毒性迹象，如流泪、毛发勃起、运动和进食活动减少。gydF4y2Ba

3.2。植物的Chemosuppressive影响gydF4y2Ba

4天的化学抑制研究表明，80%的甲醇和水提取物gydF4y2Bat . browniigydF4y2Ba表现出寄生虫血症的显著抑制gydF4y2Ba 与阴性对照相比，呈剂量依赖性(表)gydF4y2Ba1gydF4y2Ba）。的level of suppression revealed by 80% methanol extract at concentrations of 100 mg/kg/day, 200 mg/kg/day, and 400 mg/kg/day in the 4-day suppressive test was 32.7%, 47.1%, and 60.2%, respectively. Moreover, the 400 mg/kg dose of 80% methanol extract showed a significant inhibition of parasitemia 与200毫克/公斤和100毫克/公斤的相同提取物相比。另一方面，水提物在100 mg/kg/day、200 mg/kg/day和400 mg/kg/day剂量水平下，分别表现出25.9%、39.4%和51.1%的抑制率。gydF4y2Ba

80%的甲醇和水提取物表现出显著的剂量依赖性gydF4y2Ba MST的增量相比，阴性对照。然而，他们的增加存活时间的能力明显高于标准氯喹小。gydF4y2Ba

的80％的甲醇提取物一个t concentration of 200 mg/kg/day and 400 mg/kg/day significantly 与对照组相比，以剂量依赖的方式预防了与感染相关的体重下降(表)gydF4y2Ba2gydF4y2Ba）。提供了一种显著标准（氯喹）gydF4y2Ba 保护比所有剂量的80%甲醇和水提取物。gydF4y2Ba

如表所示gydF4y2Ba3.gydF4y2Ba中，80％的甲醇提取物能显著gydF4y2Ba 以剂量依赖的方式避免与感染相关的直肠温度下降。然而，水提取物表现出直肠温度的降低与感染有关。gydF4y2Ba

的80％的甲醇提取物显示出一个显著gydF4y2Ba 与对照组相比，贫血与感染相关的衰减呈剂量依赖性gydF4y2Ba2gydF4y2Ba）。即使含水提取物显示PCV的负百分比变化（图gydF4y2Ba1gydF4y2Ba),它明显gydF4y2Ba 与阴性对照相比，贫血与感染有关。氯喹表现出显著的gydF4y2Ba 贫血的衰减与感染相比，所有剂量的80%甲醇以及水提取物。gydF4y2Ba

3.3。初步植物化学分析gydF4y2Ba

植物化学筛选80%甲醇和水提取物gydF4y2Bat . browniigydF4y2Ba树皮揭示了黄酮类化合物，皂苷，类固醇，单宁，和萜类化合物在两个提取物(表gydF4y2Ba4gydF4y2Ba）。然而，蒽醌（邻 - 糖苷）仅在80％的甲醇提取物存在。gydF4y2Ba

4.讨论gydF4y2Ba

疟疾仍然是世界主要的公共健康问题，这是负责的数百万人死亡，尤其是在撒哈拉以南非洲地区。如今，疟疾控制已经逐渐由于耐药寄生虫的传播[变得更加复杂gydF4y2Ba1gydF4y2Ba]。为了应对这些挑战，必须进行广泛的研究，以寻找新的抗疟药物。在这方面，药用植物作为安全有效的抗疟药物来源有着出色的记录。青蒿素衍生物可以作为一个突出的例子来说明药用植物在发现抗疟药物方面的作用。在几种药用植物中，gydF4y2Bat . BrowniigydF4y2Ba是抗疟药使用的药用植物在埃塞俄比亚民俗药之一[gydF4y2Ba25gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

的gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba抗疟疾化合物（S）的评估开始与使用啮齿动物疟原虫[gydF4y2Ba26gydF4y2Ba]。小鼠模型已划定了几种常用抗疟药的机制[实用证明gydF4y2Ba21gydF4y2Ba]。gydF4y2Bap .鼠gydF4y2Ba(ANKA)已用于研究抗疟药在小鼠体内的活性。这主要是因为它能够产生一种类似于人类疟疾感染的啮齿动物模型[gydF4y2Ba26gydF4y2Ba]。抑制测试使用gydF4y2Bap .鼠gydF4y2Ba感染的小鼠提供测试样品的生物活性的潜在的临床前指示[gydF4y2Ba27gydF4y2Ba,gydF4y2Ba28gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

提取物口服给药在本研究中使用，临床评价过程中复制管理和可能途径的ethnomedical方法[gydF4y2Ba25gydF4y2Ba,gydF4y2Ba29gydF4y2Ba]。此外，本研究的急性毒性结果表明，口服内侧致死剂量（LDgydF4y2Ba_50gydF4y2Ba)，根据OECD指引第425号，两种提取物的含量均远大于2000毫克/公斤[gydF4y2Ba20gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

体内gydF4y2Ba一个ntiplasmodial activity can be classified as moderate, good, and very good if an extract displayed respective percent parasite suppression equal to or greater than 50% at doses of 500, 250, and 100 mg/kg body weight per day, respectively [三十gydF4y2Ba]。在本研究中，80%甲醇提取物(400mg /kg/day)的抑制水平为60.2%。根据上述分类，认为该植物具有良好的抗疟原虫活性。这一论断得到了其他人的证明gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba报告了同属其他物种的抗疟活动的研究，例如gydF4y2BaT.诃子gydF4y2Ba,gydF4y2Bat . bellericagydF4y2Ba(gydF4y2Ba31gydF4y2Ba),而gydF4y2Bat . macropteragydF4y2Ba(gydF4y2Ba32gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

最近，Mbouna等人[gydF4y2Ba33gydF4y2Ba]报道gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba的抗疟原虫活性gydF4y2Bat .外套gydF4y2Ba(集成电路gydF4y2Ba_50gydF4y2Ba= 0.26gydF4y2BaμgydF4y2Ba克/毫升）和gydF4y2Bat . superbagydF4y2Ba(集成电路gydF4y2Ba_50gydF4y2Ba = 0.57 μgydF4y2Bag / mL)gydF4y2Ba恶性疟原虫gydF4y2Ba。此外，通过80％的甲醇提取物显示出的寄生虫抑制相当于上的甲醇提取物进行前研究的结果gydF4y2Ba蒿abyssinicagydF4y2Ba(gydF4y2Ba34gydF4y2Ba),gydF4y2Ba巴豆macrostacgydF4y2Bahyus [gydF4y2Ba11gydF4y2Ba,gydF4y2Ba35gydF4y2Ba),而gydF4y2Ba本文结合轻的gydF4y2Ba(gydF4y2Ba36gydF4y2Ba]。通过含水提取物表现出的chemosuppression，但是，是比的含水提取物进行的研究下gydF4y2Ba美国缓和的gydF4y2Ba(gydF4y2Ba36gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

植物化学分析显示，在研究植物的两种提取物中，黄酮类化合物、皂苷、类固醇、单宁和萜类化合物的存在可能是其抗疟活性的原因[gydF4y2Ba18gydF4y2Ba]。甲醇提取物较好的抗疟效果可能与80%的甲醇提取物中存在蒽醌(o -糖苷)有关，而水提取物中不存在[gydF4y2Ba37gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

两种提取物均延长了实验小鼠的平均存活时间，表明该植物对小鼠有抑制作用gydF4y2Bap .鼠gydF4y2Ba和降低的对小鼠的寄生虫整体病理效果。对小鼠的平均存活时间类似的结果报告在上进行的研究gydF4y2BaT.诃子gydF4y2Ba,gydF4y2Bat . bellericagydF4y2Ba(gydF4y2Ba31gydF4y2Ba),而gydF4y2Bat . macropteragydF4y2Ba(gydF4y2Ba32gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

贫血，身体消瘦，和体温降低是疟疾感染的小鼠的一般特征[gydF4y2Ba37gydF4y2Ba]。因此，预计抗疟疾药，以防止病理特征是由于血液寄生虫的上升。在这项研究中，80％的甲醇提取物显示出相比于含水提取物贫血的优良的衰减。这可能表明，蒽醌（O-糖苷）的存在可能是主要活性成分，有助于的抗疟疾活性gydF4y2Bat . browniigydF4y2Ba(gydF4y2Ba38gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

五，结论gydF4y2Ba

目前的研究显示了前景gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba80%甲醇和水提取物的抗疟原虫作用gydF4y2Bat . browniigydF4y2Ba。的extracts were also found to be nontoxic at the maximum tested dose of 2000 mg/kg. In addition to upholding the traditional claim of the plant, the results of this study provide a basis for investigating the active compounds of this plant with the purpose of discovering candidate compounds for the development of effective and safe antimalarial drugs.

数据可用性gydF4y2Ba

支持本研究结果的数据将在合理的要求下从通讯作者处获得。gydF4y2Ba

信息披露gydF4y2Ba

这项研究是作为作者在亚的斯亚贝巴大学的一个项目，它提供了所有的实验室设施的一部分来执行。然而，这个项目没有赚到任何部分资金支持。gydF4y2Ba

的利益冲突gydF4y2Ba

作者宣称，有兴趣就本文发表任何冲突。gydF4y2Ba

致谢gydF4y2Ba

作者非常感谢EPHI提供实验动物和寄生虫。gydF4y2Ba

参考文献gydF4y2Ba

1. 谁,gydF4y2Ba疟疾主要事实gydF4y2Ba，世卫组织，瑞士日内瓦，2018年，gydF4y2Bahttp://www.who.int/news-room/fact-sheets/detail/malariagydF4y2Ba。gydF4y2Ba
2. A. Amirah, F. W. Cheong, J. R. de Silva, J. W. Kent Liew，和yl . Lau，”gydF4y2Ba疟原虫诺氏疟原虫gydF4y2Ba疟疾：目前的研究视角，”gydF4y2Ba感染和耐药性gydF4y2Ba卷。11，没有。1，P。11，2018。gydF4y2Ba查看在：gydF4y2Ba出版商网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
3. 美国疾病控制和预防中心gydF4y2Ba疟疾生物学:生命周期gydF4y2Ba，美国亚特兰大疾病控制和预防中心(CDC)， 2018年，gydF4y2Bahttps://www.cdc.gov/malaria/about/biology/index.htmlgydF4y2Ba。gydF4y2Ba
4. Y. Legesse, A. Tegegn, T. Belachew, K. Tushune， "埃塞俄比亚西部Assosa地区城市地区家庭疟疾传播及其预防措施的知识、态度和实践"gydF4y2Ba埃塞俄比亚卫生发展杂志gydF4y2Ba卷。21，没有。2，第157-165，2007。gydF4y2Ba查看在：gydF4y2Ba出版商网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
5. G. Betemariam和N. Yayeh， "埃塞俄比亚西部甘贝拉地区儿童的严重疟疾，"gydF4y2Ba埃塞俄比亚卫生发展杂志gydF4y2Ba第16卷，no。1, 2002年，61-70页。gydF4y2Ba查看在：gydF4y2Ba出版商网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
6. t.n.c. Wells, r.h. van Huijsduijnen，和w.c. van Voorhis，《疟疾药物:一杯半满的?》gydF4y2Ba《自然评论》药物发现gydF4y2Ba，第14卷，no。6, 2015年第424-442页。gydF4y2Ba查看在：gydF4y2Ba出版商网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
7. "疟疾疫苗实施方案"，2018年，gydF4y2Bahttp://www.who.int/immunization/sage/meetings/2018/april/2_WHO_MalariaMVIPupdate_SAGE_Apr2018gydF4y2Ba。gydF4y2Ba查看在：gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
8. M. L.威尔科克斯和G. Bodeker，“疟疾传统草药”gydF4y2BaBMJgydF4y2Ba，第329卷，no。7475，第1156-1159页，2004。gydF4y2Ba查看在：gydF4y2Ba出版商网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
9. G. Alebie, B. Urga, A. Worku， "埃塞俄比亚用于治疗疟疾的传统药用植物的系统综述:趋势和展望，"gydF4y2Ba疟疾杂志gydF4y2Ba第16卷，no。1，第307页，2017。gydF4y2Ba查看在：gydF4y2Ba出版商网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
10. E. Mebrahtu, W. Shibeshi, G. Mirutse "gydF4y2Ba体内gydF4y2Ba的hydromethanolic叶提取物的抗疟疾活性gydF4y2Ba散会钻进gydF4y2Ba（豆科）在小鼠感染氯喹敏感gydF4y2Bap .鼠gydF4y2Ba”gydF4y2Ba国际药学与药理学杂志gydF4y2Ba第2卷第1期9, 131-142, 2013年。gydF4y2Ba查看在：gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
11. L. Bantie，S. Assefa，T. Engidawork和E. Engdawork，“gydF4y2Ba体内gydF4y2Ba粗叶提取物和溶剂组分的抗疟活性gydF4y2Ba巴豆macrostachyusgydF4y2BaHocsht。（大戟科）对gydF4y2Ba鼠体内gydF4y2Ba在老鼠身上,”gydF4y2BaBMC补充和替代医学gydF4y2Ba，第14卷，no。1，第79页，2014。gydF4y2Ba查看在：gydF4y2Ba出版商网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
12. D. Yared, M. Yalemtsehay, D. Asfaw，”gydF4y2Ba体内gydF4y2Ba分次提取物的抗疟活动gydF4y2BaA.非洲种gydF4y2Ba在感染了gydF4y2Bap .鼠gydF4y2Ba”gydF4y2BaPHOL。拱gydF4y2Ba卷。3，第88-94，2012。gydF4y2Ba查看在：gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
13. D. Dikasso，E. Makonnen，A Debella等人，“抗疟疾活性gydF4y2BaWithania somniferagydF4y2Ba小鼠的杜纳尔提取物，"gydF4y2Ba埃塞俄比亚的医学杂志gydF4y2Ba卷。44，没有。3，第279-285，2006年。gydF4y2Ba查看在：gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
14. B. Mengiste，E. Makonnen和K.库伦，“gydF4y2Ba体内gydF4y2Ba的抗疟活性gydF4y2Ba明油子gydF4y2Ba种子提取物对gydF4y2Ba鼠体内gydF4y2Ba在小鼠模型中,“gydF4y2Ba莫纳埃塞俄比亚科学杂志gydF4y2Ba，第4卷，第2期。1，第47页，2012。gydF4y2Ba查看在：gydF4y2Ba出版商网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
15. G. Mequanint“的甲醇提取物的抗疟活性gydF4y2Ba商陆dodecandragydF4y2Ba叶反对gydF4y2Bap .鼠gydF4y2Ba感染的瑞士白化病小鼠，”gydF4y2Ba国际药理学和临床科学杂志gydF4y2Ba第3卷，no。3，第39-45页，2014。gydF4y2Ba查看在：gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
16. D. Nureye, S. Assefa, T. Nedi和E. Engidawork。”gydF4y2Ba体内gydF4y2Ba80种甲酚根树皮提取物和溶剂组分的抗疟活性gydF4y2Ba栀子花ternifoliagydF4y2Baschumach。＆thonn。（茜草科）反对gydF4y2Ba鼠体内gydF4y2Ba”gydF4y2Ba基于证据的补充和替代医学gydF4y2Ba，第2018卷，文章编号9217835,10页，2018年。gydF4y2Ba查看在：gydF4y2Ba出版商网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
17. 《热带非洲植物资源》，2018年，gydF4y2Bahttp://uses.plantnet-project.org/en/Terminalia_brownii_(PROTA）gydF4y2Ba。gydF4y2Ba查看在：gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
18. F. Machumi，J. O. Midiwo，M. R. Jacob等人，“植物化学，抗菌和抗疟原虫调查gydF4y2Ba榄仁野百合gydF4y2Ba”gydF4y2Ba天然产物通信gydF4y2Ba，第8卷，no。6、2013。gydF4y2Ba查看在：gydF4y2Ba出版商网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
19. 实验室动物研究所，gydF4y2Ba实验室动物的护理和使用指南gydF4y2Ba张建民，国家科学院出版社，美国，华盛顿，1996。gydF4y2Ba
20. 经合组织，gydF4y2Ba化学品测试指南：指南425急性经口毒性gydF4y2Ba，奇迹工程，巴黎，法国，第二版，2017年。gydF4y2Ba
21. 黄，E.皮尔曼，金，“简单致命疟疾的小鼠模型，”gydF4y2BaBio-ProtocolgydF4y2Ba第5卷，no。13，文章ID e1514, 2015年。gydF4y2Ba查看在：gydF4y2Ba出版商网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
22. W. Peter, H. Portus和L. Robinson，“四天体内抑制抗疟试验”，gydF4y2Ba热带医学和寄生虫学年鉴gydF4y2Ba卷。69，第155-171，1975。gydF4y2Ba查看在：gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
23. 王建民，"甲醇叶提取物的抗疟原虫活性。gydF4y2BaSalacia senegalensisgydF4y2BaLam (Dc)的白化小鼠感染氯喹敏感gydF4y2Ba鼠体内gydF4y2Ba(NK65),“gydF4y2Ba国际民族药理学杂志gydF4y2Ba，第1卷，no。1, 2014年2-6页。gydF4y2Ba查看在：gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
24. 马鞭草科植物叶片的植物化学成分及体外溶血活性gydF4y2BaPharmacologyonlinegydF4y2Ba卷。1，第59-67，2011。gydF4y2Ba查看在：gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
25. M. Giday，N. Alelign，T Teklehaymanot和A. Animut，“抗疟疾植物在埃塞俄比亚的阿法尔地区和阿瓦什-Fentale区民族植物学调查gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba对选定的评价gydF4y2Ba鼠体内gydF4y2Ba”gydF4y2Ba亚太热带生物医学杂志gydF4y2Ba，第8卷，no。1，第73-77页，2018年。gydF4y2Ba查看在：gydF4y2Ba出版商网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
26. “生命周期与形态”，台北gydF4y2Ba啮齿动物疟疾gydF4y2Ba，R. Killic - 肯德里克和W.彼得斯，编，第53-84，学术出版社，纽约，NY，USA，1978年。gydF4y2Ba查看在：gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
27. R. W.彼得和V. K.阿纳托利，gydF4y2Ba当前全球疟疾形势。疟疾寄生虫的生物学、发病机理和保护gydF4y2Ba， ASM出版社，华盛顿，美国，1998。gydF4y2Ba
28. D. A. Fidock, P. J. Rosenthal, S. L. Croft, R. Brun, S. Nwaka，“抗疟药物发现:化合物筛选的功效模型”，gydF4y2Ba《自然评论》药物发现gydF4y2Ba第3卷，no。6，第509-520，2004。gydF4y2Ba查看在：gydF4y2Ba出版商网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
29. G. Zenebe，M. Zerihun和Z.所罗门，“药用植物在Asgede Tsimbila区，西北提格雷，埃塞俄比亚北部的民族植物学研究”gydF4y2Ba民族植物学研究与应用gydF4y2Ba卷。10，第305-320，2012。gydF4y2Ba查看在：gydF4y2Ba出版商网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
30. 罗贝，M. M. Ngeiywa, K. Paul等人，"抗疟疾的活动gydF4y2Ba巴豆macrostachyusgydF4y2Ba茎皮提取物gydF4y2Ba体内的伯氏疟原虫gydF4y2Ba”gydF4y2Ba杂志的病原体gydF4y2Ba卷。2018年，文章编号2393854，6页，2018。gydF4y2Ba查看在：gydF4y2Ba出版商网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
31. K. Pinmai，W. Hiriote，N. Soonthornchareonnon，K. Jongsakul，S. Sireeratawong和S.托尔Udom“gydF4y2Ba在体外gydF4y2Ba和gydF4y2Ba在活的有机体内gydF4y2Ba抗疟原虫活性，水提物的细胞毒性gydF4y2BaPhyllanthu semblicagydF4y2Ba,gydF4y2Ba诃子gydF4y2Ba和gydF4y2Ba榄仁树属bellericagydF4y2Ba”gydF4y2Ba杂志泰国医学协会gydF4y2Ba卷。93，没有。7，第S120-S126，2010。gydF4y2Ba查看在：gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
32. M.海达拉，M. Haddad的，A. Denou等人，“gydF4y2Ba体内gydF4y2Ba黄芩粗提物抗疟活性的验证gydF4y2Ba榄仁树属macroptera,gydF4y2Ba一种马里药用植物。”gydF4y2Ba疟疾杂志gydF4y2Ba第17卷，no。1，第68页，2018。gydF4y2Ba查看在：gydF4y2Ba出版商网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
33. C. D. J. Mbouna，R. M. T. Kouipou，R. Keumoe等人，“强效抗疟原虫提取物和级分从gydF4y2Ba榄仁树属外套gydF4y2Ba和gydF4y2Ba榄仁木荷gydF4y2Ba”gydF4y2Ba疟疾杂志gydF4y2Ba第17卷，no。1，第142页，2018年。gydF4y2Ba查看在：gydF4y2Ba出版商网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
34. M. Adugna, T. Feyera, W. Taddese, P. Admasu "gydF4y2Ba体内gydF4y2Ba中药空中部分粗提物的抗疟活性gydF4y2Ba蒿abyssinicagydF4y2Ba反对gydF4y2Ba鼠体内gydF4y2Ba在老鼠身上,”gydF4y2Ba药理全球杂志gydF4y2Ba，第8卷，no。4，第557-565页，2014。gydF4y2Ba查看在：gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
35. L. B. Mekonnen“gydF4y2Ba体内gydF4y2Ba其粗根和果实提取物的抗疟活性gydF4y2Ba巴豆macrostachyusgydF4y2Ba（大戟科）对gydF4y2Ba鼠体内gydF4y2Ba在老鼠身上,”gydF4y2Ba医学的美国杂志gydF4y2Ba第5卷，no。3，第168-173页，2015年。gydF4y2Ba查看在：gydF4y2Ba出版商网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
36. S. Fentahun, E. Makonnen, T. Awas和M. Giday "gydF4y2Ba体内gydF4y2Ba粗提取物和叶的溶剂馏分的抗疟疾活性gydF4y2Ba本文结合轻的gydF4y2Ba在gydF4y2Ba鼠体内gydF4y2Ba受感染的老鼠。”gydF4y2BaBMC补充和替代医学gydF4y2Ba第17卷，no。1，第13页，2017。gydF4y2Ba查看在：gydF4y2Ba出版商网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
37. “血液期疟疾感染的小鼠模型:参与保护和病理的免疫反应和细胞因子，”gydF4y2Ba化学免疫和过敏gydF4y2Ba，第80卷，第204-228页，2002年。gydF4y2Ba查看在：gydF4y2Ba出版商网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba
38. R. Winter, K. A. Cornell, L. L. Johnson, L. M. Isabelle, D. J. Hinrichs, M. K. Riscoe，“羟基蒽醌类抗疟药物，”gydF4y2Ba生物有机和药物化学快报gydF4y2Ba第5卷，no。第17页，1927-1932,1995。gydF4y2Ba查看在：gydF4y2Ba出版商网站gydF4y2Ba|gydF4y2Ba谷歌学术搜索gydF4y2Ba

版权gydF4y2Ba

版权所有©2020花Biruk等。这是下发布的开放式访问文章gydF4y2Ba知识共享署名许可gydF4y2Ba，其允许在任何介质无限制地使用，分发和再现时，所提供的原始工作正确的引用。gydF4y2Ba