Cryptolepine,主要生物碱的抗疟药Cryptolepis sanguinolenta(采用)。阿,诱发在斑马鱼胚胎畸形

文摘

背景。先前的研究在cryptolepine,抗疟和细胞毒性的生物碱Cryptolepis sanguinolenta优先显示,它在迅速增殖细胞和melanin-containing组织积累。随后,我们证明了cryptolepine小鼠胚胎毒性在活的有机体内但没有致畸性的迹象。在活的有机体内发展研究可以使得由母亲的影响。在这里,我们假设cryptolepine-induced胚胎毒性发生至少部分通过直接抑制胚胎发生而不是间接通过母体毒性的感应。目的。确定cryptolepine在发展中斑马鱼胚胎的影响体外。方法。健康同步斑马鱼卵子接受cryptolepine (10⁻¹−5×10²μ米)、苄青霉素(6−6×10²μ米)、氯化汞(3.7×10⁻¹−3.7×10¹从6到72小时postfertilization海里)。胚胎发育阶段评估在24、48、72、和96小时在显微镜下杀伤力,孵化率和畸形。结果。信用证₅₀cryptolepine的研究被发现260±0.174μm . Cryptolepine诱导剂量和时间postfertilization死亡率从24到96小时。cryptolepine低浓度(< 100μ米)引起的死亡率,大约15 - 18%,只有在postfertilization 48小时。最敏感的时期胚胎杀伤力对应与pharyngula(24 - 48小时)和孵化(48到72小时)的胚胎发育阶段。Cryptolepine (10⁻¹−5×10²μ米)剂量依赖性抑制孵化率。在剂量超过500μ米,孵化完全被抑制。氯化汞(3.7×10⁻¹−3.7×10¹海里),作为积极的控制、诱导胚胎杀伤力的一致的模式在开发的所有阶段,而苄青霉素(6−6×10²μ米),作为消极的控制,没有引起任何重要的胚胎杀伤力。形态学检查(postfertilization第五天)eleutheroembryos治疗胚胎发育期间cryptolepine显示减少体长(生长抑制),减少眼直径和凸面木杆,扩大pericardia,扩大卵黄囊和肌肉畸形。结论。Cryptolepine导致畸形,生长迟缓,死亡率在快速分裂斑马鱼胚胎体外。

1。背景

西非的提取物抗疟植物,Cryptolepis sanguinolenta已经使用管理的传染病和非传染性的疾病在非洲几个世纪以来传统医学(1]。临床上,它已被证明是唯一的疟疾的管理由于其快速血液schizonticidal活动和强力的抗炎活性2- - - - - -4]。许多生物和植物提取物的药理作用已被归因于主要生物碱,cryptolepine(图1);因此,cryptolepine广泛用于抗疟工厂机械的研究。此外,cryptolepine显示显著的协同作用与传统抗疟物质(5),显示良好的gametocidal活动恶性疟原虫(6]。针对这一点,cryptolepine及其类似物在开发潜在新一代抗菌药物(7,8]。尽管如此潜力,cryptolepine和植物提取物是哺乳动物细胞(细胞毒性9]。涉及的机制成为超螺旋DNA酶的抑制作用,DNA拓扑异构酶ⅱ,夹层(10- - - - - -12]。几项研究表明cryptolepine及其类似物可能是小说的来源导致分子癌症化疗(13,14]。

我们早前表明水提物Cryptolepis sanguinolenta用作抗疟代理不利影响哺乳动物生殖(15]。它在兔形目动物抑制排卵,精子发生在小鼠模型16,17]。是致命的小鼠胚胎和延迟产后生理和发育里程碑的增长,实现老鼠(18]。没有畸形或致畸性的研究。这些观察潜在的机制并不清楚地划定。然而,明显,cryptolepine对胚胎的影响可能是介导的部分是通过母亲的压力感应和毒性(18]。能够确定cryptolepine对胚胎发育的影响没有母亲的影响,一个体外方法可能是理想的。

斑马鱼,鲐鱼类(Hamilton-Buchanan(1822)),已经成为一种快速、敏感、临床化学和高通量模型检测工具(19,20.]。与传统的小鼠模型、维护畜牧业和试剂成本很低。是很敏感的化学侮辱和股票85%的基因组同源性与人类,成为一个好的模型预测人类的影响(21,22]。它尤其适合发育毒性研究,因为它会产生大量的透明的鸡蛋在简单的实验室条件下快速的胚胎发育。不同的关键发展阶段构成斑马鱼胚胎发生(23]。胚胎保持透明畅通无阻的形态学观察,直到开始密集色素postfertilization 30 - 72小时。利用斑马鱼胚胎,研究旨在确定cryptolepine的影响,最主要的生物碱Cryptolepis sanguinolenta在发展中斑马鱼胚胎,鲐鱼类、Hamilton-Buchanan (1822)。

2。材料和方法

2.1。隔离Cryptolepine

干的根源Cryptolepis sanguinolenta从植物医学研究中心,Mampong Akuapem,加纳。是经过身份验证的生药学,KNUST,并跟一个凭证标本KNUST / HM1/2008 L056标本的生药学和草药,药学和制药科学学院,健康科学学院,KNUST,加纳库马西,。

2.1.1。Cryptolepine隔离和净化

的方法提取、分离、纯化和量化cryptolepine被描述在我们的早期研究[5,6]。总之,粉干Cryptolepis(900克)详尽的提取与甲醇(3 L)索格利特(50°C 48 h)给一个黑暗的原油生物碱提取浓缩在真空内。这是紧随其后的是液液萃取和柱层析法的结合。孤立的cryptolepine被紫外-可见光谱吸收峰的波长是223、282和369海里,纯度∼99.5%)和熔点。小杂质包括neocryptolepine和quindoline。

2.1.2。化学品和药物

水晶苄青霉素(CAS RN: 69-57-8,纯度96.0 -102.0% Troge医疗GmBH,汉堡,德国)和氯化汞(CAS RN: 7487-94-7,纯度99% BDH,普尔,英格兰)被用作控制研究。Agarose-G10(基因有限公司、西班牙)被用来对付eleutheroembryos。

2.1.3。动物

成年斑马鱼(鲐鱼类,12周大,野生型(WT)应变)获得从水族馆马歇尔有限公司(阿克拉,加纳)。他们保存在水族馆的药理学、药学和制药科学学院,恩克鲁玛科技大学,为适应环境7天。斑马鱼被安置在玻璃罐(∼21 L)平均密度1.5每升鱼(女性对男性比例为1:1)包含过滤dechlorinated水保持在22 - 25°C和下一个14 h: 10 h光暗周期。每个柜都有单独的水进和流出来减少交叉污染。模仿自然栖息地,每个住房坦克充满碎石的高度约2厘米,和淡水植物(Cabomba aquatica在每个柜)被淹没。

2.1.4。收集鸡蛋

方法描述了麦格拉思et al。24]。成熟的成年斑马鱼被喂以每天两次鱼用金片(四谱品牌宠物,LLC 3001商务圣。布莱克斯堡,美国)。产卵坦克被放置到鱼缸前晚上蛋收集。在发病的光,产卵坦克被移除和鸡蛋被转移到一个不同的容器中。的受精卵最初用蒸馏水洗净去除可见的碎片在水中含有胚胎。我们随后再镀清洗和胚胎在E3媒体,其中包含盐防止任何形式的渗透冲击。与死后在显微镜下观察,鸡蛋胚胎,白色的外表,和异常的形状和未孕被移除的援助微量吸液管通过选择性的愿望23- - - - - -25]。健康的同步与一个完整的鸡蛋绒膜膜被选作研究。

2.2。Cryptolepine对斑马鱼胚胎的影响:杀伤力和孵化率

健康同步鸡蛋大约2小时postfertilization(高通滤波器)转移到6-well细胞培养板(Coster 6板3527康宁合并康宁,纽约,美国)(n= 7 - 10)。每个被分配到一个剂量水平的cryptolepine (10⁻¹−5×10²μ米)和治疗评估cryptolepine在胚胎发生的影响。从6到72小时postfertilization结果记录。苄青霉素(6−6×10²μ米)和氯化汞(3.7×10⁻¹−3.7×10¹海里)被用作控制。蒸馏水作为车辆控制。固定体积的4毫升的每种药物和/或车辆管理解决方案是根据其分配好板治疗。药物解决方案不断取代日常使用微量吸液管(静态更新)。死者的胚胎被从每个板使用微量吸液管和记录。孔板覆盖,整个研究蒙在鼓里。胚胎杀伤力评估24、48和72小时postfertilization。postfertilization孵化率评估96小时。

2.3。的影响在斑马鱼Eleutheroembryos Cryptolepine:第五天Postfertilization显微镜检查

在第五天postfertilization,琼脂糖凝胶用于固定药物治疗斑马鱼胚胎。Eleutheroembryos (n= 5)治疗期间与cryptolepine胚胎发生,氯化汞,或苄青霉素在胚胎阶段选择使用微量吸液管从孔板,放置在一个抑郁滑光显微镜下检查(750年徕卡DM×4×10放大)。头部和尾部区域的图像捕获每个eleutheroembryos的形态学检查。彻底检查身体的长度,身体弯曲,头盖骨和面部,皮肤了。身体的长度和心率量化图像J软件的帮助下(NIH和位点)。

2.4。统计分析

结果给出了描述性或量化。定量结果分析与图形垫棱镜,6.0版。统计分析是通过单向方差分析使用Dunnett多重比较检验。被认为是具有统计学意义。

3所示。结果

3.1。Cryptolepine对斑马鱼胚胎的死亡率的影响

Cryptolepine (10⁻¹−5×10²μ米)诱导剂量和时间在斑马鱼胚胎死亡率。大约50%的死亡发生在24小时内的剂量cryptolepine 1×10以上²μm .这个增加到超过90%的72小时内治疗(图2)。最敏感期的死亡率与pharyngula(24 - 48小时)和孵化(48到72小时)的斑马鱼胚胎发育时期。cryptolepine低浓度(< 1×10²μ米)引起的死亡率只有经过长时间的治疗(> postfertilization 48小时)。信用证₅₀cryptolepine的研究被发现260±0.174μ米在24小时的治疗。苄青霉素作为负控制没有引起任何重要的胚胎杀伤力研究的整个持续时间。然而,氯化汞引起显著的胚胎杀伤力研究的时间点。形状、坡度和功效的氯化汞(浓度响应曲线)不受时间影响的治疗(图2)。在这项研究中,比氯化汞cryptolepine并不有效。

3.2。Cryptolepine对斑马鱼胚胎孵化率的影响(96小时Postfertilization)

Cryptolepine (10⁻¹−5×10²μ米)治疗降低孵化率线性增加剂量(图3)。在250年剂量的μ米,大约有40%未能舱口和完整的孵化抑制发生在剂量500左右μcryptolepine的M(图3)。苄青霉素(6−6×10²μ米)没有对孵化率的影响。甲基汞(3.7×10⁻¹−3.7×10¹海里)孵化率下降显著增加剂量后3海里。

3.3。Cryptolepine对斑马鱼Eleutheroembryos”发展的地标

3.3.1。生长迟缓

Cryptolepine增长抑制斑马鱼eleutheroembryos预处理postfertilization从2到72个小时。生长迟缓表示,减少身体整体的长度和宽度。这是显著的剂量cryptolepine 1×10以上²μM(图4)。Cryptolepine诱导生长迟缓相对于控制量化为0.83%,1.73%,16.6%,10⁻²、10和1×10²μM,分别。氯化汞作为积极的控制也在3 nM诱导生长抑制作用显著。氯化汞引起的抑制百分比7.9和11.63在0.3和3海里,分别。苄青霉素并不影响增长的eleutheroembryos在研究(图使用的剂量4)。

3.4。Cryptolepine治疗斑马鱼形态

3.4.1。颅面检查

斑马鱼eleutheroembryo头异形,浏览全脸畸形。上下颌骨的对齐和角度了。没有区别cryptolepine-treated eleutheroembryos和控制。颅面级、犁沟或扭曲出现相同的。

3.4.2。眼畸形

斑马鱼eleutheroembryos暴露cryptolepine、氯化汞或苄青霉素在胚胎发生凸面木杆,检查尺寸、对称性,和位置。Cryptolepine-treated斑马鱼eleutheroembryos有一个小眼睛的直径。眼睛出现沉而不是凸起见其他团体。没有眼色素沉着(图中可观察到的差异5 (b))。

3.4.3。皮肤和身体曲率考试

斑马鱼的皮肤是连续性的仔细检查,异常,色素沉着,语气和纹理。没有显著区别cryptolepine-treated eleutheroembryos和控制。Cryptolepine-treated动物没有显示异常隆起或皮下血肿(瘀斑)。全身曲率在所有组相似。

3.4.4。卵黄囊扩展和肌肉畸形

治疗与cryptolepine导致斑马鱼胚胎卵黄囊水肿和eleutheroembryos肌肉萎缩的迹象。这发生在1×10²μM(图5 (b))。

3.4.5。心包水肿和改变心率

治疗的斑马鱼胚胎cryptolepine斑马鱼eleutheroembryos心包面积的增加。氯化汞和苄青霉素用作控制影响了心包eleutheroembryos领域。初步量化显示在1×10效果显著²μM和心包的扩大面积和降低心率(图5 (c))。

4所示。讨论

斑马鱼(鲐鱼类Hamilton-Buchanan(1822))被广泛获得的声誉作为一个可靠的科学模型的快速筛选药物(26,27]。是很敏感的化学侮辱和股票85%的基因组同源性与人类,成为一个好的模型预测人类的影响(21,22]。流行的抗疟植物Cryptolepis sanguinolenta细胞毒性和在哺乳动物生殖和胚胎发育造成不利影响9,13,15]。Cryptolepine,主要的吲哚生物碱的植物,积累优先快速分裂的细胞生物治疗(28]。报道胚胎影响包括杀伤力、宫内生长抑制、和功能毒性(15]。胚胎和胎儿畸形的病例被报告任何先前的研究[15- - - - - -18]。然而,有迹象表明,产妇可能混淆发育毒性影响结果。本研究因此检查cryptolepine对斑马鱼胚胎的影响(18]。

在这项研究中,cryptolepine诱导显著24小时之内postfertilization胚胎死亡。这在斑马鱼胚胎观察证实与其他作者报道工作使用A549细胞,消息灵通的G2, hepatome细胞系,国和中国(仓鼠成纤维细胞系29日- - - - - -31日]。在这些引用的研究中,cryptolepine的有效浓度从0.5到5.0μm .这些剂量诱导显著的细胞周期阻滞upregulation proapoptotic基因p53在6到24小时。在斑马鱼,剂量低于10²μ诱导生长迟缓,但胚胎存活的影响cryptolepine直到48小时的治疗,显著的死亡率出现了。剂量的细胞株之间的差异在先前的研究和斑马鱼的可能是由于快速发展和增加细胞数量和可能的药物动力学的差异cryptolepine而不是cryptolepine敏感性差异的影响。

在小鼠模型中,cryptolepine怀孕造成重大损失从概念到胚胎发生,表明可能避孕的效果。胚胎的死亡可能是继发于广泛cryptolepine诱导细胞凋亡细胞快速分裂。Cryptolepine表明多效性的诱导细胞凋亡的机制在细胞周期29日- - - - - -31日]。在整体动物实验中,死亡的胚胎组织随后接受组织吸收的孕产妇系统[32]。来自本研究的证据表明,避孕药cryptolepine活动至少部分是由于直接作用于胚胎而非产妇内分泌功能的改变或子宫内膜变化(15,17]。

最敏感的时期胚胎容易cryptolepine pharyngula和孵化阶段。pharyngula期间,有发展的神经系统和大脑的成熟5发生明显的叶。有趣的是,老鼠孕期开发模式功能的毒性可解释为改变神经发生和大脑发育。实际上,功能毒性神经毒性的表现。本研究在斑马鱼可以让我们更好地了解cryptolepine影响大脑和神经发育的可能性。此外,产前治疗的老鼠在我们先前的研究Cryptolepis造成推迟的眼睛开放在产后一天8 [18]。推迟的眼睛开放的象征神经发生的变更。在这项研究中,cryptolepine造成畸形的眼睛以减少直径和减少凸面木杆。眼睛可能更容易受到的影响cryptolepine相比其他器官因为cryptolepine亲和力的黑色素(28]。这种亲和力优先支持cryptolepine积累的眼睛可能抑制细胞增殖。

这项研究指出,心脏和肌肉鱼暴露于cryptolepine的变化。动物之间有心率下降cryptolepine对待。cryptolepine对心率的影响表明,显著降低心率的斑马鱼胚胎处理高浓度的cryptolepine (> 100μ米)。也有增加心包的斑马鱼胚胎的eleutheroembryos高浓度cryptolepine对待。这种影响机制不清楚。在我们之前的研究中,我们表明,小鼠造成的水提物Cryptolepis显示改变感觉运动活动和表现不佳的自发运动和运动协调研究18]。可能会有心脏和肌肉系统之间的联系和性能rotarod实验,因为它对早期胚胎组织的影响。

5。结论

总之,cryptolepine,主要生物碱的抗疟药Cryptolepis sanguinolenta,embryotoxic斑马鱼。它诱导胚胎杀伤力、生长抑制、畸形的眼睛,和心包的伸长区和蛋黄。

数据可用性

使用的数据来支持本研究的结果包括在本文中。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

确认

作者感谢Eziine Uwakwe Obeka和托马斯·Ansah研究工作期间的帮助。

引用

1. n . Osafo k·b·曼沙,o . k . Yeboah”的植物化学成分和药理的回顾Cryptolepis sanguinolenta(采用)。阿。”药理科学的进步ID 3026370条,卷。2017年,13页,2017。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
2. k . a . Bugyei g . l . Boye m·e·艾迪,“袋泡茶的制定的临床疗效Cryptolepis sanguinolenta根治疗急性无并发症恶性疟疾,”加纳医学杂志,44卷,不。1,3 - 9,2010页。视图:谷歌学术搜索
3. o . a . Olajide a . m . Ajayi和c·w·赖特,“cryptolepine消炎,”植物疗法的研究,23卷,不。10日,1421 - 1425年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
4. s . o . a . Bamgbose和b . k . Noamesi cryptolepine研究。”足底》第41卷。。4、392 - 396年,1981页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
5. 公元Forkuo, c . Ansah k . m . Boadu et al .,“协同cryptolepine和青蒿素抗疟疾行动,”《疟疾杂志》上,15卷,不。1,p。89年,2016。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
6. 公元Forkuo, c . Ansah k . b . Mensah et al。”体外抗疟交互和cryptolepine gametocytocidal活动,“《疟疾杂志》上,16卷,不。1,p。496年,2017。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
7. t . k .妈祖j . r . Etukala m·r·雅各布。汗,l·a·沃克,郑胜耀Ablordeppey。”δ-Carbolines及其ring-opened类似物:合成和评价对真菌和细菌机会致病菌,”欧洲药物化学杂志》上,46卷,不。6,2378 - 2385年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
8. 李朱x y l . g . Mardenborough s . et al .,“合成和评价等排物的N-methyl indolo [3、2 b]喹啉(cryptolepine)作为新的antiinfective代理”生物有机和药物化学,15卷,不。2、686 - 695年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
9. c . Ansah和n . j .•古德翰”流行的草药抗疟,提取的Cryptolepis sanguinolenta有效的细胞毒性,”毒物学的科学,卷70,不。2、245 - 251年,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
10. j . n . Lisgarten m·科尔,j .葡萄牙,c·w·赖特和j . Aymami”和细胞毒性抗疟药cryptolepine插入到DNA cytosine-cytosine网站,“自然结构生物学,9卷,不。1、年度,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
11. l . Dassonneville a . Lansiaux a Wattelet et al .,“细胞毒性和细胞周期的影响植物生物碱cryptolepine neocryptolepine:药物引起的细胞凋亡有关,”欧洲药理学杂志,卷409,不。1,9到18,2000页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
12. c·贝利•莱恩(george w . bush), b . Baldeyrou et al .,“DNA夹层,抑制拓扑异构酶2和细胞毒性植物生物碱neocryptolepine的活动,“抗癌药物设计,15卷,不。3、191 - 201年,2000页。视图:谷歌学术搜索
13. c . Ansah和k·b·曼沙”,回顾的抗癌潜力抗疟草药Cryptolepis sanguinolenta,其主要生物碱cryptolepine。”加纳医学杂志卷,47号3、137 - 147年,2013页。视图:谷歌学术搜索
14. 塞维利亚,r·m·菲利普斯s . d . Shnyder和c·w·赖特,“cryptolepine的合成类似物作为潜在bioreducible抗癌剂,”生物有机和药物化学,15卷,不。19日,6353 - 6360年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
15. c . Ansah k Boadu犯罪,大肠Woode,和m . Duwiejua生殖和发育毒性Cryptolepis sanguinolenta在老鼠身上,”研究药理学杂志》上的报告,4卷,不。1,9-14,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
16. c . Ansah和k·b·曼沙,“抗疟草药Cryptolepis sanguinolenta(采用)schltr antiandrogenic。”国际毒理学和应用药理学杂志》上,4卷,不。1,6尺11寸,2014页。视图:谷歌学术搜索
17. c . Ansah和k·b·曼沙”,水根中提取的抗疟疾草药cryptolepis sangunolenta(采用)schltr抑制排卵的兔子,“英国药理学和毒理学杂志》上,3卷,不。5,240 - 244年,2012页。视图:谷歌学术搜索
18. k·b·曼沙和c . Ansah”水的根中提取抗疟草药Cryptolepis sanguinolenta(采用)schltr延迟物理发展的地标和感觉运动系统在老鼠身上,“国际制药科学和研究杂志》上,4卷,不。4 p。1442年,2013年。视图:谷歌学术搜索
19. l . Truong d·m·赖夫l .圣玛丽m . c: a, h·d·Truong和r . l . Tanguay“多维使用斑马鱼体内危害评价,”毒物学的科学,卷137,不。1,第233 - 212页,2013。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
20. r·内格尔,“飞镖:斑马鱼的胚胎试验鲐rerio-a一般模型在生态毒理学和毒理学,”Altex,19卷,不。1,38 - 48,页。2002。视图:谷歌学术搜索
21. r . Wannemacher a . Rebstock e . Kulzer d . Schrenk和k·w·博克”的影响2、3、7、8四氯- dibenzo-p-dioxin繁殖和在斑马鱼卵子发生(鱼类),“光化层,24卷,不。9日,第1368 - 1361页,1992年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
22. j . Keizer g D \ ' agostino博士和l . Vittozzi”生物转化的重要性在外源性物质对鱼的毒性。二嗪农的毒性和生物体内积累在古比鱼(Poecilia试)和斑马鱼(鱼类),“水生毒理学,21卷,不。3 - 4、239 - 254年,1991页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
23. c . b . Kimmel w·w·巴拉德,s . r . Kimmel b·乌尔曼和t . f .先令,斑马鱼的胚胎发育阶段,“发展动态,卷203,不。3、253 - 310年,1995页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
24. p .麦格拉思斑马鱼:评估药物的安全性和毒性的方法新泽西州霍博肯市约翰·威利& Sons,美国,2012年。
25. s .阿里·h·g·范·密尔·m·k·理查森,“大规模的评估斑马鱼胚胎毒性测试可能的预测模型,”《公共科学图书馆•综合》》第六卷,没有。6篇文章ID e21076 2011。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
26. 问:你们h . Liu方c . et al .,“二萜生物碱对斑马鱼的毒性评价和比较,”药物和化学毒物学,42卷,不。1,1 - 8,2019页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
27. y, l .龚j . et al .,“芦荟大黄素诱发肝毒性通过激活NF -κB炎症通路和P53在斑马鱼细胞凋亡通路,”毒物学字母卷,306年,第79 - 66页,2019年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
28. b . k . Noamesi b·s·拉尔森d l . Laryea和s . Ullberg”全身autoradiographic 3 h-cryptolepine老鼠的分布,研究”份de Pharmacodynamie et de Therapie档案卷。313年,为5 - 14,1991页。视图:谷歌学术搜索
29. c . Ansah h·朱,n . j . Goderham“cryptolepine-induced细胞死亡的机制,”药理学和毒理学杂志》上,3卷,不。4、291 - 301年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
30. c·h·朱c . Smith, Ansah, n . j .•古德翰”反应的基因参与细胞周期控制不同的DNA损伤的化学物质在人类肺腺癌A549细胞,”癌细胞国际,5卷,不。1,p。28日2005。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
31. 朱h和n . j .•古德翰”机制诱导细胞周期阻滞和细胞死亡的cryptolepine在人肺腺癌A549细胞,”毒物学的科学,卷91,不。1,第139 - 132页,2006。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
32. k·s·拉尔森和m·埃里克森Salicylate-induced胎儿在两个品系小鼠死亡和畸形,”儿科学报》杂志上,55卷,不。6,569 - 576年,1966页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

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