一个新颖的胞内蔗糖酶酶的纯化和表征gydF4y2Ba杜氏利什曼虫gydF4y2BaPromastigotesgydF4y2Ba

文摘gydF4y2Ba

的promastigote阶段gydF4y2Ba利什曼虫gydF4y2Ba驻留在沙子飞肠道,富含糖分子。最近我们报道,gydF4y2Ba杜氏利什曼虫gydF4y2Ba具有蔗糖吸收系统和稳定的胞内蔗糖代谢酶池。在目前的研究中,我们纯化的胞内蔗糖酶几乎同质性和比较它与纯化细胞外蔗糖酶。胞内蔗糖酶的估计大小由凝胶过滤色谱法~ 112 kDa,本地页面,和基质染色。然而,在sds - page,蛋白质是解决~ 56 kDa,指示为其原生状态的可能性。纯化胞内蔗糖酶的动力学显示其较高的底物的亲和力gydF4y2Ba1.61毫米的细胞外有一个形式gydF4y2Ba4.4毫米。胞内蔗糖酶的非常具体的活动对蔗糖最佳pH值6.0和30°C。在这个报告中胞内蔗糖酶的纯化和表征提供了证据表明,蔗糖酶酶存在至少两种不同的形式gydF4y2Ba杜氏利什曼虫gydF4y2Bapromastigotes。这胞内蔗糖酶可能会进一步支持细胞内利用蔗糖运输。gydF4y2Ba

1。介绍gydF4y2Ba

蔗糖、葡萄糖和其他己糖的氧化还原平衡和维护所需的寄生虫产生DNA和RNA生物合成的前体。作为一个结果gydF4y2Ba杜氏利什曼虫gydF4y2Ba取决于碳水化合物来维持他们的中心碳代谢。这种寄生虫有能力修改其生化机械适应多样的微环境,遇到主机内为了保证他们的生存。gydF4y2Ba

糖粉对感染性形式的发展很重要gydF4y2Ba利什曼虫gydF4y2Basp.和恶意的gydF4y2Ba1gydF4y2Ba,gydF4y2Ba2gydF4y2Ba]。考虑白蛉肠道的主要代谢物成分(gydF4y2Ba3gydF4y2Ba,gydF4y2Ba4gydF4y2Ba),蔗糖大概是首选的能源之一,promastigotes发生的部门。因此重要的是要理解他们如何利用这个糖以及糖摄入细胞内的机制。最近我们报道了蔗糖运输系统gydF4y2Ba杜氏利什曼虫gydF4y2Bapromastigotes和胞内蔗糖分解酶蔗糖酶,这可能证明内化蔗糖的利用(gydF4y2Ba5gydF4y2Ba]。然而,蔗糖内化和今后的消费是一个相对较新的领域gydF4y2Ba利什曼虫gydF4y2Ba生物学。利什曼病仍然是21世纪一个主要的健康问题在世界范围内,尽管几十年来持续努力控制疾病。连同现有的努力开发疫苗(gydF4y2Ba6gydF4y2Ba)和改进的药物(gydF4y2Ba7gydF4y2Ba)有必要了解其生理重要和寄生虫的固有能力适应各种不利环境参数。gydF4y2Ba

我们最近发现胞内蔗糖酶的酶,以及以前的秘书报告细胞外蔗糖酶(gydF4y2Ba5gydF4y2Ba,gydF4y2Ba8gydF4y2Ba),促使我们净化胞内蔗糖酶。在这里,我们发现了一个~ 112 kDa为胞内蔗糖酶的酶gydF4y2Ba杜氏利什曼虫gydF4y2Bapromastigotes和特征,而它同时纯化~ 71 kDa细胞外蔗糖酶。进一步详细的胞内酶的分子特性是重要的洞察其可能的生化途径的寄生虫和发病机理中的作用。这种理解可能造成知识向antileishmanial药物设计。gydF4y2Ba

2。材料和方法gydF4y2Ba

2.1。材料gydF4y2Ba

分析纯试剂用于实验的目的。所有的化学品都从σ,购买美国,除非另有提及。脑心浸液从巴尔的摩Acumedia制造商Inc .,医学博士,美国,和媒体199年Penicillin-Streptomycin粉,从GIBCO购买,美国。gydF4y2Ba

2.2。菌株gydF4y2Ba

的压力gydF4y2Bal . donovanigydF4y2Ba用于这项工作,莫姆/ 1978年/ / UR6,是一个从印度确认黑热病患者临床分离收集在1978年。UR6细胞保持在固体血琼脂媒体pH值7.4和高度运动型promastigotes被认为在实验。gydF4y2Ba

2.3。媒体和文化条件gydF4y2Ba

2.3.1。固体血琼脂媒体gydF4y2Ba

据库马尔萨哈et al。gydF4y2Ba9gydF4y2Ba)细胞株保持在固体血琼脂媒体22°C。的增长promastigotes测量每24小时72小时的增长时期。gydF4y2Ba

2.3.2。液体媒体199gydF4y2Ba

一公升液体介质准备通过增加11 g的媒体- 199,10% FCS, 22毫米的玫瑰,和100单位Penicillin-Streptomycin在水里。媒体的pH值调整到7.4和过滤消毒为进一步使用。gydF4y2Ba

2.4。制备脱细胞提取gydF4y2Ba

无细胞提取物制备根据辛格和Mandal [gydF4y2Ba5gydF4y2Ba]。收获指数级增长的promastigotes液体培养,用PBS洗净,悬浮在裂解缓冲包含(PMSF Tris-HCl 5毫米,0.5毫米和0.25毫米EDTA, pH值7.4)。暂停在孵化环境温度是由涡流混合10次30秒时间间隔为2分钟。这是进一步用15 20秒脉冲每1分钟间隔在冰上。用提取被调整至50 mM Tris-HCl, pH值7.4(缓冲),离心器gydF4y2Bag 1小时在4°C。浮在表面的视为无细胞提取收集和储存在−20°C为进一步使用。gydF4y2Ba

2.5。净化过程gydF4y2Ba

2.5.1。酶提取gydF4y2Ba

自由提取细胞的酶活性被认为是原油和活动的水平是复苏的100%计算。gydF4y2Ba

2.5.2。硫酸铵沉淀gydF4y2Ba

固体硫酸铵添加到无细胞提取物,33%饱和度,然后75%饱和度。颗粒控股主要蔗糖酶活动终于悬浮在缓冲区中含有蛋白酶抑制剂和立即考虑进一步净化。gydF4y2Ba

2.5.3。凝胶排阻色谱(SEC)gydF4y2Ba

后硫酸铵浓度resuspended样本(活跃的一部分)加载到Sephacryl s - 200列(120×1厘米)preequilibrated与缓冲的蛋白质被筛选了与缓冲的流量22毫升/小时。蛋白质分数/管含蔗糖酶的主要活动集中净化的进一步措施。gydF4y2Ba

2.5.4。离子交换色谱法(IEC)gydF4y2Ba

一列(20×2厘米)挤满了CM-Cellulose矩阵,肿胀一夜之间在室温下床体积的10×2厘米。汇集活跃的酶s - 200列的分数通过CM-Cellulose(阳离子交换剂)列preequilibrated缓冲进一步净化。包含主要的蔗糖酶活性的主要材料汇集立即受到DEAE交联葡聚糖(阴离子交换剂)列一张床体积与缓冲preequilibrated a包含酶的结合蛋白质分数被筛选了0 - 0.2 M氯化钠盐梯度。混合分数从DEAE交联葡聚糖通过s - 200列(gydF4y2Ba厘米)再平衡semipurified酶样品与20毫米磷酸钾缓冲pH值7.4羟磷灰石批量吸附。gydF4y2Ba

2.5.5。羟磷灰石批量吸附gydF4y2Ba

羟磷灰石(gydF4y2Ba10gydF4y2Ba矩阵是平衡与20毫米磷酸钾缓冲pH值7.4。混合分数从s - 200列包含主要的蔗糖酶活性受到羟磷灰石批量吸附和偶尔允许正常酶混合搅拌。矩阵定居下来后,未被吸收的内容,主要是纯化酶,是由一个低旋转离心收集在4°C。上层清液被发现含有纯化酶> 95%。gydF4y2Ba

2.6。蛋白质估计gydF4y2Ba

修改洛瑞法用于蛋白质估计(gydF4y2Ba11gydF4y2Ba)与BSA作为一个标准。gydF4y2Ba

2.7。凝胶电泳和染色的活动gydF4y2Ba

聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)在本地和变性条件下进行根据Laemmli不连续Tris-glycine缓冲体系(gydF4y2Ba12gydF4y2Ba)进行小修改。在活动过程中染色的凝胶切成两半,每一半轴承相同的样本。5.5%的一部分本地凝胶含有纯化胞内蔗糖酶酶孵化在50毫米和100毫米蔗糖Tris-HCl 2小时30°C,后跟一个用蒸馏水(gydF4y2Ba13gydF4y2Ba]。这种凝胶当时沉浸在1 M的碘乙酰胺在室温下15分钟。双蒸馏水洗涤后,凝胶在0.5 N孵化氢氧化钠含有2% 2,3,5-Triphenyl四唑氯(TTC) 15分钟在沸水浴直到扩散粉红色背景颜色的发展。适当的鄙视后7.5%的醋酸,照片拍摄立即随着颜色的发展持续不久。随后其他凝胶部分彩色coomassie r - 250年相应的蛋白带识别。gydF4y2Ba

2.8。净化细胞外的蔗糖酶gydF4y2Ba

Promastigote细胞在液体培养基为66 - 67小时颗粒状的离心分离和胞外媒体是semidryness冻干。重组在50 mM磷酸钾缓冲,pH值7.4,集中到~ 1.5毫升用centricon膜滤器YM 10。相同的胞内蔗糖酶纯化过程后,滤液被允许通过preequilibrated s - 200列。随后的离子交换色谱法和羟磷灰石进行批量吸附步骤获得纯化细胞外酶。gydF4y2Ba

2.9。酶化验gydF4y2Ba

轻微的修改梅塞尔集团和Dahlqvist的方法(gydF4y2Ba14gydF4y2Ba蔗糖酶活性估计。酶反应是由添加酶的测定混合物(50毫米醋酸钠,pH值5.5/6.0)的4毫米的衬底蔗糖和热失活反应停止后30分钟30°C的孵化。葡萄糖的比色估计是在505海里。一个酶活力单位是指大量的酶,这种酶水解蔗糖生产1摩尔的葡萄糖在30°C。gydF4y2Ba

2.10。最佳温度和热稳定性gydF4y2Ba

酶的最适温度是评价通过测量蔗糖酶活性在50毫米醋酸钠缓冲(pH值5.5 - -6.0)在不同的温度。热稳定性是由preincubating纯化酶在一系列温度为30分钟(4-60°C)前化验标准活动。gydF4y2Ba

2.11。最佳pH值gydF4y2Ba

纯化酶活性在50 mM化验的四种不同缓冲代理,glycine-HCl (pH值2.0 - -3.0),醋酸(pH值4.0 - -6.0),磷酸(pH值6.0 - -7.0),和Tris-HCl (pH值7.0 - -8.0),为了记录概要文件在标准试验条件下pH值。gydF4y2Ba

2.12。金属离子对胞内蔗糖酶活性的影响gydF4y2Ba

金属离子对酶活性的影响确定preincubating纯化后酶与不同的金属离子如ZnClgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba,HgClgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba,CaClgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba氯化钾,AgNOgydF4y2Ba_3gydF4y2Ba,FeSOgydF4y2Ba_4gydF4y2Ba,MgSOgydF4y2Ba_4gydF4y2Ba,MnSOgydF4y2Ba_4gydF4y2Ba,CuSOgydF4y2Ba_4gydF4y2Ba,CoSOgydF4y2Ba_4gydF4y2Ba,你gydF4y2Ba_4gydF4y2Ba在所需的浓度,一次10分钟30°C。标准试验条件后酶活性测定和百分数表示的控制(没有金属离子)。gydF4y2Ba

3所示。结果gydF4y2Ba

在目前研究内部和细胞外酶同时纯化的胞内蔗糖酶酶相比,细胞外。证实了胞内蔗糖酶的分子大小凝胶排阻层析法和凝胶分析本土活动染色紧随其后。gydF4y2Ba

3.1。分子量测定gydF4y2Ba

3.1.1。凝胶排阻层析法gydF4y2Ba

凝胶排阻层析法提取游离的硫酸铵沉淀紧随其后显示胞内蔗糖酶活性(图gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)和蛋白质的分子质量从凝胶过滤色谱法估计是大约112 kDa(图gydF4y2Ba1gydF4y2Ba插图)。s - 200的活跃的分数列(表汇集,通过不同的步骤gydF4y2Ba1gydF4y2Ba)获得纯活性蛋白质。整个净化步骤产生近330倍的纯化胞内蔗糖酶。gydF4y2Ba

3.1.2。相对迁移率gydF4y2Ba

一个乐队在sds - page(图的存在gydF4y2Ba2gydF4y2Ba(一)揭示酶的纯度。估计大小的蛋白质几乎是56 kDa计算的相对移动和已知的标记蛋白的分子量(图gydF4y2Ba2gydF4y2Ba(b))。56 kDa蛋白大小近一半的大小估计从凝胶过滤色谱法(112 kDa。图gydF4y2Ba1gydF4y2Ba插图),这可能表示homodimerization酶蔗糖酶的原生状态。gydF4y2Ba

3.1.3。活性染色gydF4y2Ba

确定酶的测试诊断是定位在聚丙烯酰胺凝胶酶活性。因此,确认胞内蔗糖酶的位置在electrophoretically分离蛋白质,加布里埃尔的改性方法和王gydF4y2Ba13gydF4y2Ba)是用于本机胞内蔗糖酶的底物染色。纯化蛋白显示出深粉红色紫色乐队,代表活性蛋白质(图gydF4y2Ba2gydF4y2Ba(c))。随后的单一乐队coomassie对应于基质染色(图的染色gydF4y2Ba2gydF4y2Ba(d))证实了其近似112 kDa的大小。这个结果证实与蛋白质凝胶过滤层析的大小估计。gydF4y2Ba

3.2。酶动力学的原油和纯化胞内蔗糖酶gydF4y2Ba

胞内蔗糖酶活性在不同的底物浓度测量。底物浓度变化的范围从-10年的0.05毫米到0.4 - -5.0毫米,分别估算了原油和纯化胞内蔗糖酶酶活性。原油Lineweaver-Burk阴谋的胞内蔗糖酶酶活性显示了gydF4y2Ba~ 6.6毫米的gydF4y2Ba~ 125 nmol /分钟/毫克(图gydF4y2Ba3(一个)gydF4y2Ba),而纯化胞内酶更有亲和力对衬底从Lineweaver-Burk情节和估计计算gydF4y2Ba和gydF4y2Ba~ 1.6 mM ~ 190.5 nmol /分钟/毫克,分别(图gydF4y2Ba3 (b)gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

3.3。底物特异性gydF4y2Ba

不同的二糖被用来检查纯化胞内酶的底物特异性。不同底物的酶在存在孵化,即棉子糖、蜜二糖,麦芽糖,海藻糖,palatinose,相应的酶活性测定根据梅塞尔集团和Dahlqvist [gydF4y2Ba14gydF4y2Ba)相比,蔗糖作为控制(100%)。的底物特异性gydF4y2Ba利什曼虫gydF4y2Ba胞内蔗糖酶在本质上是非常具体的,因为它无法水解蔗糖以外的任何上述基板和部分棉子糖浓度范围从1到10毫米(数据未显示)。gydF4y2Ba

3.4。分子质量和细胞外的蔗糖酶动力学gydF4y2Ba

细胞外的蔗糖酶的分子质量,取决于凝胶排阻层析法和sds - page(数据未显示),是~ 70.79 kDa。在动力学研究中,净化细胞外的酶活性蔗糖酶被孵化估计不同底物浓度(0.125 8毫米)30分钟30°C。双倒数的反应的速度和底物显示了gydF4y2Ba纯化细胞外蔗糖酶的~ 4.4毫米,证实纯化细胞外蔗糖酶的报告gydF4y2Ba利什曼虫gydF4y2Ba由Gontijo et al。gydF4y2Ba15gydF4y2Ba]。结果表明纯化细胞外蔗糖酶几乎三倍比胞内蔗糖酶酶底物的亲和力降低。gydF4y2Ba

净化和随后的动能纯化酶的研究进一步证实,至少存在两个不同形式的酶蔗糖酶gydF4y2Bal . donovanigydF4y2Bapromastigotes。gydF4y2Ba

3.5。耐温性和pH敏感性内部和细胞外的蔗糖酶gydF4y2Ba

胞内蔗糖酶也会受到高温和失去50%的活动增加的温度高于45°C。另一方面,细胞外的蔗糖酶主要是稳定50°C和广泛的温度公差(图gydF4y2Ba4(一)gydF4y2Ba)。胞内蔗糖酶显示~ 20%的最大活动在这个温度然后释放完全与温度的进一步提高。然而纯化酶显示最大活性在30°C(数据未显示)。gydF4y2Ba

有趣的是胞内蔗糖酶显示近80%的活动在pH值的范围从4.5到7.0(图gydF4y2Ba4 (b)gydF4y2Ba);然而,最优酶活性发生在pH值为6.0(数据未显示)。在标准试验条件的最大纯化细胞外酶活性蔗糖酶出现在pH值为5.5(数据未显示)尽管超过80%的活动之间观察到的pH值(图5.0和6.5gydF4y2Ba4 (b)gydF4y2Ba)。gydF4y2Ba

3.6。金属离子对胞内蔗糖酶活性的影响gydF4y2Ba

酶活性而在各种金属离子的存在在1毫米浓度呈现在图gydF4y2Ba5gydF4y2Ba。ZnCl等金属离子gydF4y2Ba_2gydF4y2Ba,AgNOgydF4y2Ba_3gydF4y2Ba,HgClgydF4y2Ba_2gydF4y2Ba强烈抑制酶活性,而温和的抑制活性的硫酸钴,镍,铜离子。gydF4y2Ba

4所示。讨论gydF4y2Ba

昆虫的寄生虫向量暴露于一个完全不同的比他们的脊椎动物宿主微环境。gydF4y2Ba利什曼虫gydF4y2Bapromastigotes拥有蔗糖转运蛋白的质膜(gydF4y2Ba5gydF4y2Ba),这有助于蔗糖的内化,主要食物组成的昆虫肠道。解决这个问题在进一步积累蔗糖的利用gydF4y2Bal . donovanigydF4y2Bapromastigotes我们专注于蔗糖代谢酶蔗糖酶。最近我们报道gydF4y2Ba5gydF4y2Ba],大多数酶仍是细胞内胞内蔗糖酶和其他分泌细胞外蔗糖酶gydF4y2Ba。gydF4y2Ba这些蔗糖酶酶是自然界中本构;酶的特定活动的存在与否是相同的外部压力(即。在媒体上,蔗糖)。的gydF4y2Ba胞内蔗糖酶的提取和纯化的游离形式明显不同于对方。粗酶对底物的亲和力降低可能发生的干扰胞质抑制因素。gydF4y2Ba

独特的酶蔗糖酶的特征属性显示的可能性有两种形式的酶gydF4y2Ba利什曼虫gydF4y2Bapromastigotes, 56 ~ 71 kDa单体细胞外蔗糖酶和~ kDa为胞内蔗糖酶。所以有一个概率,单体的胞内蔗糖酶活性催化部位可能转译后的修改成为细胞外蔗糖酶(gydF4y2Ba8gydF4y2Ba]。然而,确定每个单体催化地活跃与否,需要做进一步的研究。的显著差异观察动力学两种形式之间的蔗糖酶可能是由于不同的催化网站的可访问性和效率。gydF4y2Ba

它已经建立了两种形式的转化酶细胞外和细胞内的一个gydF4y2Ba酿酒酵母gydF4y2Ba差别并不是很大gydF4y2Ba或速度,稳定pH值变化(gydF4y2Ba16gydF4y2Ba]。根据沃利斯et al。gydF4y2Ba17gydF4y2Ba]gydF4y2Ba黑曲霉gydF4y2Ba分泌两种fructofuranosidases和两个二聚体在自然考虑到蛋白质构象大小在sds - page和原生状态。酶的亲和力在某种程度上对蔗糖和棉子糖;然而,他们的亲和力随其他基质。在gydF4y2Ba利什曼虫gydF4y2Ba细胞外的各种温度公差蔗糖酶可能是在外面的温度保持功能;相比之下胞内蔗糖酶有轻微的耐热性(图gydF4y2Ba4(一)gydF4y2Ba)。强烈抑制细胞内酶活性与硫醇修饰试剂5、5′-dithiobis-2-nitrobenzoic酸(DTNB) N-ethylmaleimide (NEM)和p-chloromercuribenzoate (PCMB)表明酶的活性位点可能拥有sh半个(数据没有显示)。这一发现证实纯化b-fructofuranosidase的报告gydF4y2Bab .对象gydF4y2Ba(gydF4y2Ba18gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

酶的特性和初步数据净化胞内蔗糖酶的N端序列显示其相当大的糖苷酶同源性,细菌gydF4y2BaβgydF4y2Ba-fructofuranosidase类酶(gydF4y2Ba19gydF4y2Ba),更广泛的标题下糖苷酶(辛格和Mandal未发表的数据)。这支持细菌的发现的性质在许多酶,代谢机械的谎言gydF4y2Ba利什曼虫gydF4y2Ba(gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba]。的gydF4y2BaβgydF4y2Ba32 -fructofuranosidases属于糖基水解酶家族的蛋白质和催化蔗糖水解的葡萄糖和果糖。文献调查表明bifidobacterialgydF4y2BaβgydF4y2Ba-fructofuranosidases也有活动对基质如raftilose链越长,raftiline,菊粉(gydF4y2Ba21gydF4y2Ba]。相关的细胞内的系统发育分析fructofuranosidases包括一大群sucrose-6P-hydrolases,这些都是身体与蔗糖转运蛋白基因编码的分gydF4y2Ba20.gydF4y2Ba]。最近莉达et al。gydF4y2Ba22gydF4y2Ba发现了分泌转化酶(LdINV)基因的gydF4y2Ba利什曼虫gydF4y2Bapromastigotes也确定了beta-fructofuranosidase-like基因的同源性搜索LdINV,编码一个120 kDa的蛋白质。来验证我们的初步结果还需要更进一步的研究来确定这种基因编码胞内蔗糖酶。gydF4y2Ba

葡萄糖的吸收和随后的新陈代谢在锥虫科的一个例子是一个调整导致最大能源效率(gydF4y2Ba23gydF4y2Ba]。然而,它因物种而异gydF4y2Bal . donovanigydF4y2Ba面临不同的条件白蛉肠道和争取内部能量的体内平衡甚至不惜牺牲。因此它可能发生,两个不同的代谢策略代表两种对立的趋势:蔗糖的吸收和利用率的能力通过水解蔗糖葡萄糖和果糖是一种有效适应短期牺牲灵活性和另一方面的能力迅速适应环境变化的能量。gydF4y2Ba

有趣的是最近Dirkx et al。gydF4y2Ba24gydF4y2Ba报道称,鞭毛原生动物gydF4y2Ba阴道毛滴虫gydF4y2Ba基因组包含近11假定的蔗糖转运蛋白和一个假定的ß-fructofuranosidase(蔗糖酶)。因此,机械的胞内蔗糖的吸收和裂解似乎存在于原生动物的细胞溶解产物保留转化酶活性。可能最近的共同祖先gydF4y2Bat .鞘突gydF4y2Ba- - -生活是肠道里的原生生物,能力利用果糖含有化合物可能是有利的(gydF4y2Ba25gydF4y2Ba]。gydF4y2Ba

的代表Kinetoplastids分布在各种不同的环境中,在适当的时候,他们中的许多人成为昆虫、寄生虫水蛭,主要脊椎动物血统,甚至植物。Kinetoplastids进化到digenetic寄生虫,涉及两个不同的主机,甚至不同的宿主组织,他们必须找到方法有效地适应代谢在高度不同的环境。这意味着发展的机制来调节不同的表达他们的代谢在不同的生命周期阶段。因此代谢灵活性一定是高度选择性的优势在这个进化的不同阶段的场景。Trypanosomatids显然有一个相当数量的植物如特征和几种植物如基因编码的蛋白质同源染色体中发现叶绿体或植物和藻类的细胞溶质。事实上,优雅的研究证实了之前的许多基因在不同Trypanosomatids orthologues [gydF4y2Ba26gydF4y2Ba]。因此gydF4y2Ba利什曼虫,gydF4y2BaTrypanosomatid寄生虫属于动体目,加上眼虫,正在Euglenozoa中。在这样的背景下,因此,观察到这一点并不奇怪gydF4y2Ba利什曼虫gydF4y2Ba拥有一个高效的蔗糖转运蛋白和代谢机制。最近的报告在胞内蔗糖酶BfrA,gydF4y2Bal .主要gydF4y2Ba(gydF4y2Ba27gydF4y2Ba),进一步支持我们的假设在胞内蔗糖酶的参与gydF4y2Bal . donovanigydF4y2Bapromastigotes蔗糖代谢途径。我们有限的研究结果部分努力探索这个非常有趣的代谢物。结论只能是未来的知识作用的蔗糖酶酶生理和寄生虫的生命周期会导致许多的开放途径向更好的感知寄生生物,因此遏制这种可怕的疾病。gydF4y2Ba

信息披露gydF4y2Ba

当前地址Arpita辛格是弗吉尼亚大学医学系,传染病,夏洛茨维尔,弗吉尼亚州22904 - 4101,美国。相应的地址Debjani Mandal健康科学统一服务大学,生物化学与分子生物学、医学院的贝塞斯达,MD 20814,美国。gydF4y2Ba

相互竞争的利益gydF4y2Ba

作者宣称没有利益冲突。gydF4y2Ba

确认gydF4y2Ba

作者感谢教授罗伊,前主任IICB,加尔各答,印度、支持这项工作和博士Tanmoy穆克吉(IICB,加尔各答,印度)设计实验的有益的建议和意见。他们感谢Chowdhury阿希斯博士(美国马里兰州USUHS)精心编辑。gydF4y2Ba

引用gydF4y2Ba

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