文摘
阿尔茨海默氏症是一种神经退行性疾病的特点是有毒的积累β淀粉样蛋白(a-)肽在大脑中导致进步的神经元死亡。一个肽是由天门冬氨酰proteinase-mediated乳沟较大的淀粉样前体蛋白(APP)。相比之下这个有害的“amyloidogenic”形式的蛋白质水解,一系列的锌金属蛋白酶可以通过另一种“nonamyloidogenic”过程应用途径蛋白质在其裂解地区的形成完整的一个肽。此外,锌金属蛋白酶家族的其他成员可以降低的肽。因此,锌金属蛋白酶,下调一个集体,是关键生成和提高其降解。锌金属蛋白酶的作用在这个“积极的一面的蛋白水解作用在阿尔茨海默氏症”,讨论了当前纸。
1。介绍
阿尔茨海默病(AD)是老年痴呆的主要形式,约占三分之二的所有情况下表现出来的患病率5%的人年龄超过65岁。该病临床表现为进行性认知障碍,包括决策、受损方向和判断经常陪同,在后期阶段,psychobehavioural障碍和语言障碍。广告最初是1906年由德国精神病学家和神经病理学家,阿洛伊斯•阿尔茨海默,但这是他的同事,埃米尔Kraepelin是谁首先创造了这个词“老年痴呆症”[1]。阿尔茨海默所说我们现在知道的两个主要的病理特征的大脑AD-afflicted个人、淀粉样蛋白(也称为老年性)斑块和神经纤维缠结(非功能性测试)2]。在分子水平上,非功能性测试由τ,microtubule-associated蛋白质,在广告中,变得过度磷酸化,形成不溶性细胞内原纤维(3]。淀粉样斑块,另一方面,是细胞外结构由中山氨基酸肽称为β淀粉样蛋白(A)肽。
虽然感激是很重要的,广告是一种多因素疾病4),一个关键的疾病的因果关系理论是“淀粉样蛋白级联假说”,即肽神经元有毒性的主要原因(5]。初始版本的假说提出,成熟的淀粉样原纤维和斑块在大脑中负责观察神经毒性,但最近化身指向前面的阶段,较小的可溶性总量是广告的主要原因6,7]。无论如何,很明显,在增加在大脑中有一个角色在AD发病机制。
蛋白质水解规定的水平肽在第一个实例和生成速率退化在第二。因此,蛋白水解酶活动的良好平衡的大脑保持水平检查。虽然各种蛋白酶类直接或间接参与的代谢,尤其是关键的锌金属蛋白酶表达下调生成和提高其降解。锌金属蛋白酶的作用这个蛋白水解作用在阿尔茨海默氏症”“积极的一面,将讨论在当前的纸。
2。一个肽一代:Nonamyloidogenic之间的平衡和Amyloidogenic蛋白水解作用
一个肽是产生一个更大的前体蛋白,淀粉样前体蛋白(APP),一种无处不在的我不为人知的细胞表面蛋白的生理功能(图1)[8]。蛋白质存在于多个亚型由于可变剪接的19个外显子编码应用程序基因(9]。编码外显子7 57-amino酸地区有相当大的同源性Kunitz-type丝氨酸蛋白酶抑制剂(KPI)和存在于更大的应用程序770年和应用751年亚型,但缺席较小的应用程序695年蛋白质。
APP holoprotein可以通过一个amyloidogenic通路(图proteolytically退化1和了10]),包括最初的乳沟分泌酶(网站APP-cleaving酶1;BACE1)生成可溶性n端片段称为酸式焦磷酸钠以及一个c端膜相关片段(CTF)的99个氨基酸。C99的片段然后进一步处理γ分泌酶复杂的生产肽和应用胞内域(上市)11]。另外,应用程序可以通过处理涉及nonamyloidogenic路线分泌酶内解理域(综述(12])。后者解理发生c端一侧Lys687(应用程序770年编号)13),排除了肽的形成,生成可溶性的应用而不是ectodomain(酸式焦磷酸钠)以及清洁技术基金的83个氨基酸(C83)(图1)。
3所示。锌金属蛋白酶的预防一代
的-secretase-mediated nonamyloidogenic处理应用程序(图1)代表一个积极方面的广告,因为它排除了蛋白质水解形成完整的一个肽,即有一个互惠nonamyloidogenic和amyloidogenic应用处理之间的关系。Skovronsky et al。14]表明,激活的分泌酶应用处理使用佛波醇酯稳定转染CHO细胞的应用695年导致减少酸式焦磷酸钠和一个生产。在在活的有机体内水平,超表达的分泌酶活动应用程序([V717I])转基因小鼠增加酸式焦磷酸钠代,相应的形成肽(15]。蛋白水解作用的应用-secretases也可能被视为一个积极的酸式焦磷酸钠的事件生成增强nonneuronal和神经元前体细胞的增殖(16- - - - - -18),刺激神经突延伸在永生化神经细胞株(19),调节突触传播,并对缺血性神经,excitotoxic,和创伤性脑损伤20.- - - - - -24]。在活的有机体内酸式焦磷酸钠的颅内注射已经被证明可以增强记忆性能在成年大鼠(25),和一个截断应用删除对应于酸式焦磷酸钠的变体已被证明营救解剖、行为和电生理异常APP-deficient老鼠(26)进一步强调生理酸式焦磷酸钠的重要性的一代。
鉴于nonamyloidogenic应用程序处理的积极方面,的身份分泌酶是阿尔茨海默氏症研究人员极大的兴趣。第一个线索在这方面证明了的时候分泌酶是一个完整的膜蛋白酶与其偏好Lys687-Leu688肽键的应用决定更多的接近债券比的绝对氨基酸特异性膜裂解位点(27,28]。利用一系列职业专用蛋白酶抑制剂,它随后被证明只有锌螯合剂,1,10-phenanthroline,造成显著的应用从原油膜制剂释放的抑制系统[游离29日首次暗示,一个或多个锌金属蛋白酶构成分泌酶的活动。一些团体后报道,活动定点batimastat锌螯合化合物和TAPI-2(图2)抑制酸式焦磷酸钠的释放的条件媒体多种细胞系(29日- - - - - -31日]。
(一)
(b)
(c)
(d)
一系列的研究表明,锌金属蛋白酶活动负责生成酸式焦磷酸钠类似于负责proteolytically“脱落”其他底物蛋白质从细胞表面。例如,Parvathy et al。30.)的应用相比,血管紧张素转换酶(ACE;EC 3.4.15.1)证明释放蛋白转染IMR-32细胞被batimastat氧肟抗酸化合物,抑制marimastat, BB2116(图2与集成电路50值较低的微摩尔的范围。此外,帕金et al。32]表明,一系列异羟肟抗酸化合物未能区分负责流应用的蛋白酶和人类朊蛋白的细胞形式,它随后被证明的确蛋白质都掉同样的酶(33]。事实上,它已成为明显分泌酶的活动是由一个或多个成员亚当(disintegrin和金属蛋白酶)锌金属蛋白酶家族现在负责脱落的细胞表面积分膜蛋白(了34])。
3.1。亚当斯家族锌金属蛋白酶的应用-Secretases
disintegrin和金属蛋白酶(亚当斯)是属于metzincin锌金属蛋白酶超家族。他们是I型跨膜糖蛋白,构成一些四十个成员的家庭(34)有一个共同的模块化ectodomain结构组成的一个氨基端prodomain,催化领域,disintegrin域和cysteine-rich域(图3)。亚当prodomain似乎必不可少的蛋白质成熟保持金属蛋白酶网站新合成的蛋白质的活性构象的半胱氨酸开关机制(35,36]直到域是由激素原转化酶(pc)如furin和PC7 [15,35,37,38]。而且这个领域似乎是必不可少的至少两个亚当的正确折叠家庭成员(ADAM10和17)作为其删除导致催化地活动形式的蛋白质(35,39];在ADAM10的情况下,酶的催化活性可以通过cotransfection获救的活动构造一种编码仅prodomain (35]。
prodomain是紧随其后的是一个地区,在十七岁的亚当斯,包含共识序列,预测HEXGHXXGXXHD,活性锌金属蛋白酶的催化部位(34]。这个催化域后跟disintegrin域,一个60 - 90氨基酸残基伸展轴承有限序列同源性的disintegrin蛋白质从蛇毒分离和参与各种信息附着事件(40- - - - - -45]。最后,亚当斯参与的胞质域绑定各种适配器蛋白质可能影响成熟,贩卖,或蛋白水解酶的活动46]。
它正变得越来越明显亚当分泌酶活动是由一个以上的家庭成员的资料这些zinc-dependent APP-cleaving酶不同细胞系之间明显不同。
3.1.1。ADAM10
ADAM10 (EC 3.4.24.81)于1989年首次发现的肽序列纯化牛脑髓磷脂膜的准备和称为MADM(哺乳动物Disintegrin Metalloprotease) (47]。克隆后,第一次分配给酶催化活性的能力降低髓磷脂碱性蛋白(MBP) [48]。像其他家庭成员亚当,ADAM10模块化ectodomain结构和合成为一个不活跃的发酵菌酶切除后才被激活的prodomain [35]。实际上,重组ADAM10 prodomain纯化大肠杆菌是一个强有力的和选择性抑制剂的酶在体外(49]。ADAM10的催化域包含锌结合共识主题,HEXGHXXGXXHD,而糖基化网站包含high-mannose和复杂N聚糖坐落在催化和disintegrin域(50]。此外,一个N439突变N糖基化位点的酶已被证明的易感性增加ADAM10蛋白水解降解[50]。
人类ADAM10的基因位点是15号染色体上(15 q21.3-q23)和小鼠的染色体951,52),和两个序列长度大约160 kb。核心启动子区域在人类基因已经被删除分析核苷酸来bp代表包含功能性TATA-less启动子结合位点对普遍服务基金,Sp1和视黄酸受体(53,54]。事实上,NAD-dependant脱乙酰酶直接SIRT1激活转录ADAM10的基因可能通过脱乙酰作用和coactivation视黄酸受体β(55]。
鉴于ADAM10的最初报道衬底(MBP)是一种胞质蛋白和ADAM10本身是一种膜蛋白,这种基质是一种不太可能的生理意义。然而,现在知道ADAM10的锌金属蛋白酶活动负责proteolytically脱落四十多个积分从细胞表面膜基质包括生长因子(例如,betacellulin和表皮生长因子),粘附蛋白(例如,L1),其他蛋白酶(如BACE1)和一系列其他基质包括人类朊蛋白(33]随着切口受体及其配体之一,δ(56]。
虽然现在知道相当范围的亚当斯可能构成分泌酶的活动,这无疑是ADAM10引发了大部分研究兴趣作为应用裂开酶。Lammich et al。57]首先表明牛ADAM10 HEK细胞中过表达增强的底面解理应用。作者进一步证明了应用裂开活动刺激细胞的治疗与佛波醇酯(监管劈理)也增强了ADAM10表明酶的作用在这两个基础和监管应用蛋白质水解。此外,占主导地位的否定形式ADAM10的点突变的活性部位(E384A)抑制内生HEK细胞(分泌酶活动57]。Furin-deficient lovos细胞缺乏监管分泌酶活动也被用来证明过度ADAM10增强的基底酸式焦磷酸钠的生产(38]。
ADAM10的参与锌metalloproteinase-mediated劈理的应用程序还支持通过研究使用合成肽底物。一个18-mer肽生成的分泌酶裂解位点被纯化牛肾裂解ADAM10的生理有关分泌酶裂解位点(Lys16-Leu17(地区)57]。有趣的是,天然的插入应用突变与脑相关出血由于淀粉样血管病(A21G) [58到类似的合成肽底物导致乳沟ADAM10以较慢的速度比野生型序列肽。最后,恋情et al。59证明一个11-mer肽生成的分泌酶裂解,裂解位点的重组可溶性形式人类ADAM10催化领域。
的在体外劈理的合成肽酶底物的相似之处往往承担有限的乳沟全身生理蛋白质基质。不幸的是,这项研究ADAM10-mediated应用乳沟在活的有机体内在一段时间内,有限的胚胎和围产期死亡率ADAM10基因敲除小鼠(60]。然而,在2004年,人类应用overexpressing老鼠交叉与ADAM10转基因动物,和合成子代表现出增强酸式焦磷酸钠的生产在他们的大脑,相应的(15]。相比之下,十字路口的显性负ADAM10变异老鼠APP转基因动物了相反的效果,抑制分泌酶劈理的应用与略有增加生产。这些研究清楚地表明,ADAM10的锌金属蛋白酶活动竞争的应用程序的能力在活的有机体内amyloidogenic途径的酶。
一些团体已经展示了一个ADAM10贩运和成熟之间的联系,和锌金属蛋白酶活动负责代酸式焦磷酸钠。PC7的过度和furin HEK细胞转染和酸式焦磷酸钠ADAM10导致更大的增加生产比当酶转染到细胞只表达内源性ADAM10 [35)表明这是去除ADAM10的专门prodomain和随后的激活相关的酶的水平分泌酶的活动。ADAM10的成熟也可以化学操作,以提高酸式焦磷酸钠生产。Epigallocatechin-3-gallate (EGCG),绿茶的成分,增加了成熟的水平60 kDa ADAM10的形式通过一个特定于ADAM10的作用机制(酸式焦磷酸钠的增加生产带来的EGCG只有受损细胞接受ADAM10 siRNA和不接受siRNA针对亚当斯9和17)(61年]。多奈哌齐的乙酰胆碱酯酶抑制剂,也与此同时增加酸式焦磷酸钠生产和成熟ADAM10 SH-SY5Y膜部分的细胞,产生影响的预处理可以预防细胞衣霉素或brefeldin暗示的作用机制涉及走私/成熟ADAM10的蛋白质(62年]。最后,似乎其他蛋白质所需的贩卖ADAM10会影响酸式焦磷酸钠生产。马塞洛et al。63年]表明synapse-associated蛋白- 97 (SAP97),一种蛋白质参与动态贩卖蛋白质易刺激的突触,负责指挥ADAM10的突触后膜通过直接相互作用通过其Src同源性3域。作者最近报道(64年]ADAM10包含一个arginine-rich((723)存款准备金率)序列的胞质域负责保持蛋白质在内质网(ER),蛋白质序列突变时,退出ER。然而,SAP97并未被认为是参与调节这ER退出建议替代蛋白质绑定合作伙伴在这次事件中所扮演的角色。
3.1.2。ADAM17
ADAM17 (EC 3.4.24.86)最初被确定为蛋白酶负责减少炎性细胞因子肿瘤坏死因子(TNF)从膜相关前兆肿瘤坏死因子(65年,66年),因此,或者称为肿瘤坏死因子-转换酶(TACE)。ADAM17是I型积分膜锌金属蛋白酶、催化领域已cocrystallised的氧肟抗酸抑制剂,Immunex化合物3,解决结构为2.0Ǻ解决方案(67年]。
像ADAM10 ADAM17已经涉及到大范围的细胞表面蛋白的蛋白水解作用不同的功能(了68年])。与应用的乳沟,蛋白质的基底脱落在主要影响胚胎成纤维细胞来源于ADAM17基因敲除小鼠,而佛波醇酯监管乳沟被发现不足(69年,70年]。同样,ADAM17抑制剂,cp - 661631抑制监管但不是本构酸式焦磷酸钠人类分泌物主要神经元文化没有影响肽生产(71年]。根据后者的观察,它也许是小惊喜最近一直不显示ADAM10和ADAM17或9是相关的生理基础分泌酶活动的主要神经元(72年]。然而,有相当多的证据表明,这种酶是参与了其他各种细胞系的基础应用脱落。只本构而不是muscarine-regulated应用乳沟是增强和ADAM17 HEK细胞转染73年]。同样,Hiraoka et al。74年)表明,过度的ADAM17 COS7细胞导致基底酸式焦磷酸钠显著增加分泌。相比之下Asai et al。75年]使用短干扰rna (siRNAs)耗尽ADAM17蛋白质含量在人类胶质母细胞瘤A172细胞随后表明蛋白酶参与了本构和内生监管分泌酶处理应用。因此,数据来源于在体外细胞培养的研究似乎表明,ADAM17普遍参与的监管处理应用,但其参与本构酸式焦磷酸钠生产更细胞泛型类型。
研究使用合成肽基板提供证明ADAM17参与不太有说服力分泌酶处理应用。巴克斯鲍姆et al。76年)报道,重组ADAM17裂解合成底物生成的分泌酶裂解位点在Lys16-Leu17(应用程序肽键编号)。然而,作者并没有显示数据有关的动力学乳沟。相比之下,Mohan et al。77年]研究了合成的动力学乳沟TNF衬底的重组和本地ADAM17和比较了乳沟的其他几个提议ADAM17基质,包括应用。作者发现ADAM17高效裂解肿瘤坏死因子底物只有裂解APP-derived肽底物在高酶浓度和延长反应时间表明应用程序可能是一个可怜的酶的底物在活的有机体内。
3.1.3。ADAM9和ADAM15
互补脱氧核糖核酸编码的锌金属蛋白酶ADAM9 (EC 3.4.24.B9)隔离来自小鼠肺cDNA库(78年]。最初人们认为酶可能负有直接责任,至少部分的-secretase-mediated处理应用。ADAM9和应用因为细胞的过度导致增加佛波醇ester-regulated代酸式焦磷酸钠(79年]。然而,作者在本研究没有确定确切的网站的乳沟ADAM9留下的可能性有债券以外的特异性酶的“普通”分泌酶裂解位点(Lys16-Leu17)。后者是肯定考虑到一种可溶性重组的可能性ADAM9可以打通12-mer合成肽生成应用程序分泌酶裂解位点His14-Gln15债券中地区(80年]。然而,分泌的ADAM9形式,coexpressed应用在CHO细胞时,已经被证明可以增强佛波醇ester-regulated APP乳沟Lys16-Leu17 [81年]。
考虑到启动子多态性增强ADAM9转录是预防零星的广告82年),似乎有一个锌金属蛋白酶和疾病之间的联系。然而,研究生理相关的可能性直接劈理的应用ADAM9几乎在最近几年逐渐消失。相反,现在看来,ADAM9影响应用程序处理以间接的方式通过影响ADAM10的瞬态超表达前酶与野生型相比成纤维细胞,成纤维细胞没有影响酸式焦磷酸钠生产(83年]。最近其实一直在我们实验室证明ADAM9棚屋ADAM10从细胞表面(84年)尽管目前尚不清楚这一事件将如何提高分泌酶的应用,我们还证明了一个截断可溶性ADAM10构造类似于流形式的酶没有提高酸式焦磷酸钠生产尽管对合成肽底物催化地活跃。这一观察Tousseyn et al。85年]表明ADAM9和ADAM15能够剥离ADAM10提出证据表明c端膜相关ADAM10片段ADAM9乳沟的进一步加工后生成的解放一个胞内域参与核信号。后者观察打开的可能性ADAM9-mediated ADAM10核信号可能增强分泌酶劈理的应用。
3.1.4。应用程序的其他亚当斯-Secretases
虽然现在看来,ADAM10生理有关分泌酶在初级神经元(72年],许多附加亚当斯超过亚当斯9和17涉及应用程序处理。邹et al。86年)表明,ADAM33 (EC 3.4.24. -)可以打通合成分泌酶底物,但解理发生在His14-Gln15而不是Lys16-Leu17和酶效率很低使它不太可能是一个生理有关分泌酶。此外,nautica et al。87年)表明,ADAM8 (EC 3.4.24. -)可以用类似HEK细胞分裂应用ADAM10的效率。最后,田边et al。88年)表明,过度的ADAM19 A172细胞(EC 3.4.24.)增强本构酸式焦磷酸钠生产和内源性酶siRNA损耗的降低酸式焦磷酸钠生产约21%。然而,看起来ADAM8和ADAM19,在最好的情况下,负责一个非常小的一部分酸式焦磷酸钠生成的初级神经元鉴于ADAM10的主要贡献在这方面(72年]。
3.2。Nardilysin:亚当激活锌Metalloendopeptidase
Nardilysin (N-arginine氢转化酶;自然资源保护委员会;EC 3.4.24.61)是一种锌metalloendopeptidases inverzincin / M16家族成员(89年]。这个家族的酶共有一个大约200 -氨基酸保守区域包含HXXEH绑定催化锌的主题2 +。NRDc已经证明可以提高酸式焦磷酸钠的本构脱落暂时从COS7细胞转染产生影响,完全废除的氧肟抗酸金属蛋白酶抑制剂TAPI-2 [74年]。现在看来,NRDc提高ADAM9, -10年和-17年活动无论衬底被裂解(90年)通过的作用机制仍不清楚,但这似乎涉及直接相互作用的蛋白质。
4所示。锌金属蛋白酶的降解
正如亚当斯可以防止代在第一种情况下,预制的蛋白水解降解肽代表了另一种方式来减少这些潜在的神经毒素多肽的稳态水平。虽然从许多不同的类蛋白酶降解在这方面,到目前为止,统治阶级是锌金属蛋白酶。
4.1。胰岛素降解酶
胰岛素降解酶(IDE) (EC 3.4.24.56) (insulysin,胰岛素蛋白酶)是一个100 - 120 kDa广泛表达锌metallopeptidase属于metalloendopeptidases M16A类的特点是一个倒置的HXXEH主题在活动网站(相对于其他锌金属蛋白酶的HEXXH主题)。酶的进化,拥有或者拼接和发起的变体91年]。IDE开辟广泛的生理活性肽包括胰岛素、胰高血糖素、心房利钠因子,其主要生理功能是调节稳态水平的外周胰岛素(92年]。IDE的结构类似于蛤形状组成的四个同源域,酶是依赖于一个需要atp提供能量结构监管开关允许基质进入活性部位(91年]。
至于裂开而言,IDE会降低一个吗从神经细胞条件培养液文化(93年IDE),大鼠和小鼠基因敲除动物表现出增强的大脑水平(94年,95年]。相反,IDE的超表达转基因小鼠结果在大脑大幅减少水平和减少斑块的形成以及减少广告细胞病理学(96年]。除了裂开,有人建议,IDE也可能坚持应用胞内域就是明证增加上市的水平在IDE基因敲除小鼠的大脑97年]。然而,治疗细胞培养与IDE抑制剂没有加强上市水平(98年]表明仅靠IDE的直接裂解片段可能不考虑增强上市IDE基因敲除动物中观察到的水平。
在人类的大脑,AD-afflicted IDE老年斑和相关联微血管存款(99年,One hundred.),海马浓度的过氧化氢酶减少高危患者被认为是发展中广告(101年]。在基因水平,发展广告与变异的风险在一个276 Kb的染色体编码,其中,IDE (102年]。此外,IDE催化活性下降而不是表达检测染色体的淋巴母10-linked广告家庭成员(103年]。
4.2。中性肽链内切酶
中性肽链内切(EC。24.11 3.4.24.11)(neprilysin enkephalinase,肽链内切酶,肾脏刷状缘中性蛋白酶,常见的急性淋巴细胞白血病抗原,CD10)是一个85 - 93 kDa II型膜蛋白属于M13的锌metalloendopeptidases [104年]。蛋白质由一个短的氨基端胞质区域,一个跨膜螺旋,和一个大c端ectodomain包含,其中,催化部位守恒HEXXH主题参与协调(锌91年]。棉结展示一个广泛的底物特异性裂开许多生物活性肽包括P物质、神经肽Y,脑啡肽、缩胆囊素;的酶,因此,有着丰富的角色在神经肽信号和血管张力的调节104年]。
棉结可能参与了这一事实退化最初成立时曝光的酶可能会裂开,但不是完整的应用程序,在体外(105年]。然而,花了五年建立,棉结是参与在活的有机体内退化的当岩田聪et al。106年]注入放射性肽在老鼠大脑和观察到后来的退化是由化合物抑制phosphoramidon和thiorphan等。这是随后表明NEP基因敲除小鼠表现出显著水平升高在他们的大脑107年),应用转基因小鼠与NEP-deficient动物交叉时,产生的后代表现出受损的海马突触可塑性和认知能力下降而增加应用转基因棉结的正常水平(108年]。
在人类大脑解剖样本增加淀粉样斑块密度与减少棉结免疫反应性(109年),在AD患者的大脑,棉结mRNA水平在海马和颞回低于控制大脑(在同一地区110年]。此外,棉结的age-dependant下降水平已经证明大脑在正常和广告(111年]。
在基因水平,至少两个单核苷酸多态性(snp)位于NEP基因的内含子一直积极与广告(112年),和一个新GT-repeat多态性也涉及疾病的迟发性的形式(113年]。最后,减少棉结的表达广告与载脂蛋白e4基因型也零星的广告本身是一个主要的危险因素(114年]。
4.3。内皮素转换酶1和2
内皮素转换酶(EC (EC)。3.4.24.71)M13小组的成员的蛋白质(II型整合膜蛋白锌金属蛋白酶活动)和显示几个序列和域结构相似性到这个家庭的其他成员,棉结(部分4.2)。ec裂开生物活性大内皮素生成成熟的内皮素作为血管收缩剂(115年]。
三种亚型的ec已报告,ECE-1 ECE-2, ECE-3,但只有前两个已经涉及退化。四种拼接ECE-1变体,本地化的细胞膜和细胞,在人类已报告(ECE-1a, ECE-1b、ECE-1c ECE-1d) (116年,117年]。相比之下,ECE-2是本地化几乎完全反式高尔基网络(115年]。Eckman et al。118年最初]表明,金属蛋白酶抑制剂phosphoramidon增强细胞外的水平在培养细胞通过抑制肽降解。作者也表明ECE-1在CHO细胞的过度导致的减少90%水平和重组ECE-1能裂开在多个网站。同一组随后报道显著增加水平的大脑ECE-1和ECE-2基因敲除小鼠(119年),还演示了更大的一个积累结合ECE-1和NEP基因敲除小鼠的大脑中表明这两种酶一致采取行动降低(120年]。有趣的是,ECE-1和ECE-2 mRNA水平增强细胞培养治疗时建议反馈循环机制的存在增加了提高自己的水平退化(121年,122年]。
在基因水平,Funalot et al。123年)确定了C338A监管ECE-1b区域基因的多态性与增加转录活动。作者证明了一个等位基因的纯合子个体在发展中广告的风险降低。一个额外的研究还显示一个等位基因的保护作用在一群中国主题121年]。此外,使用微阵列技术,Weeraratna et al。124年)注意到,最重要的是广告是ECE-2调控基因。作者还提出了免疫组织化学证据证明减少ECE-2劣质蛋白表达的大脑顶叶组织广告。
4.4。血管紧张素转换酶
血管紧张素转换酶(ACE) (EC 3.4.15.1)是I型积分膜zinc-dependent二肽酶,劈开两个血管活性的多肽,血管紧张素I和缓激肽(125年,126年]。因此,酶起着重要的作用在调节高血压和血管病理学的发展和内皮改造在某些疾病(127年,128年]。有两种截然不同的亚型的哺乳动物的王牌,体细胞(sACE)和睾丸(tACE),这两个从单个基因转录的使用两个替代促进剂(129年]。体细胞ACE (180 kDa)由两个相同的催化域(C -和N-domains),两个轴承zinc-dependent活跃的站点的功能,而睾丸血管包括只有一个域对应sACE [C端域的128年]。
所有的锌金属蛋白酶参与退化,可能是最有争议的王牌。这种酶最初显示降解在体外裂开Asp7-Ser8和Arg5-His6肽债券(130年),最近,一个可耻的ACE活性报道位于专门在蛋白质的N-domain [131年]。一项研究报道的一个重要高度水平与ACE抑制剂治疗组小鼠的大脑,卡托普利(132年]。此外,ACE抑制剂联合培,在最近的研究里它又显示出改善认知能力在APP / presenilin-1转基因小鼠注射(133年]。然而,对于每一个研究报告ACE预防AD的作用,至少有一个其他礼物-日期在这方面。例如,有一些研究,利用基因或化学失活的王牌在活的有机体内表明,这种酶没有实质性的生理作用的退化(106年,120年,134年]。在这方面值得注意的是,另一个生理基质的王牌,血管紧张素I转换成有效的血管收缩剂的王牌。因此,基质和产品都是配体的雄激素受体亚型的监管也被卷入广告(135年]。问题出现,因此,是否上的血管紧张素转换酶抑制剂的效果水平是由于酶的抑制是一个可耻的活动或改变血管紧张素I和II的相对水平和他们的能力与同源受体。
4.5。基质金属蛋白酶
基质金属蛋白酶(MMPs) zinc-dependent肽链内切酶属于metzincin总科,主要是胞外酶的能力裂开一个大范围的细胞外基质蛋白和生物活性肽136年]。MMP-2 (EC 3.4.24.24), MMP-3 (EC 3.4.24.B6)和MMP-9 (EC。3.4.24.35)都拥有有辱人格的活动在体外;但是,与ECE-1、棉结和IDE, MMP-9裂开的聚合原纤维(137年]。此外,重要的海拔已报告的大脑中MMP-2和MMP-9基因敲除小鼠(138年]。虽然基底大脑中的基质金属蛋白酶的表达水平很低,一些细胞类型(胶质、神经和血管)上调内生MMP-2, 3和9表达在回答治疗(139年- - - - - -141年]。然而,这三种酶的表达水平和活动似乎并没有意识到广告之间的显著差异和控制大脑和不相关斑块负荷(142年]。在基因水平,分析多态性的MMP-3(-1171 5 / 6)和MMP-9 (c - 156 t)基因表示,-1171 6 MMP-3等位基因(伴随着减少启动子活动)与广告有关,而MMP-9多态性不是[142年]。
4.6。另一个有辱人格的锌金属蛋白酶
一个显然是受到一系列的锌金属蛋白酶蛋白水解作用在本文的前面的部分讨论。此外,需要注意的是,新的候选人酶在这方面仍然是光。例如,它最近报道,谷氨酸羧肽酶II (GCPII) (EC 3.4.17.21),锌金属蛋白酶表达多个组织包括大脑(143年),是能够裂开单体在c终端产生一系列较小的片段以及1 - 14,缺少长篇的聚合电位和细胞毒性。作者也表明GCPII可以降低可溶性低聚物和纤维可以减少斑块大小APP-presenilin1的大脑中E9转基因老鼠。此外,在细胞培养中,过度GCPII减少或补充体内分泌的水平肽。除了GCPII亚当斯的能力,在他们摆脱或膜相关表单、降解而不是正常的全身应用基质,还有待建立。
5。结束语
蛋白水解酶在广告中发挥核心作用。虽然是天门冬氨酰蛋白酶类,直接有助于神经毒素的形成通过amyloidogenic通路,它无疑是锌金属蛋白酶,扮演最重要的角色的排除通过nonamyloidogenic形成途径,在这些肽的降解(图4)。虽然许多研究在广告领域继续关注amyloidogenic通路的抑制剂的发展,很明显,upregulation各种锌金属蛋白酶活动代表一个可能的替代治疗疾病的治疗策略。
