调查对聚合物纳米粒子眼交付

文摘

在目前的调查,试图制定timolol马来酸(TML)加载聚合物纳米粒子的亚麻籽胶(外汇)和壳聚糖(CH)眼部交付使用离子凝胶化方法。纳米颗粒制备过程中使用因子进行优化,三级中心组合实验设计。外汇的最佳浓度和CH产生纳米粒子与最小粒子大小和最大(267.06±8.65海里)封装效率(74.96±4.78%)被发现0.10% w w / v / v和0.08%,分别。制定纳米颗粒显示相当大的一类力量和表现出持续释放药物在体外扩散研究。的体外transcorneal渗透研究显示更高的TML角膜穿透而销售眼药水。激光共焦扫描显微镜(CSLM)研究也证实了纳米粒子的渗透能力更深层的角膜。纳米颗粒的组织病理学研究显示角膜生物相容性。纳米粒子被发现降低眼内压(IOP)的兔子长时期相比,传统的眼药水。本研究的结果提出了一个有前途的聚合物纳米粒子的作用眼部给药治疗青光眼。

1。介绍

多糖是受雇为有前途的辅料在制药行业作为胶凝和悬浮剂,乳化剂,粘结剂,增稠剂,稳定剂,矩阵前,崩解剂(1]。与多糖的使用相关的主要优势包括他们丰富的可用性在自然界中,生物降解性,生物相容性,组织可以为功能化改造(2]。

亚麻籽(亚麻属植物usitatissimuml .)胶(外汇),从亚麻籽中提取的水状胶质,异质多糖存在于最外层(表皮层)亚麻籽。口香糖主要由木糖、阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖、鼠李糖(3- - - - - -5]。外汇具有很多优势,如良好的持水量,凝胶、乳化、发泡性能(6,7]。此外,它具有很好的营养价值作为膳食纤维和功能性食品成分。它也被用来减少与糖尿病和心脏病风险(8,9]。亚麻籽胶的功能性质报道接近阿拉伯胶(10]。

壳聚糖(CH)是一种自然,polycationic聚合物广泛用于制药配方(11]。它是甲壳素脱去乙酰基衍生物,发现在海洋甲壳类动物、昆虫和真菌(12,13]。发现具有抗菌、一类和渗透性增强属性(14]。研究人员正在与其他多糖聚电解质复合物的CH /聚合物和使用它们作为药物输送载体。CH和羧甲基辣木属口香糖Rimpy基于聚电解质复合纳米粒子已报告et al .,2017年为氧氟沙星的交付15]。同样,果胶CH基础没有观察到纳米粒子提供版本控制和改善乳酸链球菌肽的抗菌效果16]。

交付的药物一致是一个具有挑战性的任务由于复杂的解剖学和生理学的眼睛和存在许多障碍,限制药物分子的条目。胶体纳米颗粒等航空公司最近获得相当大的关注,因为他们改善病人的依从性,避免眼部过敏、异物感,减少病人不适(17,18]。然而,这些系统表现出快速清除从眼睛导致眼粘膜(短停留时间19]。配方的停留时间可以通过使用增强的一类聚合物。一类高分子胶体运营商已报告,提高药物的生物利用度1.71倍比胶体运营商没有一类聚合物(20.]。研究基于CH一类纳米颗粒显示优秀的力量,持续释放carteolol 24 h导致长期降低眼内压(IOP)比药物治疗青光眼的解决方案。青光眼是一种紧急眼部疾病,特点是视神经的损害。它通过增加眼内压有关,如果不及时治疗会导致失明(21]。非选择性Timolol马来酸(TML)β杀杀杀,已经使用了超过30年,仍然青光眼治疗的首选药物。它会降低眼压降低房水形成。然而,TML必须每天服用4 - 6次为长期的治疗效果,因为它是一种短效药物消除半衰期为2.5 5 h。22]。传统的眼科眼药水迅速消除闪烁的反射,流泪,和排水,导致短precorneal住宅和可怜的生物利用度23- - - - - -25]。的方法来提高治疗的有效性TML的停留时间可以增加配方采用一类聚合物。

在这个调查中,TML加载一类高分子纳米粒子是由离子凝胶法使用外汇和CH治疗青光眼。制定使用因子三级中心复合设计优化。优化纳米粒子进一步的特征红外光谱、DSC、SEM、TEM、XRD、和在体外药物释放研究。降低眼压的聚合物纳米粒子也决定雇佣合适的动物模型。

2。材料和方法

2.1。材料

亚麻籽从当地市场采购。CH (MW 50000 - 190000 Da,脱乙酰作用度≥75%)和粘蛋白是从Hi-Media实验室。分公司采购的。(印度孟买)。TML收到作为礼物样本Zee实验室有限公司Poanta大人。丙酮和碳酸氢钠从默克公司专业采购分公司,孟买。二水氯化钙从珞巴化学有限公司购买,孟买。

2.2。亚麻籽胶的提取和纯化(外汇)

亚麻籽胶(FX)从种子中提取的亚麻属植物usitatissimum通过水的方法。亚麻种子第一次用水洗去除任何表面灰尘,然后晒干。干种子浸泡在蒸馏水(8 x)和在1000 rpm电磁搅拌器搅拌3 h大约50°C。粘性溶液形成是过滤采用棉布。其次是离心(4000 rpm)和降水的口香糖(50毫升×2)丙酮。creamish /棕色颜色的沉淀,所以被过滤分离,形成由透析纯化,在冷冻干燥器干燥(盟军霜,德里)[26]。

2.3。描述的外汇和CH

2.3.1。傅里叶变换红外光谱(FTIR)

那些时光iS50红外光谱分光光度计(NICOLET,热科学)是用来确定粉胶样品的光谱性质。样品与溴化钾混合粉的颗粒压缩。球被扫描的频率范围4000 - 400厘米⁻¹(27]。

2.3.2。差示扫描量热法(DSC)分析

提取口香糖的DSC和CH记录采用差示扫描量热计(EVO131, SETARAM Instrumentational法国)。口香糖样品(2.0毫克)加热20 - 400°C的升温速率下10°C /分钟氮气吹扫的速度10毫升/分钟(27]。

2.3.3。x射线衍射(XRD)

XRD爱视宝PRO衍射仪系统上记录分析牙龈粉的结晶特性。使用的实验条件包括铜Kα辐射(λ= 1.54060)在45 kV和40 mA,生成2θ从5-50°,步长为0.0170°,和扫描步骤24.7650秒的时间在室温(25°C)。干粉末样本放置在样品阶段(Spinner PW3064)和衍射模式的评价27]。

2.3.4。扫描电子显微镜(SEM)

外汇的形态特征和CH扫描电子显微镜研究了(JEOL地产- 6510 lv)。样品被涂上一层黄金(汽车好涂布机jfc - 1600)导电。图像被抓获在5 - 10 kV电子束的加速电压(27]。

2.3.5。电动电势和pH值的决心

外汇的电动电势和CH 0.1% (w / v)测量使用Zetasizer NanoZS90(英国莫尔文仪器)。水胶样品分散在液相色谱(Milli-Q协同系统、微孔)和电动电势测量进行了使用水浸在自动模式下细胞。样品的温度被控制在25°C。pH值的1.0% (w / v)分散外汇和CH用ESICO pH计测量。

2.3.6。外汇之间的交互和CH

1.0% w / v分散外汇和CH准备水和醋酸,分别。聚合物分散体(FX和CH)在10:90的比例混合,20:80,30:70,40:6 0,五五开,比例,70:30,80:20,挺和允许的立场。24小时后,上层清液被离心分离(雷米冷却离心、印度)在10000 rpm 20分钟。沉淀用蒸馏水洗净,冻干干燥。交互发生的最大比率决定通过测量粘度的上层清液使用布氏粘度计(S18主轴美国),通过计算百分比收益率沉淀后采用方程(28,29日]: 在哪里=重量的沉淀和获得=总重量的聚合物。

2.3.7。制定和优化TML装载纳米颗粒

外汇的聚合物纳米粒子和CH采用离子凝胶法制定。外汇和CH的解决方案是由溶解成蒸馏水和醋酸(2%,v / v)。TML 0.5% (w / v)被添加到CH的解决方案。纳米粒子是准备通过增加外汇解决方案0.08 - -0.16% (w / v)一滴一滴地CH解决方案0.02 - -0.08% (w / v)连续使用电磁搅拌器搅拌(800 rpm)在室温下的30分钟。最大的互动比外汇和CH(70:30)是用于制备纳米粒子。这样形成的纳米颗粒被离心恢复在11000 rpm使用超离心机40分钟。纳米粒子被干的冻干直到进一步使用和存储。空白纳米粒子也制定使用以上方法(30.]。

2.3.8。实验设计(DoE)

聚合物纳米粒子的优化进行了使用因子,三级,中心组合实验设计采用13(表运行1)。根据初步筛选(数据未显示),外汇的浓度(X1)和CH (X2)被选为独立变量,和粒度(Y1)和封装效率(Y2)被选为因变量。独立制定变量在三个层次(即调查。1 0,+ 1)。10.0设计专家软件(试用版)被用来优化实验设计和分析数据。

2.4。表征纳米粒子

2.4.1。颗粒大小、多分散性指数和电动电势分析

粒子大小,多分散性指数(PDI),电动电势测定使用的纳米粒子Zetasizer(英国莫尔文工具)使用动态光散射(DLS)技术在25°C。纳米粒子分散在液相色谱水,然后分析。

2.4.2。封装效率

封装效率的测量(EE)制备纳米颗粒离心后获得的悬浮在11000 rpm 40分钟在4°C。分析了上层清液unentrapped药物spectrophotometrically在294纳米30.]。封装药物在纳米粒子的数量计算使用以下方程:

2.4.3。红外光谱分析

TML的光谱特性、空白纳米颗粒和药物装载纳米粒子进行了分析使用红外光谱分光光度计(NICOLET iS50,热科学)。纳米粒子的混合与溴化钾和颗粒被压缩。球被扫描的频率范围4000 - 400厘米⁻¹(27]。

2.4.4。DSC

TML的热特性,空白纳米粒子,和药物装载纳米粒子测定采用差示扫描量热计(EVO131, SETARAM Instrumentational法国)。干纳米颗粒被卷曲在一个标准的铝锅,加热从20到400°C下10°C /分钟常数清除氮(27]。

2.4.5。XRD

TML的晶体分析、空白纳米颗粒和优化药物装载纳米粒子进行了采用x射线衍射图(爱视宝PRO衍射仪)使用类似的情况如上所述。

2.5。形态学研究

表面形态的优化配方使用扫描电子显微镜(SEM)观察(JEOL,地产- 6510 lv)和透射电子显微镜(TEM)(日立h - 7500)。SEM分析,纳米颗粒被涂以金(汽车好涂布机jfc - 1600)使其导电。图片拍摄5 - 10 kV电子束的加速电压。TEM分析,分散纳米粒子的碳包覆铜网格和额外的水被吸墨纸。然后网格包含40 - 120千伏的样本进行扫描操作电压和不同分辨率图片被点击。

2.5.1。一类强度测量

一类强度是决定使用质地分析仪配备了50公斤负载细胞(TA。XT +稳定微系统,英国)。透明膜在膜纸架安装安全到位,然后浸渍在溶液0.3% (w / v)粘蛋白(引入微量吸液管)。丸(1厘米²FX-CH纳米颗粒和FX和CH粉末压缩使用单穿孔,液压机通过直接压缩方法,然后连接(使用双面胶带)圆柱探针的基地,这是固定在移动手臂的纹理分析器。圆柱探针与颗粒附着在其基础是降低0.5毫米/秒的速度在1 N的力的接触时间2分钟。然后撤回0.5 mm / s的速度10毫米的距离。mucoadhesive样品的性能是决定通过测量撤军的电阻探针(最大剥离力;在牛顿“N”)反映了mucoadhesion纳米粒子的特性。至少有三个重复每个测量得到。

2.6。体外扩散研究

在体外扩散研究使用Keshary-Chein Franz细胞扩散。TML装载纳米颗粒(相当于5毫克/毫升TML)分散在三蒸馏水和销售制定(Iotim®)放置在捐赠者隔间。刚做好的模拟撕裂流体(氯化钠0.670 g,碳酸氢钠0.200 g,二水氯化钙0.008 g和纯净水足以使100毫升)pH值7.2是放置在受体间的Franz细胞扩散。透析膜(0.22μ孔隙大小)供体和受体之间的隔间。介质的温度保持在37°C±0.5°C。2毫升的样品被撤回在预先确定的时间间隔24 h,取而代之的是相同体积的新鲜的媒体。撤回样本分析合适的稀释后紫外分光光度计在294纳米31日]。药物的扩散计算使用方程生成(y = 0.0131 x + 0.0005;r²从标准校准曲线和比例= 0.999)发布。

2.7。体外Transcorneal渗透研究

刚切除的山羊的眼睛从当地屠宰场。角膜被小心翼翼地,洗几次磷酸盐缓冲剂(pH值7.4),清除任何蛋白质的物质。供体和受体之间的切除角膜安装隔间的弗朗兹扩散细胞这样面临的角膜内皮细胞表面受体和上皮向捐赠者隔间。优化的配方(相当于5毫克/毫升TML)和销售制定(Iotim®)被放置在捐赠舱和刚做好的模拟在受体间撕裂液pH值7.2。介质的温度保持在37°C±0.5°C。2毫升的样品被撤回在预先确定的时间间隔为12 h从细胞,取而代之的是同等体积的新鲜的媒体。取消样品分析在294海里(紫外分光光度计31日]。的药物渗透计算使用来自标准校准曲线和方程生成的药物渗透比例确定。

2.8。共焦激光扫描显微镜(样品形貌)研究

纳米粒子的角膜穿透决心使用样品形貌技术。罗丹明6 g(0.03%)装载纳米颗粒(FX-CH-Rd)使用相同的技术准备采用优化外汇的浓度和CH。山羊角膜供体和受体之间的隔间的Franz细胞扩散。染料装载纳米粒子或解决方案包含罗丹明6 g (Rd的解决方案)是放置在角膜表面的捐赠的隔间体外transcorneal渗透的研究。角膜被撤扩散组装与磷酸缓冲盐和8 h和洗后立即用福尔马林溶液固定(10% v / v)。组织与酒精脱水,放置在融化石蜡,固化块的形式。角膜组织的横截面(< 1毫米)削减和固定在显微镜幻灯片。捕获的图像使用共焦激光扫描显微镜(奥林巴斯FluoView阵线1000)在480 nm的氩激光激发和发射550海里(32]。

2.9。角膜毒性研究(组织病理学研究)

组织病理学检查完成刺激潜在的纳米颗粒配方山羊角膜。刚切除的山羊的眼睛从当地屠宰场和获得生理盐水。角膜被仔细洗几次删除任何蛋白质的物质。优化的配方是孵化与切除角膜35°C 1 h,其次是与磷酸盐缓冲盐水洗。角膜是立即用福尔马林溶液固定(10% v / v)。组织与酒精脱水,放置在融化石蜡,固化块的形式。角膜组织的横截面(< 1毫米),与苏木精和伊红染色。眼角膜孵化的横截面与磷酸缓冲盐(负控制)、十二烷基硫酸钠、0.1%,w / v(积极的控制),和销售制定(Iotim®)都准备以同样的方式。光学显微镜下的角膜幻灯片进行评估(徕卡Microsystems CMS (DM 4000),德国)和捕获的图像33]。

2.10。在活的有机体内研究

的协议在活的有机体内研究机构动物伦理委员会批准注册。107/99 / cpcsea 30 - 2012。兔子(1.5 - 2公斤)用于这项研究被安置在控制条件下的温度(20 - 25°C),和湿度和免费的食物和水。后眼压的降低管理优化配方和销售制定(Iotim®) TML决心采用HNT 7000非接触式眼压计。这项研究是在血压正常的进行白化兔子(33]。兔子被分成三个组每个组成三个动物。优化的配方(50μl)是第一组的管理。第二组的动物收到眼药水Iotim®(销售配方)。第三组收到空白纳米颗粒配方。配方都灌输在一只眼睛的角膜表面和反侧眼一直控制。眼压的变化记录在管理药物配方和加载后每小时滴剂的药物配方一段12 h。所有的三次测量记录和平均值。降低IOP百分比计算由以下方程:

2.11。统计分析

所有的数据都表示为平均值±标准偏差。统计分析是运用方差分析Bonferroni紧随其后(后续测试)测试使用Graph-pad棱镜软件。值为p < 0.05或p < 0.01被认为是具有统计学意义。

3所示。结果与讨论

3.1。提取亚麻籽胶(外汇)

水提取技术用于提取外汇的种子亚麻属植物usitatissimuml .导致收益率为5.13±0.15% w / w。外汇的收益报告亚麻属植物usitatissimuml .从8.0%至3.6不等w / w (34]。

3.2。描述外汇

外汇(图的红外光谱谱1(一))显示感染高峰在3430厘米⁻¹和2929厘米⁻¹这可能归因于拉伸的羟基(-哦)脂肪醇和CH -组烷烃,分别。峰值为1621厘米⁻¹和1419厘米⁻¹相应的C = O对称和非对称拉伸,分别也观察到光谱(35,36]。这些山峰的自尊和阿拉伯树胶的山峰报道也有类似的结构像外汇37]。CH的红外光谱谱图1(b))显示h伸展振动的宽带3432厘米⁻¹。碳氢键的存在脂肪族伸展振动是观察到2917厘米⁻¹和2849厘米⁻¹。的特征乐队amide-I amide-II, amide-III也明显在1650厘米⁻¹,1576厘米⁻¹,1300厘米⁻¹分别为(38]。

外汇(图的DSC热分析图2(一))和CH(图2(b))显示广泛的电热100.92°C和102.19°C,分别。一个放热峰在273.06°C和307.38°C在外汇和CH,热法分别。相关联的吸热峰可以自由的损失/束缚水存在于样本而放热峰表明聚合物的热降解。

XRD被广泛用来确定微晶的结晶度和方向。外汇(图的x射线衍射图3(一))和CH(图3(b))透露外汇的无定形的性质和CH晶体的本质39]。据报道,天然聚合物具有无定形和结晶特性,这也证实了聚合物的SEM图像(数字4(一)和4 (b))。

电动电势的提取口香糖被发现-12.7 mV,描述其阴离子性质而CH被发现12个mV。外汇和CH溶液的pH值是6.78±0.02,6.42±0.04,分别。近中性pH值意味着它不会造成任何刺激时在配方中使用。

3.3。之间的互动研究外汇和CH

后得到的上层清液的粘度外汇与CH在不同比例混合解决方案列在下表中2。当电荷相反聚合物混合他们自发反应,导致沉淀的形成(28]。观察上层清液的粘度降低,外汇在FX-CH混合物的比例增加。70:30的比率(FX: CH),上层清液的粘度下降到1.17±0.12 cP建议最大的交互。最大百分比收益率(99.21±1.46%)也观察到70:30比率(FX: CH)。

3.4。TML装载纳米粒子的制备和优化

纳米颗粒配方是由一种温和的离子凝胶化过程包括电荷相反聚合物之间的静电相互作用。这是一个非常简单的程序,包括温和的制备条件,完整的亲水环境,避免了有机溶剂的使用或高剪切力(40,41]。

初步实验研究变量的影响(时间、转速和聚合物的浓度)对粒度和封装效率(数据未显示)。结果表明,外汇和CH的浓度显著影响纳米颗粒的粒径和封装效率。二因子,三级中心组合实验设计用于研究的浓度的影响外汇(X1)和CH (X2)粒度(Y1)和封装效率(Y2)。13实验运行后的结果进行归纳在表格按照设计协议1。因变量的结果被安装到各种多项式模型,它强调,颗粒大小(Y1)和封装效率(Y2)安装最佳线性模型。的方差分析分析模型揭示了模型与无意义的显著(p < 0.05)缺乏合适的(p > 0.05)。证实了该模型可靠性的R值就越高²和一个相当好的调整R之间的协议²并预测R²值。此外,足够的值精度高(> 4)显示足够的信号噪声比,建议开发模型可以用来导航的设计空间。

3.5。颗粒大小(Y1)和封装效率(Y2)

日元的响应之间的数学关系(粒径)、Y2(封装效率),和独立变量X1(外汇)浓度和X2 (CH)的浓度可以表示由以下方程:颗粒大小(日元)x1 + 7.12 X2 = 296.47 + 139.97封装效率(Y2)x1 + 8.89 x2 = 74.63 + 15.27

反应Y1和Y2被X1和X2的变化影响显著。响应面图显示联合外汇和CH浓度对粒径的影响(数据5(一个)和5 (c))显示,外汇和CH增加粒子的浓度大小也增加。增加的粒度和浓度的增加可以归因于聚合物粘度的增加聚合物和聚合物的形成。此外,更多的结合位点的可用性离子交联的分子也可以增加颗粒大小有关(42]。最佳的浓度水平的外汇和CH支持毫微米粒子的形成。浓度的综合效应外汇和CH封装效率(数字5 (b)和5 (d))TML显示增加浓度的聚合物封装效率也会增加。封装效率随着聚合物浓度的增加同样也可以解释如上所述。增加聚合物溶液的粘度与浓度可以防止浸出的药物相互作用的凝胶阶段到大量的解决方案(43]。

外汇的最佳浓度和CH用于制备纳米粒子的最小粒子大小和最大的封装效率计算使用优化设计专家的工具软件。设计预测配方为0.10% (w / v)浓度的外汇和0.08% (w / v)的浓度CH导致纳米颗粒大小为254.5 nm和封装效率为78.17%。纳米颗粒配方(FX-CH-TML)采用上述浓度外汇和CH准备。纳米粒子的粒径是267.06±8.65 nm和封装效率74.96±4.78%。这个优化的多分散性指数和电动电势批被发现是0.345±0.02,-20.3±2.88 mV,分别。

3.6。表征纳米粒子

TML的红外光谱谱(图1(c))显示宽带3299厘米⁻¹对应于s / h地伸展振动峰值在2967厘米⁻¹,2889厘米⁻¹和2854厘米⁻¹由于脂肪族碳氢键伸展振动。乐队的羧酸组顺丁烯二酸被观察到1704厘米⁻¹和C = N伸展振动出席1618厘米⁻¹。乐队在1497厘米⁻¹和1382厘米⁻¹是由h弯曲振动和s (n组,分别(44]。TML的峰值为1497厘米⁻¹,1589厘米⁻¹,1618厘米⁻¹略转移到1492厘米⁻¹,1567厘米⁻¹和1623厘米⁻¹分别在药物纳米颗粒(图加载1(e)),清楚地表明,没有离子药物和聚合物之间的相互作用和药物物理类型的圈套45,46]。

一把锋利的电热TML显示为209.33°C(图2(c)),没有优化的纳米颗粒(图所示2(e))。药物电热209.33°C的消失在药物装载纳米粒子可以归因于药物在聚合物基质的圈套47]。这也表明晶体药物的无定形分散成封装后的纳米粒子聚合物(48]。

XRD被广泛用来确定百分比结晶度和微晶取向。TML的衍射图(图3(c))显示其结晶性质与锋利的特征峰。然而,TML的结晶度降低纳米粒子(图进行了优化3(e))。与DSC结果相符合,表明nanoparticulate系统中的药物的封装49]。

形态学研究(数据4 (c)和4 (d))表明,纳米粒子毫微米(< 100 nm)和具有球形、卵圆形没有锋利的边缘,因此不会引起刺激的死胡同。粒度TEM下观察(图4 (d))是比较少与DLS(267.06±8.65海里)自DLS测量集成粒子周围的离子环境但在TEM分析粒子本身主要是(50,51]。

纳米粒子的一类性质有助于增加药物在死胡同的停留时间。有报道称,没有辅料制备,纳米颗粒可以尽快消除水的解决方案52]。的一类强度优化的纳米粒子,外汇和CH,被发现是713.91±10.05克,272.77±3.26 g,分别和351.69±4.43 g。纳米颗粒显示相当大的一类强度可归因于增加聚合物链的灵活性和极性官能团53]。纳米粒子表现出负的电动电势(-20.3±2.88 mV)暗示他们的阴离子的性格。早期的研究得出结论,一类聚阴离子具有更好的强度比聚阳离子(54,55]。阴离子聚合物,如聚(丙烯酸)和羧甲基纤维素,形成强氢键与粘蛋白链(56]。此外,研究人员的研究表明,聚合物链的开卷中性pH值附近的阴离子聚合物会导致更大的黏附力通过与粘蛋白(纠缠和渗透57]。

3.7。在体外扩散的研究

的在体外扩散的研究TML装载优化纳米颗粒配方(FX-CH-TML)显示一个初始破裂释放1 h(27.18%)紧随其后持续释放(52.90% 4 h, 67.71%在8 h, 85.16%在12 h和90.55%在24 h)。销售配方(Iotim®)公布的49.35%在1 h和91.82%的4 h。优化纳米粒子被发现展览持续释放具有统计上的显著差异(P < 0.001)相比,销售配方(图6(一))。初始破裂释放的药物纳米颗粒可能归因于存在药物粒子表面的纳米粒子或弱封装在聚合物基体中。观察持续释放由于水化和肿胀的聚合物(58,59]。的初始破裂释放药物有利于实现TML治疗浓度的最小时间持续释放需要维持一个高效青光眼管理最小有效浓度(60]。

3.8。体外研究

的体外渗透使用新鲜山羊切除角膜进行了研究。纳米颗粒配方(FX-CH-TML)显示,85.24%的药物渗透通过角膜在12 h,另一方面销售制定渗透60.12%在12 h(图6 (b))。在统计学上是不重要的(P > 0.05),直到0.5 h。然而,差异显著(P < 0.001) 0.5 h之间的两个配方后观察。物质渗透到角膜屏障的能力取决于各种因素,例如化学物质的性质、大小、构象等。据报道,亚微米粒子渗透的角膜上皮细胞内吞作用[61年]。增加纳米粒子的渗透与解决方案(销售配方)可能是因为更高的保留在角膜表面的纳米粒子由于纳米尺度的粒子和黏附力62年- - - - - -64年]。CH在配方的存在也可能导致增加渗透的药物由于其渗透增强属性,因为它能够打开紧密连接位于上皮细胞(65年]。

3.9。CSLM研究

空白的角膜穿透染料装载纳米颗粒和解决方案包含罗丹明6 g CSLM研究对此进行了研究。横截面的角膜组织的共焦图像是描绘在图7(我)。空白罗丹明装载纳米粒子被发现在更大程度上渗透到切除山羊角膜(图7(1)(a)包含染料(图)与解决方案7(我)(b))。这可能是由于小尺寸的粒子和渗透加强产权CH (66年]。

3.10。组织病理学研究

山羊眼睛眼角膜的横截面处理优化配方,销售制定、磷酸缓冲盐(负控制)和十二烷基硫酸钠(积极控制)在图所示7(II)。角膜部分孵化与十二烷基硫酸钠显示表面角膜上皮(图的完全分离7(2)(d))。然而,优化纳米颗粒、销售配方和磷酸缓冲盐表现出没有角膜横截面的变化。角膜层(上皮细胞,肾小球膜和基质)和细胞被发现是完好无损,角膜形态很好维护。组织病理学结果倡导安全使用的聚合物纳米粒子眼部给药(67年]。

3.11。在活的有机体内研究

药效学的性能优化减少纳米颗粒是由测量眼内压的兔子用人HNT 7000非接触式眼压计。TML装载纳米颗粒和销售制定(Iotim®眼药水)被灌输只有一次获得相对比较单剂政府。优化的纳米颗粒和销售配方显示1 h后眼压降低18.79%和19.99%,分别。最大眼压降低(28.93%)通过优化配方(FX-CH-TML) 4 h后观察而销售配方显示最大降低IOP 3 h后(21.26%),然而,降低IOP比例显著降低比优化药物装载纳米颗粒。结果也显示显著差异(P < 0.001)降低IOP 3 h后两国的配方(图8)。至少减少15%在青光眼眼压被认为是有效治疗(68年]。虽然销售制定立即降低眼内压引起的,它是有效的只有4 h。优化的纳米粒子,另一方面,是有效的在一段时间内12 h。改进的有效性可以归因于增加角膜接触时间与一类聚合物纳米颗粒。

4所示。结论

亚麻籽胶(FX)隔绝亚麻属植物usitatissimum和红外光谱、DSC、XRD、SEM、和电动电势分析。外汇和CH纳米粒子是由离子凝胶法和过程优化使用因子,三级中心组合实验设计。优化批纳米粒子被发现拥有267.06±8.65纳米粒子大小和74.96±4.78%的封装效率。一类一类的生物高分子纳米粒子表现出明显的生物属性,持续释放TML,角膜穿透高于销售眼药水。纳米粒子在生物相容性和角膜显示更大的和长时间的降低眼压。本研究的结果表明,外汇的一类高分子纳米粒子和CH可以用于眼部给药在治疗青光眼。

数据可用性

所有的数据用于支持本研究的结果包括在本文中。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

确认

作者要感谢科技部(DST,塞尔维亚),新德里(DST没有。某人/英尺/ LS-177/2012 26/04/2013约会),提供金融援助。

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