文摘
神经肌肉电刺激(nm)已经被用来增加肌肉力量和身体功能。然而,纳米诱导迅速疲劳,限制了其应用。到目前为止,股四头肌的影响(QF)肌肉长度在膝盖和髋关节操纵NMES-induced收缩易疲劳性还不清楚。我们旨在量化不同的肌肉长度NMES-induced收缩易疲劳性的影响,疲劳指数,和肌(EMG)对QF肌肉的活动。QF最大诱发收缩(QMEC)应用于26分钟协议(10;120年代;12宫缩)在20个健康的参与者( 4岁),在会话测试不同条件下在不同的日子。测试条件如下:仰卧位和膝盖弯曲60°(SUP60),坐着的膝盖弯曲60°(SIT60),仰着膝盖弯曲20°(SUP20),和坐在膝盖弯曲20°(SIT20)。收缩易疲劳性(转矩下降评估最大随意收缩(MVC)和在海里),疲劳指数(MVC)比例减少,EMG活动(均方根(RMS)和中值频率)表面QF的成分进行了测定。海里后,所有职位除了SUP20绝对减少MVC ( )。在SIT20疲劳指数大于SIT60 ( )和SUP20 ( )。有显著减少扭矩在12 QMEC SUP60 SIT60,高达10.5% ( )和9.49% ( ),分别。没有扭矩减少在海里SUP20 SIT20。疲劳是伴随着RMS的增加( )和中值频率减少SUP60 ( )。中值频率增加只有SUP20条件( )。我们的结论是,QF NMES-induced收缩易疲劳性大于60°膝盖弯曲时相比,20°。此外,仰卧位促进早期疲劳为60°膝盖弯曲,但它延迟疲劳发作20°膝盖弯曲而坐的位置。这些结果提供了一个理由下肢定位在海里,这取决于培训目标,例如,加强或特定于任务的功能训练。
1。介绍
神经肌肉电刺激(nm)通常用于恢复功能和肌肉加强(1,2]。然而,NMES-evoked比自愿收缩,收缩更让人疲倦和破坏性,可能会限制他们的适用性3- - - - - -5]。肌肉疲劳是一个复杂和多因子的依赖现象的变化在中央和周边水平(6]。收缩力下降引起的纳米类型的性能易疲劳性(即。在客观测量的性能,减少离散时间)7),以后在这个手稿被称为“收缩易疲劳性”或简单的“易疲劳性”[8]。先前的研究显示疲劳发作的依赖肌肉长度通过操纵关节角度。在协议与自主收缩疲于奔命,疲劳发作的依赖肌肉长度通过操纵关节角已经证明。在延长膝关节角度,股四头肌肌肉(QF)不如更多的弯曲角度(易疲劳的9,10),被认为是增加新陈代谢的结果生成一个更大的力量时,根据的数量actin-myosin横桥相互作用[11]。承认这一点,操纵关节角也可能有重要意义的平衡力输出和易疲劳性纳米等距协议。
先前的研究表明,《纳米在90°的膝盖弯曲疲劳比15°(0°充满扩展),即在长肌肉长度(12]。另一项研究显示,和更大的疲劳在早些时候65°和90°或20°(13),即。,一个t a midmuscle length. Increased contraction fatigability in these examples was explained by the greater absolute knee extensor torque in fresh condition. Some elegant studies reported a greater evoked torque in supine (hip extended) compared to seated (hip flexed), which was attributed to an improved length-tension relationship of the rectus femoris (RF) and the biarticular constituent of the QF [14,15]。然而,肌肉长度变化的影响,在NMES-induced收缩易疲劳性髋关节角操作,没有调查到目前为止。
纳米允许观察外周疲劳发作,即。,失败在兴奋收缩偶联16),描述为减少力发电能力没有自愿的要求/中央司令部[6]。此外,急性最大随意收缩(MVC)的变化,伴随着肌(EMG)信号,可以通过纳米通知QF是如何影响的。肌电图已广泛应用于肌肉疲劳评估由于其noninvasiveness,实时和适用性。在收缩易疲劳性生理参数评估(17)、均方根(RMS)的运动单位招聘(18),和中值频率,衡量电机单元的发射率(19)是常用的。然而,这些肌电图的结果没有评估的影响下的《肌肉长度前后一套的《最大诱发宫缩(QMEC)。EMG信号的谱参数的相对变化可能反映了协同QF成分(肌间的差异20.,21适应纳米训练)和影响。此外,一旦所有的《选民的工作作为一个整体,是相互联系的22,23),有可能通过改变射频长度,所有其他成分可能显示与疲劳相关的变化。
NMES-induced收缩易疲劳性可能表明肌肉过载,这对加强目的是可取的,但它也可以限制一个冗长的功能活动持续时间的康复协议。详细了解《易疲劳性可以帮助下肢位置调整纳米等距协议。因此,我们的目的是调查不同的肌肉长度的影响,通过改变髋关节和膝关节关节角,NMES-induced收缩易疲劳性、疲劳指数和的EMG活动QF(射频、股外侧肌(六世)和股内侧肌(VM))。基于令人信服的证据,我们推测,疲劳会早些时候和更大的肌肉长度,产生更大的扭矩。
2。材料和方法
2.1。试验设计和参与者
这是一个二级注册研究的结果http://clinicaltrials.gov(NCT03822221)。这是一个随机试重复测量设计的参与20人( )年龄: (岁),体重: ,和高度: (厘米)。所有参与者被告知程序、福利、和潜在风险,并书面同意参加。研究伦理委员会Faculdade de Ceilandia /巴西利亚大学批准了研究(94388718.8.0000.8093)依照1975年的赫尔辛基宣言。程序进行的强度实验室Faculdade de Educacao运动/巴西利亚大学。手稿报告根据配偶(舒尔茨et al . 2010年)。
参与者通过传单分发的招募当地大学和口头邀请。合格标准18 - 30岁,男性,身体健康,体力活动根据国际体力活动问卷调查,而不是从事系统的下肢力量训练。排除标准停止响应或重要的不适在海里( 每个位置的MVC),神经肌肉疾病,或肌肉骨骼的条件可能会限制实验过程。
2.2。随机化和分配隐藏
参与者打开一个不透明信封包含四个小纸表,每个图和描述一个位置。每个表里面没有看到信封,和订单已注册和使用的测试序列。职位是仰卧位(0°=臀部扩展)的膝盖弯曲60°(0°=全膝扩展)(SUP60);坐(85°)的髋关节屈曲膝关节屈曲60°(SIT60);仰着膝盖弯曲20°(SUP20),和坐在膝盖弯曲20°(SIT20)。这些组合关节角的选择,因为(1)60°的膝盖弯曲(或关闭)是最优的最大力量代(24];(2)声称,《纳米完全伸展膝盖时是可行的,因为它不需要修复的脚在一个特定的角度,但这种方法可以妥协的力量获得(25]。一旦扭矩阅读测力计的妥协当完全伸展膝盖时,我们选择20°的膝盖弯曲对比的最佳位置,同时保持一个简短的肌肉长度通常30°或低于26];(3)《纳米通常应用主题是坐着时,仰卧位,或中间;因此,我们选择两个远的位置(0°、85°)在不影响安全的生物力学(例如,过伸或身体前倾)。
2.3。干预措施
本研究涉及五个实验室访问:熟悉会话和四个实验课程,每个的位置(如随机化中描述)。所有的课程都是七天,长2 - 3小时,在白天进行(09.00点和04.00点之间)。参与者被指示不要摄取酒精和兴奋剂(如咖啡因、巧克力和性能补充),分别24和6小时访问之前,为了避免剧烈运动36 h在下次会议之前,日常饮食和保持。
2.4。一般设置
参与者接受实验时放置在一个测力计(系统4、Biodex医疗系统、纽约、美国)测量伸肌力矩(自发或诱发)的右膝。设备轴是视觉与膝盖弯曲伸缩轴,即。的外侧上髁股骨。膝盖和臀部的角度调整与测角仪和测功器的杠杆臂牢牢地粘附换能器是2 - 3厘米以上的外踝表带。受试者坚定稳定与皮带在胸部和骨盆带椅子,减少身体动作。
六世的EMG、VM和射频记录双用三双圆形氯化银电极(Ag) / Cl),每个测量直径20毫米,直径10毫米录音,由一个电极间的距离(中心)的20毫米。每一对电极纵向定位在QF的每个表面的腹部肌肉。一个参比电极固定髌骨的同侧下肢。电极放置之前,三分法和清洁用酒精是减少皮肤阻抗(< 5 kΩ)。EMG信号被放大带宽频率15赫兹到500赫兹( ; , )。然后,均方根(RMS);在μV)和中值频率(赫兹)获得使用Miotool系统(Miotec®)通过选择一个500 ms MVC的高原的窗口。
2.5。熟悉
首先,人体测量评估(体重和身高)和运动点进行定位。每个运动点在六世和VM的肌肉(bot et al . 2011年)被记录为膝的距离基地和大腿中线复制在下面的会话。随后,三个MVC和三个QMEC进行在每个位置让参与者熟悉程序和验证响应在纳米和安慰。在每个MVC中,参与者被鼓励口头上执行最大限度和接收视觉反馈产生的扭矩。实现QMEC,当前的振幅逐渐增加马在步骤2 - 10,根据参与者宽容。同时,参与者通知他们不适使用清廉数值范围内每次海里训练后,0表示没有不适,10代表的最大感觉不适。参与者被告知8 10的一份报告认为不适应该对应于最大允许电流振幅他们愿意忍受。此外,试验在给定角度将结束任何时候他们希望停止测试27]。每个位置的最大电流振幅在随后的会议注册和使用,允许快速成就的QMEC疲劳协议。
2.6。收缩易疲劳性协议
在每个实验环节,四个职位之一(SUP60, SIT60、SUP20 SIT20)进行疲劳检测的伸膝QF期间和之后12-QMEC协议。疲劳协议前,参与者执行两个mvc,监控扭矩和肌电图。纳米刺激器装置(Neurodyn 2.0, Ibramed、SP、巴西)被连接到两个孤立的电缆,和一双25厘米的自粘的电极2应用在汽车点。它是用脉冲电流(频率:100 Hz,阶段持续时间:500μ年代,上升时间:3 s,时间:4 s,衰减时间:3 s,关机时间:2分钟)。协议持续了26分钟(总共12宫缩)。这是收缩的数量需要一个完整的《成像评估在QMEC一项研究(28]。每个QMEC志愿者报道不适后,当前的振幅增加马(2 - 5),如果有必要,保持目标的不适程度8 10,如熟悉所述。受试者被要求完全放松在海里。检查所有刺激的物理参数都使用数字示波器(模型DS1050E;普源精电,俄亥俄州克利夫兰)。
2.7。结果
我们的结果是绝对诱发扭矩变化在12 QMEC和MVC(绝对和相对)和肌电图的变化(RMS和中值频率)前(基线)和后疲劳过程。
2.7.1。扭矩测量
转矩进行记录在12 QMEC协议和pre -和post-NMES MVC。为MVC中,我们使用两个尝试分离的意思是2分钟。MVC和QMEC和MVC,休息扭矩被记录在每个位置和用于随后的重力校正由于肢体的重量或其他力量,如结构的被动张力过膝盖。扭矩记录被保存在计算机后续评估使用数据采集设备新Miotool (POA Miotec生物医学设备有限公司,巴西)作为接口与测力计。软件中的数据读MiotecSuite 1.0 (Miotec Equipamentos Biomedicos, RS,巴西)通过选择500 ms窗口每个峰值高原的扭矩。
2.7.2。在最大随意收缩收缩疲劳
收缩易疲劳性量化是MVC扭矩之间的绝对和百分比变化前(基线)和post-NMES生成。根据获得的疲劳指数方程: (29日]。
2.7.3。在QMEC收缩易疲劳性评估
对获得的疲劳在海里,收缩易疲劳性量化是在第一次产生的转矩之间的绝对差QMEC和以下QMECs总(12)。
第2.7.4。疲劳评估从肌电图
RMS,我们显示的原始值(名rRMS)表面QF分开的选民,倒塌(即均值)。此外,我们证明了RMS求和所有选民和正常化的MVC扭矩(《全国抵抗运动)。这个过程需要比较条件和不同的扭矩值,一旦我们无法推断出个人对每种组分的扭矩的贡献。因此,一旦QF成分协同行动,总结RMS的影响从表面成分规范化的MVC担任代理整体激活肌肉组织。
2.8。统计分析
样本大小( )确定先验使用G权力(3.1.3版;德国特里尔大学特里尔)设置为水平的意义 和 。所有报告结果意味着及其95%置信区间(95% CI)。一个双向方差分析(位置[SUP60, SIT60 SUP20, SIT20]时间[预处理和post-QMEC])被用来观察MVC和《全国抵抗运动的差异。收缩易疲劳性指数分析了单向方差分析的主要作用位置。一个双向方差分析(位置通过时间(从1日到12日QMEC])被用来观察差异诱发扭矩。三方方差分析(位置通过肌肉(射频、六世和VM)时间[预处理和post-QMEC])被用来观察名rRMS和中值频率的差异。意义阈值被设定为 。当检测到显著的区别是,一个图基事后测试是用于识别的差异。尺度效应(部分埃塔平方- )计算和统计力量。所有统计分析使用Statistica 23.0(美国俄克拉何马州的塔尔萨STATSOFT Inc .)。
3所示。结果
3.1。在QMEC收缩易疲劳性评估
有一个显著的交互效应(位置通过时间QMEC) ( , , :0.14,功率:1.0)。所有图中演示了显著差异1(一),而图1 (b)显示了百分比变化。事后分析表明,QMEC SUP60比SIT60 ( )在1圣引起收缩。此外,SUP60和SIT60 QMEC大于SUP20和SIT20收缩( )。显著减少转矩发生只在SUP60 SIT60。SUP60,显著减少发生第五逐步收缩和下面的收缩( ),而显著减少转矩发生第七收缩和逐步在以下SIT60收缩( )。
(一)
(b)
3.2。在自愿的收缩收缩易疲劳性
之间的交互作用显著影响位置和时间发现了MVC ( , , :0.17、功率:0.80;图2(一个))。在基线和post-NMES, MVC是SUP60和SIT60大于SUP20和SIT20 ( )。比较两个跨度为,事后分析显示有显著减少SUP60 MVC ( ),SIT60 ( ),和SIT20 ( ),但不是在SUP20 ( )。疲劳指数图表示2 (b),这表明,考虑到变化百分比,SIT20减少扭矩大于SIT60 ( )和SUP20 ( )。
(一)
(b)
3.3。疲劳评估从肌电图
有一个互动的效果位置通过肌肉通过时间名rRMS ( , , :0.15,功率:0.93)。比较基线和post-NMES,名rRMS减少射频SIT60 ( )和SIT20 ( ),和VM SIT20 ( ;数据3 (c)- - - - - -3 (e))。还有一个交互位置通过时间( , , :0.36、权力:0.99),显示的代理的《名rRMS崩溃其表面的成分(图3(一个))。有显著减少名rRMS SUP20 ( )和SIT20 ( )后QMECs与基线相比。
(一)
(b)
(c)
(d)
(e)
还有一个交互位置通过时间( , , :0.17、权力:《全国抵抗运动(图0.81)3 (b))。事后分析显示增加全国抵抗运动在SUP60 QMECs相比基线( )。此外,在基线和QMECs之后,全国抵抗运动是低SUP60 SIT60 SUP20和SIT20(相比 )。
有一个互动的效果位置通过肌肉通过时间中值频率( , , :0.10,功率:0.77)。中值频率降低的射频SUP60 ( ;图4(一))和增加在SUP20六世( ;图4 (b)比较基线和post-NMES)。还有一个交互位置通过时间( , , :0.25,力量:0.96),显示的代理的《中值频率崩溃其表面的成分(图4 (d))。也有显著增加频率中值SUP20 ( )后QMECs与基线相比。
(一)
(b)
(c)
(d)
4所示。讨论
我们证明NMES-induced收缩易疲劳性取决于QF肌肉长度根据髋关节和膝关节关节角操纵。我们主要的新研究结果如下:(i)纳米后,所有职位除了SUP20 MVC的减少,相对于基线;(2)只在60°的膝盖位置,我的膝盖弯曲能够产生疲劳在海里,这是重要的5th(SUP60)和7th(SIT60) QMEC;(3)疲劳伴随着《全国抵抗运动的增加和减少的平均频率SUP60和减少QF名rRMS SUP20 SIT20;(iv) SUP20,唯一的位置没有减少MVC,中值频率的增加,主要由六世。我们的发现可能有助于临床医生解释收缩易疲劳性发作的协议海里,试图刺激设计更合理的临床策略。
4.1。疲劳时股四头肌最大诱发宫缩
收缩易疲劳性在海里被观察到在膝盖的位置只有60°的弯曲。这些头寸(SUP60和SIT60)也有更大的绝对比SUP20 QMEC和SIT20(图1)。同样,一项研究报告更疲劳的关节角的肌肉产生更大的力量前疲劳状态(更大的扭矩在65°相比20°、90°)(12]。与电刺激其他研究也支持这些发现,添加大易疲劳性的基本原理机制,增加代谢率和兴奋收缩偶联障碍(13),显示更大的外周疲劳股中间肌(30.和肌肉损伤31日]。然而,一些研究显示大疲劳肌肉长度较短(32,33]。最后,最近的一项研究表明,自愿收缩与延长膝关节角度(30°)抗疲劳超过60°和90°由于减少耗氧量30°(10]。进一步的研究是必要的阐明这一主题在NMES-induced疲劳协议。
在新鲜状态,我们表明,髋部扩展位置(SUP60)生成诱发扭矩大于臀部弯曲的位置(SIT60),反过来促进更大的和更早的疲劳。我们所知,这是第一个研究操纵QF长度在臀部的角度为疲劳评估纳米。先前的研究[14,15]发现躺的位置可以产生更大的诱发扭矩比坐着(膝盖弯曲角为90°),但收缩易疲劳性不是评估。在目前的研究中,更快疲劳发作SUP60可能表明一个更大的机械载荷对QF与改进的力量一代在细长的射频(34]。然而,其他机制可能涉及,包括改变合规膝伸肌的力量传输组件机制(35QF的选民之间)和肌间的连接(22]。
4.2。神经肌肉电刺激后收缩易疲劳性
在基线和MVC获得post-NMES(图2(一个)),减少转矩在大多数情况下可检测(SUP60、SIT60 SIT20),除了SUP20条件。有趣的是,疲劳没有定居在SIT20 QMECs期间,但在MVC后显示正确。目前,发病机制(中央或外围)底层NMES-induced收缩易疲劳性并不是完全建立,这将要求电生理学的结果像并购浪潮振幅。到目前为止,众所周知,自愿等距收缩产生中枢疲劳第一,然后外周疲劳(19),这也可能是QMECs,导致自愿减少转矩没有唤起SIT20扭矩的变化。然而,必须注意这个解释因为扭矩在纳米水平明显低于生产在MVC。因此,即使在QMEC,低扭矩可能隐藏的即时生成减少最大力量。
SUP20,伸长射频的髋部负责强行消除疲劳的在我们的协议,这也可能被解释成中等频率的增加,如以下所示会话。因此,我们建议QF性能变化有望通过髋关节角度变化。尽管射频是唯一biarticular QF组成,所有主要成分共享相同的插入和周围神经(即。股神经)(36]。肌肉协同共享肌间的结缔组织,允许一个解剖学和力学相互依存(22]。此外,担忧更大的感官不适在缩短肌肉最大收缩长度(对于SIT20)所描述的一些作者(2]。这可以解释不同的反应获得SUP20 SIT20。这些假设是投机,需要更多的研究来理解这个复杂的结果。
减少收缩易疲劳性指数显示更大的扭矩比SUP60 SIT20 SIT60。可能,这是由于基线SIT20的扭矩值越低,使得其他职位减少比例大于60°的膝盖弯曲。事实上,最近的一项研究与自主收缩(10]表明,更延长膝关节角度(30°)抗疲劳超过60°、90°由于减少耗氧量30°。转矩生成有关改善肌腱和肌肉的传播力、最优肌节/纤维长度,关键因素的生理结构配置力代改进(37]。因此,在临床实践中,有必要强调,高转矩和电流NMES-efficiency伴随着低被认为不适相关策略来加强和改善运动模式。
4.3。全国抵抗运动和中值频率
在SUP60(数据3 (c)- - - - - -3 (e)),QMEC之后,所有的《成分导致了小增量RMS MVC(图却在减少2(一个)),导致更大的全国抵抗运动在这个位置(图3 (b))。增加在全国抵抗运动疲劳发作之前证明是为了增加运动单位招聘(18]。在最近的研究中,未能维持MVC扭矩水平发生尽管增加了运动单位招聘,建议外周疲劳(38]。在SIT60,名rRMS往往是减少(VM除外),附带的MVC的减少。因此,全国抵抗运动保持不变。20°的职位,我的膝盖弯曲了RMS /扭矩比更大的新鲜和疲劳状态,指示一个补偿机制来产生更多的力量39]。这种效应可能与actin-myosin复杂不匹配,如预期的那样在缩短的位置。因此,这一事实可能引发激活逆差疲劳,证明了一致的名rRMS减少。
在SUP60,减少射频频率的中位数,以前发现疲劳自愿等距收缩后膝盖(19)和肘部两种(18]。因此,在疲劳状态,不增加MF,即。,the rate of alpha motor neuron discharge by the central nervous system [40),可能减少力发电能力的一个重要因素。RF可能关键诱发转矩观测在SUP60略大于SIT60(图1)。有趣的是,在SUP60,只有射频显示(图曼氏金融的减少4(一))。在SUP20,唯一位置没有明显减少MVC,我们发现中值频率(数字的增加3 (b)和3 (d))。对这个职位来说,重要的是主要负责这个补偿提高功率谱,这可能表明一个转变的类型运动单位招募或运动单位放电率,这对肌肉疲劳的恢复是至关重要的因素(41]。此外,中值频率往往从最细长的逐渐增加(SUP60)最缩短(SIT20)条件,这是之前证明(42,43]。
4.4。限制
一些限制在当前研究中必须突出显示。这项研究是一个广泛的研究的一部分,要求转矩为QMEC可靠性。因此,我们允许休息两分钟宫缩之间的时期。此外,我们逐渐增加当前振幅每次收缩后,当所允许的志愿者,以补偿电流的神经肌肉住宿(3)和维护真正的QMEC不适水平的8/10。尽管如此,我们认为,这一战略是现实的,因为它是推荐在临床实践3),只允许我们探测与疲劳相关的变化QF(不只是一个住宿的电流)。此外,还有其他工具收缩易疲劳性评估,我们没有使用(例如,并购浪潮振幅,代谢途径),我们没有考虑深股中间肌的肌电图的贡献。最后,我们的结果是有限的特定角度,人口,和时间框架。因此,是否长时间变化的髋关节和膝关节关节角将继续决定收缩易疲劳性发作仍然是一个挑衅的假说进行进一步的调查。
4.5。实际意义
NMES-induced收缩易疲劳性可能是理想的或根据培养目标应该推迟。例如,功能性电刺激通常用于长时间的活动,像走44和骑自行车45),同时为加强和纳米肥大需要过载在相对较短的练习(3]。在前应用,早期疲劳是避免让活动完成,而在后者,疲劳可能会表明训练强度高,所以它应该预期。我们表明,肌肉长度调节疲劳发作,这表明髋关节和膝关节关节角可能控制战略根据培训目的和特异性。当前数据加强利用角操纵的循证临床决策方法。
5。结论
总之,QF NMES-induced收缩易疲劳性取决于肌肉长度髋关节和膝关节角度变化。收缩易疲劳性是膝盖弯曲60°时大于20°。膝盖弯曲60°时,仰卧位促进早期疲劳,但膝盖弯曲20°时,仰卧位延迟疲劳发作相比,坐的位置。EMG信号分析揭示了QF RMS值的增加和减少射频频率中值SUP60位置。在SUP20,中值频率的增加可能青睐扭矩维护水平。在SIT20,有减少MVC,但不是在诱发扭矩。这些结果提供了一个理由下肢定位在海里,这取决于培训目标,例如,加强或特定于任务的功能训练。
缩写
| 纳米: | 神经肌肉电刺激 |
| MVC: | 最大随意收缩 |
| QMEC: | 股四头肌最大诱发收缩 |
| QF: | 股四头肌 |
| 射频: | 股直肌 |
| 六世: | 股外侧肌 |
| 虚拟机: | 股内侧肌 |
| 肌电图: | 肌电图、肌 |
| RMS: | 均方根 |
| 名rRMS: | 生的均方根 |
| 全国抵抗运动: | 归一化均方根。 |
数据可用性
数据(原始文件和电子表格软件)可以规定要求。
的利益冲突
作者声明没有潜在的利益冲突的研究,本文的作者和出版。
作者的贡献
JGTC、NB和JLQD负责概念和设计;IVSN JGTC, AAV LGJF,阿姆思,和RCM分析和解释;,AAV JGTC LGJF、IVSN RCM, NB, JLQD手稿草案和知识内容。所有作者修订和批准的最终版本的手稿。
确认
我们感激那些给他们的时间和精力参与这项研究。这个项目得到了Coordenacao de Aperfeicoamento de Pessoal de含量优越,巴西(斗篷财务代码001),慰问Nacional de Desenvolvimento Cientifico e学府(CNPq进程号。:404746/2018-7 312136/2018-8和310269/2021-0),Fundacao de帕罗尽管做联邦区(FAPDF过程。00193.0000168 / 2019 - 87和00193.00001222 / 2021 - 26),Decanato de尽管e Inovacao,巴西利亚大学(DPI过程。04/2019),Decanato de Pos-Graduacao巴西利亚大学(DPG过程。0001/2022)。