TY - JOUR A2 - De Angelis, M. A2 - Blazquez, J. R. AU - Sasuga, Shintaro AU - Osada, Toshiya PY - 2012 DA - 2012/12/31 TI - The Reporter System for GPCR Assay with The裂变酵母粟酒裂殖酵母SP - 674256 VL - 2012 AB - G蛋白偶联受体(GPCRs)与多种生物活性相关。酵母常被用作异种GPCR检测的宿主。我们通过内源性GPCR途径,设计了裂变酵母强烈报告质粒生成绿色荧光蛋白(GFP)。作为报告质粒上GFP表达的控制区,我们重点研究了通过该途径特异性激活的7个内源性基因。当这些基因的上游区域与LPI终止子结合作为诱导启动子时
mam2在高背景下,上游区域产生GFP的速度最快,强度最大。随后,LPI终止子被相应的下游区域取代。SPBC4.01下游区域以低背景增强响应。此外,结合SPBC4.01下游区域和sxa2上游区域,其信噪比明显优于其他区域。我们还评估了由报告质粒转化的菌株的GFP产生的时间和剂量依赖性。最后,我们建立了在外源启动子控制下表达内源性GPCR的报告质粒的简化GPCR检测模型。SN - null UR - https://doi.org/10.6064/2012/674256 DO - 10.6064/2012/674256 JF - Scientifica PB - Hindawi Publishing Corporation KW - ER -