TY - JOUR A2 - Rodr guez Lozano, Francisco J. AU - Suga, Takenori AU -臼井，michiko AU - Onizuka, Satoru AU - Sano, Kotaro AU - Sato, Tsuyoshi AU - Nakazawa, koji AU - Ariyoshi, Wataru AU - Nishihara, Tatsuji AU - Nakashima，PY - 2021 DA -圭佑2021/10/19 TI -表征和研究人类牙周间充质干细胞的基因表达谱在球体文化通过转录组分析SP - 5592804六世- 2021 AB -球体被称为一个三维的文化模式,更好的模拟生理条件的干细胞。本研究旨在通过RNA-seq分析，识别球形培养的人牙周膜间充质干细胞(hPDLMSCs)中特异性表达的基因，评估其功能。使用4例患者的hPDLMSCs的球形和单层培养进行转录组分析。聚类分析和基因本体论分析显示，参与细胞与细胞粘附以及有丝分裂细胞周期G2/M和G1/S转换的基因在单层培养组中表达强烈。然而，参与细胞增殖负调控、组蛋白去乙酰化和骨形态发生蛋白信号转导的基因在球形培养组中强烈表达。我们重点研究转录因子核受体亚家族4 A组成员2 ( NR4A2)在球形培养组中强烈表达的基因中，分析其功能。为了确认转录组分析的结果，我们进行了实时聚合酶链反应和western blotting分析。有趣的是，我们发现NR4A2的mRNA和蛋白在球形培养的hPDLMSCs中表达强烈。在成骨分化条件下，我们使用siRNA敲除球形培养hPDLMSCs中的NR4A2，验证其在成骨中的作用。我们发现NR4A2敲低显著提高了成骨相关基因碱性磷酸酶( 高山),骨桥蛋白( OPN)和1型胶原蛋白( COL1)(学生的搭配 t 以及, p < 0．05 )．ALP活性也显著增加时，与阴性对照组(学生的配对 t 以及, p < 0．05 )．此外，转染siNR4A2的球形培养hPDLMSCs培养12天，结果与阴性对照组相比，形成了明显更大的钙化结节(学生的配对) t 以及, p < 0．05 )．另一方面，hPDLMSC球形体中NR4A2的敲除并不影响软骨形成和脂肪形成条件下的软骨形成和脂肪形成相关基因水平。这些结果表明，NR4A2负调控hPDLMSCs球形培养成骨。SN - 1687-966X UR - https://doi.org/10.1155/2021/5592804 DO - 10.1155/2021/5592804 JF -干细胞国际PB - Hindawi KW - ER -