TY - JOUR A2 - 罗萨，亚历山德罗AU - 杨，滨盟 - 旷，军棋AU - 吴，Chuman AU - 周，文艺AU - 朱Shuoji AU - 江，好东AU - 斋，紫薇AU - 吴，越盟 -彭，君威AU - 刘，南玻AU - 胡海岩AU - IDE中，纳赛尔·穆萨AU - 陈，瑞平AU - 赵，王明义AU - 朱萍PY - 2020 DA - 2020年2月3日TI - 筛选基因促进出口从多能性幼稚 - 基于基因组范围CRISPR-Cas9敲除SP - 8483035 VL - 2020 AB - 的干细胞和再生医学的主要问题中的两个是多能性和分化的功能性细胞或组织中退出。回答这两个问题持有干细胞的临床翻译巨大价值以及再生医学研究。虽然打桩研究已经揭示有关的多能性维持的真相，多能细胞的自我更新，增殖和分化成特定细胞谱系或组织的基础的机制仍有待确定。为此，我们采取了新技术的充分利用，即基因组范围内CRISPR-Cas9敲除（壁虎）。作为在基因组中的特定位点引入靶向丧失功能的突变的一种有效的方式，壁虎能够屏幕中为是，在小鼠胚胎干细胞（mESCs）首次推动退出多能性的关键基因的无偏方式。在这项研究中，我们成功地建立了基于Gecko的模型筛选多能性撤退的关键基因。我们的战略包括慢病毒包装和感染技术，LENTI-Cas9基因敲除技术，shRNA的基因敲除技术，新一代测序，基因组范围内CRISPR-Cas9的基于模型的分析敲除（MAGeCK分析），GO分析等方法。我们的发现提供了参与多能退出的基因大规模筛选的新方法，并提供细胞命运调控研究的切入点。 SN - 1687-966X UR - https://doi.org/10.1155/2020/8483035 DO - 10.1155/2020/8483035 JF - Stem Cells International PB - Hindawi KW - ER -