TY - JOUR A2 - Carter, Mark G. AU - Wilber, Andrew AU - Ulloa Montoya, Fernando AU - Hammer, Luke AU - Moriarity, Branden S. AU - Geurts, Aron M. AU - Largaespada, David A. AU - Verfaillie, Catherine M. AU - McIvor, R. Scott AU - Lakshmipathy,Uma PY - 2011 DA - 2011/10/02 TI - Efficient Non-Viral Integration and Stable Gene Expression in Multipotent Adult Progenitor Cells SP - 717069 VL - 2011 AB - Non-Viral Integration systems, PhiC31 phagintegrase (
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C31),
睡美人转座子酶(SB),提供了一种有效的检测方法
体外基因导入细胞。在这里,我们使用了编码GFP和新霉素磷酸转移酶的质粒以及两者的识别序列
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C31和SB整合系统,证明这两个系统有效地介导了培养的人成纤维细胞和大鼠多能成体祖细胞(rMAPC)的整合。对g418抗性的rmac克隆进行Southern blot分析,结果显示,每个克隆中sb介导的插入数量比g418抗性的rmac高2倍
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C31。染色体连接位点的序列鉴定表明sb介导的整合物是随机的,而sb介导的整合物是受限的
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C31要素。在这两种系统下产生的转基因rMAPC,虽然GFP表达明显减弱,但仍能分化为肝脏和内皮细胞。我们的结论是SB和
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C31是干细胞生物学基础研究中MAPC基因工程有效的非病毒整合系统。SN - 1687-966X UR - https://doi.org/10.4061/2011/717069 DO - 10.4061/2011/717069 JF - Stem Cells International PB - SAGE-Hindawi Access to Research KW - ER -