油酸和Hydroxytyrosol抑制胆固醇和脂肪酸合成在C6神经胶质瘤细胞

文摘

最近,天然化合物的发现能够调节神经系统功能显示健康大脑的新视角。在这里,我们调查的影响,油酸(OA)和hydroxytyrosol (HTyr),两个重要的特级初榨橄榄油化合物,脂质合成在C6神经胶质瘤细胞。OA和HTyr抑制新创脂肪酸和胆固醇合成而不影响细胞的生存能力。单个化合物的抑制作用更明显如果OA和HTyr管理相结合。减少极性脂类生物合成也被检测到,而甘油三酯合成略受影响。澄清这些化合物的降脂机制,影响脂肪酸生物合成的关键酶的活性(乙酰辅酶a carboxylase-ACC和脂肪酸synthase-FAS)和cholesterologenesis (3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase-HMGCR)进行了原位利用digitonin-permeabilized C6细胞。ACC和HMGCR活动尤其4 h(25后减少μ米OA和HTyr治疗。没有观察到变化FAS活动。抑制ACC和HMGCR活动证实了信使rna和蛋白质丰度水平的降低。我们的研究结果表明直接和快速downregulatory效应的两个橄榄油在C6细胞脂质合成的化合物。

1。介绍

特级初榨橄榄油(EVOO),地中海饮食中脂肪的主要来源,是许多研究的主题,因为一些流行病学数据显示,它积极地影响人类的健康,降低癌症的发病率,高血压和心血管疾病(1,2]。除了这些公认的影响,最近的临床研究支持地中海饮食的功效,它的主要脂肪也对认知能力下降与衰老有关的发病和进展以及许多神经退行性疾病。在这种神经系统环境中,多个数据突出EVOO丰富的天然化合物的作用[3,4]。

EVOO健康效应可以归因于大量的分子包含在其可皂化的(脂肪酸)和不皂化物(主要是胆固醇)分数。最初,EVOO有益的特性是由其高油酸(OA)中的内容。据称OA消费促进心血管疾病预防和影响体内平衡和代谢基因的表达,保护组织免受氧化和炎症过程与老化,退化性疾病和癌症(5- - - - - -9]。在先前的研究对大鼠C6胶质瘤细胞(5),它已经表明,在各种脂肪酸,OA是最有效的downregulator脂质合成。

在过去的十年中,大量的科学发现凸显了许多EVOO有益作用不仅可以为其主要脂肪酸的不饱和性质OA也EVOO小化合物的生物活性,可以通过直接和间接两方面的机制作用于细胞,后者调节基因表达(6,8- - - - - -10]。EVOO次要成分中,酚类化合物hydroxytyrosol (2 (3 4-dihydroxyphenyl)乙醇HTyr)被认为是最有效的抗氧化剂之一。HTyr消费有一定的好处,和负责的机制,这些影响主要归因于其清除活性氧的能力,提高内源性抗氧化系统(11]。在之前的研究主要进行大鼠肝细胞(12,13),我们发现HTyr(单独或作为粗提物的一部分)突出能力的调节脂质代谢相关的酶活性。

白色脂肪组织后,大脑是身体的脂质含量最高的器官。脂类的生物合成和沉积发挥关键作用在维持大脑结构和功能。改变脂质代谢的原因或与许多神经系统疾病(14,15]。

衰减的年龄和疾病有关的认知下降橄榄油或较小的化合物已被观察到细胞,动物,和人类模型(16- - - - - -18]。在这些研究中,减少氧化损伤和抗氧化防御系统的调制。然而,除了抗氧化和抗炎活动,其他机制可能构成EVOO小化合物对大脑发展的有利影响和体内平衡3,16- - - - - -18]。

考虑到需要化疗干预对神经系统疾病(19)和脂肪酸和抗氧化剂的假定的角色在这个领域(7,15,20.),还需要进一步的研究来了解EVOO化合物对神经退行性过程的影响。C6神经胶质瘤细胞呈现大量的astrocyte-expressing酶活动(21,22),表现出一种普遍astrocyte-like表型在serum-rich培养基培养(23]。因此,他们被认为是一个有用的细胞模型来研究脑功能障碍(20.,24]。

据我们所知,这是第一个研究EVOO选民对脂质代谢的影响在胶质细胞被调查。详细,本研究关注的影响cosupplementation OA和HTyr胆固醇和脂肪酸合成的神经胶质细胞。

2。材料和方法

2.1。材料

大鼠C6胶质瘤细胞从美国文化集合类型。杜尔贝科的修改鹰high-glucose介质(DMEM),胎牛血清(的边后卫)、青霉素、链霉素、磷酸缓冲溶液(PBS)和3 - 4,5-dimethylthiazol-2-yl 2, 5-diphenyltetrazolium溴化(MTT)获得Gibco-Invitrogen有限公司(英国佩斯利);(1 -¹⁴C)醋酸是来自通用电气医疗集团(小都,英国);(1 -¹⁴(3 - C]乙酰辅酶a¹⁴3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA ([3 - C)¹⁴C]β)获得PerkinElmer(波士顿)。主要抗体乙酰辅酶a羧化酶(ACC),脂肪酸合酶(FAS)α得到了微管蛋白从细胞信号技术(波士顿)。抗体对3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA还原酶(HMGCR)以及辣根peroxidase-conjugated免疫球蛋白是来自圣克鲁斯生物技术(达拉斯,TX)。从Sigma-Aldrich获得,所有其他试剂均为分析纯。

2.2。细胞培养

C6细胞在DMEM补充与青霉素、链霉素的边后卫10%和1%,在37°C在湿润的气氛中5%的有限公司₂。除非另有说明在文本,C6细胞被播种在6-well板块(纽约康宁公司康宁)5×10的密度⁵细胞每10% FBS-supplemented培养基培养。电镀后24小时,中被改变,进一步的24小时后,OA钠盐和HTyr添加4 h,异常或coincubation DMEM培养基,获得25μ米决赛浓度。OA原液在DMEM和HTyr股票的解决方案是10毫米100毫米溶解在二甲亚砜(DMSO)。对于每一个决心,未经处理的控制细胞也被考虑。

2.3。细胞生存能力分析

MTT测定细胞增殖和生存能力评估。到这个目的,C6细胞培养密度的5×10³细胞/在96孔板(纽约康宁公司康宁),24小时之后,serum-rich介质被刷新。进一步的24小时后,细胞被孵化与OA和/或HTyr 4 h,为每个示例使用三个浓度:25μ50米,μ米,100μOA和/或HTyr M。然后,单层细胞孵化了肝癌和3 h和1毫克/毫升。活细胞的线粒体将黄色的四唑化合物的紫色甲瓒导数。甲瓒晶体形成的细胞溶解在100年μL DMSO,吸光度测量在570 nm使用Multiskan FC ELISA读者(热费希尔科学、沃尔瑟姆,MA)。计算能力的相对吸光度比例控制细胞。

2.4。脂肪酸和胆固醇的合成

乙酰辅酶a是脂肪酸和胆固醇合成的前体。脂肪生成的活动被纳入[1 -监控¹⁴C]醋酸(16毫米,0.96 mCi /摩尔)中总脂肪酸和胆固醇基本上Gnoni et al。25]。细胞培养4 h和25μM OA和/或25μM HTyr。贴上醋酸添加1 h之前结束实验。

终止脂肪生成的分析,媒介是吸气和细胞被洗了三次冰冷的PBS除去未反应的醋酸,和反应是停在1.5毫升0.5 N氢氧化钠。

这些细胞被刮掉,转移到试管中,并与ethanolic KOH皂化。固醇类和脂肪酸提取和计算放射性报道(25]。

2.5。色谱分析放射性标记的脂质分数

醋酸放射性标记并入磷脂和中性脂质进行了分析。潜伏期结束时,这些细胞被洗冰冷的PBS和氯化钾的反应是阻塞2 mL: CH₃哦(1:2,v/v)。总脂质提取据布莱和代尔(26),通过薄层色谱法来解决在硅胶板,使用CHCl开发系统₃:CH₃哦:28% NH₄哦(65:25:4),法国:乙醚,乙酸(80:20:1)磷脂和中性脂质分析,分别。脂质斑点可视化与碘蒸气和刮为放射性测量计数瓶(5]。

2.6。色谱分析放射性标记的脂肪酸

高效液相色谱的分析提取脂肪酸进行报道(5]。20μL(样本注入贝克曼库尔特系统黄金溶剂可编程模块125和家具使用C18 ODS柱(4.6×250毫米)和二极管阵列检测器168(贝克曼库尔特、米兰、)。两个移动阶段用于洗脱:溶剂,由乙腈:水(4:1)和跑了45分钟,溶剂B,由乙腈,跑了15分钟。流量是2毫升/分钟和检测在242海里。筛选了分数进行辐射测量。

2.7。测定脂肪生成的酶的活动

ACC活动决心放射性标记乙酰辅酶a的合并为脂肪酸的分析加上FAS活动。这种方法绕过了干扰与经典的重碳酸盐分析(27]。ACC和FAS活动确定digitonin-permeabilized C6细胞。细胞透化作用,通过使用一个包含400测定混合μ洋地黄皂苷(克/毫升5),代表了一个适当的工具直接原位(即研究酶活性。或多或少,在一个自然环境)。

FAS活动是通过测量[1的公司——化验¹⁴C]乙酰辅酶a为ACC脂肪酸实际上如上所述活动,除了0.2毫米malonyl-CoA包括ATP, butyryl-CoA和FAS digitonin-containing测定混合物中省略了28]。37°C的测定进行了10分钟。

脂肪生成的化验都停在增加100μL 10 M氢氧化钠。样本通过添加5毫升的CH皂化₃哦和沸腾管上限45 - 60分钟。酸化后200μL 12 M盐酸,放射性的脂肪酸提取和统计(5]。

ACC的活动和FAS表达nanomoles [1 -¹⁴C]乙酰辅酶a纳入脂肪酸每分钟每毫克的蛋白质。

2.8。活动分析3-Hydroxy-3-Methylglutaryl-CoA还原酶(HMGCR)

HMGCR是速率控制酶生物合成的胆固醇。HMGCR活动试验进行了本质上如[5]。短暂,C6细胞被播种密度的2×10⁶细胞每100毫米直径的培养皿。48小时后,25岁μ米OA和HTyr添加异常或coincubation媒介4 h。然后,细胞中被丢弃,被刮到一个缓冲区包含50 mM Tris-HCl氯化钠(pH值7.4)和150毫米。离心(900×g, 3分钟后,室温),颗粒在液态氮冷冻,保存在−80°C到使用。

细胞提取从球准备解冻,resuspended,随后用于HMGCR活动分析(5]。反应开始的[3 -¹⁴C]β- (75μ1.8 M, Ci /摩尔)。在37°C, 120分钟后的反应是停止增加20倍μL 7 M盐酸。转换后mevalonolactone发生额外的60分钟孵化37°C和放射性产品被薄层色谱分离,使用甲苯:丙酮(1:1)作为流动相。放射性斑点收集和统计。作为内部标准,³使用H] mevalonolactone。

2.9。隔离从C6细胞的RNA和实时qPCR分析

从C6细胞总RNA分离使用SV总RNA隔离系统工具包(Promega),遵循制造商的指示。逆转录酶反应(20μ使用5 l)进行μ克总RNA, 100 ng随机五个一,200单位的上标三世核糖核酸酶H-Reverse转录酶(生活Technologies-Thermo费舍尔科学,沃尔瑟姆,MA) (29日]。

基因表达定量分析使用SYBR®选择主混合排名(生活Technologies-Thermo费舍尔科学,沃尔瑟姆,MA)和18 s rRNA正常化。引物用于定量实时PCR分析如下(5到3):rFASNfor CTCTGGTGGTGTCTACATTTC;rFASNrev GAGCTCTTTCTGCAGGATAG;rACCfor CTTGGAGCAGAGAACCTTCG;rACCrev;CCTGGATGGTTCTTTGTCCC;rHMGCRfor CTCACAGGATGAAGTAAGGG;rHMGCRrev CTGAGCTGCCAAATTGGACG [30.]

2.10。免疫印迹分析

6-well培养皿中的细胞治疗OA和/或上述HTyr和细胞溶解(如前所述)(12]。提取煮5分钟,样品含有等量的总蛋白(25μg)加载到10% SDS-polyacrylamide凝胶。蛋白质电泳后,被转移到硝酸纤维素(13]。膜检测ACC、FAS和HMGCR,具体主要抗体孵育1.5 h在室温下然后用适当的辣根1 h peroxidase-conjugated免疫球蛋白(稀释1:5000)。信号被增强化学发光检测使用Amersham ECL +工具包(通用电气医疗集团、米兰、意大利)。Beta-actin检测用于信号归一化。

3所示。统计分析

数据意味着±s.d表示数量的实验。结果计算与Excel(微软10)。比较组间是用单向方差分析(方差分析)。平均值之间的差异进行了测试,使用Bonferroni事后测试。所有统计分析都由GraphPad棱镜6软件(GraphPad软件公司,拉霍亚,CA)。被认为具有统计显著性差异 。

4所示。结果

4.1。细胞生存能力

MTT试验表明,C6细胞孵化与OA或HTyr (25μ50米,μ米,100μM 4 h),有相同的控制细胞的生存能力在每个测试浓度(图1)。此外,coincubation OA和HTyr没有施加任何细胞毒性效应。这些发现证实了形态学观察、蛋白质分析和台盼蓝排斥(数据没有显示)。因此,所有进一步的实验进行细胞治疗25μM OA, 25μM HTyr,或它们的组合和孵化4 h为了排除假定的非特异性毒性作用,同时使用最低有效浓度。

4.2。OA的影响,HTyr及其组合对胆固醇和脂肪酸合成

乙酸在细胞转化为乙酰辅酶a,它代表了一种常见的脂肪酸和胆固醇合成的前体。因此,这两种代谢途径同时使用贴上醋酸作为前体紧随其后。

酒吧图在图2显示显著减少[1 -¹⁴C)醋酸纳入总胆固醇(图2(一个))和脂肪酸(图2 (b))。特别是,当C6细胞被孵化4 h与OA或HTyr分别减少24%和18% [1 -¹⁴C)醋酸纳入观察胆固醇。这种抑制作用更明显(−36%未经处理的细胞)如果OA和HTyr增加细胞结合。

关于cholesterologenesis,脂肪酸合成被EVOO化合物在调查中更大的影响。孵化与OA C6细胞的异常,醋酸或HTyr导致减少放射性标记并入脂肪酸约56%和23%,分别比,以控制细胞。类似地,胆固醇合成、脂肪酸合成抑制更为明显(−68%未经处理的细胞)经过4 h的OA和HTyr coincubation C6细胞。

4.3。醋酸EVOO组件对放射性标记的影响纳入磷脂和中性脂质

自从新合成脂肪酸主要是纳入复杂的脂质,OA的影响以及HTyr除了C6神经胶质瘤细胞[1 -¹⁴C)醋酸并入极地和中性脂质测试(表1)。一般减少标记前体纳入所有的磷脂,特别是为磷脂酰胆碱,最丰富的磷脂在C6神经胶质瘤细胞,观察主要细胞孵化时4 h OA和HTyr组合。在中性脂质,unesterified脂肪酸,胆固醇和胆固醇酯的分数显示显著减少放射性公司由于EVOO复合添加。有趣的是,只有轻微的减少将贴上醋酸为甘油三脂(TG)添加OA和HTyr后检测。

4.4。分析新合成放射性标记的脂肪酸

为了探讨OA的效果和HTyr增加C6细胞的单个脂肪酸合成醋酸,高效液相色谱法分析总脂肪酸的提取进行了。

图3与以前的研究结果表明,在协议(5),在控制细胞中,醋酸标签合并成单个脂肪酸是按照以下顺序:棕榈酸(0)>硬脂酸(C18:0) >油酸(C18:1)。只有少量的放射性物质被纳入其他脂肪酸(数据没有显示)。减少约50%的放射性标记并入软脂酸、硬脂,并观察油酸OA的细胞,同时减少近30%是证明在HTyr治疗。[1 -的抑制作用¹⁴C)醋酸并入脂肪酸是更加明显(大约70%)当哦和HTyr都同时添加到媒介文化。

4.5。活动的调制ACC、FAS和HMGCR OA, HTyr,他们的组合

棕榈酸和(在较小程度上的硬脂酸是主要的脂肪酸的从头合成的最终产品。

为了确定影响脂类生物合成途径的酶步骤OA, HTyr,及其组合,实验测定的活动的关键酶ACC和FAS新创脂肪酸合成和HMGCR胆固醇合成。所有酶的活动被原位测量化验使用digitonin-permeabilized C6细胞。

4 h与25 C6细胞的培养μM OA或HTyr引起ACC活动减少45%和19%,分别为(图4)。进一步衰减(−56%未经处理的细胞)是测量这些化合物coincubated时。

OA或HTyr HMGCR的活性降低29%和16%,分别。在coincubation,抑制更为明显。事实上,HMGCR活动达到61%,控制细胞中观察到25的存在μM OA和25μM HTyr。

值得注意的是,FAS活动不影响孵化条件。

HMGCR的ACC的活动减少,是按照图的结果2,以减少总合成脂肪酸(图2(一个)(图)和胆固醇2 (b))从[1 -¹⁴C)醋酸。

4.6。ACC的监管、FAS和OA HMGCR表达式,HTyr和OA + HTyr

接下来,OA施加的分子机制负责调制或HTyr above-reported酶活性。这一目标,大量的信使rna编码ACC, FAS,和HMGCR被实时qPCR分析量化,和相应的编码蛋白是由西方墨点法。

在细胞治疗,减少ACC mRNA观察丰富(图5(一个))。OA潜伏期后,ACC对mRNA水平下降了约42%,以控制细胞;HTyr异常添加到细胞培养介质施加轻微的抑制作用。在所有的实验条件测试,没有发现显著变化丰富的FAS mRNA(图5(一个))。4 h孵化后25μ25 M OA单独或结合μM HTyr HMGCR mRNA的数量降低了18%和22%,分别为(图5(一个))。结果对ACC、FAS和HMGCR mRNA富足,也证实了各自的蛋白质免疫印迹分析内容(图5 (b))。

5。讨论

地中海饮食被认为健康的饮食方案,减少相关的风险等病理代谢紊乱和心血管疾病1,2,6,31日,32]。EVOO是地中海饮食的重要组成部分,它的特点是具有生物活性的植物营养素,具有抗氧化和抗炎作用,单不饱和脂肪酸(OA)脂肪的来源。

研究的研究小组建立了膳食脂肪酸的变化或摄入的酚类化合物能够影响细胞代谢和监管过程神经元和神经胶质细胞3,5,17,24),支持越来越多的迹象显示,EVOO活性成分可以拥有巨大的潜力来减少神经退行性疾病的发病率(3,18,33]。必须强调,大多数这些研究主要关注的抗氧化和抗炎活动脂肪酸(7)和酚类化合物(20.),不考虑其可能的代谢的直接行动,如脂类的生物合成。

脂质神经元膜的基本组件,对于大脑功能至关重要。胆固醇和脂肪酸尤其存在于突触膜和膜流动性和扮演着重要角色的形成专业microdomains,脂质筏、突触传递的关键(34]。

脑脂质可以来自血液和/或内生合成。脂肪酸可以穿过血脑屏障,一个复杂的过程,涉及扩散和protein-mediated运输主要由脂肪酸发生运输蛋白1和含有(FATP-1和FATP-4)在人类和老鼠34]。脂质合成在神经元而不是神经胶质细胞是低效的。在体外研究表明,星形胶质细胞,最丰富的神经胶质细胞,合成和释放脂质复合体的载脂蛋白E - (ApoE)含有脂蛋白(35]。因此,神经功能是负面影响摄动脂质代谢已观察到在一些神经系统疾病,如患有尼曼氏病(36),阿尔茨海默病(37],亨廷顿氏舞蹈症[38),帕金森病(39),和肌萎缩性脊髓侧索硬化症40]。

尽管EVOO生物活性化合物的重要作用在大脑功能和新陈代谢,对他们的行动在脂肪生成胶质细胞(5]。

这项工作主要是表明,脂肪酸和胆固醇合成,而活跃在培养胶质瘤C6细胞[1 -¹⁴C)乙酸作为共同的前体代谢途径,从而增加了进一步支持先前的发现(5]。值得注意的是,在人类恶性胶质细胞,与正常的同行相比,一个非常活跃的新创脂肪酸和胆固醇合成已报告(41]。

目前的研究代表了直接和快速的第一份报告EVOO主要化合物的效果(OA和HTyr)在老鼠的神经胶质瘤细胞脂质合成。我们在C6细胞显示,OA和HTyr引起放射性标记的快速(4小时内)抑制醋酸并入胆固醇和脂肪酸分数。快速EVOO组件对这两种途径的影响被描述在不同的细胞培养(12,13]。单一不饱和脂肪酸在OA,代表最丰富的脂肪酸在EVOO(大约70%),多不饱和脂肪酸(如亚油酸)和饱和脂肪酸(主要是棕榈酸)明显出现在EVOO的脂肪酸分数。然而,娜塔莉等人报道,OA是最有效的减少脂质合成在C6细胞(5]。

控制细胞相比,放射性标记前体并入胆固醇在细胞孵化25下降了约30%μM OA和25μM HTyr(图2(一个))。这个结果可以解释,至少在某种程度上,通过减少HMGCR活动(图4)和胆固醇合成的调节酶,这是合理的相关HMGCR表达的变化。的确,HMGCR在mRNA和蛋白水平的表达明显降低在C6细胞治疗OA和HTyr。

然而,减少cholesterologenesis EVOO活性化合物通常是不那么明显,与脂肪酸合成相比,特别是在OA和HTyr coincubation。

孵化C6细胞与OA HTyr异常或结合减少[1 -引起的¹⁴C)醋酸并入脂肪酸和随后的酯化成复杂的脂质。最强的抑制贴上醋酸并入磷脂分数,主要为磷脂酰胆碱,观察OA和HTyr coincubation(表1)。

与磷脂、TG合成在C6细胞似乎不受EVOO化合物。相反的趋势据报道发生在鼠肝细胞,EVOO组件,几乎没有影响磷脂合成,大大减少醋酸并入TG (12,13]。这些发现是在协议与肝细胞的作用在TG合成42)和假设饮食酚类化合物可能有保护作用对肝脂肪变性(12,13]。磷脂和胆固醇是生物膜的重要组成部分。因此,显著减少我们观察到本研究的磷脂和胆固醇合成所OA和HTyr让我们假设EVOO组件可能在C6细胞调节转向膜生物起源细胞中性脂类的积累。实际上,这个假说是由以前的研究证实,表明脂肪酸体内添加到C6细胞可能代表特定的控制gliomatous增长(5,43,44]。

Coincubation OA和HTyr大大减少[1 -的合并¹⁴C)乙酸成单个脂肪酸,尤其是棕榈酸(图3),主要脂肪酸的从头合成的最终产品。这种代谢途径由两个酶催化系统工作顺序:ACC和FAS。ACC的活动,提交的第一步在脂肪酸的生物合成,降低在C6细胞治疗OA HTyr一起。然后,ACC活动下降在OA - / HTyr-treated C6细胞可以解释,至少在一定程度上减少[1 -¹⁴C)醋酸纳入整个脂肪酸部分观察图2。这个减少的分子机制进一步深化,我们的研究结果清楚地表明,coincubation OA和HTyr ACC mRNA丰富或蛋白质水平降低。相反,在我们的实验条件,4 h(治疗OA和/或HTyr孵化活动几乎没有影响FAS和FAS信使rna和蛋白质丰度水平。对FAS的明显不敏感4 h OA和HTyr孵化,值得注意的是,虽然ACC是受短期和长期机制,只有后者参与FAS调制(12,45]。

一个伟大的证据表明HTyr作为一种强有力的抗氧化剂,以及减少活性氧的能力(ROS)两种在体外和在活的有机体内实验记录(已审核,请参阅[46])。最近的作品强调,ROS促进固醇调节元件结合蛋白的表达(如)47,48)和关键酶的转录因子参与upregulation脂肪生成和cholesterologenesis31日,49,50]。飞,治疗与抗氧化剂减少活性氧,抑制脂滴堆积,和延迟神经退化48]。目前的研究表明,除了抗氧化作用报道,HTyr补充C6细胞决定提前和直接对脂肪酸合成和cholesterologenesis减少的影响。这种效应可以至少部分的差别归因于一种分子机制,涉及到对这些ACC和HMGCR的表达。降低比较明显当OA HTyr一起添加到细胞,表明在大多数情况下,一个添加剂这些EVOO组件对脂质代谢的影响。也因此,这方面应该考虑在确定的有益作用EVOO组件,OA和HTyr脂质代谢的改变发生时大脑功能障碍。

一个重要的问题担忧EVOO酚类化合物的生物利用度。HTyr是人类吸收剂量依赖性51,52]。等离子体苯酚浓度数据,可以实现在人类食用橄榄油是贫穷和有争议的52]。这可能是由于很多因素:(i)中酚类的变量水平EVOO(50 - 800毫克/公斤)53),(2)橄榄油的饮食摄入量水平,和(3)等离子体的方法和时间选择苯酚量化(53]。HTyr大部分存在于血浆和尿液中共轭形式,主要glucuroconjugates,表明广泛的初步的肠/肝代谢摄入HTyr [54]。然而,HTyr 15的血浆浓度μM已经在人类第一次测量4 h后摄入40毫升橄榄油含有大量的酚类(366毫克/公斤)55]。此外,它建立了HTyr能够穿过血脑屏障,虽然它提供了一个低大脑吸收(3]。考虑到上面,大脑EVOO酚生物利用度的问题仍然是一个有争议的问题和生理相关性在体外发现需要测试在适当的动物模型和人类。然而,即使HTyr浓度用于本研究(25μ米)可以被视为一个药理剂量,目前的研究表明早期和直接downregulatory HTyr对脂肪酸和胆固醇合成的影响。

6。结论

正确的脂质稳态对细胞生存和性能至关重要。因此,大脑脂肪酸和胆固醇合成是非常挑战在一些神经退行性疾病。活动的调制和表达这些代谢途径的关键酶的OA和HTyr表明假定的角色在神经系统疾病的预防,在脂质代谢的障碍。在这种背景下,ACC和HMGCR表达减少,活动中我们观察到神经胶质细胞处理这些化合物可能被认为是重要的。

的利益冲突

作者宣称没有利益冲突,关于这篇文章的出版。

确认

这部分工作是由Ministero德拉敬礼项目gr - 2013 - 02355646。

引用

1. e·托莱多j . Salas-Salvado c Donat-Vargas et al .,“地中海饮食和浸润性乳腺癌风险女性PREDIMED试验在高心血管风险:一项随机临床试验,”JAMA内科,卷175,不。11日,第1760 - 1752页,2015年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
2. m·A。Martinez-Gonzalez, m . Ruiz-Canela a . Hruby l .梁a . Trichopoulou和f·b·胡”与地中海饮食干预试验心血管预防:通过代谢组学分析理解潜在的机制,”《华尔街日报》的营养,卷146,不。4日,页。913 - 919年代,2016年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
3. j . Rodriguez-Morato l . Xicota m . Fito m . Farre m . Dierssen和r . de la Torre”橄榄油中酚类化合物的潜在作用神经退行性疾病的预防,”分子,20卷,不。3、4655 - 4680年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
4. l·费尔南德斯del Rio e . Gutierrez-Casado a . Varela-Lopez和j . Villalba”橄榄油和衰老的标志。”分子,21卷,不。2,p。163年,2016年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
5. f·纳塔利,l . Siculella s Salvati, g . v . Gnoni”油酸是一种脂肪酸和胆固醇合成的有效抑制剂在C6神经胶质瘤细胞,”脂质研究》杂志上,48卷,不。9日,第1975 - 1966页,2007年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
6. p . Priore李东旭,a . Gnoni f·达,g . v . Gnoni和l . Siculella”调节肝脏脂质代谢的橄榄油和非酒精性脂肪肝病的酚类化合物,”IUBMB生活,卷67,不。1,上行线,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
7. 大肠Lei, k . Vacy和w·c·恩,“脂肪酸及其在神经系统疾病治疗的潜力,”国际神经化学卷,95年,第84 - 75页,2016年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
8. m . Piroddi a . Albini r . Fabiani et al .,“特级初榨橄榄油的营养基因组学:审查。”BioFactors,43卷,不。1,17-41,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
9. r . Fabiani”橄榄油secoiridoid抗癌特性的酚类:系统回顾在活的有机体内研究”,食品与函数,7卷,不。10日,4145 - 4159年,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
10. 坦尼c . c和h·e·拉斯穆森,“多酚、炎症、心血管疾病,”当前的动脉粥样硬化的报告,15卷,不。5,324年,页2013。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
11. f . Visioli、g . Bellomo和c·加利”自由自由基清除橄榄油多酚的性质”,生物化学和生物物理研究通信,卷247,不。1、60 - 64、1998页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
12. p . Priore l . Siculella, g . v . Gnoni”特级初榨橄榄油苯酚抑制脂质合成primary-cultured rat-hepatocytes,”《营养生物化学杂志》上,25卷,不。7,683 - 691年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
13. p . Priore d·卡鲁索l . Siculella, g . v . Gnoni”快速下调肝脏脂质代谢的酚醛分数从特级初榨橄榄油,”欧洲营养杂志,54卷,不。5,823 - 833年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
14. w . j . Lukiw m . Pappolla r . p . Pelaez和n . g . Bazan,”阿尔茨海默氏症和嗜睡胆固醇和脂类代谢障碍,”细胞和分子神经生物学,25卷,不。3 - 4、475 - 483年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
15. a . Romano j·b·Koczwara c a Gallelli et al .,“脂肪的想法:在大脑脂肪酸代谢更新,“国际生物化学与细胞生物学杂志》上卷。84年,降价,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
16. c . Feart c . Samieri诉Rondeau et al .,“坚持地中海式饮食,认知能力下降和痴呆的风险,”《美国医学会杂志》,卷302,不。6,638 - 648年,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
17. 诉Pitozzi m . Jacomelli m . et al .,扎”的影响饮食特级初榨橄榄油在衰老大鼠行为和大脑生化参数,“英国营养学杂志》上的,卷103,不。11日,第1683 - 1674页,2010年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
18. d .淡水沼泽Luccarini, p . Nardiello m . Servili m·蒂芬妮和f . Casamenti”Oleuropein糖苷配基从橄榄油厂废水和多酚改善认知障碍和神经病理学,”英国临床药理学杂志》上,卷83,不。1,54 - 62年,2017页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
19. 托雷斯,m . Lorente f . Rodriguez-Fornes et al .,“一种结合大麻类临床治疗和防止罹患脑胶质瘤,”分子癌症治疗,10卷,不。1,第103 - 90页,2011。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
20. Matias, a . s . Buosi和f·c·a·戈梅斯”类黄酮在中枢神经系统的功能:星形胶质细胞作为天然化合物的目标,“国际神经化学卷,95年,第91 - 85页,2016年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
21. j . j . Volpe k .藤本j . c . Marasa和h c . Agrawal“关系文化的其他胶质细胞髓鞘,“生物化学杂志,卷152,不。3、701 - 703年,1975页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
22. f . a . McMorris“去甲肾上腺素诱发glial-specific酶活性在培养的等离子体神经胶质瘤细胞中,“美国国家科学院院刊》上的美利坚合众国,卷74,不。10日,4501 - 4504年,1977页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
23. k . a中殿和g . Lemke诱导髓磷脂含蛋白脂质蛋白(PLP)基因在恶性胶质瘤细胞C6:功能分析,策划,“《神经科学杂志》上,11卷,不。10日,3060 - 3069年,1991页。视图:谷歌学术搜索
24. a . Quincozes-Santos l . d . Bobermin a Latini et al .,“白藜芦醇保护C6星形胶质细胞细胞系对氢peroxide-induced氧化应激通过血红素加氧酶1,“《公共科学图书馆•综合》,8卷,不。5篇文章e64372 2013。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
25. g . v . Gnoni m . j . h . Geelen c . Bijleveld e . Quagliariello和s . g . van den马瑞医生,“短期刺激脂肪生成的三碘甲状腺氨酸在鼠肝细胞,维护文化”生物化学和生物物理研究通信,卷128,不。2、525 - 530年,1985页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
26. e . g .布莱和w·j·代尔”快速的总脂质提取和纯化方法,”加拿大生物化学和生理学杂志》上,37卷,不。1,第917 - 911页,1959。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
27. m·j·h·Geelen”使用digitonin-permeabilized哺乳动物细胞测量过程中酶活性研究脂质代谢,”分析生物化学,卷347,不。1、1 - 9,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
28. p . Priore a . m . Giudetti f·纳塔利,g . v . Gnoni和m . j . h . Geelen“新陈代谢和短期共轭亚油酸在鼠肝细胞代谢的影响,“Biochimica et Biophysica学报(BBA) -脂质分子和细胞生物学,卷1771,不。10日,1299 - 1307年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
29. f·达,r . Tocci g . v . Gnoni和l . Siculella“柠檬酸的表达载体基因激活ER应激效应器XBP1 ATF6α,绑定到一个UPRE在其启动子,“Biochimica et Biophysica学报(BBA)——基因调控机制,卷1849,不。1,23-31,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
30. l . Siculella r . Tocci a . Rochira m . Testini a . Gnoni f·达,“脂质积累刺激SREBP-1a mRNA的cap-independent翻译通过促进hnRNP A1绑定5utr肝脂肪变性的细胞模型,”Biochimica et Biophysica学报(BBA) -脂质分子和细胞生物学,卷1861,不。5,471 - 481年,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
31. e . Scoditti n . Calabriso m·马萨罗et al .,“地中海饮食多酚通过MMP-9减少炎症血管生成和抑制cox - 2在人类血管内皮细胞:一个潜在的保护机制在动脉粥样硬化血管疾病和癌症,”生物化学和生物物理学的档案,卷527,不。2、81 - 89年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
32. e . Scoditti a . Nestola m·马萨罗et al .,“Hydroxytyrosol抑制MMP-9和cox - 2活动和表达在人类通过PKCα和PKCβ1抑制单核细胞,激活”动脉粥样硬化,卷232,不。1,17-24,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
33. n .斯卡尔米斯m . x, y斯特恩r·麦克斯和j·a . Luchsinger“地中海饮食,阿尔茨海默病的风险。”神经病学年鉴卷,59号6,912 - 921年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
34. r·w·米切尔,n . h . m . r . Del Bigio d·w·米勒,和通用汽车舱口,“脂肪酸运输蛋白表达在人类大脑和潜在的作用在人类大脑微血管内皮细胞脂肪酸运输,”神经化学杂志,卷117,不。4、735 - 746年,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
35. j .张和刘问:“大脑中的胆固醇代谢和体内平衡,”蛋白和细胞》第六卷,没有。4、254 - 264年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
36. 和s·m·马德拉表示Sturley .“C型尼曼氏病发病机理和治疗:从他汀类药物对糖,”临床Lipidology,5卷,不。3、387 - 395年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
37. n佐藤和r . Morishita脂质和糖代谢的作用在β-amyloid调制,τ,在阿尔茨海默病的发病机制和神经退行性变的,”老化神经科学前沿,7卷,p。199年,2015年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
38. r . c, e·r·多尔西c·a·贝克,j . t . Brenna i Shoulson,“改变胆固醇和脂肪酸代谢在亨廷顿疾病,”临床Lipidology杂志,4卷,不。1,17-23,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
39. m·多利亚l . Maugest t·莫罗g .蜥蜴和a . Vejux”贡献的胆固醇和oxysterols帕金森病的病理生理学,”自由基生物学和医学卷,101年,第400 - 393页,2016年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
40. n·d·佩雷拉和b·j·特纳AMPK信号和能量代谢缺陷在肌萎缩性脊髓侧索硬化症,”神经化学研究第41卷。。3、544 - 553年,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
41. p . Prasanna,蒂博,l·刘,d . Samid“脂质代谢脑癌治疗的目标:协同活动的洛伐他汀和钠乙酸苯酯对人类神经胶质瘤细胞,”《神经化学,卷66,不。2、710 - 716年,1996页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
42. m . Tuohetahuntila m . r . Molenaar b .滚筒et al .,“ATGL的营业额和DGAT1新合成甘油三酯在肝星状细胞,”脂质研究期刊》的研究卷,57号7,1162 - 1174年,2016页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
43. j·e·c·赛克斯和m . Lopes-Cardozo外源性脂肪酸对脂质合成的影响,marker-enzymes,神经胶质细胞无血清培养系统中维护文化的发展,“神经胶质,3卷,不。6,495 - 501年,1990页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
44. f . Leonardi l . Attorri r . d . Benedetto et al .,“花生四烯酸、二十碳五烯和二十二碳六烯酸的氧化状态C6神经胶质瘤细胞,”自由基的研究,39卷,不。8,865 - 874年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
45. c . f . Semenkovich”调节脂肪酸合酶(FAS)”脂质研究进展,36卷,不。1,利润率达到,1997页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
46. f·埃切维里亚,m·奥尔蒂斯,r . Valenzuela和l·a·威德拉”Hydroxytyrosol cytoprotection:投影为临床干预措施,”国际生物化学与细胞生物学杂志》上,18卷,不。5篇文章e930 2017。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
47. a . m . Giudetti f·达,g . v . Gnoni和l . Siculella“低水平的过氧化氢诱导脂质合成BRL-3A细胞通过CAP-independent SREBP-1a激活,“国际生物化学与细胞生物学杂志》上,45卷,不。7,1419 - 1426年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
48. k . l . Liu, h·桑多瓦尔et al .,“胶质脂滴和活性氧诱导的线粒体缺陷促进神经退化,“细胞,卷160,不。1 - 2、177 - 190年,2015页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
49. w .邵和p . j . Espenshade“扩大角色如磷脂的代谢,细胞代谢,16卷,不。4、414 - 419年,2012页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
50. f .达a . Rochira r . Tocci s阿莱曼诺a . Gnoni和l . Siculella”HnRNP A1介导的激活IRES-dependent SREBP-1a mRNA翻译在内质网应激反应,”生物化学杂志,卷449,不。2、543 - 553年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
51. f . Visioli c·加利f . Bornet et al .,“橄榄油酚醛树脂在人类吸收剂量依赖性,”2月的信,46卷,不。2 - 3、159 - 160年,2000页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
52. r . de la Torre”人类橄榄油酚类化合物的生物利用度,”Inflammopharmacology,16卷,不。5,245 - 247年,2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
53. f . Visioli和c·加利”橄榄油:不仅仅是油酸,”美国临床营养学杂志》上,卷72,不。3,p。853年,2000年。视图:谷歌学术搜索
54. e . Miro-Casas cova, m . Farre et al .,“Hydroxytyrosol性格在人类身上,”临床化学卷,49号6,945 - 952年,2003页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
55. m . i cova k . de la Torre m . Farre-Albaladejo et al .,“餐后低密度脂蛋白酚醛内容和橄榄油是通过控制调节低密度脂蛋白氧化酚类化合物在人类中,“自由基生物学和医学,40卷,不。4、608 - 616年,2006页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

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版权©2017 Paola Priore et al。这是一个开放的分布式下文章知识共享归属许可,它允许无限制的使用、分配和复制在任何媒介,提供最初的工作是正确引用。