的潜在的健康益处Polyphenol-Rich提取物Cichorium intybusl . Caco-2细胞模型研究

文摘

植物化学物质没有到达体循环可以发挥他们的生物活性;几乎到达大肠吸收抗氧化剂可能导致保护氧化损害肠胃疾病。在目前的工作中,我们旨在研究潜在polyphenol-rich提取物活性之间的关系Cichorium intybusl . Caco-2细胞形态特征的变化。植物化学物质含量(类胡萝卜素和黄酮类化合物)和总抗氧化活性红菊苣的特雷维索和杂色菊苣Castelfranco进行评估。polyphenol-rich菊苣提取物的生物活性进行了研究在体外Caco-2单层细胞模型。形态特征的变化来测试抗氧化和/或prooxidant效果验证了组织学分析和韵律节奏的电子显微镜(SEM)观察到。Caco-2细胞模型,从菊苣表示温和的抗氧化多酚分数的行为直到17μM浓度,而70年μM和34μ米特雷维索的起到细胞毒性作用和Castelfranco菊苣,分别强调了te减少,渗透率增加,上皮的改变。我们的研究结果支持这些产品的有利影响抵消氧化应激和细胞损伤,诱导在体外Caco-2细胞模型,通过glycocalyx与粘多糖复合物的交互,维护在活的有机体内一个健康的和有效的肠道屏障。

1。介绍

菊苣,植物属典型的地中海地区,原产于欧洲、西亚、北美和它的颜色从白色到红色(1]。特雷维索的“红菊苣”和“杂色Castelfranco菊苣,”PGI根据欧盟规定,息息相关,他们的领土,根据传统的栽培技术。这些产品获得了极大的兴趣对他们的感官和营养特征。众所周知,植物化学物质的消费水果和蔬菜可以改善一些慢性退行性疾病的预防2,3]。植物化学物质内容可能受到几个因素的影响:遗传特点,环境方面,农艺实践和水分条件(4,5]。遗传因素对营养和植物化学物质内容,发挥巨大的影响和在蔬菜物种之间。气候条件、曝光量、温度、相对湿度和发光强度是特定参数,影响食品质量。特别是,选择一个适当的农艺实践可以提高水平和生物活性化合物的形象。植物作物中,红菊苣是有吸引力的,因为他们可能是生的还是熟的消耗。特别是,它们通常在沙拉生吃冬季当大多数蔬菜都不是上市的季节。事实上,红菊苣特别耐低温(6全年)和他们的可用性是一个重要的微量营养素来源在最冷的季节。红色的颜色在很大程度上是由于水溶性色素,花青素,但一些作品展示的红叶品种Cichorium intybusl .绿叶蔬菜中多酚含量最高,消耗原料(7,8]。农业生产的植物化学物质含量的变化在我们的饮食尤为重要。生物活性化合物的食物,如维生素、类胡萝卜素和多酚,似乎能够调节一个或多个代谢过程,在促进更好的健康结果(9]。最接受的解释对于食物的保护作用可能源于观察,不同植物植物化学物质可以作为自由基的“拾荒者”,“饮料”单线态氧,或金属螯合剂(10,11),因此诱导氧化损伤防护通过抗菌,抗炎,王亚南,抗癌的,血管扩张的行动。

最近,D 'Evoli et al。12]表明,高水平的抗氧化剂花青素在红菊苣施加直接对活性氧清除作用形成的抗氧化剂和cytoprotective活动以及抗增殖活动Caco-2细胞。在目前的工作中,我们旨在研究潜在的polyphenol-rich活动之间的关系从菊苣提取物,形态和化学/物理Caco-2细胞的变化。这个目的,生物活性化合物的内容(类胡萝卜素和黄酮类化合物)和总抗氧化活性评价早期和晚期红菊苣的特雷维索和菊苣的Castelfranco组合成的斑叶。此外,从菊苣polyphenol-rich提取物的生物活性在体外Caco-2细胞单层模型进行了研究。形态特征的变化来测试抗氧化和/或prooxidant效果验证了组织学分析和韵律节奏的电子显微镜(SEM)观察到。

2。材料和方法

2.1。试剂

溶剂都从卡洛Erba购买(意大利米兰),BDH(英国Poole),和默克(达姆施塔特,德国)。2、4、6-Tri (2-pyridyl) -s-triazine (TPTZ)与丙烯酰胺(瑞士)。磷酸盐(PBS) 6-hydroxy-2 5 7, 8-tetramethylchroman-2-carboxylic酸(Trolox)和抗坏血酸是由Sigma-Aldrich Srl提供。商业标准也从Sigma-Aldrich Srl(意大利米兰)。AAPH (2, 2′, -azobis (2-amidinopropane)盐酸盐)(韦科化学。,Richmond, VA, USA) was used as a source of hydrophilic radicals. Double distilled water (Millipore, Milan, Italy) was used throughout the study.

2.2。Cichorium intybusl

红菊苣的特雷维索(两种情况:一种是早期和晚期)生长在这个地区的样本包括Quinto(特雷维索),零布兰科(特雷维索)和Scorze(威尼斯),而PGI杂色菊苣Castelfranco来自样品由于Carrare(帕多瓦),米拉(威尼斯),Monselice(帕多瓦)。5公斤的总重量为每个位置收集每个品种在收获时间和交付给实验室。唯一的可食用部分是用于分析样品,按照下列方法。

2.3。分析方法

提取的黄酮类化合物(槲皮素、山柰酚、和芹黄素)被执行所述Hertog et al。13)和定量分析通过system-ESA高效液相色谱电化学检测器据Azzini et al。(14]。类胡萝卜素提取从特雷维索和Castelfranco菊苣根据沙普利斯描述的方法et al。15]。样本量化,分析了高压液相色谱(HPLC)据Maiani et al。16]。总抗氧化能力(TAC)使用两种不同的分析评估:铁降低抗氧化能力(收紧)[17)和Trolox等效抗氧化能力(问题)方法(18,19]。每一个分析的结果已经在一式三份。

2.4。Transepithelial电阻(te)评估

te的评价,多酚红菊苣的分数特雷维索和杂色菊苣Castelfranco水解提取在Caco-2细胞单层膜上研究了测试的变化紧密连接(TJ)渗透率通过三通,酚红通道,组织学分析。

细胞治疗是提高浓度两个多酚提取物(0.2,1.3,10日,17日,34岁的70人μ米),180分钟,来模拟在活的有机体内生理过程。transepithelial势和酚红渗透率的变化记录时间间隔(30′)。在实验中,细胞被播种到聚碳酸酯过滤细胞培养箱插入(直径6.5毫米,面积0.33厘米²,孔隙直径0.4μ米),密度1.5·10⁵细胞/过滤和放置在一个多井猎鹰。过滤器将商会分成两部分,顶端和基底,代表了腔和胃肠的底面积的系统。两院,te评估紧密连接的渗透率测量是使用Millicell人执行器(美国微孔,贝德福德,MA)根据制造商的指示。校准后的阻力系统,单层的电阻测量通过将一个电极两侧的聚碳酸酯过滤器(20.,21]。每一个分析的结果一式三份并表示为欧姆×厘米²。

在15 - 20天内达到融合细胞和分化。在这段时间里,细胞形态学Leitz则是监测和检查Diavert倒置光学显微镜。

2.5。组织学分析

细胞单层分离过滤和固定在一起Bouin(苦味酸组成的水溶液中,乙酸,和甲醛)大约12小时,然后使用酒精脱水提升规模(70%,80%,90%,95%,100%),最后是封装在环氧树脂的聚合块(GMA, J134K polyscience Inc .沃灵顿,PA,美国)。然后,样本粘在嵌入式存根和切成3μm部分与微米旋转式切片机(德国蔡司)适当的组装,使用水晶叶片据拉尔夫的修改22,23]。部分粘在显微镜载玻片都沾染了哈里斯的苏木精和伊红24,25]。准备工作就绪永久与封面和滑动密封树脂(BDA Eukitt安装介质,实验室供应池,英格兰)。所有部分(3μ22米)进行的组织学变化Diaplan光学显微镜Leitz则(德国),如图1。所有图片(缩微摄影)的放大356倍,与徕卡显微镜进行Dialux 22。

2.6。扫描电镜分析

在每个实验(180分钟),12小时的细胞单层固定甲醛(10%)和戊二醛(2.5%),然后用酒精干的解决方案。然后,样本被临界点干燥脱水(Emitech K850,群体技术,西萨塞克斯郡,英国)。最后的脱水是实现有限公司₂。最后,样品与120年代黄金30 mA气急败坏的在修改的气氛中有2%氩和分析使用SEM (EVO LS10,卡尔蔡司显微镜GmbH,耶拿,德国)。

2.7。统计数据

结果表示为平均数±标准差。统计数据分析使用方差分析测试Bonferroni事后考验(意义紧随其后< 0.05)。

3所示。结果

3.1。植物化学的描述

据几位作者,黄酮类成分可以作为潜在的标记分析草药和植物供人类食用的26- - - - - -28]。

对黄酮类化合物的定量分析(免费+共轭形式),图1显示数组代表HPLC-DAD梯度色谱,而他们识别报告在表1。不同的类黄酮含量在不同的品种和种植地点是总结表2。比较生长地点,类黄酮含量没有明显差异,而品种之间的显著差异都被记录下来。槲皮素被发现是最丰富的黄酮类红色的萝卜特雷维索品种(90.04±25.16毫克/公斤和97.88±33.94毫克/公斤,分别地。,在末和红菊苣)对早期的杂色菊苣Castelfranco(14.20±4.51毫克/公斤)。

山柰酚明显不同的品种和品种。其内容在红菊苣的特雷维索(22.80±5.84毫克/公斤)多样性明显高于(< 0.05)比较早期红菊苣的特雷维索(12.35±7.65毫克/公斤),组合成的菊苣Castelfranco(11.80±3.64毫克/公斤)。

芹黄素含量没有明显差异之间的品种和生产区域的平均范围从2.60±1.40,3.58±0.29毫克/公斤,分别对早期红菊苣的特雷维索和菊苣的Castelfranco组合成的斑叶。

我们的数据(表3)表明,叶黄素和β胡萝卜素是主要的类胡萝卜素(从1.19±0.24,2.40±0.61毫克/公斤和0.19±0.02,0.48±0.15毫克/公斤,职责)。一个显著差异(< 0.05)之间是存在的β胡萝卜素含量的红菊苣的特雷维索(0.38±0.08毫克/公斤)和早期红菊苣的特雷维索(0.22±0.04毫克/公斤)。菊苣Castelfranco显示平均的组合成的斑叶β胡萝卜素含量等于0.35±0.14毫克/公斤。特雷维索的初红菊苣,意思是叶黄素含量水平明显高于2.16±0.28毫克/公斤(< 0.05)比晚红菊苣的特雷维索(1.27±0.20毫克/ 100克)和杂色菊苣Castelfranco(1.20±0.27毫克/ 100克)。

评估个人抗氧化剂的内容后,合作行动的不同标本的生物活性分子Cichorium intybusl .由总抗氧化能力(TAC)评估。图2展示了各种抗氧化剂的协同作用来衡量收紧(更易/公斤)和问题(更易trolox /公斤)的方法。

我们的研究结果强调了收紧值最高的红和红菊苣的特雷维索对杂色菊苣Castelfranco(11.70±1.92更易/公斤和9.93±3.11更易/公斤和8.76±4.46更易/公斤,职责)。没有差异的品种和生产区域出现在收紧(更易trolox /公斤)的结果。

显著差异存在的问题(更易trolox /公斤)的水平。问题的值晚红菊苣的特雷维索(4.54±0.88更易trolox /公斤)和早期红菊苣的特雷维索(5.32±1.76更易trolox /公斤)高(< 0.05)相比,组合成的菊苣Castelfranco(2.12±0.74更易trolox /公斤)。

3.2。基于单元的化验

不同于其他食物成分,植物化学物质可以发挥其生物活性没有到达体循环。几乎到达大肠吸收抗氧化剂可能导致保护氧化损害胃肠疾病(29日]。有几个报告菊苣的药理作用和抗炎作用30.,31日]。

三通测量通常用于描述单层完整性的细胞单层渗透实验,或量化渗透率的变化,例如,由于paracellular渗透增强剂(32,33]。

利用多酚分数从红色特雷维索和Castelfranco菊苣,套磁导率的变化进行了测试在单层膜文化Caco-2细胞系。三通增加酚浓度测量数据所示3(一个)和3 (b)分别对特雷维索红菊苣和菊苣的Castelfranco组合成的斑叶。

在治疗红菊苣的特雷维索和杂色菊苣Castelfranco多酚的提取、表示通过三通值,结果显示一个单层均衡模型(健康的单层细胞)0.2 - -1.3 - 17μ米提取物浓度。直到17μ米多酚提取物浓度,te测量伸出一个高原,表明套的紧张和缺乏直接上皮Caco-2细胞之间的相互作用和菊苣提取物经组织学分析。数据4(一)和4 (b)显示17μM影响治疗。突出显示的扫描电镜超微结构的细胞学分析和证实缺乏形态变化或提取活动细胞单层(数字5(一个)和5 (b))。

70年的浓度μM和34μ米高毒性,分别为特雷维索和Castelfranco菊苣提取物进行测试。这些治疗方法产生降低t值(数据3(一个)和3 (b)),突出了渗透率的增加套(酚红)和上皮的改变。这些浓度促进Caco-2细胞坏死细胞单层组织学分析和扫描电镜观察证实了所示(数字6(一),6 (b)和7(一),7 (b)特雷维索的Castelfranco菊苣,职责)。

为了更好地理解他们的生物活性和试图证明这些提取的可能的生命起源以前的角色,Caco-2氧化应激诱导增加2,2′azobis (2-amidinopropane)盐酸盐(AAPH)细胞培养基。之间的交互polyphenol-rich特雷维索的红菊苣提取物对AAPH-induced氧化应激在图8(一个)。进步te增加表明,0.2,1.3,10μM,菊苣提取物治疗显示出现了强大的抗氧化活性,能够抵消AAPH过氧化引发诱导,表明细胞膜完整性和confluency恢复。只有0.2μM杂色Castelfranco的菊苣提取物表现出较低的抗氧化效果(图8 (b))促进细胞损伤恢复产生的轻微的te增加。

4所示。讨论

几个品种的抗氧化性能Cichorium属蔬菜一直认为,在某种程度上,植物化学物质包括hydroxycinnamic酸衍生品的存在,mono和diglycosides类黄酮、花青素。据rosseto et al。6),这些酚醛树脂的存在赋予红菊苣异常高过氧化氢自由基清除活性方面的能力和效率,尤其是在早期发展阶段。本研究中观察到较低的类胡萝卜素值可能是由于有限的暴露在阳光和温度越低,在冬季,因为类胡萝卜素生物合成是不像蔬菜在开放领域的刺激。据Niizu和Rodriguez-Amaya34),绿色的菊苣显示更高的平均含量为53.7±8.3(毫克/公斤)和35.3±5.0(毫克/公斤)对叶黄素和β胡萝卜素,分别。如前所述(其他地方35),绿色菊苣从拉齐奥表现出更高的类胡萝卜素含量。特别是,叶黄素和β胡萝卜素值分别为14.10±3.30毫克/公斤和42.12±5.99毫克/公斤,分别在野生型,平均含量为15.51±3.28毫克/公斤叶黄素和40.62±2.15毫克/公斤β在种植菊苣胡萝卜素。

总抗氧化能力是一个参数强烈影响类型的食物(即。,species and varieties for the same species), but also by growing conditions, environmental factors, and preservation techniques. Variegated Chicory of Castelfranco exhibited the lowest TAC values for the FRAP and TEAC methods, respectively. Red Chicory of Treviso (Early and Late) results, analyzed by the FRAP and TEAC assays, were according to Pellegrini et al. [36]。其他地方的报道(35),几种蔬菜的抗氧化成分的变化与农业实践和环境因素。关于细胞化验,te测量代表一个物理测量评估细胞培养的生理状态检测早期肠道屏障功能在活的有机体内损害。众所周知,缺陷引起的上皮通透性改变的套料在几个炎性肠道疾病。不同的元素,包括强大的先天免疫反应,上皮paracellular渗透率、和上皮细胞完整,以及粘液的生产,导致肠道屏障的完整性(37]。我们的实验系统是Caco-2的汇合的单层细胞平衡。在这种情况下,上皮文化更容易受到菊苣提取物浓度的变化。所以,小的相对浓度的变化提取对应于化学和物理改变细胞模式和戏剧性的细胞形态变化。套的紧张,经组织学分析(数据4(一)和5(一个))和缺乏形态变化或提取活动由扫描电镜细胞单层(数字4 (b)和5 (b)),没有指定如果这些提取物维护保护作用的抗氧化剂的混合物,但表示没有上皮之间的直接交互Caco-2细胞和菊苣提取物。这些提取物可以区分的黏多糖glycocalyx像生命起源以前的混合物。众所周知,glycocalyx是结合粘液糖蛋白分子的网络产生的黏多糖主要由杯状细胞。glycocalyx和粘液形式灵活的外衣提供细胞免受机械和化学损伤。营养物质扩散到粘膜,可以受到glycocalyx中的酶,并创建一个区域在高浓度的更容易吸附分子的浓度梯度(38]。目前,我们的研究重点是聚类的食物中提取glycocalyx交互。

最大的保护作用在细胞细胞毒性,从特雷维索红色的萝卜提取物(70μM)对组合成的菊苣Castelfranco提取(34μ米),可能是由于特定的成分在polyphenol-rich分数。上述的主要黄酮类化合物提取报道在表1TJs应对各种自然植物和食品提取物。三通测量存在剂量反应曲线模式,表明没有改变Caco-2细胞单层,根据我们的研究结果强调从0.2到17μM菊苣提取物治疗(图3)。此外,Cichorium intybusl .似乎抵消,提高AAPH引起的氧化应激和细胞损伤在体外Caco-2细胞模型(图8)。正如之前报道的(39),当prooxidant (AAPH)补充说,t形测量大大减少,直到细胞坏死;此外,据Finotti et al。40)、氧化剂(AAPH)的存在导致增加黏多糖分泌位于微绒毛glycocalyx。总的来说,一个更好的健康行动的红菊苣特雷维索polyphenol-rich提取Caco-2 (0.2 - -1.3 -10μ浓度)可以认为不与单层细胞作为外源性物质有助于保持最佳的细胞功能由其强大的抗氧化活性。另一方面,红菊苣的特点是花青素色素含量高(41],可能产生一些有益的健康和营养的影响12,42,43]。

5。结论

可以得出结论,TJs反应取决于剂量暴露和特定食品提取物的化学成分协同和相互依存的抗氧化效果与上皮glycocalyx(酶和非酶的)。即使氧化还原平衡不来自一个单一的原因,我们的研究表明,抗氧化剂之间的交互提取和粘多糖复合物glycocalyx可以保护在活的有机体内衬里损伤的肠道保持健康和有效的肠道屏障。

缩写

Caco-2:	人类结肠癌细胞系
收紧:	铁降低抗氧化能力
问题:	Trolox等效抗氧化能力
te:	Transepithelial电阻
TJ:	紧密连接
扫描电镜:	扫描电子显微镜。

利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

确认

本研究在项目中执行BIOVITA和TERRAVITA由意大利农业部、食品、和林业政策。

引用

1. 惠普姨,g . a . Ravishankar。”Cichorium intybusl种植、加工、效用、价值和生物技术,重点是目前状况和未来前景,”粮食和农业的科学杂志》上,卷81,不。5,467 - 484年,2001页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
2. d·a·埃文斯、j·b·赫希和s . Dushenkov“酚醛树脂、炎症和营养基因组学”粮食和农业的科学杂志》上,卷86,不。15日,第2509 - 2503页,2006年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
3. m·戈贝尔M.-C。Boutron-Ruault, s . Hercberg e . Riboli a . Scalbert M.-H。Siess”食物和癌症:先进的水果和蔬菜的保护作用,”公报du癌症,卷89,不。3、293 - 312年,2002页。视图:谷歌学术搜索
4. n . Hounsome b . Hounsome d灰岩洞,g . Edwards-Jones“植物代谢物和蔬菜的营养品质,”食品科学杂志,卷73,不。4,R48-R65, 2008页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
5. m称“蔬菜作物管理策略来提高植物化学物质的量,”欧洲营养杂志,44卷,不。2、85 - 94年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
6. rosseto m·a . Lante p . Vanzani p . Spettoli m·斯卡帕和a·瑞格,“红菊苣作为高活性自由基的强有力的拾荒者:一项研究酚类成分和过氧化氢自由基捕获能力和效率,”农业与食品化学杂志》上,53卷,不。21日,第8175 - 8169页,2005年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
7. a . Papetti m . Daglia和g . Gazzani“反和氧化剂水溶性化合物的活性Cichorium intybusvar.西尔维斯特(特雷维索红菊苣)。”制药和生物医学分析杂志》上,30卷,不。4、939 - 945年,2002页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
8. g . Gazzani m . Daglia a . Papetti和c·格”,在体外和体外抗prooxidant组件Cichorium intybus”,制药和生物医学分析杂志》上,23卷,不。1,第133 - 127页,2000。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
9. l . Hooper和A·卡西迪,”回顾医疗潜在的生物活性化合物,”粮食和农业的科学杂志》上,卷86,不。12日,第1813 - 1805页,2006年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
10. ,约翰逊·w·卡特证实印地安C·f·福尼a·马丁和r . l .之前“抗氧化能力、维生素C、酚醛树脂和花青素后存储的小水果,新鲜”农业与食品化学杂志》上卷,47号11日,第4644 - 4638页,1999年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
11. l . r . Fukumoto g·马扎,“评估抗氧化剂和prooxidant活动的酚类化合物,”农业与食品化学杂志》上,48卷,不。8,3597 - 3604年,2000页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
12. l . D 'Evoli f . Morroni g . Lombardi-Boccia et al .,“红菊苣(Cichorium intybusl .品种)作为一个潜在的抗氧化剂花青素来源肠道健康,”氧化医学和细胞寿命ID 704310条,卷。2013年,8页,2013。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
13. m·g·l·Hertog p·c·h·赫尔曼和d . p . Venema”优化的量化潜在抗癌类黄酮的高效液相色谱法测定蔬菜和水果,”农业与食品化学杂志》上,40卷,不。9日,第1598 - 1591页,1992年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
14. e . Azzini都拉佐,m . s . Foddai et al .,”意大利蒜头(植物化学物质含量大蒜l .)品种,“《食品研究,3卷,不。4、26 - 32,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
15. k . e .沙普利斯m . Arce-Osuna, j . brown thomas”赋值的视黄醇、棕榈酸视黄酯、生育酚和类胡萝卜素浓度在标准参考资料2383(婴儿食品复合),“采用AOAC公认的国际期刊,卷82,不。2、288 - 296年,1999页。视图:谷歌学术搜索
16. g . Maiani g .搜集积累Ferro-Luzzi et al。。β检测胡萝卜素在正常结直肠粘膜和结肠肿瘤病变在人类中,“营养和癌症,24卷,不。1,23-31,1995页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
17. i f·f·Benzie j。j应变,“铁减少等离子体(收紧)作为衡量能力的抗氧化能力”:收紧分析,“分析生物化学,卷239,不。1,第76 - 70页,1996。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
18. n . Pellegrini d . Del Rio b . Colombi m·比安奇和f . Brighenti”应用程序的2,2′-azinobis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic酸)激进的阳离子分析流动注射系统评价的一些纯化合物的抗氧化活性和饮料,”农业与食品化学杂志》上,51卷,不。1,第264 - 260页,2003。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
19. r .再保险:佩莱格里尼,a . Proteggente a . Pannala m·杨和c . Rice-Evans“抗氧化活性应用一种改进的abt激进的阳离子脱色试验,”自由基生物学和医学,26卷,不。9 - 10,1231 - 1237年,1999页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
20. s . Ferruzza g . Ranaldi m . Di Girolamo和y Sambuy赖氨酸的运输层的人类培养肠道细胞(Caco-2)取决于Na⁺端依赖和Na⁺不同的质膜领域独立的机制。”营养学杂志》,卷125,不。10日,2577 - 2585年,1995页。视图:谷歌学术搜索
21. s . Ferruzza y Sambuy, a . Onetti-Muda f . Nobili和m . l . Scarino“铜毒性紧密连接在人类肠道Caco-2细胞系,”手册的铜药理学和毒理学埃德·e·j·马萨罗,页397 - 416,胡玛纳出版社,风险中,新泽西,美国,2002年。视图:谷歌学术搜索
22. t·m·斯泽斯尼,”为“拉尔夫”类型固定器总成玻璃刀,“染色技术,53卷,不。1,50-51,1978页。视图:谷歌学术搜索
23. r .地道桥西”贡献semithin传统旋转式切片机切片,“染色技术,54卷,不。5,251 - 255年,1979页。视图:谷歌学术搜索
24. l·g·卢娜手册武装部队研究所的病理组织学染色方法,麦格劳希尔书,纽约,纽约,美国,1968年。
25. h·s·班尼特,公元埃里克,s . w . Lee)和j·h·麦克尼尔Jr .)“科学与艺术在准备组织嵌入塑料光学显微镜,与甲基丙烯酸乙二醇酯,玻璃刀和简单的污渍,”染色技术,51卷,不。2、71 - 97年,1976页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
26. 萨尔瓦多,n . Pellegrini o . v . Brenna et al .,“抗氧化特性的一些西西里食用野生蔬菜。”农业与食品化学杂志》上,53卷,不。24日,第9471 - 9465页,2005年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
27. c·e·刘易斯,j·r·l·沃克·j·e·兰开斯特和k·h·萨顿测定花青素、类黄酮和酚酸的土豆。2:野生,结节茄属植物的物种,”粮食和农业的科学杂志》上,卷77,不。1,58 - 63、1998页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
28. r . chirino d·坎波斯c Arbizu et al .,“基因型的影响,成熟阶段和收获后存储在酚类化合物,类胡萝卜素含量和抗氧化能力,安第斯mashua块茎(金莲花属植物tuberosumRuiz & Pavon),“粮食和农业的科学杂志》上,卷87,不。3、437 - 446年,2007页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
29. a . Bhattacharyya r .将s . Mitra s e·克劳,“氧化应激:胃肠道粘膜疾病的发病机制中不可缺少的因素,”生理上的评论,卷94,不。2、329 - 354年,2014页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
30. c . Cavin m . Delannoy a Malnoe et al .,“表达和活性的抑制cyclooxygenase-2菊苣提取物,”生物化学和生物物理研究通信,卷327,不。3、742 - 749年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
31. h·a·哈桑和尤瑟夫,菊苣的“改善效应(Cichorium intybusl .)补充饮食对亚硝胺precursors-induced肝损伤和氧化应激在雄性老鼠,”食品和化学毒物学,48卷,不。8 - 9,2163 - 2169年,2010页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
32. c . Masungi j .高洁的人b Willems et al .,“小说Caco-2细胞灌注系统的实用性。单层的特征属性和肽酶的活动。”Pharmazie,卷64,不。1,36-42,2009页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
33. c . Jonker-Venter d . Snyman c Janse伦et al .,“低分子量quaternised壳聚糖(11):在体外评估吸收增强属性。”Pharmazie,卷61,不。4、301 - 305年,2006页。视图:谷歌学术搜索
34. p . y . Niizu和d . b . Rodriguez-Amaya“新数据的类胡萝卜素成分生蔬菜沙拉,“《食物成分和分析,18卷,不。8,739 - 749年,2005页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
35. e . Azzini都拉佐,m . s . Foddai e . Venneria a . Raguzzini g . Maiani,”生物多样性和当地食品在意大利,“农业和生物多样性研究杂志》上,1卷,不。1、1 - 10,2012页。视图:谷歌学术搜索
36. n . Pellegrini m·塞拉菲尼,b . Colombi et al .,“总抗氧化能力的植物性食物,饮料和油消耗在意大利评估三种不同的在体外实验中,“营养学杂志》,卷133,不。9日,第2819 - 2812页,2003年。视图:谷歌学术搜索
37. l . Pastorelli c . De齐鸣,j·r·梅尔卡多m . Vecchi t·t·皮萨罗,“核心作用肠道上皮屏障的慢性肠道炎症的发病机制:从动物模型和人类遗传学的教训,“免疫学前沿第280条,卷。4日,2013年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
38. c·a·刘易斯,Enteroimmunology:预防和治疗慢性疾病的指南博士,c·a·刘易斯,602的河景,小组出版社,Carrabelle,佛罗里达州,美国,2013年。
39. f . Nobili e . Finotti l .。马蒂努里Garaguso,和m . Audisio“单层Caco-2细胞抗氧化能力和形态变化系统治疗从初榨橄榄油和提取的多酚类化合物氧化化合物,”作为,第188卷,第199页,2006年。视图:谷歌学术搜索
40. e . Finotti r . Gezzi f . Nobili Garaguso, m·弗里德曼,“苹果的效果,猴面包树,red-chicory和梨提取的细胞能量消耗和形态学Caco-2细胞使用transepithelial电阻(te)和扫描电子显微镜(SEM),“RSC的进步,5卷,不。29日,第22498 - 22490页,2015年。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
41. c . Carazzone d Mascherpa、g . Gazzani和a . Papetti“红菊苣沙拉(酚类成分的识别Cichorium intybus)通过高效液相色谱二极管阵列检测和电喷雾电离串联质谱,”食品化学,卷138,不。2 - 3、1062 - 1071年,2013页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
42. t·津田,“饮食anthocyanin-rich植物:生化基础和最新进展在健康研究中,“分子营养与食品研究卷,56号1,第170 - 159页,2012。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索
43. t·c·华莱士,花青素在心血管疾病。”营养的进步,卷2,不。1、1 - 7,2011页。视图:出版商的网站|谷歌学术搜索

版权

版权©2016 Elena Azzini et al。这是一个开放分布式下文章知识共享归属许可,它允许无限制的使用、分配和复制在任何媒介,提供最初的工作是正确引用。