文摘
目前实验中风神经科学研究面临同样的挑战:在使役动词的转换相关的研究结果。近年来的研究显示的巨大潜力,中枢神经系统对有害刺激如中风:增加塑料的变化导致神经元重组,重组神经发生,和突触发生,伴随着转录和转译营业额在细胞的影响,描述了中风临床和实验研究。然而,只有轻微的尝试了连接不同的塑料重构过程诱发特定行为表型特征。在这里,我们审查当前状态的艺术考试的技术皮层重组和神经回路的操作以及技术结合解剖学变化和分子分析。我们提供技术的原则一起研究在实验中风的研究已经应用描述方法。讨论的工具是有用的关闭循环从我们了解中风的病理行为结果,可以发现新的治疗方法的目标。这里介绍的方法打开新的可能性评估康复策略的效率通过理解他们的外部影响内在神经生物学的基础上修复机制。
1。介绍
虽然近年来作出了极大的努力,由临床医生和基本的研究人员,我们还获得了有限的见解神经系统疾病,如中风阻止我们发展特定的治疗,导致贫困统计数字:1500万人患有脑缺血性发作,每年三分之一死了,第三个仍然终身残疾,第三个恢复中风本身并没有太严重。在临床方面,创建了卒中单元,结合专家在重症监护医学、神经学、物理疗法,和语言治疗,加快协调诊断和治疗过程旨在改善对病人的恢复率。根据神经学家说“时间是大脑,”甚至移动单位已建立的医院病人(1]。这些努力旨在增加病人的数量是符合目前唯一批准急性treatment-thrombolysis或thrombectomy-within卒中后早期时间窗4.5 h (2,3]。
的基础研究,我们研究中风的神经生物学,但似乎陷入了“黑匣子”情境:我们积累了数据显示大脑的巨大能力重组通过突触发生,甚至神经发生和神经电路重组和新电路的形成。我们发现皮质地图变化和中风后大脑活跃区域;我们检测到基因和蛋白质组学营业额在不同的时空剖面和事件序列(4]。然而,只有微小的尝试将纯粹的相关数据转换成诱发的,这将使塑料的因果关系重构过程在大脑中与不同的行为结果。这不仅会让我们形成一个新的理解卒中后的脑功能状态,但也开辟了可能性开发和测试新的治疗方法的效率。今天的基本中风的研究是神经科学的一部分,面临的挑战首先描述了广泛的形态特性,然后研究细细胞和分子事件,发现基因活跃在一个特定的神经元或细胞类型,和链接行为表型。但随着科学的哲学家卡尔·波普尔可能认为:我们可以提供的答案之前,我们需要问新问题的能力。
近年来,新技术设计开始填补相关之间的差距和病因的研究。
本综述的目的是首先讨论当前最先进的技术实验中风的研究使神经元重组和电路形成一个更深刻的理解。在第二部分,介绍不同的神经元电路的技术操作,有助于揭示解剖学和行为之间的因果关系。最后,新方法结合细胞学与分子概要文件提供阐明潜在的分子机制的神经重新布线和修复。的原则解释说在一起的技术与示范研究在实验中风研究已经应用的描述方法。这里讨论的工具不仅可以增进我们的了解中风的病理,也有助于确定新的治疗干预至关重要的锚点。
2。最先进的技术来研究神经元重组和电路实验中风后形成
2.1。方法检查Brain-Wide重建
经典方法研究以及过程在整个大脑功能磁共振成像(fMRI),允许在macroanatomical神经元重组过程的监控级别在相同的动物。然而,尽管重大贡献的理解功能状态改变之间的相互作用和结构连接在中风模型(5,6使用这种技术,空间和时间分辨率水平仍然很低。
相比之下,内在的高空间分辨率光学成像伸出的小领域内更大的大脑区域的可视化展示的功能组织和空间之间的关系这些较小的领域,例如,在桶或视觉皮层7]。固有光学成像使用更积极的脑组织的作用反映少光比活跃的组织。因此,最活跃的地区显示为最黑暗的。光学成像已经被用于显示中断功能连通性在啮齿动物中风的小鼠模型8,9]。
研究特别是感觉地图变化的另一种技术是毫秒级电压特异性染色(VSD)成像与功能性核磁共振成像和内在的光信号成像测量脑电活动与相对较高的空间和时间分辨率10]。房间隔缺损成像最近被应用于测量自发活动在大鼠皮质的区域显示快速、复杂、本地化和双边同步模式去极化的10]。在天等的研究。11],房间隔缺损成像是用来显示扩张的前肢感觉下肢的地图对部分皮质大胸脊髓损伤后,指示将微后肢神经元到感官前肢的电路。在另一项研究由布朗et al。12),感觉运动皮层的功能与房间隔缺损成像可视化。鼠标前肢感觉皮层受到中风导致新的感觉在香港表示以前的前肢运动皮层。房间隔缺损成像显示慢动力学贴图感官电路伴随着高水平与双光子显微镜树突棘的可视化。
虽然VSD广角光学成像的成像是第一个演示神经活动(13),应用vsd的必要性在成像之前,他们的非常快的响应时间和非常小的信号比让他们难以使用。然而,最近发展的外生和神经活动的特定基因编码的荧光指标如GCaMP和YC-Nano已经彻底改变了目标表达水平更高的荧光信号。甚至存在转基因线(14]。此外,最近的研究表明黄素蛋白的动力学荧光可以在野生型光学映射的中枢神经系统组织作为氧化代谢的指标(15,16),也可能是一个有用的工具在实验中风的研究。广角神经影像学方法也相对容易结合光遗传学修改行为中的大脑活动的动物,研究了基于摄像头使用“介观”光记录神经活动的研究大脑皮层表面的很大一部分。这些介观的光学记录成为可能通过广泛的慢性植入窗口(17)和改进的高速摄像技术敏感。万尼et al。18使用广角成像测量皮质功能连通性在浅麻醉GCaMP3老鼠和相关钙信号记录在初级感觉皮层其他双边感觉运动区域。的coactivation地区被解读为一种迹象表明可能功能连接。然而,最终证明功能连接,关闭相关区域,失踪了。Balbi et al。19)使用相同的方法在清醒GCaMP6老鼠研究mososcopic功能连通性纵向microinfarct模型。
广角钙成像可能也是一个强大的工具来研究brain-wide皮层重组在高分辨率水平随着时间的推移,动物监测他们的康复课程或记录卒中后康复训练证明了墨菲et al。20.]。老鼠笼系统,他的实验室提出了一个家,可以启动介观本身功能成像在天无监督。
2.2。了解区域重组方法
皮层microstimulation (icm)和表面刺激电极阵列已经使用了许多年地图皮质区域,研究大脑皮层重组,发现第一次暗示如果预测运动皮层的功能有关。这种技术适用于电刺激诱发皮层的网站,例如,stimulus-evoked运动响应,可以检测到视觉,肌电图反应或加速度计的使用。几项研究已经使用这种技术,检查后感觉运动区皮质地图变化自发恢复或不同的治疗应用程序(21- - - - - -24)或使用刺激本身作为一种方法来增加塑料过程(25]。然而,icm有其缺点,如无法选择性地目标神经元亚型以及轴突的不加区别的激活通道。此外,由于电极渗透皮层电刺激仍然是一个侵入性手术造成的组织损伤(26]。icm也仅限于执行皮质表征的身体功能在卒中后不同时间点限制纵向实验在相同的动物。
一项新的非侵入性策略研究卒中后运动皮层的重组在同一动物随着时间的推移,光学运动映射:这种技术使得使用可能受光刺激神经元,通过释放神经递质(27,28)或通过直接激活光敏通道,如名为(ChR-2)。艾林et al。26)使用转基因的名为“老鼠表达ChR-2层5 b的运动皮层锥体神经元。因此,光学直接刺激目标corticofugal细胞,使运动皮层地形分析的贡献。光学运动映射的优点抽样stimulus-evoked运动在数以百计的皮质的位置在短短分钟客观和可再生的方式29日]。它比使用电极更快、微创映射,可以结合内在信号成像动物颅窗准备(30.]。此外,它使重复映射的运动皮层在几分钟,几个月的时间尺度,开放可能性检查运动的动态表征在不同的情况,比如学习随着时间的推移,药理干预或重组之前,期间和之后皮质损伤。在一个由哈里森et al。(第一个研究29日)光学运动映射显示前肢运动皮层的功能细分根据短暂的运动诱发的方向光脉冲(10 ms),而长时间的刺激(100 - 500 ms)导致前肢到特定位置的复杂的运动空间。在后续研究中(30.首次),光学映射是用于执行一个纵向实验研究重组后感觉运动皮质的焦点感觉中风。感觉中风引起的建立一个新的感官地图在前肢运动皮层的前部分,保留其中心位置,但变得更加分散。
2.3。研究卒中后神经回路的形成和网络活动
然而,尽管所有描述映射方法是强大的工具,他们只能提供地图信息一般运动动力学的变化和表示。他们远远超出手机分辨率和不允许学习当地的神经元电路或单一神经网络神经元的贡献。特别是中风后,目前尚不清楚如何在单一神经元活动的变化与皮质地图转变。分析单一神经元的神经电路中嵌入可能阐明stroke-induced是否幸存神经元的可塑性是能力的结果来处理多个功能流。体内钙双光子成像是一种有效的方法,不仅使单个神经元的学习活动的各个神经元网络也使细胞和神经元subtype-specific分析。只有少数体内钙双光子成像研究关注卒中后神经重组和电路重新布线到目前为止一直在进行。在急性体内钙成像实验诱导的小鼠短暂性缺血模型,墨菲et al。31日]看到普遍亏损鼠标躯体感觉皮质顶树突结构在缺血性去极化的阶段。这是伴随着细胞内钙含量增加,巧合的发生与树突结构的丧失。在第二项研究[32),体内钙双光子成像用于检查如何响应属性的单个神经元和胶质细胞重组前肢和后肢功能躯体感觉地图修改在复苏期间感觉皮层的缺血损伤。然而,所有的研究一直在进行动物麻醉本身影响神经元的活动。实验研究了单神经元的活动行为动物前中风和在经济复苏阶段后迄今为止缺乏侮辱。
双光子成像钙使个体神经网络中神经元活动的录音,并允许subtype-specific脑组织的功能分析。然而,神经活动与细胞水平分辨率只能检查小(< 1毫米)领域的观点。集体动力学在不同的大脑区域是无法访问的。最新进展在双光子显微镜允许与细胞神经网络的同步成像分辨率水平在多个领域活跃的动物,这甚至不是直接连接(33- - - - - -35]。这种技术的进步也为实验中风研究提供了新的承诺。
3所示。最先进的技术来操纵神经电路
在1979年《科学美国人》的一篇文章中,诺贝尔奖得主弗朗西斯·克里克说神经科学所面临的主要挑战是需要控制一种类型的细胞在大脑中而让其他的没有改变。从1999年的一次演讲中,他进一步限制:“接下来的要求之一是能够把发射一个或多个类型的神经元在警报和关闭动物以快速的方式。理想的信号光,可能在红外波长让光线穿透足够远。这似乎很牵强,但可想而知,分子生物学家可以设计出一个特定的细胞类型对光线敏感这样“36]。
操纵神经电路或单一神经元有两个先决条件:操作必须快速且非常具体。多年来,一种不同的工具组了操纵整个大脑区域以及单个细胞的活性和亚型在警戒行为的动物。
3.1。操纵与特定空间控制
第一个约束为特定的操作意味着高空间控制允许选择性调制整个大脑区域,一个独特的解剖子区域(例如,层5感觉运动皮质锥体细胞)或一个特定的细胞类型(例如,parvalbumin-positive中间神经原)。
抑制神经活动在整个大脑区域、代理等GABA受体激动剂muscimol已使用(37,38导致运动功能的丧失,指示解剖学和行为之间的因果关系。其他方法阻止突触重塑通过蛋白质合成抑制剂如茴香霉素,例如,诱导突触和运动地图的破坏大鼠前肢中风模型(39]。然而,对于一个更好的空间控制目标不同的电路和单个细胞类型,研究人员已经创造转基因小鼠行或局部注射病毒特异性激发器(40]。这些催化剂诱导基因表达直接的转基因小鼠或间接通过,例如,春节,(tetracycline-controlled转录激活)开/关或Cre-flox系统。
春节系统使用至少两个病毒载体+抗生素药物相互顺序的方式激活诱导基因的转录和翻译的兴趣:修复启动子启动转录因子的表达,要么四环素反式激活因子(tTA)或反向四环素反式激活因子(rtTA)。tTA或rtTA成为关键球员的转录四环素响应元件(过夜)催化剂,在依赖存在的四环素或强力霉素驱动器感兴趣的基因的表达。感兴趣的基因的表达是完全可逆的管理或去除四环素或强力霉素将开启或关闭其表达式。研究木下光男et al。41]Tet-on系统被用于有选择地表达synaptotoxin破伤风毒素propriospinal (PN)运动皮层神经元的支配。研究者可以表明,在强力霉素管理猴子的饮用水达到性能显著下降由于时间的封锁电动机cortex-PN-motor神经元通路。用相同的Tet-on系统Wahl et al。42)在大鼠中风模型有选择性地关闭重新皮质脊髓的纤维起源于contralesional预处理和运动皮层和针对stroke-denervated hemi-spinal绳:强力霉素管理时的大鼠饮水后康复治疗技能的运动机能受损,受损的恢复把握技能爪子再次下降。强力霉素的影响是可逆的,从饮用水中删除。本研究首次显示具体的和可逆的灭活的新out-sprouting卒中后皮质脊髓的纤维。在另一项研究通过石田et al。43]ipsilesional corticorubral纤维切断被迫康复后大鼠中风模型揭示了红核的功能重要性的恢复运动功能受损。
类似于春节系统,Cre-flox系统还需要两个转基因:修复催化剂调节Cre重组酶的表达,一种噬菌体酶重组DNA在特定的识别序列称为loxP网站。Cre重组酶然后将DNA在两loxP网站(“液氧”)。在大多数情况下,floxed-stop构造了在通过同源重组基因感兴趣的40];停止信号切除的Cre和转基因表达可以启动。Cre-mediated表达式只发生在细胞表达Cre,也是这些细胞组织的发起人是活跃的,表明这种技术程控特异性高。
3.2。操纵高空间和时间控制
3.2.1之上。DREADDs
作为第二个特定神经元的先决条件操作除了高度的空间分辨率,所需时间分辨率和定向调制信号的远程控制神经元活动。时间分辨率意味着精确控制当受体或通路活性或活性和多长时间应该是在一个特定的活动状态。不同时间分辨率可以从毫秒(见下面描述“视蛋白”)小时(例如,设计师只受体激活设计师药物,DREADDs)。重要的也是“发作”动力学(之间的时间调制的实验操作和受体或信号通路)和“抵消”动力学(之间的时间信号调制的起始和终止的调制(40])。定向调控描述工具对神经元活动的影响(激活或抑制),而双向控制将是最佳的例子:打开和关闭相同的细胞群将阐明细胞的各种功能提供了在一个特定的网络感知或执行不同的行为。
为神经网络的操作几分钟至几小时的设计师G protein-coupled受体已经开发出来。G protein-coupled受体通路参与多种细胞功能。与视蛋白在功能上是沉默没有激发体内,因为他们不是直接激活内源性化合物,G protein-coupled受体(GCPRs)不断调节体内内源性配体或揭示ligand-independent活动(44,45]。体外和体内药理研究形容GPCRs制药目标在人类基因组中最重要的类(46),50%的治疗法案规定(47]。这些事实使高度选择性的发展中的直系同源双,这将使高时空控制GPCR信号通路在体内具有挑战性的(48]。近年来,突变十多个本地GPCRs开设了该领域的发展有选择性地激活设计师受体。大多数这些受体分为两类:第一代RASSLs(完全由人工合成的配体受体激活)和第二代DREADDs(设计师只受体激活设计师药物),通过定向分子进化的进化在酵母(40]。RASSLs最初设计的基础上[5 -羟色胺受体49),组胺受体(50[],melanocortin-4受体51]。然而,第一代直系同源ligand-GPCR对揭示潜在的缺点:虽然仅仅通过合成配体受体被激活,配体本身并没有完全激活设计师受体(由罗根和罗斯40])。因此,发展第二代DREADDs,时常要等人设计配体,氯氮平n-oxide(碳氮氧),这是已知的惰性在内源性目标和高生物利用率和血脑barrier-permeant在人类和老鼠52,53]。碳氮氧氯氮平的改良结构,被认为是一种弱毒蕈碱的受体部分激动剂,(54)突变诱导的5名成员毒蕈碱的胆碱能受体家族在碳氮氧的选择性响应能力和测试应用程序。两个突变改变了hM3受体引入一个设计师受体对本国的配体,但对设计师配位碳氮氧高度敏感。在平滑肌细胞G问耦合hM3 DREADD受体刺激一连串的磷酸肌醇水解,释放和ERK1/2钙激活,而hM4Di DREADD受体,源自于G我耦合人类毒蕈碱的M4受体,抑制forskolin-induced阵营的形成和活化GIRK导致超极化,抑制神经元活动(54]。
以来的第一个发展DREADD受体,报告的使用体内现在出现:DREADD配体的药代动力学性质和特殊给药途径(口服、皮下、腹腔内,甚至当地的立体定位注入)确定很快被配体神经元响应实验操纵应用程序。反应通常出现5到15分钟后系统的应用程序,例如,碳氮氧和通常持续2 h而这个时期可以进一步扩大在碳氮氧的增加存在剂量依赖的相关性55]。当弗格森et al。56)使用virus-mediated hM4Di受体的表达直接和间接通路纹状体神经元,他们发现改变行为可塑性与重复药物治疗有关。特别是,减少striatopallidal神经元活动促进了行为敏化药物治疗。hM4Di受体的表达在中枢皮质脊髓的投射神经元最近被用来关闭重新把握功能几乎完全恢复了老鼠的熟练的前肢功能受损由于大中风后的序贯应用强烈刺激治疗和康复训练(42]。
3.2.2。光遗传学
尽管DREADD受体诱导和操纵GPCR信号通路的激活是高效的,显示了一个非常具体的空间分辨率(取决于所使用的结构或转基因小鼠行),时间分辨率仍局限于一个激活在分钟因为GPCR的性质较慢,信号和必要的配体传递神经元的位置操作。相比之下,high-temporal(毫秒)和细胞内精密快速完整的哺乳动物的神经组织,特定的激发或抑制甚至在自由移动的动物只能通过光遗传学(57]。
早期的方法使用光刺激神经元活动包括神经元的选择性光刺激果蝇果蝇的coexpression感光基因编码arrestin-2,视紫红质,同源heterotrimeric G蛋白的α亚基使神经元的敏化光(58]。在第二个方法中,在海马神经元动作电位诱导暂时可靠和精确的方式通过释放笼辣椒素衍生物光(59]。然而,去极化发生在5 s 1 s光脉冲后,持续2 - 3 s与多个光脉冲,并没有减弱。其他方法,如紫外线light-isomerizable化学与基因编码通道(60,61年)也显示限制由于速度降低,目标,组织渗透,或适用性,因为它们多组分性质(57]。2003年,内格尔et al。62年]克隆名为(ChR2),绿藻的阳离子通道衣藻reinhardtii描述相似的脊椎动物视紫红质开幕,以应对蓝光允许钾离子进入细胞。两年后,第一个optogenetic实验神经科学是由表达ChR2使用慢病毒载体培养大鼠海马神经元(63年]。照明的这些文化与波长较短的蓝光(450 - 490 nm)发起大规模、快速的去极化,而波长较长的光(490 - 510 nm)诱导电流小。光刺激的神经元是那些神经元表达ChR2选择性。从那时起,神经科学家迅速适应这种新技术的可能性体内实验。此外,可用光敏感通道的调色板和神经抑制和激活离子泵,快和慢作用视蛋白,不同波长的视蛋白激活近年来被广泛增强[64年- - - - - -68年]。
然而,尽管光遗传学的众多优点是evident-such特异性最高,超快的毫秒时间尺度解剖,基本上没有副作用,由于光线(除非光源不是太强或太长时间应用)光遗传学保持入侵过程对于许多体内实验:随着光源将接近神经组织,针对脑深部区域或弥漫性神经数量仍然是具有挑战性的。新发展的阶跃函数或双稳态视蛋白和视蛋白如Jaws-an抑制视蛋白,由红外波长的光激活(66年非侵入性操作已开启了新的可能性。
只有很少的研究应用光遗传学实验中风研究到目前为止:光遗传学是主要用于光学运动映射如上所述的背景下(30.]。其他研究使用光遗传学作为一种治疗方法,提高神经元活动旨在提高功能恢复:在第一次研究程et al。69年],optogenetic刺激同侧的初级运动皮层的ChR2转基因老鼠促进卒中后功能恢复和刺激的感应基因诱导的纹状体和躯体感觉皮质。沙et al。70年)可能进一步表明,选择性地刺激神经元外侧小脑核(LCN),深小脑核,将主要的兴奋性输出发送到多个运动和感觉在前脑区域,结果在持续复苏旋转梁在转基因小鼠中风后线(Thy1-ChR2-YFP-channelrhodopsin融合到黄色荧光蛋白在Thy1 pan-neuronal启动子)。坦南特et al。71年)透露,optogenetic刺激丘脑皮层的轴突可以促进复苏。在另一项研究[72年],optogenetic刺激完整皮质脊髓束足以促进功能恢复大量血栓形成致卒中后的老鼠。光遗传学也用于驱动移植神经干细胞的兴奋性输出,增加前翼使用stroke-affected一边和运动活动在大鼠中风模型(73年]。减少抑制纹状体输出光遗传学增强subventribular区的神经发生和行为复苏在老鼠大脑中动脉闭塞后的74年- - - - - -76年]。
光遗传学也可以用来证明因果关系的神经电路重组和恢复特定的(感觉运动)的行为证明了Wahl et al。72年]:作者使用抑制感光质子泵ArchT揭示皮质脊髓的电路的功能相关性和地区组织重塑了复苏的不同把握特性。
新的先进技术在显微镜允许精确optogenetic个体神经元的刺激(77年]甚至树突棘和神经细胞somata [78年,79年使用全息光刺激)。此外,并行的发展照明方法(80年)保护的空间瞄准能力相结合的波束扫描系统和多个神经元的快速刺激现在启用同步激发的神经元在选定目标区域。
3.2.3。Magnetogenetics
虽然光遗传学已经彻底改变了神经科学领域,更深层次的考试,皮层下脑区仍然是一个挑战,如光必须以某种方式交付给组织通常需要侵入性植入的光纤造成间接伤害周围的脑组织。一个新兴方法,克服了空间限制magnetogenetics:它依赖于一个原则称为热弛豫(81年),这意味着一个交变磁场能够加热小磁性纳米颗粒。关键元素的特定频率的磁场,纳米粒子的大小和构成。黄等。82年)激活一个热敏TRPV1通道表达人类胚胎肾细胞(HEK)诱导的氧化锰纳米粒子的热弛豫,质膜提高了温度和启动钙流入热敏感离子通道。陈等人。83年)使用这种技术来刺激人口定义的神经活动在腹侧被盖区行为老鼠展示的潜力magnetogenetics脑深部电刺激。
然而,尽管个别神经元和操纵特定的神经元电路具有高空间和时间控制是可能正如上面所讨论的,仍然是一个需要良好行为读数:特别是在实验中风研究学习,例如,运动损伤和恢复,它是至关重要的定量理解真正的恢复和补偿功能受损(84年):当使用分数分析运动行为的录像是不仅耗费时间,还经常很主观,甚至运动轨迹的分析可能不提供完整的图片(72年):当操纵和高精度控制甚至细胞和亚细胞水平在神经生物学方面,需要精确的行为表型分析。戏剧性的发展,计算机视觉算法和人工智能可能允许进一步措施以外的详细分析运动学包括体式的顺序、形状和轨迹,错过的人类的眼睛。
4所示。先进的分子生物学技术结合解剖学和
到目前为止,我们已经讨论了如何检查中风重组地图上的宏观的变化或通过研究单个神经元在神经回路使用2-photon钙成像方法。我们回顾了如何操纵单个神经元和整个神经元数量高时空分辨率披露新的可能性的疾病联系个人神经活动与不同的行为表现。然而,了解潜在的分子相声导致解剖和行为变化仍然缺乏。经典,跟踪技术(例如,右旋糖酐示踪剂)已经应用到可视化细胞参与结构重组卒中后(22,23]。李等人。85年)找到了一种专门研究分子的变化新out-sprouting神经元(“发芽转录组”)peri-infarct皮层注射两种不同的荧光示踪剂的配合霍乱毒素B(施)前肢感觉运动皮层在不同的时间点:一个施示踪剂注入的时候中风,第二个不同标记一个7或之后21天。神经元表达示踪是那些错过第二次注射部位的轴突投射时第一个示踪剂的注入,从而代表神经元卒中后建立了一个新的投影模式。两种神经元类型(单-和double-labeled)激光捕获辨认不同的转录概况的out-sprouting peri-infarct皮层的神经元。
此外,新构造最近开发的分子分析投射神经元之间的鸿沟,因此解剖修改和潜在的分子机制。使用,例如细菌人工染色体(BAC)转基因小鼠表达EGFP-tagged核糖体蛋白L10a细胞群定义允许净化polysomal mrna从基因在大脑细胞群定义86年,87年]。在另一项研究通过Ekstrand et al。88年),核糖体与骆驼科nanobody提出反对GFP标记使翻译mrna的选择性捕获投射神经元。
5。结论
在这里,我们回顾了现有的和新的有前途的最先进的技术为研究重组后中风、识别和操作不同的神经元数量和方法使研究分子的神经元是大脑皮层重组过程的一部分。尽管几十年来研究基础中风研究只有描述和报道相关的发现,这些技术打开巨大的可能性分析塑料过程和识别和目标关键球员的发展新疗法在中风。
的利益冲突
作者不包括任何的相互竞争的利益。
资金
这项工作是由瑞士国家科学基金会资助。31003 - 149315 - 1。