医院隔离及其耐药模式在ICU患者在神经和盟军科学研究所,尼泊尔

文摘

耐药生物逐日增加,原因是不知道。本研究从2011年6月至2012年5月进行了国家科学研究所的神经和盟军加德满都,尼泊尔,以确定耐药病原体的检测频谱扩展β内酰胺酶(ESBL) AmpCβ内酰胺酶(ABL)和金属-β内酰胺酶(MBL)生产细菌感染导致ICU病人。一个标准的方法被用来实现这些目标按推荐的美国微生物学会。在体外检测ESBL组合盘试验使用头孢噻肟和头孢噻肟克拉维酸,ABL使用头孢西丁和phenylboronic酸抑制剂为基础的方法,和MBL imipenem-EDTA磁盘方法相结合。二百九十四种不同的临床样本,如气管吸入物、尿液、脓、棉签、导管技巧,和血液都在研究处理。最常见的细菌是不动杆菌总数的spp。58岁不动杆菌spp, 46 (79%) MDR, 27%是阳性ABL和MBL的12%。的32例金黄色葡萄球菌,18(56%)多药抗药性肺结核病的病人。研究发现常规β内酰胺酶检测在临床分离株。

1。介绍

重症监护室患者获得院内感染的风险,因为入侵程序,延长住院时间,高使用抗生素,病人和工作人员之间的交叉传播,感染控制程序不足也容易使ICU院内感染的出现和传播的合适的地方(1- - - - - -3]。最常见的,经常报道在ICU院内感染是尿路感染,呼吸机相关肺炎(VAP)、手术部位感染、导管部位感染,菌血症和其他感染皮肤和软组织感染,常见细菌参与这样的感染铜绿假单胞菌,不动杆菌spp。金黄色葡萄球菌,大肠杆菌,克雷伯氏菌spp。肠杆菌属spp。枸橼酸杆菌属spp。普罗透斯spp。等(4]。这些生物可能是病人自己的植物来源,游客,ICU环境像水,空气,食物,和设备,卫生保健工作者,其他病人,或无生命的物体在接近附近的患者(5]。

抗菌素耐药性在院内感染与发病率和死亡率的增加尤其是多药耐药性的感染是由有机体(6]。每年有超过200万名患者的影响占据大约10%的住院病人每年导致约90000人死亡,因为只院内感染(7]。描述了几种不同的细菌耐药性的机制,例如,生产不同的药物灭活酶β-lactamases,多个射流泵,减少吸收(8]。

这抗菌素耐药性的出现和传播由于不同的生产β-lactamases因此需求持续监测电阻和快速识别这种耐药生物和决定他们的患病率。因此,这个研究,目的是确定患病率和抵抗的临床相关的模式β内酰胺酶生产商和发现抗菌药物,可用于治疗。

2。方法

横断面研究从2011年6月至2012年5月在神经和盟军科学研究所,加德满都,尼泊尔。

2.1。样本大小和类型

294种不同的临床样本,152气管吸入物、43尿液样本,31日脓/伤口拭子,24 CSF和CVP技巧、9血液样本,5导管技巧,2鼻拭子,和一个示例蝶粘膜,从脑膜炎球菌细胞组织,痰和骨骼从加护病房常规文化,和抗生素敏感性试验,研究期间处理。

2.2。文化

尿液标本被半定量的文化培养技术。尿液和气管吸入物、一个循环的混合和uncentrifuged样本被接种到血琼脂(BA)和MacConkey琼脂(MA)在37°C和耗氧孵化24小时。CSF、脓和伤口拭子被接种到血琼脂(BA), MacConkey琼脂(MA)和巧克力琼脂(CA)。英航和CA板块在5 - 10%孵化有限公司₂孕育了丰富大气而马耗氧在37°C 24小时。同样建议在表面的滚血琼脂(BA)和MacConkey琼脂(MA)在37°C和孵化24小时。血样第一丰富脑心浸液肉汤48小时,然后亚文化马和BA每24小时3天(9]。

2.3。标识隔离

起初的菌落特征孤立生物观察琼脂板和革兰氏染色法。革兰氏阳性分离株被使用过氧化氢酶,进一步确定氧化酶,凝固酶,和奥普托欣灵敏度测试时间鉴定革兰氏阴性隔离不同生化检测过氧化氢酶,oxiadse,能动性,H₂柠檬酸和吲哚生产、利用率、MR-VP尿素水解,三糖铁利用率进行,然后根据他们的结果确定。

2.4。抗生素敏感性试验

抗菌药物敏感性的细菌隔离是由Kirby-Bauer CLSI建议的磁盘扩散法。使用无菌循环四到五个不同的测试生物群落和2毫升无菌生理盐水和涡来创建一个光滑的暂停。这个解决方案的浊度调整到0.5麦克法兰标准相应的细菌浓度的大约1.5亿个/毫升。无菌拭子浸入暂停,坚决按下删除多余的液体,和镀穆勒辛顿琼脂。光盘被应用于尼古拉斯在37°C盘子和孵化24小时。抑制区测量和解释使用标准的图表和有机体报告为易感,中间或相应耐药(10]。抗生素从HiMedia光盘了,孟买,印度,和桅杆诊断,默西塞德郡,英格兰。

2.5。标准多药耐药性

在这项研究中,一个孤立的定义标准抗耐多药耐药(MDR)被设置为三个或更多的药物属于不同结构性类(11]。

2.6。检测ESBL, ABL和MBL生产

检测ESBL生产、测试生物培养液匹配麦克法兰管数量0.5 Mueller-Hinton琼脂板上培养的浊度是和地毯使用无菌拭子和头孢噻肟(30μg)(英国肥大诊断)应用筛选代理孵化在37°C 18 - 24小时。隔离的区域抑制< 27毫米头孢噻肟被认为是尽可能ESBL生产商。该区域的抑制头孢噻肟和头孢噻肟(30μg) +克拉维酸(10μg)结合光盘;区≥5毫米直径的增加从头孢噻肟头孢噻肟的存在加上克拉维酸单独确认为ESBL生产商(12]。

测试生物筛选ABL生产用头孢西丁(30μg)盘;隔离显示区直径小于18毫米被视为ABL screen-positive生产。Screen-positive隔离经抑制剂为基础的方法。Phenylboronic酸是由溶解120毫克的3毫升的DMSO然后3毫升无菌蒸馏水补充道。组合盘被调剂准备20μL phenylboronic酸溶液为30μg头孢西丁盘。测试是由把一个包含30盘μ克头孢西丁和之前结合光盘包含头孢西丁和苯基boronic酸尼古拉斯盘子标准纸片扩散法。盘子在37°C 18 - 24小时和孵化区域直径测量。隔离≥5毫米直径,组合盘周围的区域比区直径的头孢西丁盘,被视为AmpC生产商(13]。

MBL检测,imipenem (10μg)盘被用作掩蔽剂;测试生物显示中间或耐药区直径在磁盘扩散法CLSI指南推荐的视为MBL screen-positive生产。确认MBL检测,0.5麦克法兰细菌悬液接种于尼古拉斯盘子和两个imipenem (10μg)光盘应用于板和一盘10μL 100毫米EDTA直接添加。盘子在37°C孵化18 - 24小时。隔离≥5毫米直径,周围的区域结合imipenem-EDTA盘相比,仅imipenem光盘的,被视为MBL生产商(14]。

3所示。结果

294总样本处理在研究过程中,179(60.8%)显示显著的增长与增生8幼童腹壁薄弱。气管吸入等152人(51.7%)是最常见的示例之后通过尿液和脓43(14.6%)和31例(10.5%)样品,分别。152气管吸入物样品,113(74.3%)显示显著增长其中耐多药菌株94 (83.1%)。同样,25(58.2%)和18例(58.1%)尿液和脓拭子显示显著增长,分别,其中19(44.1%)和12(66.6%)多药抗药性肺结核病的病人。多药物耐药性隔离的增长模式和分布在不同的样品展示在表1。


标本	数量的样品	数量增长(%)	耐多药菌株的数量(%)

气管吸入物	152年	113 (74.3)	94 (83.1)
尿液	43	25 (58.2)	19日(44.1)
脓/伤口拭子	31日	18 (58.1)	12 (66.6)
CVP提示	24	10 (41.6)	10 (100)
脑脊液	24	4 (17.3)	3 (75)
血	9	1 (11.1)	0
ICP导管	3	1 (25)	1 (33.3)
EVD排水提示	2	2 (100)	2 (100)
鼻拭子	2	2 (100)	0
其他人	4	3 (75)	1 (33.3)

总	294年	179 (60.88)	142 (79.3)

其他人包括组织从脑膜炎球菌细胞、蝶粘膜,骨头,痰。

187总隔离,革兰氏阴性149(79.67%)和121年(81.2%)耐多药。不动杆菌种虫害是最常分离的58例(38.9%)分离株革兰氏阴性和MDR其中46例(79.31%)。这是紧随其后的是k . oxytoca23(15.4%)隔离,MDR其中20例(86.95%)。同样,38总革兰氏阳性分离株,耐多药和21例(55.2%)金黄色葡萄球菌是最常见的革兰氏阳性球菌32分离株(84.2%);其中,8(56.25%)多药抗药性肺结核病的病人。详细的结果表2。


SN	细菌的分离	总隔离数	多药耐药性隔离数(%)

1	不动杆菌spp。	58	46 (79.31)
2	k . oxytoca	23	20 (86.95)
3	k .肺炎	22	18 (81.81)
4	大肠杆菌	19	14 (73.62)
5	假单胞菌spp。	19	16 (84.21)
6	枸橼酸杆菌属spp。	3	2 (66.66)
7	p .寻常的	3	3 (100)
8	p .奇异君子兰	2	2 (100)
9	金黄色葡萄球菌	32	18 (56.25)
10	β溶血性链球菌	3	3 (100)
11	草绿色链球菌	2	0
12	凝固酶阴性葡萄球菌	1	0

总		187年	142 (75.93)

耐多药耐药性标准:三个或更多的药物不同的结构性类。

高耐药的不动杆菌种虫害被发现对抗生素如庆大霉素(70.68%)、头孢噻肟(82.75%)、环丙沙星(82.75%)、头孢吡肟(86.2%)、复方磺胺甲恶唑(93.83%)。同样,高耐头孢噻肟和庆大霉素(82.6%),复方磺胺甲恶唑(83.3%)、环丙沙星、头孢吡肟(91.3%),和氨苄西林(100%)被发现k . oxytoca。多粘菌素B被发现药物敏感性最高的100%革兰氏阴性棒的所有隔离。具体结果如表所示3。


抗生素	不动杆菌spp。 ()	k . oxytoca ()	k .肺炎 ()	假单胞菌spp。 ()	大肠杆菌 ()

氨苄青霉素	NT	One hundred.	One hundred.	NT	78.11
阿米卡星	67.24	73.91	59.09	31.57	19.04
复方磺胺甲恶唑	93.83	83.31	81.8	84.21	68.85
头孢噻肟	82.75	82.6	81.0	73.68	78.94
头孢吡肟	86.20	91.3	81.81	84.4	57.8
羧苄青霉素	NT	NT	NT	42.1	NT
环丙沙星	82.75	91.3	68.18	73.68	73.68
庆大霉素	70.68	82.6	59.09	42.1	47.36
Imipenem	17.24	0	18.18	0	0
氧氟沙星	68.96	60.80	63.63	47.36	63.15
哌拉西林/ tazobactam	50.02	40.90	63.15	5.26	15.78
多粘菌素B	0	0	0	0	0

NT:没有测试。

金黄色葡萄球菌主要是革兰氏阳性分离显示更高的耐氨苄西林(78.1%),显示对万古霉素的敏感性100%,其次是庆大霉素(78.12%)。结果如表所示4。


抗生素的使用	敏感的		耐药
抗生素的使用	数量	%	数量	%

氨苄青霉素	7	21.9	25	78.1
复方磺胺甲恶唑	18	56.25	14	43.7
头孢噻肟	19	59.38	13	40.62
头孢西丁	18	56.25	14	43.75
环丙沙星	23	71.87	9	28.12
邻氯青霉素	20.	62.5	12	37.5
庆大霉素	25	78.12	7	21.87
甲氧西林	22	68.75	10	31.25
氧氟沙星	24	75年	8	25
万古霉素	One hundred.	One hundred.	0	0

ESBL确认40(32.25%)隔离;其中10 (25%)大肠杆菌其次是8(20%)隔离k . oxytoca。ABL在51(31.28%)分离和检测不动杆菌spp。16(31.37%)主要ABL生产商。MBL生产被发现在11个隔离;其中,7 (63.8%)不动杆菌种虫害2(18.1%)隔离每个紧随其后k . oxytoca和k .肺炎。详细的结果展示在表5。


细菌	ESBL生产数量(%)	ABL生产数量(%)	MBL生产数量(%)

大肠杆菌	10 (25%)	4 (7.8%)	0
k . oxytoca	8 (20%)	8 (15.6%)	2 (18.1%)
k .肺炎	6 (15%)	6 (11.7%)	2 (18.1%)
不动杆菌spp。	5 (12.5%)	16 (31.37%)	7 (63.8%)
假单胞菌spp。	5 (12.5%)	4 (7.8%)	0
枸橼酸杆菌属spp。	1 (2.5%)	2 (3.9%)	0
p .奇异君子兰	1 (2.5%)	0	0
p .寻常的	1 (2.5%)	0	0
金黄色葡萄球菌	3 (7.5%)	11 (21.5%)	0

总	40 (32.25%)	51 (31.28%)	11 (64.7%)

4所示。讨论

在这项研究中发现了高增长率从不同的临床样本,并报告了类似的结果在前面研究在同一家医院15,16]。本研究中最主要的病原体不动杆菌种虫害是依照一项研究[17]。然而,在其他的研究(18,19它已被证明克雷伯氏菌种虫害是主要的医院ICU的病原体。这种差异可能是由于地理位置的不同,营养状况、卫生保健机构,和免疫状态的病人。不动杆菌也报道最病原体从重症监护室的病人在国际流行的研究“感染的重症监护的研究”(20.]。

在这项研究中,86.9%的k . oxytoca,84.21%的假单胞菌spp的81.81%k .肺炎,79.31%的不动杆菌种虫害是耐药和相似的结果也在早前的一项研究报告(16]。生产不同的β-lactamases、多射流泵,减少吸收,和其他药物修饰酶的耐药性造成更大的作用克雷伯氏菌种虫害和类似的抵抗机制也发生在不动杆菌种虫害和假单胞菌spp。21,22]。

更高的患病率(32.25%)的ESBL生产中被发现大肠杆菌紧随其后的是k . oxytoca和k .肺炎与先前的研究一致报告流行率为28.6%。大肠杆菌和k .肺炎隔离生产SHV, TEM, CTX-M,每个类型的ESBLs并展示可变电阻β内酰胺抗生素导致治疗失败(23]。存在一些风险因素等殖民和感染ESBL制片人重病患者住院时间延长,使用侵入性装置,沉重和抗生素的使用之前,营养状况不佳,最近的手术,胃造口术,全静脉营养和血液透析24]。

盛行的AmpCβ内酰胺酶中检测出不动杆菌spp。(29.4%)紧随其后金黄色葡萄球菌(21.5%)和k . oxytoca(15.6%)此前模式按照先前的结果(25)的患病率为20%克雷伯氏菌spp。高水平的AmpC生产通常是与抗性相关β内酰胺抗生素除了碳青霉烯和限制了治疗使用。的敏感性和特异性,在这项研究中使用的方法是90%和98.2%,分别为(13]。

在11个隔离MBL被检测出17 screen-positive隔离流行率为64.7%;其中7 (63.63%)不动杆菌种虫害,其余克雷伯氏菌spp。不同的可转让的MBL在这些生物和主要的小鬼,VIM, SIM类型(26]。与当前寻找韩国的调查显示只有6%的MBL积极隔离(27]。耐碳青霉烯的增加的趋势不动杆菌种虫害在全球范围内带来了一个重要的问题,因为它限制了范围的治疗选择。耐碳青霉烯不动杆菌是由于天然β-lactamases,收购了β-lactamases像-金属β-lactamases,碳青霉烯水解oxacillinases (CHDLs),外膜孔蛋白蛋白质的损失,有时修改penicillin-binding蛋白(28]。

5。结论

不动杆菌种虫害和金黄色葡萄球菌主要病原体流行在ICU的神经和盟军科学研究所研究。包含ESBL, ABL和MBL在临床分离株是十分必要的。

利益冲突

作者宣称没有利益冲突有关的出版。

确认

作者要感谢大学拨款委员会,尼泊尔,提供金融支持这项工作和fisker允许进行这项研究。他们感谢病人fisker没有他们这项工作是不可能的。

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