TY -的A2 -苏亚雷斯,克劳迪奥·m·吴盟——Xudong盟——吴,Di AU - Lu,智胜AU - Chen Wentao AU -胡,肖建AU -叮,Yu PY - 2009 DA - 2010/02/23 TI -一种新型高级TEV蛋白酶的生产方法Superfolder GFP标记SP - 591923六世- 2009 AB -因为它的严格的序列特异性,烟草腐蚀病毒(TEV)蛋白酶被广泛用于去除融合标签的重组蛋白。由于TEV蛋白酶溶解性差,许多策略已经被用来增加这种酶的表达水平。在我们的工作中,我们引入了一个新颖的方法来产生TEV蛋白酶通过使用superfolder可见绿色荧光蛋白(
科幻小说GFP)融合标签。6个变种的可溶性生产和催化活性
科幻小说GFP-TEV检查,然后选择最好的变体是大规模生产。纯化后Ni-NTA亲和色谱法和Q阴离子交换色谱法,最好的变体
科幻小说GFP-TEV融合蛋白酶得到纯度超过98%,产量超过320毫克每升文化。的
科幻小说GFP-TEV有着相似的原始TEV蛋白酶的催化活性。我们的研究显示,大规模生产的新方法和功能可见TEV蛋白酶结构基因组学研究和其他应用程序。SN - 2314 - 6133你2009/591923 / 10.1155——https://doi.org/10.1155/2009/591923——摩根富林明-生物医学和生物技术杂志》的PB Hindawi出版公司KW - ER