2。材料和方法
2.1。研究人群
在这种描述性的调查,100大鼠(
家鼠)被发现使用老鼠陷阱设置在不同的站点在莎丽城,伊朗(2017年9月)。性别(男性和女性)、体重(成年老鼠200 g),和栖息地类型(城市和农村)记录。因为年长的老鼠一般都较重,年龄估计基于体重(
7]。动物被运送到了寄生虫学和真菌学实验室马赞达兰大学的医学科学。然后,老鼠与乙醚麻醉和消灭,然后每个老鼠的胸腔打开,从心脏和血液样本被免疫诊断。
2.2。准备垫的抗原
成年女性瑞士白化小鼠获得从动物研究中心,马赞达兰大学的医学科学。约3×104个RH株
刚地弓形虫被接种到小鼠。感染后5天,动物被乙醚安乐死,胸腔被打开了。通过使用一个注射器,流体是吸气和稀释无菌磷酸盐(PBS, pH值7.2)包含青霉素和链霉素。离心后,个悬浮在2%甲醛溶液,继续在一夜之间。PBS的沉积物被去除甲醛的三倍。碱性抗原缓冲区被溶解安排3.5克氯化钠,硼酸的1.54 g, 2 g 450毫升去离子水的牛血清白蛋白。当时,12毫升1 N氢氧化钠添加,pH值的解决方案是调整到8.95。解决方案的体积是500毫升,储存在25°
C。Formalin-killed抗原与碱性缓冲因此稀释1×10的最终浓度7个/毫升。
2.3。血清的制备
无菌的血清样本稀释PBS (1 x, pH值7.2)包括4 g氯化钠、0.1 g氯化钾,0.57 g正磷酸盐氢二钠二水合物,0.1 g正磷酸盐,二氢钾和500毫升蒸馏水。最初的稀释是始于1:10比1:800。
2.4。的性能改良凝集试验(垫)
五十
μl的抗原组合添加到每个(U-bottom板),然后混合,和50
μ血清l是补充道。最后,20毫升的0.2(14毫升/升)我在PBS稀释是分布在每个好,混合后,盘子一夜之间被孵化22°C。
24小时后,盘子是阅读与横向黑色背景光。消极的反应表现出的中心离散点或不透明按钮,而扩散不透明度在整个直径是记录为积极。在这项研究中,它采用一个截断值等于1:40鼠血清的垫子上。
2.5。统计分析
结果用SPSS 18.0软件包进行分析(美国SPSS Inc .,芝加哥,IL)。
P
被认为具有统计显著性值小于0.05。卡方测试是用来比较的seroprevalence之间的区别
弓形虫和变量如年龄、性别、和栖息地类型。
3所示。结果
在这个横断面研究,反
弓形虫在56个老鼠的血清免疫球蛋白抗体被发现垫(56%)的方法。来自56个阳性血清,2样本正垫滴度的40岁,34个样品在80年,160年14个样品,5个样本,320年和1 640年样本。
考虑到大鼠的性别,42岁男性和女性58老鼠老鼠。垫的结果显示,45%的男性和55%的女性老鼠血清反应阳性的
弓形虫,但是差异没有统计学意义(
P
=
0.83
)。
基于76年栖息地类型的老鼠,老鼠在农村和24老鼠在城市。血清学结果显示,61.8%的血清反应阳性的老鼠在农村,34.6%的人在城市。统计分析表明,有一个啮齿动物的血清阳性和栖息地类型之间的显著差异(
P
=
0.028
)。
此外,在这次调查100年的老鼠,老鼠22日少年,成年人和78只老鼠。血清学的发现显示,36.3%的血清反应阳性的老鼠是幼稚和61.5%是成年人。统计分析表明年龄的动物之间的显著差异,血清阳性
弓形虫感染(
P
=
0.035
)(表
1)。
的统计分析
弓形虫血清阳性野生老鼠在伊朗北部基于性别,年龄,和栖息地类型。
| 特征 |
不。 |
不。积极的与垫样品浓度 |
不。pos。 |
%的pos。 |
95%可信区间 |
P
价值 |
| 40 |
80年 |
160年 |
320年 |
640年 |
| 性别 |
| 男性 |
42 |
1 |
17 |
4 |
1 |
0 |
23 |
54.7 |
38.6 - -70.1 |
|
| 女 |
58 |
1 |
17 |
10 |
4 |
1 |
33 |
56.8 |
43.2 - -69.8 |
0.83 |
| 总 |
One hundred. |
2 |
34 |
14 |
5 |
1 |
56 |
56 |
|
|
|
| 年龄 |
| 少年 |
22 |
0 |
6 |
1 |
1 |
0 |
8 |
36.3 |
24.3 - -67.7 |
|
| 成人 |
78年 |
4 |
32 |
8 |
3 |
1 |
48 |
61.5 |
47.2 - -69.9 |
0.035
∗
|
| 总 |
One hundred. |
4 |
38 |
9 |
4 |
1 |
56 |
56 |
|
|
|
| 栖息地类型 |
| 农村 |
76年 |
1 |
29日 |
11 |
4 |
2 |
47 |
61.8 |
49.9 - -72.7 |
|
| 城市 |
24 |
1 |
6 |
1 |
1 |
0 |
9 |
34.6 |
17.2 - -55.6 |
0.028
∗
|
| 总 |
One hundred. |
2 |
35 |
12 |
5 |
2 |
56 |
56 |
|
|
∗
显著差异。
4所示。讨论
目前的研究是第一次调查的seroprevalence
弓形虫在伊朗北部的老鼠使用垫的方法。根据文献回顾,建立了众多的实验室技术来识别的seroprevalence
弓形虫例如,感染大鼠的血清酶联免疫吸附试验(
8),乳胶凝集试验、间接红细胞凝集抗体,Sabin-Feldman染料测试和间接immunofluorescent抗体测试。虽然这些方法似乎是敏感的和具体的,方法是昂贵的,需要在特定的实验室完成
9]。垫是一个简单的和敏感的诊断方法反
弓形虫人类,特别是在动物的免疫球蛋白抗体(
10]。因此,我们使用这个方法来定义的流行率
弓形虫在目前的研究。
我们的研究结果表明,seroprevalence感染的老鼠在伊朗北部是56%。这个单细胞寄生虫的高seroprevalence野生老鼠在这个领域非常重要,因为受感染的老鼠很容易传播
弓形虫给其他动物。
野生老鼠的水库
弓形虫组织囊肿为猫、狗和其他动物(
11]。相反,的发生率
弓形虫感染猫实际上反映了当地的感染率啮齿动物因为猫被认为是感染了吃这些被感染的老鼠。
无论血清学方法的类型,seroprevalence率
弓形虫感染啮齿类动物在世界上是可变的(
11,
12),例如,0.3%在美国
13在西印度群岛),0.8% (
14在中国南方[],3.2%
12在巴拿马[],23.4%
11),35%在英国
15在菲律宾),58% (
16]。
很少有研究seroprevalence率
弓形虫在伊朗的老鼠。Mosallanejad等人的速度进行计算
弓形虫感染血清样本127年伊朗西南部的野生老鼠(阿瓦士)使用检测试纸试验检测免疫球蛋白反
弓形虫抗体。31(24.41%)显示抗体
弓形虫(
17]。
的流行率
弓形虫在我们的研究中类似于研究在菲律宾Salibay等人,高于其他研究[
16,
18,
19]。在伊朗北部,seroprevalence
弓形虫不同组的感染人类和动物的seroprevalence非常高
弓形虫74.6%女性提到婚前卫生实验室(
20.在免疫缺陷病人[],75.6%
21),58.8%孕妇(
22在山羊(羊),35%,30%
23),和40%的猫(
24]。
在伊朗北部,seroprevalence高
弓形虫感染可能是由于下列因素:气候温和湿润;缺乏常规治疗感染的动物;和相当丰富的猫和其他动物。在这方面,高水分(近90%)和环境温度(16 - 22°C)的孢子形成和生存提供了有利条件
弓形虫卵囊的
25]。
主机的时代的流行的主要因素
弓形虫感染,通常,比年轻的年老的动物是高度感染;据估计,随着年龄的增长,接触寄生虫感染的风险显著增加(
18,
26]。我们的分析表明,seroprevalence感染的成年老鼠高于幼年大鼠(61.5%到36.3%)。seroprevalence率有显著差异
弓形虫和年龄(
P
=
0.035
)。
在我们的研究中,61.8%的老鼠生活在农村环境感染了
弓形虫而只有34.6%的老鼠在城市地区。seroprevalence之间的显著差异
弓形虫在老鼠和生活的地方
P
=
0.028
)。这些发现类似于大多数研究和不同研究的结果由Dabritz等人在加州,美国(
27]。在农村地区,大量的猫的传播是一个重要的因素
弓形虫感染。猫是一个主要的来源
弓形虫感染(
28]。终宿主能分泌出许多卵囊
弓形虫。形成孢子卵囊的
弓形虫可以生存在潮湿环境中无数个月(
27]。
由于环境中丰富的卵囊,食肉动物可能感染
弓形虫通过摄取这些卵囊感染能导致增加的猫。此外,老鼠被摄取分泌促卵囊感染猫(
29日]。
在目前的调查,患病率无显著性差异
弓形虫在雄性和雌性老鼠。然而,这种寄生虫患病率男性高于女性(56.8%)比男性(54.7%)。这些结果与研究由阴等人在中国
12)和对比研究结果由Cabanacan-Salibay和Claveria在菲律宾
30.]。
rat-cat周期的传播中起着重要作用
弓形虫人类感染(
26]。猫,是最重要的
弓形虫,可以感染
弓形虫通过消化传染性卵囊的环境中或通过组织囊肿出现在中间宿主的消费,包括大鼠(
29日]。也这通常终宿主排泄卵囊在其粪便后最初的感染
弓形虫导致的传播
弓形虫感染(
26]。
有许多因素影响的流行病学
弓形虫感染,如猫的密度和中间宿主,如老鼠、环境条件(温度和湿度),地理区域,和食品加工
25]。减少人口的野猫,取掉卵巢猫,收集家猫粪便垃圾盒,完成烹饪的所有类型的肉,促进严重的洗手,减少老鼠很重要的记录在感染的控制
31日]。
这项研究是第一次调查
弓形虫感染野生老鼠马赞达兰省,伊朗北部。我们的研究结果有公共卫生的影响。同时,他们确认的高发病率
弓形虫在伊朗北部感染。调查确定,野生老鼠是一个重要和迫切的野生动物在伊朗北部感染中间宿主水库。一般来说,seroprevalence
弓形虫感染野生老鼠可能会低于其他动物,但老鼠的人口比其他动物高。因此,感染野生老鼠传播的主要来源
弓形虫感染动物,因此,应采取综合策略和程序控制感染野生老鼠。似乎应该在家畜和野生动物上进行进一步的研究来确定主机的水库的存在
弓形虫在这一领域。