供应商管理库存 兽医国际 2042 - 0048 2090 - 8113 Hindawi 10.1155 / 2021/6624751 6624751 研究文章 调查的干血现货卡片使用猪血液脂肪酸分析 https://orcid.org/0000 - 0003 - 1883 - 9472 木 约旦 1 https://orcid.org/0000 - 0003 - 3958 - 3912 铸币工人 拉里·J。 2 https://orcid.org/0000 - 0001 - 6837 - 9115 Stoskopf 迈克尔·K。 3 https://orcid.org/0000 - 0001 - 9141 - 7669 Bibus 道格 4 安吉 戴普斯 5 https://orcid.org/0000 - 0001 - 5949 - 8323 Tollefson 特洛伊N。 6 https://orcid.org/0000 - 0001 - 6498 - 7666 Fellner Vivek 1 https://orcid.org/0000 - 0003 - 3652 - 6218 Ange-van Heugten 金伯利 1 Hikasa 义明 1 美国动物科学 北卡州立大学 罗利 数控27695 美国 ncsu.edu 2 北卡罗莱纳动物园 4401动物园Pkwy Asheboro 数控27205 美国 nczoo.org 3 临床科学学系 兽医学院 北卡州立大学 1060年威廉·摩尔博士 罗利 数控27607 美国 ncsu.edu 4 脂质技术有限责任公司 邮政信箱216 奥斯丁 MN 55912 美国 5 山毛榉岭猪肉农场有限公司 Belhaven 数控27810 美国 6 Mazuri®珍奇动物营养 PMI营养、土地的湖泊,Inc ., 圣路易斯 密苏里州63166 美国 2021年 29日 8 2021年 2021年 2 12 2020年 30. 4 2021年 17 8 2021年 29日 8 2021年 2021年 版权©2021年乔丹木等。 这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。

脂肪酸,特别是ω- 3和ω- 6脂肪酸,对动物生殖系统和心血管健康很重要。而进行的传统监控脂肪酸使用冷冻血液分数如血清、血浆、进步的分析技术已经开发出一种方法收集seppo微量试样干全血226年级滤纸能够提供信息长期脂肪酸状态的动物。收集血液样本从五个男猪在传统冷冻方法和干血卡(DBS)。星展样品收集与未经处理的注射器和管,和大约320 μL的血液与大约80放在每张卡片 μL /(4点)。执行统计分析比较两组样本使用Mann-Whitney彼此 U以及和确定DBS样本类似传统的全血样品。30的脂肪酸和脂肪酸组与可测量的浓度,只有四个人脂肪酸,油酸,欧米伽- 3 docosapentaenoic酸,神经酸,和adrenic酸,有统计学差异。这些差异大多是轻微,可能是由于分析错误或污染。样本类型之间的比较发现相似的关键欧米茄脂肪酸的浓度和欧米和支持使用DBS的集合作为一个微创的血液采集和脂肪酸分析方法。

 1。介绍

脂肪酸饮食至关重要的组件支持一般健康的动物。特别是ω- 3和ω- 6脂肪酸有助于维持细胞膜结构和功能,支持免疫反应,会影响动物的繁殖和心血管健康 1- - - - - - 3]。在人类中,补充膳食的多不饱和脂肪酸如二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)已经被用来治疗疾病,如甘油三酯升高,胰岛素抵抗和代谢炎症( 4]。此外,饮食之间存在反比关系和循环EPA和DHA和心血管疾病的患病率,EPA和DHA水平较高的降低心血管疾病的风险( 5]。各种生物标志物的血措施,包括脂肪酸,是有用的在确定最优膳食摄入营养物质在动物 6, 7]。通常,这些血液生物标志物分析血清或血浆中;然而,全血已经发现,以反映长期脂肪酸状态相比,短期内状态(天个月)提供的血清或血浆中浓度( 8, 9]。

分析方法的进步改善了多年来,并且能够分析脂肪酸和其他生物微量试样一直感兴趣的各种物种( 10]。一种类型的脂肪酸微量试样方法使用专门准备的滤纸和小滴全血收集通过传统的血液了。全血滴被允许干的卡片,可以用于分析疾病和营养标记,包括脂肪酸( 10, 11]。使用干血现货(DBS)牌全血收集是特别感兴趣的情况下适当的存储的全血现场工作等是不可能的。尽管DBS方法验证了许多人类化验,很少有可用资源来验证DBS在其他物种 12]。

本研究的目的是评估DBS的适合测量动物全血脂肪酸。它还提供了有限的数据对全血DBS样品刚断奶的猪。我们比较结果从全血和DBS一周内发送样品的收集进行分析。

 2。材料和方法

全血收集2017年秋季从五个无关的国内猪阉割( 野猪家在断奶)重量介于6.8和9.1公斤。断奶之前,他们播下的猪保持节食的牛奶和母猪喂食玉米和大豆基地混合哺乳期饮食。从每个猪颈静脉血液得到在正常断奶期间兽医健康检查。血在未经处理的注射器和收集管和直接转移到PerkinElmer节省点卡片(PerkinElmer沃尔瑟姆,MA)收集后。这些卡片是由seppo 226年级滤纸测试和验证,以满足规范的疾病控制中心(CDC)和美国食品和药物管理局(FDA)干血托收。这些规范包括滤纸是100%纯棉纤维没有强添加剂,pH值在5.7和7.5之间,灰分含量不超过0.1% 13]。这些规范确保一致性和借给他们biostability实验室和测试。上的四个点血卡收到了大约80 μL 320的血 μL /动物/卡的4头猪。血液从5th猪是应用于所有3卡片上的斑点。一个血液脂肪酸分析现货是充分的,但额外的斑点收集以防斑点质量差或污染。这些卡片是在室温下保持直到装运NC州立大学。控制,肝素化全血样品也从每只动物收集分析和冷冻−80°C。所有五个冻肝素化样品和5点卡片被送到脂质技术(奥斯汀,MN)在一周内全部脂肪酸概要文件的集合。额外的两张牌从猪5保持在室温下(约23°C)了一年,两年,之前分别被送往脂技术进行分析。

比较对照组全血(WB)样品( n= 5)和干血滴(DBS) ( n= 5)是通过手工计算使用Mann-Whitney非参数统计 U以及与 α= 0.05确定世行与星展银行不同。此外,差异之间的视觉评估世行,初始DBS,——和两年举行DBS样本猪5。

 3所示。结果

36个人的脂肪酸和10个脂肪酸组分析,20个人脂肪酸和所有10组可衡量的浓度(表 1)。当比较白DBS在所有五个人猪,四个脂肪酸有统计上显著的差异。全血是低于DBS二十二烷酸(22:0),docosapentaenoic (Osbond)酸(DPA, 22: 5将),和神经酸(24:1)但高于DBS adrenic酸(22:4将)。

总脂肪的脂肪酸(%)的液体全血(WB) ( n= 5)和干血滴(DBS) ( n5 = 5)Mann-Whitney猪 U以及世行的星展样品1。

类型 星展银行 白平衡
猪ID 1 2 3 4 5 平均 52 53 1 2 3 4 5 平均
脂肪酸
肉豆蔻酸(14:0) 1.00 1.25 1.35 1.33 0.98 1.18 0.87 0.66 1.25 1.04 1.40 1.39 1.05 1.23
棕榈酸(16:0) 25.75 25.68 25.01 26.24 22.34 25.00 24.14 25.14 25.68 26.10 25.64 27.70 23.49 25.72
9 -十六碳烯酸(16:1支w7) 4.44 4.19 4.25 5.10 6.40 4.88 5.92 5.95 4.40 3.99 4.29 4.64 6.57 4.78
硬脂酸(18:0) 7.65 9.05 8.63 8.43 7.28 8.21 10.56 9.55 7.94 9.37 8.47 8.66 6.89 8.27
油酸(w9 18: 1) 22.41 20.50 24.56 24.92 22.06 22.89 24.45 26.56 22.98 20.30 24.44 24.11 21.85 22.74
亚油酸(18:2将) 27.65 28.49 24.51 23.70 29.47 26.76 25.20 23.82 27.08 28.66 24.30 23.89 29.53 26.69
γ亚麻酸(18:3将) 0.29 0.28 0.38 0.27 0.30 0.30 0.30 0.00 0.23 0.26 0.34 0.20 0.33 0.27
花生酸(20:0) 0.16 0.19 0.15 0.08 0.00 0.12 0.11 0.00 0.21 0.15 0.12 0.07 0.00 0.11
Paullinic酸(20:1支w7) 0.11 0.24 0.24 0.12 0.17 0.18 0.15 2.34 0.11 0.21 0.25 0.09 0.21 0.17
α亚麻酸(18:3 w3) 0.53 0.58 0.56 0.51 0.58 0.55 0.50 0.40 0.56 0.51 0.52 0.42 0.59 0.52
Eicosenoic酸(20:2将) 0.27 0.27 0.25 0.15 0.32 0.25 0.29 0.29 0.28 0.26 0.29 0.21 0.23 0.25
h - γ亚麻酸(20:3将) 0.35 0.45 0.33 0.38 0.41 0.38 0.32 0.28 0.33 0.40 0.30 0.32 0.36 0.34
花生四烯酸(20:4将) 6.19 6.12 6.78 5.85 6.90 6.37 4.16 3.39 6.34 6.17 6.93 5.86 6.38 6.34
环境保护署(20:5 w3) 0.18 0.20 0.17 0.18 0.16 0.18 0.15 0.22 0.18 0.20 0.15 0.14 0.17 0.17
二十二烷酸(22:0) 0.31 0.29 0.25 0.41 0.30 0.31 一个 0.48 0.32 0.03 0.07 0.04 0.08 0.08 0.06 b
Adrenic酸(22:4将) 0.49 0.47 0.50 0.52 0.48 0.49 一个 0.26 0.06 0.52 0.54 0.61 0.55 0.51 0.55 b
DPA (Osbond酸)(22:5将) 0.32 0.34 0.32 0.39 0.36 0.35 一个 0.13 0.08 0.24 0.32 0.26 0.34 0.30 0.29 b
DPA (clupanodonic酸)(22:5 w3) 0.69 0.59 0.60 0.58 0.51 0.59 0.38 0.25 0.56 0.65 0.56 0.61 0.49 0.57
DHA (22: 6 w3) 1.02 0.66 1.02 0.62 0.86 0.84 0.55 0.19 0.98 0.71 0.96 0.62 0.92 0.84
神经酸(24:1) 0.19 0.18 0.14 0.20 0.10 0.16 一个 0.15 0.10 0.11 0.09 0.12 0.10 0.05 0.09 b
饱和烃 34.87 36.46 35.40 36.50 30.91 34.83 36.15 35.66 35.11 36.73 35.68 37.89 31.52 35.39
单烯 22.70 20.91 24.94 25.25 22.33 23.23 25.38 29.04 23.20 20.60 24.81 24.30 22.11 23.00
PUFA 37.98 38.44 35.41 33.15 40.36 37.07 32.55 29.35 37.29 38.68 35.22 33.17 39.80 36.83
HUFA 9.24 8.83 9.71 8.53 9.68 9.20 6.26 4.69 9.14 9.00 9.78 8.44 9.12 9.10
w3总 2.43 2.03 2.35 1.88 2.11 2.16 1.73 1.42 2.28 2.08 2.19 1.79 2.16 2.10
总将 35.55 36.41 33.07 31.27 38.25 34.91 30.66 27.93 35.01 36.60 33.04 31.37 37.64 34.73
总w9 22.59 20.68 24.70 25.12 22.16 23.05 25.23 26.70 23.09 20.39 24.56 24.21 21.90 22.83
将/ w3 14.65 17.93 14.10 16.60 18.12 16.28 17.75 19.62 15.34 17.60 15.12 17.50 17.41 16.59
欧米伽- 3 HUFA 20.48 16.44 18.37 16.17 15.80 17.45 19.62 18.61 18.83 17.45 17.05 16.25 17.22 17.36
ω- 6 HUFA 79.52 83.56 81.63 83.83 84.20 82.55 80.38 81.39 81.17 82.55 82.95 83.75 82.78 82.64

1(不同的标a、b)在平均列是明显不同( p < 0.05 星展银行WB相比。2样本代表了1年期DBS卡在室温和不包括在星展银行的平均水平。3样本代表了2年举行DBS卡在室温和不包括在星展银行的平均水平。

视觉差异被认为对大多数脂肪酸和酸组相比——两年存储样本猪5的初始星展银行和全血样品同样的动物。这些差异是基于定性的浓度在所有样本组之间的比较。没有适当的统计分析样本只可以从一个动物。

 4所示。讨论

统计的四个人脂肪酸DBS和WB样本之间的差异都是低浓度脂质和除了二十二烷酸是由相当大比例的差异只有一个或两个样品,建议小实验室处理错误或问题时把卡片上的样本期间收集卡片起源的持续高值样本二十二烷酸可能会建议DBS卡纤维或环境污染物的干扰。不幸的是,没有空白的卡片作为消极的控制运行之前测试的开发人员和标准设定的CDC和FDA没有说明需要 13]。如果污染发生时,很可能发生在收集动物外壳而不是被污染的卡片。然而,控制卡将被认为是未来的研究。总体而言,我们的研究提供了强有力的证据使用DBS集合代替液体WB系列猪当样本可以分析后不久。DBS可用于有效样本在困难自由放养野外条件和对动物血液无法提供大体积样品任何理由。这些星展样品也可以容易的船,因为他们可以保持在环境温度,干燥过程会导致病原体含量减少,出口干样品被认为是免税监管的材料在许多地区( 10, 14]。这些因素可以减少样本收集和管理的总成本。

为数不多的脂肪酸组成的差异这些样本类型脂肪酸研究是令人鼓舞的,特别是那些涉及欧米茄脂肪酸和欧米的没有差异这些类别的重要脂肪酸。脂肪酸,也是最受退化( 15),EPA、DHA和花生四烯酸,没有显著差异。这意味着DBS样品应提供更快的收集替代与传统全血可比的结果集合。

当看着存储时间因素DBS猪5样本,有潜力之间的差异指出原始的“新鲜”样本的储存在室温下1或2年。由于低 n这不能统计分析。这些长时间的收集样本并不是这个项目的目标;然而,进一步研究DBS卡有效性可能需要通过时间postsampling和存储技术。

虽然这个数据集很小,初步在广度,它提供了有价值的信息比较营养研究的领域。DBS卡片的使用全血脂肪酸目前正在调查在外来物种大量血液样本,大样本人群和血液样本处理(或温度管理)可能不可用。目前,有研究用DBS积极成果分析管理和自由放养东部框( Terrapene卡卡和常见的拍摄 Chelydra serpentina)海龟 16)和自由放养绿海龟( 龟鳖目mydas)和坎皮海龟( 摘要本文kempii)[ 17]。利用猪作为国内模型奇异的哺乳动物,这个数据集提供了强有力的证据表明,星展银行可以利用奇异的哺乳动物和爬行动物样品样本。

 5。结论

对比液体全血和DBS样本支持DBS集合的使用作为一种微创的血液采集和脂肪酸分析方法。脂肪酸浓度两个集合之间的相似分析方法包括关键的欧米茄脂肪酸和欧米伽在许多物种心血管和一般健康的关键。四个脂肪酸与差异分析时应特别谨慎,和山酸应进一步研究的问题。差异存储DBS样本收集从猪5显示有限的存储时间和值得进一步研究探讨温度和湿度储存条件对样品的稳定性。

 数据可用性

使用的数据来支持本研究的结果包括在本文中。

 的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

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