SRT 中风的研究和治疗 2042 - 0056 2090 - 8105 Hindawi 10.1155 / 2017/6516401 6516401 研究文章 颅内出血的严重程度来衡量自由血红蛋白在大脑中取决于抗凝类:实验数据 制品 凯尔·M。 1 范斯坦 道格拉斯·L。 2 3 鲁宾斯坦 以色列 3 4 Battula Prudhvi 1 http://orcid.org/0000 - 0003 - 0680 - 4520 奥特罗 穆 1 赫伯特 李 5 王 Tzu-Fei 5 伊万诺娃 亚历山德拉 6 乔杜里 什维塔 1 卷边 杰西卡 1 http://orcid.org/0000 - 0003 - 4570 - 5883 布罗斯基 谢尔盖V。 1 Ishrat Tauheed 1 病理学系 美国俄亥俄州立大学 哥伦布 哦 美国 osu.edu 2 美国麻醉学 芝加哥伊利诺伊大学 芝加哥 伊尔 美国 uic.edu 3 杰西布朗VA医学中心 芝加哥 伊尔 美国 va.gov 4 医学系的 芝加哥伊利诺伊大学 芝加哥 伊尔 美国 uic.edu 5 医学系的 美国俄亥俄州立大学 哥伦布 哦 美国 osu.edu 6 OhioHealth康复医院 哥伦布 哦 美国 ohiohealth-rehab.com 2017年 20. 7 2017年 2017年 14 02 2017年 26 04 2017年 23 05年 2017年 20. 7 2017年 2017年 版权©2017凯尔m .器皿等。 这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。

背景和目的。抗凝治疗是广泛用于预防血栓栓塞事件。抗凝治疗的颅内出血是严重的并发症,尤其是与华法林。直接口服抗凝血剂减少但不消除颅内出血的风险。本研究的目的是确定应用抗凝剂后颅内出血的程度没有额外的触发器。 方法。老鼠接受不同抗凝类(维生素K拮抗剂、肝素、直接凝血酶抑制剂,和因子Xa抑制剂)。脑部出血被免费评估脑实质中血红蛋白浓度。 结果。维生素K拮抗剂(华法林和brodifacoum)大脑中游离血红蛋白显著增加。在直接口服抗凝血剂,凝血酶抑制剂dabigatran还显著增加免费血红蛋白在大脑中,而治疗因素Xa抑制剂rivaroxaban游离血红蛋白浓度没有显著影响。 结论。我们的数据表明,脑部出血的严重程度取决于抗凝类和维生素K拮抗剂更明显。

 美国国立卫生研究院的 U01 NS083457 俄亥俄州立大学 1。介绍

抗凝治疗高危患者的标准治疗血栓栓塞事件,尤其是与心房纤颤或静脉血栓栓塞。华法令阻凝剂仍然是最常用的抗凝剂,随着市场的快速直接口服抗凝血剂(DOAC)近年来。华法令阻凝剂提供可靠的防止血栓栓塞事件。然而,这个好处是有代价的,这是造成出血warfarin-related凝血障碍。也许最怕出血性事件与华法林是颅内出血。warfarin-associated颅内出血的发病率是1 - 5%,占所有颅内出血的10 - 12%。这些患者的死亡率高达50% ( 1]。DOAC,如直接凝血酶抑制剂(dabigatran)和因子Xa抑制剂(rivaroxaban和apixaban),减少但不完全防止颅内出血的风险( 2]。

本研究的目的是调查是否颅内出血是依赖于类抗凝剂的实验动物。

 2。材料和方法

按照美国国立卫生研究院所有实验指导的护理和使用机构批准的实验室动物和动物保健和使用委员会。成年男性的雄性sd大鼠中(180 - 220 g,哈伦实验室,印第安纳波利斯,在提供食物和水随意。动物被随机分配到治疗组。

使用多个抗凝类:(1)维生素K拮抗剂:brodifacoum快速公车提供)和华法林(Sigma-Aldrich,圣路易斯,密苏里州);(2)直接凝血酶抑制剂dabigatran (Pradaxa,勃林格殷格翰集团制药,Inc .)、里奇CT);(3)因子Xa拮抗剂rivaroxaban (Beerse Xarelto,詹森制药公司,比利时);(4)间接凝血酶和因子Xa抑制剂肝素(费森尤斯公司Kabi美国、摩托罗拉、IL)。下面的路线和剂量使用药物:快速公车提供:口服填喂法、单管理0.4毫克/公斤(半数致死量(LD50) [ 3];华法令阻凝剂/ os饮用水中2毫克/公斤/天5天( 4];dabigatran:口服填喂法、单管理150毫克/公斤(LD50) [ 5];rivaroxaban:口服填喂法、单管理20毫克/公斤(LD50) [ 6];肝素:皮下单注100 KU /公斤(LD50, MSD)。这些剂量是基于不同的这些药物的药代学和药效学老鼠与人类相比。

抗凝剂治疗进行5天的药物(除了华法林,服用7天)。死亡率记录;存活动物牺牲在第五天(7天华法林为了达到期望的增加凝血酶原时间(PT))。

PT测定血液中每日获得从我们前面描述的尾巴 3, 4, 7]。所有的老鼠(死于过度抗凝和存活大鼠)进行了解剖;进行颅骨切开术,大脑是提取并在中间的矢状面。大脑的左半部分分为三部分:前大脑(包括额叶),后大脑(包括顶叶、颞叶、枕叶),和小脑。这三个部分的大脑被冻结在−游离血红蛋白80°C的进一步评估。

颅内出血的组织学检查评估大脑和大脑实质自由血红蛋白浓度。免费使用Drabkin血红蛋白测定试剂制造商协议基于修改。总血红蛋白浓度计算每个通用脑组织的校准曲线。

2.1。统计数据

使用棱镜执行统计分析软件(GraphPad软件公司,拉霍亚,CA)。组之间的差异进行了分析,方差分析(方差分析)测试随后postanalysis图基的多重比较检验。差异与 p < 0.05 被认为是具有统计学意义。

 3所示。结果

与快速公车提供治疗,肝素导致至少50%的死亡率(快速公车提供第二天,第一天为肝素)。与其他抗凝剂治疗并不致命。维生素K拮抗剂治疗导致快速增加PT和sINR以上4 ( 3]。

颅内出血严重尸检中不被赏识的治疗组。然而,显微镜检查显示微观间质出血与快速公车提供动物治疗,但没有其他抗凝血剂(数字 1(一)- - - - - - 1 (c))。

组织学发现老鼠的大脑中brodifacoum处理。(一)血管充血,血管周围间质出血,前大脑,×100。(b) Subarachnoidal出血,大脑后,×100。(c)间质出血,小脑,×100。(d)控制鼠小脑,×100。

游离血红蛋白浓度测量的结果如图所示 2。治疗与快速公车提供导致自由血红蛋白显著增加大脑的所有三个隔间。另一个维生素K拮抗剂,华法林,导致显著增加游离血红蛋白浓度在大脑前。游离血红蛋白浓度在大脑后动物用华法林治疗增加,但它并没有达到统计上显著差异(图 2)。直接凝血酶抑制剂治疗dabigatran导致增加游离血红蛋白浓度在所有3大脑隔间,只在前,但在统计学上意义重大的大脑和小脑。肝素和因素Xa抑制剂rivaroxaban游离血红蛋白显著增加大脑中(图 2)。

游离血红蛋白浓度在老鼠的脑组织不同抗凝剂治疗。血红蛋白浓度测定游离血红蛋白毫克每克的脑组织。 ∗ p < 0.05 而控制。

 4所示。讨论

我们的工作是第一个描述不同脑自发出血与不同的抗凝治疗后类。之前的工作主要关注影响不同抗凝剂的实验(诱导)颅内出血。

抗凝治疗是一个拯救生命的治疗,它是广泛应用于临床实践。维生素K拮抗剂和DOAC都与颅内出血与高死亡率( 2]。数据关于机制的颅内出血是有争议的。还不清楚这些出血与过度抗凝或相关联的结果抗凝本身。它已被证明在住院,大多数患者warfarin-associated颅内出血INR的治疗范围。然而,更高的INR一直在与死亡率增加有关患者颅内出血( 8]。我们的研究结果支持这些临床观察。最显著增加大脑中的游离血红蛋白浓度与维生素K拮抗剂治疗的动物中看到。抗凝与维生素K缺乏严重时(如与快速公车提供,免费的增加血红蛋白在大脑中是更重要的,在所有的大脑隔间。另一方面,当抗凝与维生素K拮抗剂相似的临床实践(INR 4-5-fold增加),然后游离血红蛋白显著增加指出只有在大脑前,而在大脑和小脑后游离血红蛋白增加不显著(图 2)。事实上,它已经表明,warfarin-associated颅内出血的病人主要是intraparenchymal [ 1]。有趣的是,直接凝血酶抑制剂dabigatran导致显著增加游离血红蛋白不仅在大脑前,但在小脑。另一个DOAC因素Xa抑制剂,没有增加游离血红蛋白的浓度在脑间,但有一个趋势增加免费的血红蛋白在小脑(图 2)。

我们的数据是由以前的观测。它已经表明,华法林显著增加了血脑屏障(BBB)通透性 9和溶栓后继发出血 10[]或collagenase-induced颅内出血 11]。有数据rivaroxaban不会增加出血后溶栓在实验小鼠缺血性中风( 9];然而,其他研究表明,rivaroxaban大幅增加颅内出血的血肿体积胶原酶诱导的小鼠( 12]。同一组治疗后报告了类似的结果的实验动物dabigatran [ 13]。另一方面,dabigatran没有显著增加出血性转换瞬态小鼠局灶性脑缺血后( 14]或继发性出血的风险在各种啮齿动物模型的缺血和再灌注溶栓后( 10[]或collagenase-induced颅内出血 11]。我们和其他报道,华法林和dabigatran诱导肾脏肾小球出血[ 4, 15]。

我们的研究的局限性包括单个supratherapeutic剂量的抗凝血剂和困难比较抗凝的程度。我们使用老鼠LD50剂量之前描述;这些剂量明显高于临床设置中使用的人类;因此,更详细的研究将包括这些和其他抗凝血剂剂量反应的影响是必要的。

总之,我们的实验数据证实最近的临床试验结果,DOAC减少,但并不能完全预防颅内出血与抗凝治疗有关。DOAC、因素Xa抑制剂rivaroxaban大脑中导致较低的游离血红蛋白浓度相比直接凝血酶抑制剂dabigatran。

 的利益冲突

作者宣称没有利益冲突。

 确认

本研究支持,在某种程度上,由美国国立卫生研究院拨款U01 NS083457 (Sergey诉布罗斯基,道格拉斯·l·范斯坦和以色列Rubinstein)和创业基金的病理学、美国俄亥俄州立大学(Sergey诉Brodsky)。

 Appelboam R。 托马斯。 e . O。 华法林和颅内出血 血液检查 2009年 23 1 1 9 2 - s2.0 - 58349113624 10.1016 / j.blre.2008.05.001 米勒 c·S。 大人物 s M。 Shimony 一个。 Filion k B。 艾森伯格 m·J。 荟萃分析的有效性和安全性的新口服抗凝血剂(dabigatran、rivaroxaban apixaban)和心房纤颤患者华法林 美国心脏病学杂志》上 2012年 110年 3 453年 460年 10.1016 / j.amjcard.2012.03.049 2 - s2.0 - 84863981277 制品 k . M。 范斯坦 d . L。 鲁宾斯坦 我。 温伯格 G。 Rovin b . H。 赫伯特 l 市政 N。 Cianciolo r·E。 Satoskar 答:一个。 纳达斯蒂 T。 布罗斯基 s V。 Brodifacoum诱发早期血红蛋白尿和血尿晚间在老鼠:小说中毒的快速生物标志物 美国肾脏病学会杂志》 2015年 41 4 - 5 392年 399年 2 - s2.0 - 84933556374 10.1159 / 000433568 Ozcan 一个。 制品 K。 Calomeni E。 纳达斯蒂 T。 《福布斯》 R。 Satoskar 答:一个。 纳达斯蒂 G。 Rovin b . H。 赫伯特 l。 布罗斯基 s V。 5/6肾切除术作为验证模仿人类warfarin-related肾病大鼠模型 美国肾脏病学会杂志》 2012年 35 4 356年 364年 2 - s2.0 - 84859121836 10.1159 / 000337918 布卢姆 J。 Carreiro 年代。 黑客 j·B。 静脉注射脂肪乳剂不反向dabigatran-induced抗凝在老鼠模型中 学术急诊医学 2013年 20. 10 1022年 1025年 2 - s2.0 - 84886935158 10.1111 / acem.12225 穆克 W。 Stampfuss J。 Kubitza D。 Becka M。 rivaroxaban临床药代动力学和药效学的状况 临床药物动力学 2014年 53 1 1 16 10.1007 / s40262 - 013 - 0100 - 7 制品 K。 布罗斯基 P。 Satoskar 答:一个。 纳达斯蒂 T。 纳达斯蒂 G。 吴 H。 Rovin b . H。 Bhatt U。 冯Visger J。 赫伯特 l。 布罗斯基 s V。 Warfarin-related肾病肾元建模的减少和过度抗凝 美国肾脏病学会杂志》上 2011年 22 10 1856年 1862年 2 - s2.0 - 80053491983 10.1681 / ASN.2010101110 方 m . C。 去 答:S。 常 Y。 Borowsky l . H。 Pomernacki n K。 Udaltsova N。 歌手 d E。 术后死亡率仅次于缺血性中风和颅内出血患者的心房纤颤,抗凝血剂 中风 2012年 43 7 1795年 1799年 2 - s2.0 - 84863305471 10.1161 / STROKEAHA.111.630731 Ploen R。 太阳 l 周 W。 Heitmeier 年代。 该研究 M。 Jenetzky E。 Veltkamp R。 溶栓后Rivaroxaban不增加出血实验性缺血性中风 脑血流量和新陈代谢杂志》上 2014年 34 3 495年 501年 2 - s2.0 - 84896720180 10.1038 / jcbfm.2013.226 太阳 l 周 W。 Ploen R。 该研究 M。 Veltkamp R。 抗凝溶栓后颅内出血dabigatran不会增加二次性脑缺血实验 血栓和止血法 2013年 110年 1 153年 161年 2 - s2.0 - 84879621987 10.1160 / th12 - 12 - 0942 劳尔 一个。 Cianchetti f。 范·科特 e . M。 Schlunk F。 舒尔茨 E。 Pfeilschifter W。 斯坦梅茨 H。 谢弗 c . B。 罗 e . H。 Foerch C。 与口服抗凝直接凝血酶抑制剂dabigatran不扩大在实验性脑出血血肿体积 循环 2011年 124年 15 1654年 1662年 2 - s2.0 - 80053978431 10.1161 / CIRCULATIONAHA.111.035972 周 W。 该研究 M。 Nawroth P。 Butehorn U。 Perzborn E。 Heitmeier 年代。 Veltkamp R。 止血治疗实验性脑出血与rivaroxaban有关 中风 2013年 44 3 771年 778年 2 - s2.0 - 84876288671 10.1161 / STROKEAHA.112.675231 周 W。 Schwarting 年代。 Illanes 年代。 Liesz 一个。 Middlehoff M。 该研究 M。 Bendszus M。 海兰德 年代。 范Ryn J。 Veltkamp R。 止血治疗实验性脑出血与直接凝血酶抑制剂dabigatran有关 中风 2011年 42 3594年 3599年 10.1161 / STROKEAHA.111.624650 Bohmann F。 Mirceska 一个。 Pfeilschifter J。 Lindhoff-Last E。 斯坦梅茨 H。 Foerch C。 Pfeilschifter W。 没有影响力的dabigatran抗凝血性转换在缺血性中风的实验模型 《公共科学图书馆•综合》 2012年 7 7 2 - s2.0 - 84864213148 10.1371 / journal.pone.0040804 e40804 布罗斯基 s V。 Satoskar 一个。 陈 J。 纳达斯蒂 G。 Eagen j·W。 Hamirani M。 赫伯特 l Calomeni E。 纳达斯蒂 T。 急性肾损伤在华法林治疗伴有阻塞性管状红细胞投:报告9例 《美国肾脏疾病 2009年 54 6 1121年 1126年 10.1053 / j.ajkd.2009.04.024 2 - s2.0 - 70449658993