SCI 干细胞国际 1687 - 9678 1687 - 966 x Hindawi 10.1155 / 2020/5684250 5684250 研究文章 肺基因的筛选和功能通路分析与抑制过敏性气道炎症的脂肪干细胞细胞外囊泡 Sung-Dong 1 Shin Ae 2 Yong-Wan 3 在野阵营的太阳 2 https://orcid.org/0000 - 0002 - 4381 - 6996 Kyu-Sup 1 https://orcid.org/0000 - 0002 - 3055 - 8713 卢武铉 Hwan-Jung 4 卡尔韦, 1 耳鼻喉科学和生物医学研究所 釜山国立大学医院 釜山 韩国 pnuh.or.kr 2 寄生虫学和热带医学院 釜山国立大学医学院 Yangsan 韩国 pusan.ac.kr 3 耳鼻喉科学学系 Inje大学云台沉重的医院 韩国 paik.ac.kr 4 耳鼻喉科学和生物医学科学和技术研究所收敛 釜山国立大学Yangsan医院 Yangsan 韩国 pnuyh.or.kr 2020年 27 6 2020年 2020年 5 2 2020年 19 5 2020年 2 6 2020年 27 6 2020年 2020年 版权©2020 Sung-Dong金等。 这是一个开放的文章在知识共享归属许可下发布的,它允许无限制的使用,分布和繁殖在任何媒介,提供最初的工作是正确的引用。

背景。虽然间充质干细胞(MSC)派生细胞外囊泡(EVs) MSC一样有效的抑制过敏性气道炎症,很少有研究探讨了MSC-derived电动汽车在过敏性气道疾病的分子机制。本研究的目的是评估(度)在肺相关的差异表达基因的抑制过敏性气道炎症使用脂肪干细胞——(ASC)派生的电动汽车。 方法。C57BL / 6小鼠致敏卵白蛋白(OVA)腹腔内注射和挑战与卵子鼻内。评估ASC-derived电动汽车在过敏性气道炎症的影响,10 μg / 50 μL EVs的鼻内接种前卵子的挑战。肺组织被移除和度在三组两两比较。度概要文件和分层聚类识别的基因进行了分析评估基因表达的变化。确定执行实时PCR基因表达水平的调节治疗后ASC-derived电动汽车。富集分析基于基因本体论(去)数据库和京都基因和基因组的百科全书(KEGG)通路分析也进行进一步识别度的功能。 结果。表达paraoxonase 1 (PON1),大脑和x染色体相关2 (Bex2)、胰岛素样生长因子结合蛋白6 (Igfbp6)、甲酰肽受体1 (Fpr1), secretoglobin家庭1 c成员1 (Scgb1c1)在哮喘小鼠治疗后显著增加ASC-derived电动汽车。浓缩和KEGG路径分析表明,这些基因与免疫系统密切相关流程和规定,细胞过程,单个有机体过程和生物的监管。 结论。这些结果表明,度确定在本研究中(PON1, Bex2, Igfbp6 Fpr1, Scgb1c1)可能参与过敏性气道炎症的改善ASC-derived电动汽车。 韩国国家研究基金会 nrf - 2017 r1a2a2a05069529 1。介绍<gydF4y2Ba/title> <p>哮喘是一种慢性气道炎症性疾病涉及多个细胞组件;它的关键特性(AHR),气道高反应持续的气道炎症和气道重塑(<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B1"> 1<gydF4y2Ba/xref>]。过度激活的Th2细胞抑制不足调节性T细胞亚群)中扮演一个重要角色在过敏性气道炎症的发病机制<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B2"> 2<gydF4y2Ba/xref>- - - - - -<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B4"> 4<gydF4y2Ba/xref>]。最近,据报道,气道重塑是重要的病理通路的哮喘气道高反应性的特点是不可逆和气道阻塞(<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B5"> 5<gydF4y2Ba/xref>]。<gydF4y2Ba/p> <p>间充质干细胞(msc)调节免疫反应和炎症(<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B6"> 6<gydF4y2Ba/xref>]。多项研究表明,msc,包括那些来自脂肪组织(对asc),可以改善过敏性哮喘小鼠气道炎症(<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B7"> 7<gydF4y2Ba/xref>- - - - - -<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B9"> 9<gydF4y2Ba/xref>]。虽然msc在过敏性气道疾病的免疫抑制机制并不完全清楚,它已被证实Treg upregulation紧密相关,增加溶性因素,如前列腺素E2 (PGE2)、转化生长因子-<gydF4y2Baitalic> β<gydF4y2Ba/italic>(TGF -<gydF4y2Baitalic> β<gydF4y2Ba/italic>)和白介素- 10 (IL) (<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B10"> 10<gydF4y2Ba/xref>- - - - - -<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B13"> 13<gydF4y2Ba/xref>]。msc也被证明调制识别调节细胞免疫反应的抗原递呈细胞,包括树突细胞,巨噬细胞,B细胞(<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B14"> 14<gydF4y2Ba/xref>,<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B15"> 15<gydF4y2Ba/xref>]。<gydF4y2Ba/p> <p>最近的一些研究表明,T细胞的激活和增殖抑制的MSC文化上层清液(MSC吃晚饭)<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B16"> 16<gydF4y2Ba/xref>,<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B17"> 17<gydF4y2Ba/xref>]。越来越多的证据表明,政府的MSC一口或细胞外囊泡(EVs)发布的MSC是一样有效的MSC在抑制过敏性气道炎症<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B18"> 18<gydF4y2Ba/xref>- - - - - -<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B20"> 20.<gydF4y2Ba/xref>]。MSC-derived EVs被发现上调il - 10和TGF -<gydF4y2Baitalic> β<gydF4y2Ba/italic>1从哮喘病人外周血单核细胞,从而促进扩散和亚群的免疫抑制能力<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B21"> 21<gydF4y2Ba/xref>]。此外,ASC-derived EVs Th2-mediated改善炎症引起的<gydF4y2Baitalic> 曲霉属真菌<gydF4y2Ba/italic>蛋白酶通过激活树突状细胞抗原和诱导M2巨噬细胞极化<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B22"> 22<gydF4y2Ba/xref>]。尽管最近的一项研究表明,MSC-derived EVs预防组2先天淋巴cell-dominant过敏性气道炎症通过mir - 146 - 5 - p (<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B23"> 23<gydF4y2Ba/xref>],MSC-derived电动汽车在过敏性气道炎症的分子机制仍有待阐明,和基因参与这些机制尚未确定。<gydF4y2Ba/p> <p>在这项研究中,我们通过对asc和孤立EVs分泌进行微阵列基因表达分析哮喘小鼠接受ASC-derived电动汽车。我们还研究了差异表达基因(度)与过敏性气道炎症的抑制ASC-derived电动汽车。<gydF4y2Ba/p> </sec> <sec id="sec2"> <title>2。材料和方法<gydF4y2Ba/title> <sec id="sec2.1"> <title>2.1。动物<gydF4y2Ba/title> <p>六个女C57BL / 6小鼠从Samtako有限公司购买(乌山,韩国)和饲养动物在实验设施没有特定的病原体。动物研究协议是机构批准的动物保健和使用委员会釜山国立大学医学院(批准号pnu - 2016 - 1109)。<gydF4y2Ba/p> </sec> <sec id="sec2.2"> <title>2.2。电动汽车提取和描述<gydF4y2Ba/title> <p>在我们之前的研究(<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B11"> 11<gydF4y2Ba/xref>,<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B24"> 24<gydF4y2Ba/xref>,<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B25"> 25<gydF4y2Ba/xref>),脂肪组织获得了C57BL / 6小鼠腹部脂肪。对asc是培养在37°C公司为5%<gydF4y2Basub>2<gydF4y2Ba/sub>在<gydF4y2Baitalic> α<gydF4y2Ba/italic>修改鹰的介质(<gydF4y2Baitalic> α<gydF4y2Ba/italic>mem)含10%胎牛血清的边后卫,直到<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M1"> <mml:mn> 1<gydF4y2Ba/mml:mn> <mml:mo> ×<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:msup> <mml:mrow> <mml:mn> 10<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mn> 6<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:mrow> </mml:msup> </mml:math> </inline-formula>细胞/厘米<gydF4y2Basup>2<gydF4y2Ba/sup>被获得。电动汽车被隔绝ASC一口如前所述[<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B26"> 26<gydF4y2Ba/xref>]。上层清液过滤是0.45<gydF4y2Baitalic> μ<gydF4y2Ba/italic>真空过滤机。滤液集中使用QuixStand(英国)通用电气医疗集团,小都,然后透过0.22<gydF4y2Baitalic> μ<gydF4y2Ba/italic>m瓶盖过滤器(Sigma-Aldrich、圣路易斯、钼)。滤液是颗粒状转子超速离心法在45 Ti(贝克曼库尔特,富勒顿,CA) 100000×<gydF4y2Baitalic> g<gydF4y2Ba/italic>在4°C 2 h。最后一个球被resuspended磷酸盐(PBS)和存储在-80°C。我们把电动汽车在PBS 300 -网铜网格,用2%醋酸双氧铀染色。图像获得使用jem - 1011电子显微镜(JEOL、东京、日本)运营的加速电压100 kV (<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B27"> 27<gydF4y2Ba/xref>,<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B28"> 28<gydF4y2Ba/xref>]。电动汽车标记包括研究和分析了CD40与主要抗体,免疫印迹anti-CD81 (Abcam 1: 1000年,剑桥,MA),和anti-CD40(1: 1000年,Abcam)如前所述[<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B22"> 22<gydF4y2Ba/xref>]。<gydF4y2Ba/p> </sec> <sec id="sec2.3"> <title>2.3。过敏性气道炎症的小鼠模型<gydF4y2Ba/title> <p>过敏性气道炎症的小鼠模型诱导与少量修改之前报道(<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B24"> 24<gydF4y2Ba/xref>,<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B25"> 25<gydF4y2Ba/xref>]。75年的老鼠被腹腔内注射致敏<gydF4y2Baitalic> μ<gydF4y2Ba/italic>克的卵子(Sigma-Aldrich,圣路易斯,密苏里州,美国)2毫克的氢氧化铝(Sigma-Aldrich)在200年<gydF4y2Baitalic> μ<gydF4y2Ba/italic>L PBS的天0 1 7和8。在14、15天、21和22日50的老鼠挑战鼻内<gydF4y2Baitalic> μ<gydF4y2Ba/italic>50 g的卵<gydF4y2Baitalic> μ<gydF4y2Ba/italic>PBS的L。老鼠们牺牲了24天(图<xgydF4y2Baref rid="fig1a" ref-type="fig"> 1(一)<gydF4y2Ba/xref>)。<gydF4y2Ba/p> <fig-group id="fig1"> <label>图1<gydF4y2Ba/label> <p>本研究的实验协议。(a)小鼠致敏天0,1,7和8的腹腔内注射卵白蛋白(OVA)和鼻内挑战天14日,15日,21日和22日卵子。脂肪干细胞(ASC)派生细胞外囊泡(EVs) (10<gydF4y2Baitalic> μ<gydF4y2Ba/italic>g / 50<gydF4y2Baitalic> μ<gydF4y2Ba/italic>L)被注入经天12日13日19和20。(b)根据致敏小鼠被分为三组,挑战,和治疗。<gydF4y2Ba/p> <fig id="fig1a"> <label>(一)<gydF4y2Ba/label> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/sci/2020/5684250.fig.001a"></graphic> </fig> <fig id="fig1b"> <label>(b)<gydF4y2Ba/label> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/sci/2020/5684250.fig.001b"></graphic> </fig> </fig-group> </sec> <sec id="sec2.4"> <title>2.4。鼻内ASC-Derived电动汽车<gydF4y2Ba/title> <p>评估ASC-derived电动汽车的影响,我们注入10<gydF4y2Baitalic> μ<gydF4y2Ba/italic>g / 50<gydF4y2Baitalic> μ<gydF4y2Ba/italic>L EVs鼻内的12天,13日、19日和20。小鼠被分为三组,每组5老鼠:(a)诈骗集团是敏化,进行预处理,与PBS和挑战;(b)卵巢组与卵子敏化,用PBS预处理,然后用卵子的挑战;和(c) EV组与卵子敏化,使用ASC-derived电动汽车,然后挑战与卵巢(图<xgydF4y2Baref rid="fig1b" ref-type="fig"> 1 (b)<gydF4y2Ba/xref>)。<gydF4y2Ba/p> </sec> <sec id="sec2.5"> <title>2.5。微阵列分析肺部组织<gydF4y2Ba/title> <p>肺组织提取和度在三组两两比较。调查ASC-derived EVs治疗后基因表达的变化,微阵列分析由Macrogen Inc .(首尔,韩国),一个公司,专门从事这项技术。了Affymetrix Whole-transcript表达阵列过程使用整个GeneChip成绩单+执行试剂盒从肺组织中提取总RNA根据制造商的协议。然后,互补脱氧核糖核酸合成作为制造商使用GeneChip所描述的整体成绩单(WT)放大工具包和cDNA支离破碎和biotin-labeled末端转移酶(TdT)使用GeneChip WT终端标签设备。大约5.5<gydF4y2Baitalic> μ<gydF4y2Ba/italic>g标记DNA的目标是杂化在45°C 16 h Affymetrix GeneChip鼠标第2.0数组。洗后的杂化数组和染色GeneChip流体站450年,我们使用gc扫描目标3000扫描仪(Affymetrix)和计算信号值使用Affymetrix GeneChip命令控制台软件。<gydF4y2Ba/p> </sec> <sec id="sec2.6"> <title>2.6。基因表达分析,定量实时聚合酶链反应(存在)<gydF4y2Ba/title> <p>肺组织的总RNA提取使用1毫升QIAzol(试剂盒,瓦伦西亚,CA)制造商的协议。我们转录2<gydF4y2Baitalic> μ<gydF4y2Ba/italic>g使用Moloney小鼠白血病病毒的RNA逆转录酶(Promega,麦迪逊,WI)。Paraoxonase 1 (PON1)(向前,5<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M2"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ′<gydF4y2Ba/mml:mo> </mml:mrow> </mml:msup> </mml:math> </inline-formula>-GATTGGCACTGTGTTCCAC-3<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M3"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ′<gydF4y2Ba/mml:mo> </mml:mrow> </mml:msup> </mml:math> </inline-formula>;相反,5<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M4"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ′<gydF4y2Ba/mml:mo> </mml:mrow> </mml:msup> </mml:math> </inline-formula>-ATCACTGTGGTAGGCACCTT-3<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M5"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ′<gydF4y2Ba/mml:mo> </mml:mrow> </mml:msup> </mml:math> </inline-formula>),大脑x 2 (Bex2)(向前,5<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M6"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ′<gydF4y2Ba/mml:mo> </mml:mrow> </mml:msup> </mml:math> </inline-formula>-GGATGTTAAAAGGGACTCCCGGTGA-3<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M7"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ′<gydF4y2Ba/mml:mo> </mml:mrow> </mml:msup> </mml:math> </inline-formula>;相反,5<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M8"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ′<gydF4y2Ba/mml:mo> </mml:mrow> </mml:msup> </mml:math> </inline-formula>-CGACGGCGGTTCTGACGCCACAACG-3<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M9"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ′<gydF4y2Ba/mml:mo> </mml:mrow> </mml:msup> </mml:math> </inline-formula>)、胰岛素样生长因子结合蛋白6 (Igfbp6)(向前,5<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M10"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ′<gydF4y2Ba/mml:mo> </mml:mrow> </mml:msup> </mml:math> </inline-formula>-GCAGCAGCTCCAGACTGA-3<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M11"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ′<gydF4y2Ba/mml:mo> </mml:mrow> </mml:msup> </mml:math> </inline-formula>;相反,5<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M12"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ′<gydF4y2Ba/mml:mo> </mml:mrow> </mml:msup> </mml:math> </inline-formula>-CATTGCTTCACATACAGCTCAA-3<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M13"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ′<gydF4y2Ba/mml:mo> </mml:mrow> </mml:msup> </mml:math> </inline-formula>),甲酰肽受体1 (Fpr1)(向前,5<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M14"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ′<gydF4y2Ba/mml:mo> </mml:mrow> </mml:msup> </mml:math> </inline-formula>-CATGTCTCTCCTCATGAACAAG-3<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M15"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ′<gydF4y2Ba/mml:mo> </mml:mrow> </mml:msup> </mml:math> </inline-formula>;相反,5<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M16"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ′<gydF4y2Ba/mml:mo> </mml:mrow> </mml:msup> </mml:math> </inline-formula>-ATGAGAAGACATCCAGAACGA-3<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M17"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ′<gydF4y2Ba/mml:mo> </mml:mrow> </mml:msup> </mml:math> </inline-formula>),secretoglobin 1 c家庭成员1 (Scgb1c1)(向前,5<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M18"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ′<gydF4y2Ba/mml:mo> </mml:mrow> </mml:msup> </mml:math> </inline-formula>-GGAATTCCTGCAAACACTCCT-3<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M19"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ′<gydF4y2Ba/mml:mo> </mml:mrow> </mml:msup> </mml:math> </inline-formula>;相反,5<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M20"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ′<gydF4y2Ba/mml:mo> </mml:mrow> </mml:msup> </mml:math> </inline-formula>-GGGCTGCTTATGTGTCCTCT-3<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M21"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ′<gydF4y2Ba/mml:mo> </mml:mrow> </mml:msup> </mml:math> </inline-formula>)RNA水平量化相对于管家基因3 -磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)(向前,5<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M22"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ′<gydF4y2Ba/mml:mo> </mml:mrow> </mml:msup> </mml:math> </inline-formula>-TACCCCCAATGTGTCCGTC-3<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M23"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ′<gydF4y2Ba/mml:mo> </mml:mrow> </mml:msup> </mml:math> </inline-formula>;相反,5<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M24"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ′<gydF4y2Ba/mml:mo> </mml:mrow> </mml:msup> </mml:math> </inline-formula>-AAGAGTGGGAGTTGCTGTTGAAG-3<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M25"> <mml:msup> <mml:mrow></mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> ′<gydF4y2Ba/mml:mo> </mml:mrow> </mml:msup> </mml:math> </inline-formula>),使用LightCycler 96实时PCR系统(罗氏、巴塞尔、瑞士)后,制造商的指示。我们使用了比较Ct (<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M26"> <mml:msup> <mml:mrow> <mml:mn> 2<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mo> - - - - - -<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mi> Δ<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mi> Δ<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mtext> Ct<gydF4y2Ba/mml:mtext> </mml:mrow> </mml:msup> </mml:math> </inline-formula>)方法计算相对基因表达水平。<gydF4y2Ba/p> </sec> <sec id="sec2.7"> <title>2.7。原始数据准备<gydF4y2Ba/title> <p>我们使用了Affymetrix GeneChip命令控制台软件提取原始数据,按照Affymetrix数据提取方案。我们总结和标准化的数据使用健壮multiarray平均(RMA)方法与Affymetrix表达式控制台软件。能够结果导出RMA一起分析,并进一步研究通过度分析。<gydF4y2Ba/p> </sec> <sec id="sec2.8"> <title>2.8。统计分析<gydF4y2Ba/title> <p>统计学意义的表达数据评估的褶皱变化。评估相似,我们检查了链接和欧几里得距离每度的层次聚类分析的结果集。该基因本体论(去)和《京都议定书》百科全书的基因和基因组(KEGG)通路数据库(<gydF4y2Baext-link ext-link-type="uri" xlink:href="http://www.geneontology.org/"> http://www.geneontology.org/<gydF4y2Ba/ext-link>)被用来执行基因富集和功能注释分析重要的调查。所有的数据分析和度可视化进行了使用R 3.1.2软件(R核心团队)。<gydF4y2Ba/p> </sec> </sec> <sec id="sec3"> <title>3所示。结果<gydF4y2Ba/title> <sec id="sec3.1"> <title>3.1。表征ASC-Derived电动汽车<gydF4y2Ba/title> <p>透射电子显微镜(TEM)表明,ASC-derived EVs脂质影响,是球形的形状。免疫印迹显示ASC-derived电动汽车的研究外来体标记和CD40微泡标记(数据未显示)。<gydF4y2Ba/p> </sec> <sec id="sec3.2"> <title>3.2。数据处理和识别度<gydF4y2Ba/title> <p>正常化后,我们分析了度概要文件的错误发现率(罗斯福)截止<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M27"> <mml:mtext> 罗斯福<gydF4y2Ba/mml:mtext> <mml:mo> <<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 0.05<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>和褶皱变化的否决<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M28"> <mml:mo> ∣<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi mathvariant="normal"> 日志<gydF4y2Ba/mml:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mtext> 足球俱乐部<gydF4y2Ba/mml:mtext> </mml:mrow> </mml:msub> <mml:mo> ∣<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mo> ≥<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 1。5<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>和<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M29"> <mml:mo> ∣<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi mathvariant="normal"> 日志<gydF4y2Ba/mml:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mtext> 足球俱乐部<gydF4y2Ba/mml:mtext> </mml:mrow> </mml:msub> <mml:mo> ∣<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mo> ≥<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 2。0</mml:mn> </mml:math> </inline-formula>。我们鉴定了868度<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M30"> <mml:mo> ∣<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi mathvariant="normal"> 日志<gydF4y2Ba/mml:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mtext> 足球俱乐部<gydF4y2Ba/mml:mtext> </mml:mrow> </mml:msub> <mml:mo> ∣<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mo> ≥<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 1。5<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>电动车和卵巢组织,其中313年和555年下降和调节,分别。我们鉴定了249度<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M31"> <mml:mo> ∣<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi mathvariant="normal"> 日志<gydF4y2Ba/mml:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mtext> 足球俱乐部<gydF4y2Ba/mml:mtext> </mml:mrow> </mml:msub> <mml:mo> ∣<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mo> ≥<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 2。0</mml:mn> </mml:math> </inline-formula>电动车和卵巢组织,其中228和21基因和调节,分别(图<xgydF4y2Baref rid="fig2" ref-type="fig"> 2<gydF4y2Ba/xref>)。<gydF4y2Ba/p> <fig id="fig2"> <label>图2<gydF4y2Ba/label> <p>酒吧的重要的探测器。我们确定了868年和249年(度)和褶皱的差异表达基因的变化<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M32"> <mml:mo> ∣<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi mathvariant="normal"> 日志<gydF4y2Ba/mml:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mtext> 足球俱乐部<gydF4y2Ba/mml:mtext> </mml:mrow> </mml:msub> <mml:mo> ∣<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mo> ≥<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 1。5<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>和<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M33"> <mml:mo> ∣<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi mathvariant="normal"> 日志<gydF4y2Ba/mml:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mtext> 足球俱乐部<gydF4y2Ba/mml:mtext> </mml:mrow> </mml:msub> <mml:mo> ∣<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mo> ≥<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 2。0</mml:mn> </mml:math> </inline-formula>电动汽车和卵巢之间的组,分别。<gydF4y2Ba/p> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/sci/2020/5684250.fig.002"></graphic> </fig> </sec> <sec id="sec3.3"> <title>3.3。度的分层聚类分析<gydF4y2Ba/title> <p>层次聚类的识别度如图<xgydF4y2Baref rid="fig3" ref-type="fig"> 3<gydF4y2Ba/xref>。树视图和集群分析使用欧氏集团和显示基因的方法<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M34"> <mml:mo> ∣<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi mathvariant="normal"> 日志<gydF4y2Ba/mml:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mtext> 足球俱乐部<gydF4y2Ba/mml:mtext> </mml:mrow> </mml:msub> <mml:mo> ∣<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mo> ≥<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 1。5<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>表达的变化。ASC-derived电动汽车中基因表达与转录水平在卵巢组织。调节和表达下调的基因很容易区分两组。Eosinophil-associated核糖核酸酶家族成员6 (Ear6)趋化因子配体5、8和12 (Ccl5, Ccl8和Ccl12)、肿瘤坏死因子配体超家族成员8 (Tnfsf8) interleukin-5受体α(IL5Ra)和肿瘤坏死因子受体超家族成员13 b (Tnfrsf13b)调节卵巢组CON组相比,尽管这些基因表达下调ASC-derived电动汽车(表<xgydF4y2Baref rid="tab1" ref-type="table"> 1<gydF4y2Ba/xref>)。相比之下,PON1 Bex2、Igfbp6 Fpr1, OVA-induced哮喘小鼠和Scgb1c1表达下调,但调节治疗后ASC-derived电动汽车(表<xgydF4y2Baref rid="tab2" ref-type="table"> 2<gydF4y2Ba/xref>)。<gydF4y2Ba/p> <fig id="fig3"> <label>图3<gydF4y2Ba/label> <p>层次聚类分析和热图图。绿色和红色阴影指示和调节基因,分别。<gydF4y2Ba/p> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/sci/2020/5684250.fig.003"></graphic> </fig> <table-wrap id="tab1"> <label>表1<gydF4y2Ba/label> <p>基因表达下调后治疗ASC-derived电动汽车。<gydF4y2Ba/p> <table> <thead> <tr> <th align="left">基因<gydF4y2Ba/th> <th align="center">卵子/反对<gydF4y2Ba/th> <th align="center">电动汽车/反对<gydF4y2Ba/th> <th align="center">电动汽车/卵子<gydF4y2Ba/th> </tr> </thead> <tbody> <tr> <td align="left">Ear6<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1.838022<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1.149834<gydF4y2Ba/td> <td align="center">-1.598512<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="left">Ccl5<gydF4y2Ba/td> <td align="center">2.641300<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1.198238<gydF4y2Ba/td> <td align="center">-2.204320<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="left">Ccl6<gydF4y2Ba/td> <td align="center">29.061333<gydF4y2Ba/td> <td align="center">16.230038<gydF4y2Ba/td> <td align="center">-1.790589<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="left">Ccl12<gydF4y2Ba/td> <td align="center">5.776364<gydF4y2Ba/td> <td align="center">3.477515<gydF4y2Ba/td> <td align="center">-1.661061<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="left">Tnfsf8<gydF4y2Ba/td> <td align="center">2.617759<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1.697634<gydF4y2Ba/td> <td align="center">-1.542005<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="left">IL5Ra<gydF4y2Ba/td> <td align="center">2.587367<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1.613224<gydF4y2Ba/td> <td align="center">-1.603849<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="left">Tnfrsf13b<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1.985461<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1.238539<gydF4y2Ba/td> <td align="center">-1.603067<gydF4y2Ba/td> </tr> </tbody> </table> <table-wrap-foot> <fn> <p>对asc:脂肪干细胞;三地:趋化因子配体;反对:控制;Ear6: eosinophil-associated核糖核酸酶家族成员6;电动汽车:细胞外囊泡;IL5Ra: interleukin-5受体α;卵:卵白蛋白;Tnfrsf13b:肿瘤坏死因子受体超家族成员13 b;8 Tnfsf8:肿瘤坏死因子配体超家族成员。<gydF4y2Ba/p> </fn> </table-wrap-foot> </table-wrap> <table-wrap id="tab2"> <label>表2<gydF4y2Ba/label> <p>基因调节治疗后ASC-derived电动汽车。<gydF4y2Ba/p> <table> <thead> <tr> <th align="left">基因<gydF4y2Ba/th> <th align="center">卵子/反对<gydF4y2Ba/th> <th align="center">电动汽车/反对<gydF4y2Ba/th> <th align="center">电动汽车/卵子<gydF4y2Ba/th> </tr> </thead> <tbody> <tr> <td align="left">PON1<gydF4y2Ba/td> <td align="center">-9.35267<gydF4y2Ba/td> <td align="center">-6.482819<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1.442686<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="left">Bex2<gydF4y2Ba/td> <td align="center">-3.798534<gydF4y2Ba/td> <td align="center">-2.489212<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1.525998<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="left">Igfbp6<gydF4y2Ba/td> <td align="center">-3.230484<gydF4y2Ba/td> <td align="center">-2.120048<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1.523779<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="left">Fpr1<gydF4y2Ba/td> <td align="center">-3.109904<gydF4y2Ba/td> <td align="center">-2.022899<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1.537350<gydF4y2Ba/td> </tr> <tr> <td align="left">Scgb1c1<gydF4y2Ba/td> <td align="center">-2.224596<gydF4y2Ba/td> <td align="center">-1.467501<gydF4y2Ba/td> <td align="center">1.515908<gydF4y2Ba/td> </tr> </tbody> </table> <table-wrap-foot> <fn> <p>对asc:脂肪干细胞;Bex2:大脑x 2;反对:控制;电动汽车:细胞外囊泡;Fpr1:甲酰肽受体1;Igfbp6:胰岛素样生长因子结合蛋白6;卵:卵白蛋白;PON1: paraoxonase 1;Scgb1c1: secretoglobin家庭1 c成员1。<gydF4y2Ba/p> </fn> </table-wrap-foot> </table-wrap> </sec> <sec id="sec3.4"> <title>3.4。PON1, Bex2、Igfbp6 Fpr1, Scgb1c1<gydF4y2Ba/title> <p>PON1和Scgb1c1的基因表达水平显著降低卵巢组相比CON组(<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M35"> <mml:mi> p<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> =<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 0.001<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>和<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M36"> <mml:mi> p<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> =<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 0.008<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>分别)。然而,治疗ASC-derived EVs PON1的表达明显增加,Bex2 Igfbp6, Scgb1c1哮喘小鼠(<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M37"> <mml:mi> p<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> =<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 0.001<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>,<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M38"> <mml:mi> p<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> =<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 0.003<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>,<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M39"> <mml:mi> p<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> =<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 0.022<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>,<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M40"> <mml:mi> p<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> <<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 0.001<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>分别)。尽管Frp1 mRNA水平增加EV组之间没有显著差异卵子和EV组(<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M41"> <mml:mi> p<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> =<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 0.057<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>)(图<xgydF4y2Baref rid="fig4" ref-type="fig"> 4<gydF4y2Ba/xref>)。<gydF4y2Ba/p> <fig id="fig4"> <label>图4<gydF4y2Ba/label> <p>PON1 ASC-derived电动汽车的影响,Bex2, Igfbp6 Fpr1, Scgb1c1基因表达。PON1和Scgb1c1基因表达显著减少卵巢组相比CON组。然而,电动汽车治疗PON1的表达明显增加,Bex2 Igfbp6, Scgb1c1哮喘小鼠。<gydF4y2Basup>__<gydF4y2Ba/sup> <inline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M42"> <mml:mi> p<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> =<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 0.001<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>;<gydF4y2Basup>‡<gydF4y2Ba/sup> <inline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M43"> <mml:mi> p<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> =<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 0.003<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>;<gydF4y2Basup>§<gydF4y2Ba/sup> <inline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M44"> <mml:mi> p<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> =<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 0.022<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>;<gydF4y2Basup>为<gydF4y2Ba/sup> <inline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M45"> <mml:mi> p<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> =<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 0.008<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>;<gydF4y2Basup>¶<gydF4y2Ba/sup> <inline-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M46"> <mml:mi> p<gydF4y2Ba/mml:mi> <mml:mo> <<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 0.001<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>。对asc:脂肪干细胞;Bex2:大脑x 2;反对:控制;电动汽车:细胞外囊泡;Fpr1:甲酰肽受体1;Igfbp6:胰岛素样生长因子结合蛋白6;卵:卵白蛋白;PON1: paraoxonase 1;Scgb1c1: secretoglobin家庭1 c成员1。<gydF4y2Ba/p> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/sci/2020/5684250.fig.004"></graphic> </fig> </sec> <sec id="sec3.5"> <title>3.5。功能类别浓缩度的分析<gydF4y2Ba/title> <p>去数据库被用来执行富集分析度审视自己与生物过程的关系,细胞组件和分子功能。十大最非常重要条款与截止的度有关<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M47"> <mml:mtext> 罗斯福<gydF4y2Ba/mml:mtext> <mml:mo> <<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 0.05<gydF4y2Ba/mml:mn> </mml:math> </inline-formula>为每个类别进行了综述。下降后,调节基因治疗ASC-derived EVs强烈与免疫系统流程及其相关规定(图<xgydF4y2Baref rid="fig5a" ref-type="fig"> 5(一个)<gydF4y2Ba/xref>组件和胞内细胞器(图),细胞内<xgydF4y2Baref rid="fig5b" ref-type="fig"> 5 (b)<gydF4y2Ba/xref>),催化活性和离子绑定(图<xgydF4y2Baref rid="fig5c" ref-type="fig"> 5 (c)<gydF4y2Ba/xref>)。<gydF4y2Ba/p> <fig-group id="fig5"> <label>图5<gydF4y2Ba/label> <p>功能类别浓缩度的分析。的<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M48"> <mml:mi> y<gydF4y2Ba/mml:mi> </mml:math> </inline-formula>设在显示显著富集基因本体论(去),和<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M49"> <mml:mi> x<gydF4y2Ba/mml:mi> </mml:math> </inline-formula>设在显示了数项。去分析包括三类:(一)生物过程,细胞组件(b)和(c)分子功能。<gydF4y2Ba/p> <fig id="fig5a"> <label>(一)<gydF4y2Ba/label> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/sci/2020/5684250.fig.005a"></graphic> </fig> <fig id="fig5b"> <label>(b)<gydF4y2Ba/label> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/sci/2020/5684250.fig.005b"></graphic> </fig> <fig id="fig5c"> <label>(c)<gydF4y2Ba/label> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/sci/2020/5684250.fig.005c"></graphic> </fig> </fig-group> <p>——和表达下调基因与每一项分别进行了分析。度,表达下调后治疗ASC-derived电动汽车参与全细胞和within-cell组件(图<xgydF4y2Baref rid="fig6a" ref-type="fig"> 6(一)<gydF4y2Ba/xref>)。相比之下,基因治疗后不同调节ASC-derived EVs与细胞和有机体流程有很大的关联,以及生物调节(图<xgydF4y2Baref rid="fig6b" ref-type="fig"> 6 (b)<gydF4y2Ba/xref>)。<gydF4y2Ba/p> <fig-group id="fig6"> <label>图6<gydF4y2Ba/label> <p>气泡图的基因本体术语关联。泡沫大小显示的数量(a)或(b)使之抑制调节基因对应的注释。<gydF4y2Ba/p> <fig id="fig6a"> <label>(一)<gydF4y2Ba/label> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/sci/2020/5684250.fig.006a"></graphic> </fig> <fig id="fig6b"> <label>(b)<gydF4y2Ba/label> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/sci/2020/5684250.fig.006b"></graphic> </fig> </fig-group> </sec> <sec id="sec3.6"> <title>3.6。KEGG途径分析<gydF4y2Ba/title> <p>基于KEGG通路富集分析显示治疗后高度显著度ASC-derived电动汽车与环境相关信息处理,有机系统,和人类疾病(图<xgydF4y2Baref rid="fig7" ref-type="fig"> 7<gydF4y2Ba/xref>)。<gydF4y2Ba/p> <fig id="fig7"> <label>图7<gydF4y2Ba/label> <p>富集分析基于基因和基因组的京都百科全书(KEGG)通路识别显著差异表达的基因。度环境信息处理有很大的关联,有机系统,和人类的疾病。PON1的表达、Bex2 Igfbp6, Scgb1c1 ASC-derived治疗后显著增加电动汽车在哮喘小鼠。基因本体论分析表明,这些调节基因主要参与免疫系统流程及其调控,细胞和有机体的过程,和生物的监管。这些改变的基因可能参与过敏性气道炎症的改善治疗ASC-derived电动汽车。<gydF4y2Ba/p> <graphic xlink:href="//www.newsama.com/downloads/journals/sci/2020/5684250.fig.007"></graphic> </fig> </sec> </sec> <sec id="sec4"> <title>4所示。讨论<gydF4y2Ba/title> <p>msc已报告有前途的候选人为治疗过敏性气道疾病(<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B7"> 7<gydF4y2Ba/xref>- - - - - -<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B13"> 13<gydF4y2Ba/xref>]。然而,msc有几个缺点包括免疫排斥,异倍性的风险,难以处理,和致瘤性。以前的研究已经表明ASC-derived secretome-containing电动车,即使没有对asc,改善过敏性气道炎症通过Th2细胞因子生产的抑制和诱导Treg扩张(<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B19"> 19<gydF4y2Ba/xref>,<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B22"> 22<gydF4y2Ba/xref>]。此外,ASC-derived EVs被证实能够减少静态肺倒电容和胶原纤维沉积在实验性过敏性哮喘肺实质和航空公司(<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B29"> 29日<gydF4y2Ba/xref>]。EVs施加的影响等内容提供蛋白质,mrna, microrna受体细胞(<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B30"> 30.<gydF4y2Ba/xref>]。最近的研究报告说,线粒体msc、转让的组件可以在电动汽车,可以有效地缓解过敏性气道炎症(<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B31"> 31日<gydF4y2Ba/xref>,<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B32"> 32<gydF4y2Ba/xref>]。MSC-derived电动汽车可以减少潜在的安全风险管理与干细胞治疗相关,表明MSC-derived EVs可能是一个有前途的替代细胞治疗过敏性气道疾病。然而,主要的肺基因负责MSC-derived EVs过敏性气道疾病的免疫调节效应还没有被很好地记录下来了。<gydF4y2Ba/p> <p>分子和遗传研究需要阐明潜在的免疫抑制机制MSC-derived EVs Th2-mediated过敏性气道炎症。DNA微阵列杂交技术被广泛应用于分子生物学研究[<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B33"> 33<gydF4y2Ba/xref>]。DNA微阵列是由不同的DNA探针固定在一个坚实的支持组织,形成一系列的microspots [<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B33"> 33<gydF4y2Ba/xref>]。当一个DNA样本结合固定化DNA探针彻底互补序列结合,检测是实现通过阅读标记标记与目标DNA (<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B33"> 33<gydF4y2Ba/xref>]。DNA微阵列是一个有用的工具的快速、经济、和可伸缩的候选人的识别度与表型相关(<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B34"> 34<gydF4y2Ba/xref>]。度的调查是必不可少的理解和解释的免疫调节机制MSC-derived EVs过敏性气道炎症。<gydF4y2Ba/p> <p>在这项研究中,我们进行了DNA微阵列分析识别度与过敏性气道炎症的抑制ASC-derived电动汽车。我们进行层次聚类的度,其次是功能和路径分析。总共有249度,其中228和21下降和调节,分别用折叠的变化<在line-formula> <mml:math xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" id="M50"> <mml:mo> ∣<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:msub> <mml:mrow> <mml:mi mathvariant="normal"> 日志<gydF4y2Ba/mml:mi> </mml:mrow> <mml:mrow> <mml:mtext> 足球俱乐部<gydF4y2Ba/mml:mtext> </mml:mrow> </mml:msub> <mml:mo> ∣<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mo> ≥<gydF4y2Ba/mml:mo> <mml:mn> 2。0</mml:mn> </mml:math> </inline-formula>电动汽车和卵巢组织。基因Ear6、Ccl5 Ccl8、Ccl12 Tnfsf8, IL5Ra,和Tnfrsf13b调节卵巢组,但EV组中表达下调。Igfbp6,然而,基因PON1 Bex2 Fpr1,和Scgb1c1被卵子敏化和挑战表达下调,但调节治疗ASC-derived电动汽车。治疗后基因表达下调与ASC-derived电动汽车在整个细胞和细胞成分丰富。然而,这些调节治疗后与ASC-derived电动汽车与细胞和有机体过程和生物调控密切相关。KEGG路径分析显示治疗后度ASC-derived EVs相关环境信息处理,有机系统,和人类的疾病。在这项研究中,我们发现,PON1 Bex2, Igfbp6, Fpr1,和Scgb1c1表达减少哮喘小鼠肺组织,但是,PON1 Bex2, Igfbp6, Scgb1c1表达式ASC-derived EVs治疗后显著增加。在一起,这些结果表明,PON1、Bex2 Igfbp6, Scgb1c1可能参与的免疫抑制机制ASC-derived EVs过敏性气道疾病。<gydF4y2Ba/p> <p>PON1,一个主要的抗氧化酶,据报道,导致哮喘的发病机制<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B35"> 35<gydF4y2Ba/xref>和许多其他疾病包括类风湿性关节炎<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B36"> 36<gydF4y2Ba/xref>,<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B37"> 37<gydF4y2Ba/xref>)、糖尿病(<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B38"> 38<gydF4y2Ba/xref>,系统性红斑狼疮<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B39"> 39<gydF4y2Ba/xref>),和牛皮癣<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B40"> 40<gydF4y2Ba/xref>]。最近的研究表明,PON1表达式和活动明显减少哮喘和可能潜在影响哮喘诊断(<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B35"> 35<gydF4y2Ba/xref>,<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B41"> 41<gydF4y2Ba/xref>,<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B42"> 42<gydF4y2Ba/xref>]。此外,PON1降低哮喘小鼠气道炎症和气道重塑和抑制巨噬细胞表达LPS-induced炎性细胞因子和肺成纤维细胞增殖<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B43"> 43<gydF4y2Ba/xref>]。Bex2调节线粒体细胞凋亡和细胞周期G1在乳腺癌(<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B44"> 44<gydF4y2Ba/xref>]。最近的一项研究表明,Bex2表达式被增加了DNA甲基化抑制IL-13-induced过敏性气道炎症(<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B45"> 45<gydF4y2Ba/xref>]。Igfbp6是一个<gydF4y2Baitalic> O<gydF4y2Ba/italic>相关的糖蛋白,具有较高的亲和力IGF-II比IGF-I和特定抑制剂的IGF-II行动<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B46"> 46<gydF4y2Ba/xref>]。Igfbp6也与细胞生长和成纤维细胞增殖相关的哮喘患者(<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B47"> 47<gydF4y2Ba/xref>]。Scgb1c1主要表达在人类呼吸道粘膜和由IFN-r表达下调,调节il - 4和IL-13<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B48"> 48<gydF4y2Ba/xref>- - - - - -<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B50"> 50<gydF4y2Ba/xref>]。Scgb1c1也起着重要的作用在保护肺上皮细胞的识别和消除病原微生物粘膜(<xgydF4y2Baref ref-type="bibr" rid="B48"> 48<gydF4y2Ba/xref>]。<gydF4y2Ba/p> <p>我们的研究有一些局限性。进一步评估确定的基因的影响在本研究T细胞等免疫细胞需要澄清我们的发现。未来的工作应该检查的具体函数的识别度过敏性气道炎症的抑制ASC-derived EVs和调查哪些组件ASC-derived电动汽车导致了监管的度。<gydF4y2Ba/p> </sec> <sec id="sec5"> <title>5。结论<gydF4y2Ba/title> <p>在这项研究中,我们发现遗传信息的潜在的免疫调节机制ASC-derived EVs过敏性气道疾病。我们假设确定基因(PON1, Bex2、Igfbp6 Scgb1c1)导致过敏性气道炎症的改善,导致过敏性气道疾病的改善ASC-derived电动汽车。<gydF4y2Ba/p> </sec> <back> <sec sec-type="data-availability"> <title>数据可用性<gydF4y2Ba/title> <p>使用的数据来支持本研究的发现可以从相应的作者。<gydF4y2Ba/p> </sec> <sec sec-type="COI-statement"> <title>的利益冲突<gydF4y2Ba/title> <p>作者宣称没有利益冲突。<gydF4y2Ba/p> </sec> <sec> <title>作者的贡献<gydF4y2Ba/title> <p>Sung-Dong Kim Shin Ae Kang Kyu-Sup秋,Hwan-Jung卢武铉的贡献同样本文的内容。Sung-Dong金正日在起草了这篇文章,获取数据,并对数据进行分析和解读。Shin-Ae Kang贡献在本文起草,获得数据,并对数据进行分析和解读。Yong-Wan金正日贡献在对数据进行分析和解读。Hak-Sun Yu贡献在对数据进行分析和解读。Kyu-Sup曹贡献分析和解释数据和概念化和设计。Hwan-Jung卢武铉在概念化和设计起到了推波助澜的作用。<gydF4y2Ba/p> </sec> <ack> <title>确认<gydF4y2Ba/title> <p>这项工作是由韩国国家研究基金会(NRF)授予由韩国政府资助(MSIT) (NRF - 2017 r1a2a2a05069529)。<gydF4y2Ba/p> </ack> <ref-list> <ref id="B1" content-type="article"> <label>1<gydF4y2Ba/label> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> 李<gydF4y2Ba/surname> <given-names> h . Y。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 金<gydF4y2Ba/surname> <given-names> 即K。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 尹<gydF4y2Ba/surname> <given-names> h·K。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> Kwon<gydF4y2Ba/surname> <given-names> 美国年代。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> Rhee<gydF4y2Ba/surname> <given-names> c K。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 李<gydF4y2Ba/surname> <given-names> s Y。<gydF4y2Ba/given-names> </name> </person-group> <article-title> 抑制白藜芦醇对气道重塑的影响通过转化生长因子-<gydF4y2Baitalic> β<gydF4y2Ba/italic>/ Smad信号通路在慢性哮喘模型<gydF4y2Ba/article-title> <source> <italic> 过敏症,哮喘和免疫学研究<gydF4y2Ba/italic> <year> 2017年<gydF4y2Ba/year> <volume> 9<gydF4y2Ba/volume> <issue> 1<gydF4y2Ba/issue> <fpage> 25<gydF4y2Ba/fpage> <lpage> 34<gydF4y2Ba/lpage> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.4168 / aair.2017.9.1.25<gydF4y2Ba/pub-id> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 85007564199<gydF4y2Ba/pub-id> <pub-id pub-id-type="pmid"> 27826959<gydF4y2Ba/pub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B2" content-type="article"> <label>2<gydF4y2Ba/label> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> 威尔逊<gydF4y2Ba/surname> <given-names> m . S。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 泰勒<gydF4y2Ba/surname> <given-names> m D。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> Balic<gydF4y2Ba/surname> <given-names> 一个。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 芬尼<gydF4y2Ba/surname> <given-names> c a M。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 羊肉<gydF4y2Ba/surname> <given-names> j . R。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 该种<gydF4y2Ba/surname> <given-names> r·M。<gydF4y2Ba/given-names> </name> </person-group> <article-title> 抑制过敏性气道炎症的helminth-induced调节性T细胞<gydF4y2Ba/article-title> <source> <italic> 《实验医学杂志》上<gydF4y2Ba/italic> <year> 2005年<gydF4y2Ba/year> <volume> 202年<gydF4y2Ba/volume> <issue> 9<gydF4y2Ba/issue> <fpage> 1199年<gydF4y2Ba/fpage> <lpage> 1212年<gydF4y2Ba/lpage> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.1084 / jem.20042572<gydF4y2Ba/pub-id> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 27144486144<gydF4y2Ba/pub-id> <pub-id pub-id-type="pmid"> 16275759<gydF4y2Ba/pub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B3" content-type="article"> <label>3<gydF4y2Ba/label> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> 史<gydF4y2Ba/surname> <given-names> h . Z。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 秦<gydF4y2Ba/surname> <given-names> x J。<gydF4y2Ba/given-names> </name> </person-group> <article-title> CD4 + CD25 +调节性T淋巴细胞在过敏和哮喘<gydF4y2Ba/article-title> <source> <italic> 过敏<gydF4y2Ba/italic> <year> 2005年<gydF4y2Ba/year> <volume> 60<gydF4y2Ba/volume> <issue> 8<gydF4y2Ba/issue> <fpage> 986年<gydF4y2Ba/fpage> <lpage> 995年<gydF4y2Ba/lpage> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.1111 / j.1398-9995.2005.00844.x<gydF4y2Ba/pub-id> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 21744433238<gydF4y2Ba/pub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B4" content-type="article"> <label>4<gydF4y2Ba/label> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> Jaffar<gydF4y2Ba/surname> <given-names> Z。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> Sivakuru<gydF4y2Ba/surname> <given-names> T。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 罗伯茨<gydF4y2Ba/surname> <given-names> K。<gydF4y2Ba/given-names> </name> </person-group> <article-title> CD4 + CD25 + T细胞调节气道嗜酸性调节炎症的Th2细胞表型<gydF4y2Ba/article-title> <source> <italic> 免疫学杂志<gydF4y2Ba/italic> <year> 2004年<gydF4y2Ba/year> <volume> 172年<gydF4y2Ba/volume> <issue> 6<gydF4y2Ba/issue> <fpage> 3842年<gydF4y2Ba/fpage> <lpage> 3849年<gydF4y2Ba/lpage> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.4049 / jimmunol.172.6.3842<gydF4y2Ba/pub-id> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 1542724420<gydF4y2Ba/pub-id> <pub-id pub-id-type="pmid"> 15004191<gydF4y2Ba/pub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B5" content-type="article"> <label>5<gydF4y2Ba/label> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> Gabehart<gydF4y2Ba/surname> <given-names> k . E。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 罗伊斯<gydF4y2Ba/surname> <given-names> s G。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> Maselli<gydF4y2Ba/surname> <given-names> d . J。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> Miyasato<gydF4y2Ba/surname> <given-names> 美国K。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 戴维斯<gydF4y2Ba/surname> <given-names> e . C。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 唐<gydF4y2Ba/surname> <given-names> m·l·K。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 勒索克斯<gydF4y2Ba/surname> <given-names> c·J。<gydF4y2Ba/given-names> </name> </person-group> <article-title> 气道高反应性和气道重塑有关但不是炎症老化Cav1−−老鼠<gydF4y2Ba/article-title> <source> <italic> 呼吸系统的研究<gydF4y2Ba/italic> <year> 2013年<gydF4y2Ba/year> <volume> 14<gydF4y2Ba/volume> <issue> 1<gydF4y2Ba/issue> <fpage> 110年<gydF4y2Ba/fpage> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.1186 / 1465-9921-14-110<gydF4y2Ba/pub-id> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 84885805011<gydF4y2Ba/pub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B6" content-type="article"> <label>6<gydF4y2Ba/label> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> 乌切利对<gydF4y2Ba/surname> <given-names> 一个。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> Moretta作品<gydF4y2Ba/surname> <given-names> l<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 皮斯托亚<gydF4y2Ba/surname> <given-names> V。<gydF4y2Ba/given-names> </name> </person-group> <article-title> 间充质干细胞的免疫调节功能<gydF4y2Ba/article-title> <source> <italic> 欧洲免疫学杂志<gydF4y2Ba/italic> <year> 2006年<gydF4y2Ba/year> <volume> 36<gydF4y2Ba/volume> <issue> 10<gydF4y2Ba/issue> <fpage> 2566年<gydF4y2Ba/fpage> <lpage> 2573年<gydF4y2Ba/lpage> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.1002 / eji.200636416<gydF4y2Ba/pub-id> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 33750233770<gydF4y2Ba/pub-id> <pub-id pub-id-type="pmid"> 17013987<gydF4y2Ba/pub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B7" content-type="article"> <label>7<gydF4y2Ba/label> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> 公园<gydF4y2Ba/surname> <given-names> h·K。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 赵<gydF4y2Ba/surname> <given-names> k . S。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 公园<gydF4y2Ba/surname> <given-names> h . Y。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 胫骨<gydF4y2Ba/surname> <given-names> d . H。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 金<gydF4y2Ba/surname> <given-names> y K。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 荣格<gydF4y2Ba/surname> <given-names> j·S。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 公园<gydF4y2Ba/surname> <given-names> 美国K。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 卢武铉<gydF4y2Ba/surname> <given-names> h·J。<gydF4y2Ba/given-names> </name> </person-group> <article-title> 脂肪基质细胞抑制小鼠过敏性气道炎症<gydF4y2Ba/article-title> <source> <italic> 干细胞与发展<gydF4y2Ba/italic> <year> 2010年<gydF4y2Ba/year> <volume> 19<gydF4y2Ba/volume> <issue> 11<gydF4y2Ba/issue> <fpage> 1811年<gydF4y2Ba/fpage> <lpage> 1818年<gydF4y2Ba/lpage> <pub-id pub-id-type="doi"> 10.1089 / scd.2009.0513<gydF4y2Ba/pub-id> <pub-id pub-id-type="other"> 2 - s2.0 - 77956261268<gydF4y2Ba/pub-id> <pub-id pub-id-type="pmid"> 20225940<gydF4y2Ba/pub-id> </element-citation> </ref> <ref id="B8" content-type="article"> <label>8<gydF4y2Ba/label> <element-citation publication-type="journal"> <person-group person-group-type="author"> <name> <surname> 古德温<gydF4y2Ba/surname> <given-names> M。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> Sueblinvong<gydF4y2Ba/surname> <given-names> V。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> Eisenhauer<gydF4y2Ba/surname> <given-names> P。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> Ziats<gydF4y2Ba/surname> <given-names> n P。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> LeClair<gydF4y2Ba/surname> <given-names> l<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 波因特<gydF4y2Ba/surname> <given-names> m E。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 斯蒂尔<gydF4y2Ba/surname> <given-names> C。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 林康<gydF4y2Ba/surname> <given-names> M。<gydF4y2Ba/given-names> </name> <name> <surname> 维斯<gydF4y2Ba/surname> <given-names> d . 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